养殖水化学实验教学大纲

节点列表

◎实验概述

@实验教学大纲

电教学实验指导

&拓展实验指导

“养殖水化学”实验概述

《养殖水化学》共设21学时的教学实验，选择与水产养殖密切相关的主要水质指标，

如碱度、总硬度、钙和镁、溶解氧、化学耗氧量、亚硝酸盐和活性磷酸盐等开展教学，实验

方法详见《养殖水化学教学实验指导》。

《养殖水化学》实验教学强调学生独立思考、创新思维、动手操作、书面表达等能力的

培养：十分重视团结协作、严理求实、锐意进取等精神和科学态度的培养。

为更好地满足水产养殖、水族科学与技术学生的学习和今后工作的需要，特意编写了《养殖

水化学拓展实验指导》，使学生对其他常用水化学指标的测定有更深刻的了解，为今后的生

产实习、毕业论文研究等提供了完整的测试方法。

养殖水化学实验教学大纲

嘱编号：12461220

学生18学分：1

一、课程性质、地位与任务

养殖水化学实验是水产养殖专业教学计划中的一门课程。本课程的教学任务是在进行理

论课教学的同时，对养殖水化学实验的有关基础知识和基本技能进行学习和训练。通过本课

程的学习为学生毕业后从事水产养殖科学研究、养殖水质调控与管理等工作提供必要的养殖

水化学实验方法和技术。

二、课程教学基本要求

1.掌握水质化学指标测定的两大基本方法：容量分析法与仪器分析（主要是分光光度

法）。掌握这两类方法的原理，适用对象、优缺点等。

2.掌握每项指标测定的原理、试验仪器与试剂、试验步骤、结果处理与讨论、适用对

象以注意事项。

3.要求学生在实验过程中，能独立地、严格和规范地完成各项操作，并以标准格式撰写实验

报告。

4.学生在实验中，应注意养成科学与严谨的实验态度和作风。

三、实验教学大纲及学时分配

实验一碱度（3）

（一）实验目的

掌握淡水和海水中总碱度的测定，掌握酸碱滴定法。

（二）实验项目内容

1.盐酸标准溶液的标定

2.水样的测定

（三）主要仪器设备及其配套数

滴定管、滴定台、移液管、锥形瓶等常规实验设备，人均一套

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验二总硬度与钙镁（3）

（-）实验目的

掌握水中总硬度的测定原理与方法，掌握络合滴定法。

（二）实验项目内容

1.总硬度的测定

2.水样中钙的含量粗测

3.水样中钙含量的准确测定

4.水样中镁含量的求和

（三）主要仪器设备及其配套数

滴定管、滴定台、移液管、锥形瓶等常规实验设备，人均一套

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验三溶解氧（3）

（-）实睑目的

掌握水中溶解氧的采样方法、固定方法以及测定原理与方法，掌握氧化还原滴定法。

（二）实验项目内容

1.2息0,溶液浓度的标定

2.水样的采集

3.水样的固定

4.酸化滴定

（三）主要仪器设备及其配套数

棕色采样瓶、采样橡皮管、滴定管、滴定台、移液管、锥形瓶等常规设备，人均一套

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验四化学需氧量（3）

（一）实验目的

1.进一步熟悉和掌握烘箱与电子分析天平的使用。

2.加强化学试剂配制的训练。

3.掌握碱性高钛酸钾法测定化学需氧量的原理、步骤、数据处理、注意事项与结果的

讨论等。

（二）实验项目内容

1.溶液的配制：包括药品的烘干、电子天平的使用、药品的溶解与定容等：

2.硫代硫酸钠溶液的标定；

3.高锌酸钾溶液的标定：

水样测定：包括取样量V水样的确定、还原剂碘化钾量V碘化钾的确定、硫代硫酸钠的

滴定等。

（三）主要仪器及配套数

烘箱（共用1套）

电子天平、称量瓶、碘量瓶、锥形瓶、移液管、滴定管、加热板等实验室设备每组一

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验五亚硝酸盐氮（3）

（-）实验目的

掌握水中亚硝酸盐测定的原理与方法，掌握分光光度法的原理.，掌握分光光度计的使

用方法。

（二）实验项目内容

1.水样过滤

2.工作曲线绘制

3.水样中亚硝氮的测定

（三）主要仪器设备及其配套数

分光光度计及配套比色皿（共用）、具塞比色管、容量瓶、移液管等常规实验室设备，人

均一套

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验六活性磷酸盐（3）

（-）实验目的

掌握水中活性磷酸盐测定的原理与方法，掌握分光光度法的原理，掌握分光光度计的

使用方法.

（二）实验项目内容

1.水样过滤

2.工作曲线绘制

3.水样中活性磷酸盐的测定

（三）主要仪器设备及其配套数

分光光度计及配套比色皿（共用）、具塞比色管、容量瓶、移液管等常规实验室设备，人

均一套

（四）实验室名称

环境化学实验室

实验七常用便携式水质分析仪器的使用（3）

（-）实验目的

掌握养殖水体水质分析常用便携式仪器的原理与使用方法.

（二）实验项目内容

1.pH计

2.盐度计

3.溶氧仪

4.氧化还原电位仪

5.电导率仪

6.多参数水质分析仪

（三）主要仪器设备及其配套数

分组进行，5人一组，轮流使用。

（四）实验室名称

环境化学实验室

《养殖水化学教学实验指导》

目录

1碱度（酸滴定法）................................1

2总硬度（络合滴定法）..............................2

3钙和镁（络合滴定法）...........................3

4溶解氧（碘量法）..................................4

5化学耗氧量（碱性高锌酸钾法）..................7

6亚硝酸盐（磺胺-盐酸蔡乙二胺分光光度法）........9

7活性磷酸盐（磷铝蓝法）.........................11

实验一总碱度

(酸滴定法)

一、方法原理

用标准HCI溶液直接滴定总碱度。以HC1溶液滴定水样，使HCI与水样中的弱酸阴离

子，如OH、CO32-、HC03-等全部反应，此时pH约为4.3,临近终点时加热驱除二氧化

碳，以甲基红一次甲基兰混合指示剂指示滴定终点。

二、仪器及设备

实验室常规设备

三、试剂及其配制

I.HC1标准溶液(O.OImol/L):0.9mL浓HC1用除去CO2的纯水稀释至1L。

Na2CO3标准溶液(CI/2Na2co3=0.01000mol/L)：称取0.5300g无水碳酸钠(AR,于

180c烘2h),以除去CO2的纯水溶解并在1000mL容量瓶中定容。

甲基红一次甲基蓝混合指示剂：0.032g甲基红溶解于80mL95%的酒精中，加入

5mL0.1%的次甲基蓝酒精溶液，滴加NaOH溶液(0.02mol/L)至指示剂溶液呈浅褐绿

色。

四、测定步骤

1.盐酸标准溶液的标定

移取Na2CO3标准溶液25.00mL于锥形瓶中，加入甲基红一次甲基蓝混合指示剂3滴,

用HC1标准溶液滴定至溶液由黄绿色变为玫瑰红，加热驱除CO2,玫瑰红褪去，待稍冷却后

继续滴至玫瑰红即为滴定终点，记下消耗的H。标准溶液体积V(mL.双样标定取平均值),

按下式计算HCI标准溶液的准确浓度：

CHCI=(0.01000X10.00)/V(mol/L)

2.水样的测定

移取水样50.00mL于锥形瓶中，加入甲基红一次甲基就混合指示剂6滴，滴定至溶

液呈玫瑰红(临近滴定终点加热驱除CO2),记录HCI标准溶液的总消耗量(mL,以T

表示)。

五、结果计算

1.总碱度

A=1000•CHCI•T/50.00(mmol/L)

六、注意事项

1.配制溶液的除CO2纯水是用纯水经煮沸驱除CO2后冷却制得的。

2.水样中OFT、HC03一不能共存。

3.作为总碱度单位的mmol/L,均以折算为单位电荷的离子量作为基本单元(如

HCO3-s1/2CO32-.OH-等),碱度的单位也可用德国度。

4.海水一般只测定总碱度。

实验二总硬度

（络合滴定法）

一、方法原理

水的硬度是指一升水样中含二价及二价以上金属离子的含量，通常水的总硬度主要由

Ca2+、Mg2+组成，其测定采用络合滴定法。在pH^lO的氨缓冲液中，以错黑T为指示

剂，用标准EDTA溶液直接滴定水中的Ca2+、Mg2+总量。在等当点之前,Ca2+、Mg2+

和铝黑T形成紫红色络合物；当等当点到达时;游离出指示剂，溶液呈现蓝色。滴定时

反应如下：

2+22+

等当点前Ca+H2Y--*CaY+2H

Mg2++H2Y2-*MgY2+2H+

等当点时Mg-格黑T+FhY'fMgY2-+2H'+铭黑T

（酒红色）（蓝色）

此滴定需要有Mg2+存在，变色才敏锐。为了使测定适用二缺镁水样，可在氨缓冲液中

加入Mg-EDTA盐，利用置换滴定法提高终点变色的敏锐性。

二、仪器与设备

锥形瓶、酸式滴定管、移液管、量筒等

三、试剂及其配制

1.EDTA标准溶液（Cl/2EDTA=0.1000mol/L）:准确称取在105℃下烘干的EDTA-Na2

（基准级）18.60克于小烧杯中，先用适量蒸憎水溶解后，转入1000亳升容量瓶中,

稀释定容。

5.氨缓冲溶液（内含Mg-EDTA盐）：溶液A——20gNH4Cl固体溶于纯水中，加入

100ml浓氨水并稀释至1L；溶液B一一0.25gMgC12-6H2O溶解后于100ml容量瓶

中定容，然后用干燥洁净的移液管移取50.00ml溶液，加5mlNH3-NH4Cl溶液,4滴

格黑T指示剂，用O.lmol/L的EDTA溶液滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为止，取

与此等体积的EDTA溶液加入容量瓶中与剩余的MgCI2溶液混合，即成Mg-EDTA

盐溶液。将溶液A与溶液B混合即得含Mg-EDTA盐的氨缓冲溶液。

6.格黑T指示剂（0.5%）：0.5g辂黑T固体溶于l（）0ml纯水中，于棕色瓶中保存。

7.4.标准锌溶液：用表面皿精确称取031-0.35克（W）基准锌粒（片），转入150

毫升锥形瓶中，盖上一个内外壁均洗净的小漏斗，通过小漏斗往锥形瓶加I：1盐

酸3亳升，注意使酸溶液充分同锌粒接触（必要时可加少量纯水）。待全部溶解后，

用纯水冲洗漏斗内外壁，将锥形瓶内的锌溶液小心转移到500亳升容量瓶内，并定

容至刻度。该液准确浓度依..Cl/2Zn2尸计算。

8.氨水（1：1）

EDTA溶液的标定：吸取20毫升标准锌溶液于锥形瓶中，加纯水30亳升。滴加1：1

氨水，使有氨味后再加氨缓冲容液1亳升及格黑T指示剂少许（溶液有明显的红色即可，不

宜过多）。以EDTA溶液滴定，溶液变纯蓝色即为终点。按下式计算EDTA溶液的准确浓度：

Cl/2EDTA=CI/2Zn2+V1N'

式中:VI一—锌标准溶液的体积（mL）：

V'——滴定消耗EDTA-Na2的体枳（mL）。

四、测定步骤

1.取25ml水样于锥形瓶中。

加入9.7ml氨缓冲溶液,3-4滴钠黑T指示剂，摇匀。

用EDTA-Na2标准溶液滴定至溶液由紫红色变为蓝色，即为滴定终点。记录所消耗EDTA标

准溶液的体积数V（双样滴定取平均值）。

五、结果计算

HT=Cif2Ca"十Cif2Mg：-=（C“2bLMAKVK1000）/V水样（niinol/L）

六、注意事项

1.络合反应速度较慢，因此滴定速度不宜太快，尤其临近终点，更应缓慢滴定，并充分

摇动。若室温太低，应将溶液略微加温到30一一400Co

2.水中如含有较多的碳酸氢根，加缓冲溶液后可能由CaCO3沉淀析出，使测定偏低。

如滴定到蓝色后溶液很快又变紫红，则表明可能有CaCO3沉淀生成。这时应另取水样加1:

1HC1酸化（刚果红试纸变蓝），加热煮沸以驱除CO2,然后再作测定。

3.测定时，溶液中加铭黑T后，如果指示剂显色不明显（不显酒红色），或滴定时等当

点变色不明显，这可能是因为水中含有Cu2+、Zn2+、Co2+、Ni2+等离子所产生的

干扰。这时可另取水样，加缓冲溶液后再加10%Na2s和10%盐酸羟胺各0.3ml,可

以消除干扰。

一些重金属离子对铭黑T有封闭作用，可用下法消除：在加入级缓冲溶液和珞黑T指示

剂之前，先滴加EDTA标准溶液（不能过量），然后再加缓冲溶液和指示剂，并继续滴

定至终点（这样测定的结果也包括水样中的重金属离子〉。

如果水样的总硬度太低,滴定水样可加倍移取，但缓冲液及指示剂加入量亦应加倍。

实验三钙、镁

（络合滴定法）

一、方法原理

采用EDTA容量法测定天然水中的钙，镁含量由水中总硬度与钙的含量计算而得。天然

水中钙镁总量的测定即为总硬度的测定，在pH为10的氨缓冲溶液中，以铝黑T为指示剂,

用EDTA标准溶液直接滴定：另取一份水样，加入氢氧化钠，调节共PH>12,Mg2+即成为

Mg（OH）2沉淀，不为EDTA所络合，不干扰钙的测定。采用钙红指示剂，钙红与Ca2+生成酒

红色络合物，并且不如EDTA-Ca稳定，而游离钙红指示剂在PII>12的条件下为蓝色，可利

用溶液颜色的变化指示终点的到达。滴定时反应如下：

2+22+

Ca+H2Y--»CaY+2H

等当点时Ca-钙红+4丫2-一钙红+CaY，2H'

（酒红色）（蓝色）

镁含量•般由钙、镁总量与钙含量之差来计算。

二、仪器与设备

锥形瓶、酸式滴定管、移液管等。

三、试剂及其配制

1.EDTA标准溶液（Cl/2EDTA=0.1000mol/L）.准确称取在105，下烘干的EDTA-Na2（基

准级）18.60克于小烧杯中，先用适量蒸储水溶解后，转入1000亳升容量瓶中，稀释定容,

浓度标定同总硬度。

2.2.氢氧化钠溶液（50W）：称取50g固体氢氧化钠，溶于50ml蒸储水中，冷却后稀

释至lOOnilo

3.3.钙试剂（0.5%）：溶0.20g钙试剂按酸钠（C21H13O7N2SNa）于40ml50%的丙酮溶

液中。

4.三乙聘胺溶液（1:10）。

四、测定步骤

取25ml水样于锥形瓶中，加入2ml三乙醇胺溶液，摇匀，以蒸储水稀释至95ml混匀，

加入5.0ml氢氧化钠溶液摇匀后加入6滴钙试剂（以溶液呈现明显的紫红色为准），立

即以EDTA标准溶液滴定至溶液刚由紫红色变为稳定的纯蓝色，记录EDTA溶液的用量

VIe

取25nli水样于锥形瓶中，加入2ml三乙醇胺溶液，摇匀，以蒸储水稀释至95ml混匀，

向锦形瓶中滴加体枳为90%Vl的EDTA标准溶液，再向锥形瓶中加入5.0ml氢氧化钠溶

液，摇匀后加入6滴钙试剂，继续以EDTA标准溶液滴至溶液由紫红色变为稳定的纯蓝

色，记录总的EDTA溶液的用量V2（双样滴定，取平均值）。

五、结果计算

1.钙含量Cl/2Ca2+=（Cl/2EDTAXV2X1000）/V水样（mmol/L）

Pca:-Ci/2CaJ*X20.04（mg/l.）

2.镁含量Cl/2Mg2+=HT-Cl/2Ca2+（mmol/L）

Pus'-=Ci/2Mg'X12.15（mg/L）

六、注意事项

如果Mg（0H）2沉淀太多，将使滴定终点变色不明显，此时可少取水样，稀释后测定。

水中如果含有较多的碳酸氢根，加入NaOH后将生成碳酸钙沉淀，使测定结果偏低（终

点后蓝色又很快变紫色的现象表明有碳酸钙析出）。此时应另取水样，以盐酸酸化（以刚果

红试纸变蓝为准），加热煮沸2-3分钟，以驱除C02,冷却后先用适量NaOH中和到刚果红

试纸变红后，再进行测定。

实验四溶解氧

（碘量法）

本法适用于大洋和近岸海水及河水、河口水溶解氧的测定.

一、方法原理

用钛(H)在碱性介质中与溶解氧反应生成亚镭酸(H2MnO4),然后在酸性介质中使

亚钵酸和碘化钾反应，析出碘和2),最后用硫代硫酸钠(Na2s203)滴定析出的12的量，其

反应如下：

溶氧的固定：MnS04+2NaCH—Mn(0H)2I(白色)+Na2s04

2Mn(OH)2+O2——2H2MnO3I(褐色)

酸化：H2MnO3+2H2so4+2KI=MnS04+I2+K2so4+3H20

滴定：2Na2S203+I2=2NaI+Na2S406

合并上述各式得:Na2s203相当于1/402

即滴定每消耗1摩尔的Na2s203,相当丁水中有1/4摩尔的02.也即相当丁水中有8

克的02。

二、仪器及设备

I.棕色水样瓶(容积125mL左右的棕色瓶，瓶塞为锥形，磨口要严密，容积

须经校正)

2.碱式滴定管

3.移液管及吸管

4.碘量瓶

5.温度计

6.一般实验室常备仪器和设备

三、试剂及其制备

1.硫酸锈溶液：称取240g硫酸锌(MnSO4・4H2O)溶于水，并稀释至500mL。

2.碱性碘化钾溶液：称取250g氢氧化钠(NaOH),在搅拌下溶于250mL

水中，冷却后，加75g碘化饵(KI),稀释至500mL盛I•具橡皮塞的棕色试剂瓶中。

3.硫酸溶液(1:1):在搅拌下，将50mL浓硫酸(H2SO4,P=1.84g/mL)

小心加入同体积的水中，混匀。盛于试剂瓶中。

4.硫代硫酸钠溶液(CNa2S203=0.01mol/L):称取2.5g硫代硫酸钠

(Na2S2O3-5H2O),用刚煮沸冷却的蒸储水溶解，加入约2g碳酸钠，稀释至1L,

移入棕色试剂瓶中，置于阴凉处保存。

重铭酸钾标准溶液(Cl/6K20207=0.0100mol/L):称取K2O207固体(AR,于130℃

烘3h)0.4904g,溶解后在10C()mL容量瓶中定容。

碘化钾溶液(10%)：将5g碘化钾(KI)溶于水中，并稀释至50mL。

0.5%淀粉溶液:称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100mL煮沸的蒸储水，混

匀，继续煮至透明。冷却后加入1mL乙酸，稀释至200mL,盛于试剂瓶中。

1.四、测定步骤：

Na2S2O3溶液浓席的标注移取K2Cr2O7标准溶液20.00mL于250mL碘量瓶中.加入

KI溶液5mL和H2SO4溶液2mL,盖上瓶盖混匀并在暗处放置5min,加纯水50mL。以

Na2s203溶液滴至淡黄，加入淀粉溶液1mL.继续滴至溶液呈无色为止，读取滴定管读数V

(双样滴定取平均值)，依卜式计算Na2s203溶液的准确浓度：

CNa;s2O3=(CI/6KCOX20.00)/V(mol/L)

标定时发生的反应如下：

K2O2O7+6KI+7H2so4=3l2+Cn(SO4)3+7H2O+4K2sO4

2Na2s2O3+b=2NaI+Na2s4。6

2.综合上述两式，得Na2s203相当于1/6K2Cr2O7

3.水样的分析

①水样的采集采水器出水后，立即套上橡皮管以引出

水样。采集时使水样先充满橡皮管并将水管插到瓶底，放入少

量水样冲洗水样瓶，然后让水样注入水样瓶，装满后并溢出部

分水样(约水样瓶体积的一半左右)，抽出水管并盖上瓶盖(此

时•瓶中应无空气泡存在)。

②水样的固定打开水样瓶盖，立即依次加入MnSO4溶泌和KI-NaOH溶液，(加液时

移液管尖应插入液面下约1cm处)，塞紧瓶盖(瓶内不能有气泡)，按住瓶盖将瓶上下颠倒

不少于20次，静置让沉淀尽可能下沉到水样瓶底部。

③酸化滴定小心打开水样瓶瓶盖，将上层澄清液倒出少许于碘量瓶中(切勿倒出沉

淀)，于水样瓶中加入H2s04溶液1mL,盖上瓶盖摇动水样瓶使沉淀完全溶解，并把瓶中溶

液倒入碘量瓶中，以Na2s203溶液滴至淡黄，加入淀粉溶液1mL,再继续滴至无色，倒出少

量溶液回洗水样瓶，倒回碘量瓶后再继续滴至无色为止，记下滴定管读数VI。

五、结果计算

1.可按卜.式计算水样中溶解氧的含量：

DO(mg/L)=(CNaSO,XViX8X1000)7(V水杆装-2)

式中DO—水样中溶解氧的浓度(mg/L)

CNaSO,—Na2s2O3溶液的浓度(mol/L)

Vi—滴定水样时用去Na2s2O3溶液的体积(mL)

V木样亚一水样瓶的容积(mL)

2.将水样中的溶解氧换算为在标准状态下的体积(mL)

DO(ml/L)=[(CNaSOsXV1X8XIOOO)/(V水样忆2)]/1.4292(mg/L)

=5.598XIO()OXCNa&oJ(V刎旷2)(mg/L)

3.溶解氧饱和度

DO%=(DO/DOs)X100%

式中：DO-水样中溶解氧的浓度

DOs-相同温度和含盐量条件下水体中溶解氧的饱和浓度

六、注意事项

1.采样后须及时固定并避免阳光的强烈照射：水样固定后，如不能立即进行

酸化滴定，必须把水样瓶放入桶中水密放置，但一般不得超过24h。

2.水样固定后，沉淀降至瓶体高一半时，即可进行酸化滴定。

3.滴定临近终点，速度不宜太慢，否则终点变色不敏锐。如终点前溶液显紫

红色，表示淀粉溶液变质，应重新配制。

水样中含有氧化性物质可以析出碘产生正干扰，含有还原性物质消耗碘产生负干扰。

在碱性碘化钾中配入1%NaN3(叠氮化钠),可以消除水样中高达2mg/L的NO2-N的

十扰，此为修止碘量法，常应用r养冷用水中溶氧测定。

同一水样的两次分析结果，其偏差不超过0.08mg/L（或0.供ml/L）。

实验五化学需氧量

（碱性高钵酸钾法）

—综合性实验

一、实验目的

4.进一步熟悉和掌握烘箭与电子分析天平的使用。

5.加强化学试剂配制的训练。

6.掌握碱性高镒酸钾法测定化学需氧量的原理、步骤、数据处理、注意事项与结果的

讨论等。

二、方法原理

碱性条件下，向水样加入高镭限钾以氧化水中rr机物。将有机物以

“c”来代表，则反应式如下：

4Mn（V+3"C"+2Hq=4MnO2I+3cCht+40H

加硫酸于溶液使呈酸性，加入碘化钾与剩余高钵酸钾和二氧化铺发

生反应：

2+

2MnO4-+I6H-+101=2Mn+8H2O+5I2

+2

MnO2+21+4H=Mn*+2H2O+L

最后用硫代硫酸钠标准溶液滴定生成的碘：

2Na2s2（）3+l2=2Na【+Na2s46

三、仪器及设备

烘箱、电子天平、称量瓶、碘量瓶、锥形瓶、移液管、滴定管、加

热板等实验室设备

四、化学药品

氢氧化钠、浓硫酸、重钠酸钾、高锌酸钾、碘化钾、硫代硫酸钠、碳酸钠、可溶

性淀粉

五、实验步骤

4.溶液的配制

1.1接通烘箱电源，舀取一定量的分析纯重珞酸钾于称量瓶中，打开称量瓶盖，于

105-110（烘十3小时，取出后加盖，置于十燥器中冷却（提前进实验室）。

1.2将万分之一电子分析天平置于稳固、干扰少的实验桌面匕检查F燥剂，确保其具备

一定的干燥性能。接通电源，预热20-30分钟。

1.3氢氧化钠溶液（50%）的配制：称取50g分析纯氢氧化讷，溶于少量蒸储水中，并稀

释至100mL,盛于试剂瓶中。

1.4硫酸溶液（1：3）的配制:在搅拌下,将50mL浓硫酸（H2SO4,P=1.84g/mL）小

心加入150mL的水中，混匀。盛于试剂瓶中。

1.5重铭酸钾标准溶液（Cl/6K20207=O.OlOOOmol/L）的配制：称取0.4904g烘干冷却

后的重:格酸钾于烧杯中，加少量水溶解后移入1000mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。

1.6高猛酸钾标准溶液（Cl/5KMnO4=0.01mol/L）:称取0.32g高镒酸钾，溶于水中，煮

沸10—15分钟,冷却后稀释至1000mL,摇匀。

1.7碘化钾溶液（10%）的配制:称取10g碘化钾，加少量水溶解后移入lUUmL容量瓶

中定容至标线。

1.8硫代硫酸钠标准溶液（CNa2S203=0.01mol/L）的配制:称取2.5g硫代硫酸钠

（Na2S2O3-5H2O）,用刚煮沸冷却的蒸储水溶解，加入约2g碳酸钠，稀释至1L,移入

棕色试剂瓶中。

1.9淀粉（0.5%）溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，加入100mL我沸的蒸

储水，混匀，继续煮至透明。冷却后加入1mL冰醋酸，稀释至200mL盛于试剂瓶中。

5.硫代硫酸钠溶液的标定

用移液管移取10mL（V重辂酸钾）重格酸钾标准溶液丁•硬量瓶中，加11mLi：3硫酸。

立即加入4mL碘化钾溶液，塞好瓶塞，摇匀，在暗处放置5min,打开瓶塞，沿壁加入50mL

蒸饱水稀秤，在不断振摇下，以硫代硫酸钠溶液滴至溶液呈淡黄色。加入huL0.5%淀粉溶液,

继续滴至蓝色刚好消失为止，记录硫代硫酸钠的消耗量VI（双样测定，取平均值）。

6.高钛酸钾溶液的标定

以高镉酸钾溶液（V高镭酸钾）代替上述重铝酸钾溶液，其余步骤

同上，记录硫代硫酸钠的消耗量V2（双样测定，取平均值）。

7.水样测定

4.1水样取样量V水样的确定

吸取水样V水样，加蒸播水稀释至约100mL.加0.5mL氢

氧化钠溶液及10.00mL（V3）高铝酸钾溶液。

加数粒玻璃珠或沸石于锥形瓶中，在瓶口加一小漏斗，并

用大火均匀地将瓶内溶液加热至沸，从开始冒大气泡（沸腾）

算起准确煮沸10分钟，立即取下。此时溶液应为淡红色，若溶

液的红色消失，表明所取水样中有机物含量过多，应重新减少

取样量，直至加热后溶液可保持淡红色为止。

4.2碘化钾量V.化科的确定

立即取下锥形瓶，迅速冷却至室温，加入5mL1：3硫酸溶

液和不同体枳的10%碘化钾溶液，摇匀，此时溶液红色应褪尽。

若红色未褪尽，表明加入的碘化钾不足以完全氧化溶液中剩余

的高钵酸钾，则必须提高碘化钾的加入量，直至红色可褪尽为

止。

4.3硫代硫酸钠滴定

待反应剩余的高镭酸钾颜色褪尽,立即在不断振摇下，用

硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色，加入lmL0.5%淀粉溶液，维

续滴定至蓝色消失，记下硫代硫酸钠溶液消耗量V4„

六、结果计算

1.硫代硫酸钠浓度的计算

CNa2S;Os=(CI/6KQOXV*珞段钟)N\(mol/L)

2.高链酸钾浓度的计算

Cl/5KMnO4=(CNaSOjXV?)/V高恬限仲(mol/L)

2.水样化学需氧量的计克

COD=(Cl/5KMnO4xV3-CNaSOsXV4)/V水样X8X]()00(mg/L)

七、讨论

根据测定结果，参照《中华人民共和国地面水水质标准》，仅考虑COD一项，分析

该水样为几类。

八、注意事项

1.取水样时，应摇匀后吸取。若用稀释水，则应做稀释水的空白滴定，以便从水样中减去

稀释水耗用高锯酸钾标准溶液的体积。

2.水样中含无机还原性物质较多时，应在不加热煮沸情况下,按本法测定这些还原性物

质(如亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物等)的数量，并将测定值从需氧量中减去，才是水样中有

机物的需氧量。有文献报道，在含铁量为0.l-0.2mg/L、亚硝酸根为0.1mg/L及硫化物为0.1

—0.2mg/L以下时，可不予考虑。

3.水样加热完毕，应冷却至室温后，再加入硫酸和碘化钾，否则会因游离碘挥发而造成误差。

4.若水样中有高价金属离子存在，由于在酸性中它可能把碘离子氧化成游离碘，从而使滴定

所消耗的硫代硫酸钠溶液增加，导致COD值偏低。

5.本法适用于海水。

实验六亚硝酸盐氮

(蔡乙二胺分光光度法)

一、方法原理

在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸蔡乙二胺偶合生成红

色偶氮染料，于543nm波长测定吸光值。光电比色在0—0.25mg/L范围内符合比尔定律，最

低测定浓度为0.001mR/Lo

二、仪器及设备

1.分光光度计及配套比毡皿

2.具塞比色管

3.容量瓶、移液管等常规实验室设备

三、试剂及其配制

1.磺胺溶液(10g/L):称取5g磺胺(NH2so2c6H4NH2),溶于360mL盐酸溶液(1:6),

用水稀释至500mL,盛于棕色试剂瓶中，有效期为2个月。

盐酸蔡乙二胺溶液（lg/L）:称取0.5g盐酸茶乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2-2HC1）,溶

于500mL水中，盛于棕色试剂瓶中于冰箱内保存，有效期为1个月。

亚硝酸钠标准贮备溶液（100mgN/L）：称取0.4926g亚硝酸钠（NaN02,于110,C烘干），

溶于少量水中后全量转移入1000mL容量瓶中，加水至标线，混匀。加1mL三氯甲烷

（CHC13）,混匀。贮于棕色试剂瓶中于冰箱内保存，有效期为两个月。

亚硝酸钠标准使用溶液dmgN/L）：取1mL贮备液于100mL容量瓶中，用蒸播水稀释

至标线，混匀。临用前配制。

四、测定步骤

I.绘制标准曲线

①取6个50mL具6比色管,分别加入0、0.25.0.50、1.00、2.00、3.00mL亚硝酸

钠标准使用溶液，加水至标线.混匀。标准系列各点的浓度分别为0、0.005.0,010.0.020、

0.040、0.060mg/Lo

②每个比色管中各加入1.0mL磺胺溶液，混匀，放置5min。

③在每个比色管中加入1.0mL盐酸茶乙二胺溶液，混匀，放置显色5min。

选543nm波长，2cm比色皿，以蒸馀水作参比，测其吸光值E。其中零浓度为标准空白吸光

值E0。

以吸光值（EE0）为纵坐标，浓度（mgN/L）为摘坐标绘制标准曲线。

序列号123456

亚硝酸钠标准使用液体积（ml）0.000.250.501.002.003.00

亚硝酸盐氮浓度（mgN/L）0.000.0050.0100.0200.0400.06()

吸光度值EEo

E-Eo

2.水样的测定

①移取50.0mL已过滤的水样于具塞比色管中。

参照标准曲线制订过程中的步骤②一④，显色并测定该水洋的吸光值E\v。

量取50.0mL澄清水样（如水样较浑浊需经过滤），参照上述步骤④测量由于水样浑浊

引起的吸光值Eto

五、结果计算

水样由亚硝酸盐氮引起的吸光值可依下式计算：En=Ew-EO-Et,由En杳标准曲线,

得该水样中亚硝酸盐氮的浓度。

1.六、注意事项：

2.水样可用有机玻璃或塑料采水器采集，经0.45um滤膜过滤后贮于聚乙烯瓶中，应

从速分析，必须在12h内测定完毕：水样加盐酸蔡乙二胺后，须在2h内测量完毕，并避免阳

光照射。

3.水样需过滤时，滤纸中常含有不可忽略的亚硝酸根，水样过滤后时结果偏高。使用

前应用纯水淋洗滤纸，并检查有无N02-,若有则应淋洗到无N02-后才开始过滤水样。

4.本法的显色速度与显色过程与水的温度有关，若水温太低（低于10℃）,可在水浴

中温热反应。要注意各管受热•致，温度相同时，颜色稳定后可保持十多个小时不变。

标准曲线每隔一周须重制一次，当测定样品的实验条件与制定标准曲线的条件相差较

大时，如更换光源或光电管、温度变化较大时，须及时重制标准曲线。

无氮海水可模仿人工海水配方以化学试剂配制，也可取低氮澄清海水，放入海藻置于

阳光下照射数日除氮。

实验七活性磷酸盐

（磷铝蓝法）

一、方法原理

水样中的活性磷酸盐采用磷钥蓝法测定。活性磷酸盐在一定的酸性条件下可与铝酸铉作

用，生成淡黄色的磷钥酸钱，但磷铝酸核发色能力弱，在通常的磷浓度下显不出黄色

来。磷相酸铉可被还原剂（氯化亚锡、抗坏血酸、亚硫酸钠等）还原成发色能力很强的

蓝色化合物一一“铜蓝”，还原后的溶液在690nm处有较大吸收，可用比色法分析。

二、仪器及设备

1.分光光度计及配套比色皿

2.具塞比色管

3.容量瓶、移液管等常规实验室设备

三、试剂及其配制

1.硫酸溶液（1:2）:在不断搅拌下将浓硫酸缓缓倒入同体积蒸储水中，冷却后盛于试

剂瓶中。

2.酒石酸睇钾：溶解6g酒石酸睇钾于200ml水中，贮于聚乙烯瓶中，溶液变混浊时,

应重配。

3.钳酸铉溶液（10%）:称取5g铝酸钱固体[（NH4）6Mo7O24•4H2O],溶解后稀释至

50ml,若溶液浑浊应取其澄清液贮于聚乙烯瓶中。

4.铜酸铉一硫酸混合试剂：45ml铝酸筱溶液与200ml硫酸溶液混合，加入5ml酒石酸

锦钾溶液，混匀后贮于聚乙烯瓶中，此溶液避光保存可稳定数巳如发现混浊须重新配制。

5.抗坏血酸溶液：溶解20g抗坏血酸（C6H8O6）于200mL水中，盛于棕色试剂瓶中。

此溶液4℃避光保存，可稳定I个月。

磷标准贮备液<0.2mgPO43-P/mL）：称取KH2P04（AR,于U5C下烘lh）0.8790g溶

于蒸储水中，并转入lOOCml容量瓶中定容。

磷标准使用液（0.004mgP043-P/mL）:移取2.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中定容。

四、测定步骤

1.绘制工作曲线

①取6个50ml具塞比色管,分别加入0、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50ml磷标准使用

液，加水至标线，混匀。

②分别加入钳酸镂一硫酸混合试剂1ml,混匀后放置3min；再分别加入抗坏血酸溶液

Iml,混匀后显色lOmiiu

用分光光度计在690nm波长处，于比色皿中对照蒸饰水测定上述溶液的吸光度E值（其

中试剂空白吸光度为E0）。

在坐标纸上，以吸光度E-EO为纵坐标，磷浓度为横坐标作图，得工作曲线。

序列号123456

磷标准使用液体积（ml）0.000.501.001.502.002.50

浓度（mgPOj一p/mL）0.000.040.080.120.160.20

吸光度值EEo

E-Eo

①水样的测定（双样测定，取平均值）

②取50ml水样于比色管中。

参照标准曲线绘制过程中的步骤②、③，显色并测定该水样的吸光度值Ew。

另取澄清水样50nli，加入1.00ml硫酸溶液后混匀，参照工作曲线绘制过程中的步骤③

测定由于水样浑浊引起的吸光度值Et。

五、结果计算

由水样的测定值Ew-EO-Et查工作曲线，得该水样中活性磷酸盐的含量。

六、注意事项

1.显色后须在30min之内测定溶液的吸光度值，30min之后溶液的颜色将逐渐减退。

水样的含盐量对磷铝蓝的显色有影响。对于海水样品，上述从工作曲线上查得的数值尚需乘

以适当的校正系数Ks,才能获得海水样品中活性磷酸盐磷的实际浓度。

由于磷铝蓝的摩尔吸光系数较小，比色时采用液层厚度较大的比色皿可提高测定的精确度。

《养殖水化学拓展实验指导》

目录

1氯离了----------------------------------------------------1

2氯度（银量法）--------------------------------------2

3盐度（比重法）--------------------------------------3

4盐度（盐度计法）------------------------------------4

5硫酸根（EDTA四滴法）--------------------------------7

6碱度（pH法）---------------------------------------9

7氨氮（奈氏试剂法）-----------------------------------11

8氨氮（次澳酸盐氧化法）-------------------------------12

9氨氮（靛酚蓝法）....................................14

10硝酸盐氮（锌镉还原一重氮偶氮法）......................16

11硝酸盐氮（镉柱还原法）...............................17

12凯氏氮............................................20

13总磷..............................................22

14可溶性硅酸盐（硅铝球法）..............................23

15透明度--------------------------------------------25

16水色----------------------------------------------26

17嗅和味--------------------------------------------26

18悬浮物质------------------------------------------26

19浑浊度（目视比浊法）---------------------------------28

20浑浊度（分光光度法）---------------------------------30

21浑浊度（浊度计法）...................................31

22溶解氧（膜电极法）...................................32

23化学耗氧量（重钠酸钾法）.............................33

24化学耗氧量（碱性高镉酸钾法）.........................35

25生化需氧量（五日培养法）..............................36

26硫化物（亚甲基蓝分光光度法）--------------------------38

实验一氯离子

一、方法原理

水中氯离子含量的测定，可采用银量滴定法。此法在中性或微碱性条件卜.（pH=6.5—

10.5）,以K2CrO4作为指示剂，用标准AgNO3溶液滴定，其滴定反应：

Ag++Ci=AgClI（白色）

其指示剂反应为：

+2

2Ag+CrO4-=Ag2CrO4I（砖红色）

囚为AgCI的溶解度远小了Ag2cg4的溶解度，所以当AgCl定量沉淀后，才生成

Ag2CrO4沉淀，指示滴定终点。

二、仪器与设备

锥形瓶、酸式滴定管、移液管等常规实验室设备

三、试剂及其配制

1.AgNO3标准溶液：溶解4.8gAgNO3固体于IL纯水中，置于棕色磨口试剂瓶保

存。此溶液对于氯离子的滴定度TAgNO3/CI约为l.Omg/mL,其准确值须用氯化钠标准溶液

标定。

2.NaCl基准溶液（CCl-=I.OOOmg/mL）：准确称取氯化钠（NaCi,AR,在500—600℃

的马弗炉内灼烧lh）0.8243g,在500mL容