胺类介质交叉配血试验操作指南

凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文献)

1目的

作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体H勺临床筛选检

测及辅助用于临床交叉配血试验。

2检查原理

红细胞表面带有大量的负电荷，以防止其产生自发性汇

集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷

所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成

Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间口勺排斥作用。

凝聚胺技术首先运用低离子溶液(LIM),减少介质的离子

强度，减少红细胞周围的阳离子云，以增进红细胞和血清(血

浆)中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高价阳离

子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生诸多正电荷，可以中

和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位减少，缩

短红细胞之间日勺距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最终,

加入悬浮液(Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺

(Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚

散开，试验成果为阴性；但假如红细胞被对应的抗体致敏，

则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验成果为阳性。

3储存条件及有效期

未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不不小于80%,

无腐蚀性气体口勺室内；己开封试剂应贮存于相对湿度不不小

于80%,无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应

及时拧紧瓶盖保留；未开封试剂的有效期为二年，在有效期

内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

4样本规定

4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。

4.2不能使用溶血标本及含枸椽酸钠、肝素抗凝血浆标本。

5检查措施

辅助交叉配血试验

5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2

滴，加供血者红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴,

次侧管反之。

5.2各加LIMO.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2

滴，并混合均匀0

5.3用离心机3400转/min（相称于1000g离心力）离心10秒,

然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

5.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必

须要重做。

5.5最终加入Resuspending2滴，轻轻摇动试管混合并同步

观测成果。假如在60秒内凝集散开，代表是由Polybrene

引起的非特异性汇集，配血成果相合；如凝集不散开，则为

红细胞抗原抗体结合欧I特异性反应，配血成果不相合。如反

应可疑，可深入倒在玻片上用显微镜观测。

6注意事项

6.1可以用含EDTA之血浆替代血清使用。

6.2若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4〜6

滴Polybrene溶液以中和肝素。

6.3本试剂盒的操作措施也合用于抗体鉴定。

6.4若试剂使用前为低温贮存，请答复室温再行操作。

6.5加做辅助性抗人球蛋白试验，目的是增长检测抗-K的

敏感性。

6.6在冬天室温极低日勺状况下，操作交叉配血试验，某些病

人血清中也许具有冷凝集素等原因，而导致假阳性的成果出

现。若有此怀疑，提议在最终滴入Resuspending时，将试

管立即置入37℃水浴中，轻轻摇动试管混合，并在60秒内

观测成果。

6.7红细胞抗原检测环节同抗体筛检试验，其检测原则血清

用已知原则血清。

6.8顾客可使用IgG抗D抗体（效价264）与RhD阳性红细

胞反应做阳性对照试验，测试本试剂日勺有效性。

0——

AB4-+

注：“+”有凝集反应，”无凝集反应

6检查成果时解释

将已知日勺抗A、抗B血型定型试剂与受检者的红细胞混合

时，与抗A血型定型试剂发生凝集者即为A型血型，与抗B

血型定型试剂发生凝集者即为B型血型，与抗A、抗B血型

定型试剂均发生凝集者即为AB型血型，与抗A、抗B血型定

型试剂均不发生凝集者即为0型血型。

7注意事项

7.1对具有较多自身冷凝集的受检者，在鉴定血型时往往

被误认为AB血型，碰到此种状况，需用37。生理氯化钠溶

液洗涤受检者细胞2-3次，以清除吸附在红细胞卜•的凝集素,

然后再鉴定血型。

7.2在做配型试验时，如发既有不配合现象，则取受检者

血清，用已知A血型或B血型细胞进行反定型试验，以核算

原鉴定日勺血型与否对的。

7.3用立即试管法不能测出亚型（如Ax）,需延长作用时

间。

7.4本品如出现浑浊或变色则不能使用，若开瓶使用时间

较长后，最佳用已知ABO血型红细胞检查成果与否与己妇血

型相符，以防制品污染，变质失效，而导致鉴定错误。

7.5在有效期内使用。

ABO血型反定型操作规程（SOP文献）

1目的

用于ABO血型日勺反定型检测，该产品不用于血源筛查。

2检查原理

本品系采用三人份同型混合的A1型、B型和0型合格人红

细胞经洗涤后悬浮于红细胞保留液中配制而成。采用凝集试

验原理，用已知的Al,B,0型红细胞测定被检者血清/血浆

中有无对应日勺抗A或抗B抗体（反定型试验），结合正定型

成果鉴定ABO血型。

3检查措施

试管法

3.1取被检者血清/血浆各50ul分别加入3支标识好日勺试管

中；

3.2分别各加50ulAl、B、0试剂红细胞;

3.3摇动试管，混匀。于900g离心15s,或室温静止lh;

3.4首先检查与否溶血，（溶血也许是阳性成果，或是细菌污

染。）轻轻摇动悬浮红细胞。

3.5观测凝集状况，并立即记录成果。必要时可借助显微镜

观测。

4检查成果时解释

ABO血型正反定型反应格局表

正定型反定型血型

抗A试剂抗B试剂A1细胞B细胞。细胞

十——十—A

—++——B

一—++一0

++———AB

注：“+”有凝集反应，“-”无凝集反应

5注意事项

5.1假如在反定型试验中，受检者的血清/血浆与0血型红细

胞试剂产生阳性反应，则需要添加自身对照试验。假如自身

对照为阳性，表明是冷凝集素导致。假如自身对照为阴性，

则表明被检者血清或血浆中也许存在ABO系统以外的其他血

型系统的抗体干扰定型。请按照有关的试验措施处理上述定

型问题。

5.2本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞自发凝集，

出现菌落或溶血，则不能使用。若开瓶使用时间较长后，最

佳用注册上市H勺抗A、抗B血型定型试剂检查成果与否与已

知血型相符，以防制品污染、变质失效、而导致检定错误。

5.3为了便于鉴别，A1血型红细胞试剂标签为蓝色，B血型

红细胞试剂标签为黄色，0血型红细胞试剂标签为红色。

乙型肝炎病毒表面抗原操作规程（SOP文献）

1.目日勺

用于血液日勺筛查和临床乙型肝炎病毒感染日勺辅助诊断。

2.检查原理

本品系用乙型肝炎表面抗体（抗TIBs）包被的微孔板和酶

标识抗TIBs及其他试剂制成，应用双抗体夹心酶联免疫法原

理检测人血清和血浆中时乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）

3,合用仪器

微量移液器；37c恒温水浴箱；振荡器；洗板机或洗瓶；

计时器;酶标仪，检测波长450nm,参照波长630nln。

4.样本规定

4.1样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术搜集血

液，全血样本最佳先放置37℃处理2小时，再将血样本充足

离心，3000转/分钟离心6分钟以上，使血清（血浆）不具

有或很少具有血细胞。假如为抗凝血样本，应将血样本充足

离心后，最佳再放置室温2小时以上。

4.2样本中具有叠氮钠会影响试验的成果，高度溶血的样

本、没完全收缩的血清样本或有微生物污染的样本也许会引

起错误的成果。

4.3新鲜的（样本在2、8℃无菌条件下可保留一周，新鲜样本

可长期贮存在-20℃或如下，防止反复冻融。

5.检查措施

5.1试验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡

30分钟，同步将洗涤液进行1:40倍稀释。

5.2设阳性对照2孔，阴性对照3孔，空白对照1孔。

5.3加样：在阳性对照、阴性对照孔内分别加入阳性对照、

阴性对照50ul,其他每孔加待测血清或血浆50ulo盖上封

孔胶片，置37℃水浴孵育60分钟。

5.4洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液持续洗涤5

次后，拍干孔内液体。

5.5加酶结合物:空白孔除外,每孔各加酶结合物50ul。

盖上封孔胶片，置37℃水浴孵育30分钟。

5.6洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液持续洗涤5

次后，拍干孔内液体。

5.7加底物液：每孔先加底物液A50ul,再加底物液B50J1,

混匀，盖上封孔胶片，置37℃条件下避光显色30分钟后，

加终止液50uL混匀，终止反应。

6.参照值（参照范围）

终止后尽快测定，波长450nm,先用空白孔校零，测0D值。

假如选用双波长测定，不必设置空白对照空。按下列公式计

算：

C0V二阴性对照平均0D值X2.1倍

阴性对照平均0D值低于或等于0.05,按0.05计算；高

于0.05时，按照实际0D值计算。

7.检查成果日勺解释

样品0D值S/C0V21时，待测样本HBsAg为阳性；

样品OD值S/COV<1时，待测样本HBsAg为阴性。

8.注意事项

8.1本品仅用于体外诊断，仅限检测人体血清或血浆；检

测成果作为诊断指标之一。

8.2使用时，从冷藏环境取出试剂盒，置室温平衡30分钟

后，方可进行测试。剩余试剂应及时封存于冰箱内保留，备

用。

8.3成果鉴定需在反应终止后10分钟内完毕。

8.4封孔胶片不得反复使用。

8.5在有效期内，微孔板密封袋如有漏气现象，不影响试

验成果。试剂盒在有效期内使用，不一样批号不得混用。

8.6阳性对照应呈阳性，否则所有试验无效。

8.7保证样本加样量的精确，假如加样不精确也许会导致

错误的试验成果。

8.8使用微量移液器加样时，每次应更换吸头吸取样本。

8.9在操作过程中应尽量防止反应微孔中产生气泡。

8.10精确控制反应温度和反应时间。

8.11洗板：1用洗板机洗板时，洗板机的加液量应注意控

制，既防止洗液过量而溢出，又能充斥反应微孔，并常常检

查加液头与否堵塞；2洗板机最佳每次使用前、后冲洗洁净,

防止管路堵塞或腐蚀；3洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

8.12本试剂盒及临床样本均应视为传染性物质或潜在传

染性物质，请按有关试验室工作规范执行和处理。

9.参照文献

《中国药典》2023年版三部；

《体外诊断试剂阐明书编写指导原则》（国食药监械

[2023]240号）

梅毒螺旋抗体操作规程（SOP文献）

1.目的

本试剂盒定性检测人血清或血浆中H勺梅毒螺旋体抗体。合

用于血液日勺筛查及临床梅毒螺旋体感染日勺辅助诊断。

2.检查原理

本试剂盒采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理。在微

孔条上预包被梅毒螺旋抗体时基因重组抗原，配以酶标识抗

原及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清或血浆中的梅毒螺

旋体抗体。

3.合用仪器

加样器、温箱、洗板机、含波长450nmH勺酶标仪。

4.样本规定

4.1本试剂使用样品为人血清或血浆，具有EDTA、柠檬酸

钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本试验。

4.2不能检测含悬浮纤维蛋白或汇集物、重度溶血的样品。

4.3样品中应无微生物，可在2、8℃储存1周，长期储存应

低温冻存，防止反复冻融。

4.4使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品试验

前需混匀。

5.检查措施

5.1配液：将浓缩洗涤液用蒸馈水或去离子水20倍稀释。

5.2编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照

3孔，阳性对照2孔和空白对照1孔。（用双波长检测，可不

设空白对照孔）。

5.3加样：分别在对应孔中加入待测样品或阴性、阳性对照

lOOulo

5.4温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。

5.5洗板：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最终一次

尽量扣干。

5.6加酶:酶孔加入酶标试剂100ul,空白孔除外。

5.7温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育30±1分钟。

5.8洗板：操作同环节5.5

5.9显色:没孔加入显色剂A.B液各50uL轻轻震荡混匀,

37±1℃避光显色30±1分钟。

6.参照值

临界值(CUTOFF)计算临界值二阴性对照孔A均值NC+0.18.

7.检查成果日勺解释

7.1阴性对照孔A值W0.10,阳性对照孔A值20.80.否则

试验无效。

7.2若有1孔阴性对照A值不小于0.1应舍弃，若两孔或两

孔以上阴性对照A值不小于0.1,应反复试验。

7.3阴性鉴定:样品A值V临界值(CUTOFF)者为TP阴性。

7.4阳性鉴定：样品A值2临界值(CUTOFF)者为TP阳性(注

意：初试阳性应重新取样双孔复试)。

8.注意事项

8.1本品仅用于体外诊断，操作应按阐明书严格进行。封板

膜不能反复使用，不一样批号酶标板。酶标试剂和阴性、阳

性对照不可混用，不能与其他厂家试剂混用。

8.2防止在有挥发性物质及次氯酸类消毒剂(如84消毒剂)

欧I环境下操作。

8.3使用前请将试剂平衡至室温(平衡30分钟以上)，试验

前将试剂轻轻振荡混匀，使用后立即放回2〜8℃。未用完的

微孔板条与干燥剂仪器用自封袋密封2~8℃保留。过期试剂

请勿使用。

8.4加液时必须用加样器，并常常校对加样器的精确性。加

入不一样样品或不一样试剂组分时，应更换加样器吸头和加

样槽，以防出现交叉污染。

8.5洗涤时各孔均需加满洗液，防止孔内有游离酶不能洗

净。使用洗板机应设定30飞0秒侵泡时间。在洗板结束后，

必须立即进行下一步，不可使酶标板干燥。防止长时间的中

断试验环节，以保证每孔试验条件日勺均一。

8.6成果鉴定必须以酶标仪读数为准。读取成果时，应擦干

酶标板底部，且孔内不能有气泡。不要触碰孔底部的外壁，

指印或划痕都也许影响板孔的读值。

8.7所用样品、废液和废弃物都应按传染物处理。终止液为

硫酸，使用时必须注意安全。

8.8显色时必须加显色剂A液后再加显色剂B液，以免显色

过低。

8.9由于ELISA反应原理日勺限制，本试剂检测阴性并不排除

TP感染的也许。检测的阳性成果必须结合临床信息进行分

析。

甲型肝炎病毒IgM抗体操作规程

（SOP文献）

1.目的

用本试剂盒检测人血清或血浆中的抗-HAVIgM,用于甲型肝

炎的初期诊断。

2.检查原理

本品系用抗人IgM（u链）包被的微孔板、甲型肝炎病毒（HAV）

抗原和酣标识抗甲型肝炎病毒（抗-HAV）及其他试剂制成，

应用捕捉法原理检测人血清或血浆中H勺抗-HAVIgM,用于甲

型肝炎的初期诊断。

3.合用仪器

微量移液器；37℃恒温水浴箱；振荡器；洗板机或洗瓶；

计时器；酶标仪，检测波长450nm,参照波长630nm。

4.样本规定

4.1样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术搜集血

液，全血样本最佳先放置37℃处理2小时，再将血样本充足

离心，3000转/分钟离心6分钟以上，使血清（血浆）不具

有或很少具有血细胞。假如为抗凝血样本，应将血样本充足

离心后，最佳再放置室温2小时以上。

4.2样本中具有叠氮钠会影响试验的成果，高度溶血的样

本、没完全收缩内血清样本或有微生物污染的样本也许会引

起错误的成果。

4.3新鲜的样本在2〜8℃无菌条件下可保留一周，新鲜样本

可长期贮存在-20℃或如下，防止反复冻融。

5.检查措施

二步法

5.1试验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡

30分钟，同步将洗涤液进行1:40倍稀释。

5.2设阳性对照2孔，阴性对照3孔，空白对照1孔。

5.3加样：在阳性对照、阴性对照孔内分别加入阳性对照、

阴性对照50uL其他每孔加待测血清或血浆50ul（或将待

测血清或血浆用生理盐水1:1000稀释后，加入到反应孔内）,

盖上封孔胶片，置37℃水浴孵育30分钟。

5.4洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液持续洗涤5

次后，拍干孔内液体。

5.5加酶结合物：取出酶结合物，充足混匀，每孔加50ul

（空白孔除外），盖上封孔胶片，置37℃水浴孵育30分钟。

5.6洗板：同5.4

5.7加底物液：每孔先加底物液A50ul,再加底物液B50al,

混匀，盖上封孔胶片，置37℃条件下避光显色15分钟后，

加终止液50ul,混匀，终止反应。

6.参照值（参照范围）

终止后尽快测定，波长450nm,空白孔调零，测0D值。假

如选用双波长测定，不必设置空白对照空。按下列公式计算:

C0V二阴性对照平均0D值X2.1倍

样品0D值S/C0V21时为阳性

样品0D值S/COV<1时为阴性

注：阴性对照平均0D值低于或等于0.05,按0.05计算;

高于0.05时，按照实际0D值计算。

7.检查成果H勺解释

7.1阴性成果表明样本中不具有抗-HAVIgM或抗-HAVIgM

含量低于试剂盒的检测范围。

7.2阳性成果表明样本中具有抗-HAVIgM或产生非特异反

应。

7.3样本的检查成果与临床体现不符或存在疑问时应采用

合适的措施进行确认。

7.4对于待检血清或血浆直接进行50ul加样，成果判为阳

性的标本，应对其用生理盐水1:1000稀释后反复试验并鉴

定成果。

8.注意事项

8.1本品仅用于体外诊断，仅限检测人体血清或血浆；检测

成果作为诊断指标之一。

8.2使用时，从冷藏环境取出试剂盒，置室温平衡30分钟

后，方可进行测试。剩余试剂应及时封存于冰箱内保留，备

用。

8.3成果鉴定需在反应终止后10分钟内完毕。

8.4封孔胶片不得反复使用。

8.5在有效期内，微孔板密封袋如有漏气现象，不影响试

验成果。

8.6试剂盒在有效期内使用，不一样批号不得混用。

8.7保证样本加样量的精确，假如加样不精确也许会导致

错误的试验成果。

8.8使用微量移液器加样时，每次应更换吸头吸取样本；

假如采用滴瓶滴加时，请将滴瓶中液体摇匀，并弃去2滴后

垂直均速滴加，要防止组分中的液体触到或溅到微孔边缘

上，尤其是酶结合物。

8.9在操作过程中应尽量防止反应微孔中产生气泡。

8.10精确控制反应温度和反应时间。

8.11洗板：1用洗板机洗板时，洗板机的加液量应注意控

制，既防止洗液过量而溢出，又能充斥反应微孔，并常常检

查加液头与否堵塞；2洗板机最佳每次使用前、后冲洗洁净,

防止管路堵塞或腐蚀；3洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

8.12本试剂盒及临床样本均应视为传染性物质或潜在传

染性物质，请按有关试验室工作规范执行和处理。

9.参照文献

《中国生物制品规程》2023年版

丙型肝炎病毒抗体操作规程（SOP文献）

1.目日勺

用于血液日勺筛查和临床丙型肝炎病毒感染日勺辅助诊断

2.检查原理

本品系用丙型肝炎病毒（HCV）抗原包被口勺微孔板和酶标识

抗人IgG及其他试剂制成，应用简接酶联免疫法原理检测人

血清或血浆样品中的HCV抗体。

3.合用仪器

微量移液器；37℃恒温水浴箱；振荡器；洗板机或洗瓶；

计时器；酶标仪，检测波长450nm,参照波长630nm。

4.样本规定

4.1样本采集不需要特殊准备，按照正常口勺采血技术搜集

血液，全血样本最佳先放置37C处理2小时，再将血样本充

足离心，3000转/分钟离心6分钟以上，使血清（血浆）不

具有或很少具有血细胞。假如为抗凝血样本，应将血样本充

足离心后，最佳再放置室温2小时以上。

4.2样本中具有叠氮钠会影响试验日勺成果，高度溶血的样

本、没完全收缩的血清样本或有微生物污染的样本也许会引

起错误日勺成果。

4.3新鲜的样本在2~8℃无菌条件下可保留一周，新鲜样本

可长期贮存在-20℃或如下，防止反复冻融。

5.检查措施

5.1试验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡

30分钟，同步将洗涤液进行1:40倍稀释。

5.2设阳性对照2孔，阴性对照3孔，不加样品稀释液,

直接加入阳性对照。阴性对照100U1,另设空白对照1孔（只

加底物液及终止液）。

5.3加样：在其他每孔加先加样品稀释液100ul,再加待

检血清或血浆10ul（空白孔除外），充足混匀，盖上封孔胶

片，置37℃水浴孵育60分钟。

5.4洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的I洗涤液持续洗涤5

次后，拍干孔内液体。

5.5加酶结合物:空白孔除外，每孔各加酶结合物lOOuL

盖上封孔胶片，置37C水浴孵育30分钟。

5.6洗涤：弃去孔内液体，用稀释后的洗涤液持续洗涤5

次后，拍干孔内液体。

5.7加底物液：每孔先加底物液A50uL再加底物液B50al,

混匀，盖上封孔胶片，置37℃条件下避光显色30分钟后，

加终止液50uL混匀，终止反应。

6.参照值

终止后尽快测定，波长450nm,空白孔调零，测0D值。假

如选用双波长测定，不必设置空白对照空。按下列公式计算:

COV二阴性对照平均0D值X2.1倍

阴性对照平均0D值低于或等于0.1,按0.1计算；高于0.1,

按照实际0D值计算。

7成果判断

样品0D值S/COV^l时，待测样本为阳性;

样品0D值S/COV<1时，待测样本为阴性。

8.注意事项

8.1本品仅用于体外诊断，仅限检测人体血清或血浆；检测

成果作为诊断指标之一。

8.2使用时，从冷藏环境取出试剂盒，置室温平衡30分钟

后，方可进行测试。剩余试剂应及时封存于冰箱内保留，备

用。

8.3成果鉴定需在反应终止后10分钟内完毕。

8.4封孔胶片不得反复使用。

8.5在有效期内，微孔板密封袋如有漏气现象，不影响试

验成果。

8.6试剂盒在有效期内使用，不一样批号不得混用。

8.7保证样本加样量的精确，假如加样不精确也许会导致

错误日勺试验成果。

8.8使用微量移液器加样时，每次应更换吸头吸取样本。

8.9在操作过程中应尽量防止反应微孔中产生气泡。

8.10精确控制反应温度和反应时间。

8.11洗板：1用洗板机洗板时，洗板机H勺加液量应注意控

制，既防止洗液过量而溢出，又能充斥反应微孔，并常常检

查加液头与否堵塞；2洗板机最佳每次使用前、后冲洗洁净,

防止管路堵塞或腐蚀；3洗板时所用代I吸水纸请勿反复使用。

8.12本试剂盒及临床样本均应视为传染性物质或潜在传

染性物质，请按有关试验室工作规范执行和处理。

9,参照文献

《中国药典》2023年版三部

《体外诊断试剂阐明书编写指导原则》（国食药监械【2023】

240号）

HIV抗体初筛试验室操作规程（SOP文献）

1.检查目的

检查人体血清中与否感染HIV病毒

2.检查原理

本产品系用纯化基因工程人类免疫缺陷病毒“1”型和

“2”（HIV-1和HIV-2）抗原包被的微孔板和酶联记日勺HIV-1

和HIV-2抗原及其他试剂构成试剂盒，应用双原夹心法原理

检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒抗体，用于献血员

及高危人群中人类免疫缺陷病毒的筛查。

3.检查条件

3.1操作人员对本试验应心中有数，严格执行操作规程。

3.2洗板机，酶标仪，加样器必须定期校正。试剂按规

定保留。

4.标本采集

4.1门诊病人由检查科人员无菌抽取静脉血2ml分离血

清备用。

4.2住院病人由护士采血送检查科。

4.3要防止溶血。

5.设备和试剂

5.1设备全自动ZDMX型酶标洗板机，MR-96A酶标仪。

5.2试剂珠海丽珠试剂股份有限企业生产的抗HIV诊

断试剂盒。

6.操作措施

6.1试验准备从冷环境中取出试剂盒，室温平衡半小

时，同步将浓缩洗液用蒸储水作1:20稀释备用。

6.2编号每板应设空白对照1孔，阳性对照2孔，阴

性对照2孔，质控1孔。

6.3加样每孔加入50ul样品稀释液，并分别在对应孔

中加入待测样品或阴、阳对照、质控品50ul。空白孔内只加

稀释液。

6.4温育用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

6.5加酶除空白对照孔外，每孔加50ul酶标识物，轻

轻震动混匀，用封板膜将板孔封好，置37℃温育30分钟。

6.6洗板小心将封板膜揭掉，选择6次的程序洗板，

最终排干。

6.7显色每孔先加显色剂A再加显色剂B各50ul,