微生物检验项目一原核微生物48课件

主讲人：杨雅兰

副教授项目一原核微生物任务一：细菌的形态和大小微生物检验广东省精品在线开放课程分析检验技术资源库AnalyticalTestingTechniquesRepository细菌任务一Projectone01

0203

1.4

食品中常见的细菌041.1细菌的形态和大小1.2细菌的细胞结构1.3细菌的繁殖与群体形态微生物检验细菌的形态和大小1.1微生物检验认识细菌细菌是单细胞原核微生物，个体微小，形态简单，以二等分裂方式繁殖。在自然界中，细菌分布最广、数量最多。微生物检验1.1细菌的形态和大小球状螺旋状方形杆状或梭状杆状星星形状基本形态其他形态微生物检验

1.球菌(coccus）菌体呈球形或近似球形,以典型的二分裂殖方式繁殖,分裂后产生的新细胞常保持一定的空间排列方式.根据细胞分裂的方向及分裂后的各子细胞的空间排列状态不同,可将球菌分为以下几种:单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等。(一)细菌的形态和大小微生物检验(1)单球菌

分裂后的细胞分散而单独存在的球菌.如尿素微球菌(Micrococcusureae)1.球菌单球菌微生物检验1.球菌

(2)双球菌

分裂后两个球菌成对排列的为双球菌.

如肺炎双球菌(Diplococcuspneumoniae)双球菌微生物检验1.球菌

(3)链球菌

分裂是沿一个平面进行，分裂后细胞排列成链状.如乳链球菌（Streptococcuslactis）链球菌微生物检验1.球菌

(4)四联球菌

分裂是沿两个相垂直的平面进行，分裂，分裂后每四个细胞在一起呈田字形.

如四联微球菌（Micrococcustetragenus）四联球菌微生物检验1.球菌

(5)八叠球菌按三个互相垂直的平面进行分裂后，每八个球菌在一起成立方体形.

如藤黄八叠球菌（Sarcinaureae)

八叠球菌微生物检验1.球菌

(6)葡萄球菌分裂面不规则，多个球菌聚在一起，像一串串葡萄。如金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)

葡萄球菌微生物检验2.杆菌短杆菌长杆菌梭状芽孢杆菌微生物检验链状杆菌单杆菌2.杆菌微生物检验杆菌细胞两端的形态特征2.杆菌微生物检验一般情况下,同一种杆菌的宽度比较稳定,但它的长度经常随培养时间、培养条件的不同而有较大的变化。杆菌举例：大肠杆菌（Escherichiacoli）枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）北京棒杆菌（CorynebacteriunPekinensis）2.杆菌微生物检验3、螺旋菌

螺旋状的细菌称为螺旋菌。

根据其弯曲情况分为：

弧菌：螺旋不满一圈，菌体呈弧形或逗号形

例：霍乱弧菌、逗号弧菌

螺旋菌：螺旋满2—6环，螺旋状

例：干酪螺菌

螺旋体：旋转周数在6环以上，菌体柔软。

例：梅毒密螺旋体(一)细菌的形态微生物检验3、螺旋菌弧菌螺旋体螺旋菌微生物检验

细菌的特殊形态微生物检验细菌大小的测定：(1)测量：测微尺(2)长度单位：微米(μm)(3)表示：球菌：直径杆菌：宽×长螺菌：宽、长、螺距微生物检验微生物检验

菌名

直径或宽×长/

（μm×μm

）乳链球菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌枯草芽孢杆菌霍乱弧菌0.5~10.8~10.5×(1~3)(0.8~1.2)×(

1.2~3)(0.2~0.6)×(1~3)

细菌细胞的大小微生物检验

细菌的细胞结构1.2微生物检验一、细菌的细胞结构12341234细胞壁细胞膜细胞质核质体Capsule荚膜flagellum鞭毛Pili菌毛germ芽胞5内含物Contents细胞的基本结构细胞的特殊结构cellwall

cellmembranecytoplasmNucleoplast微生物检验微生物检验细菌的基本结构细胞壁是位于菌体的最外层，内侧紧贴细胞膜的一层无色透明，坚韧而有弹性的结构。细胞壁约占细胞干重的10%—25%。细胞壁保护细胞免受外力损伤,维持菌体外形协助鞭毛运动与胞膜一起完成细胞内外物质交换为正常细胞分裂所必需与细菌的抗原性．致病性和对噬菌体的敏感性密切相关。细胞壁的功能肽聚糖网格状结构细胞壁基本骨架---肽聚糖微生物检验细菌细胞壁的结构：细胞壁的基本骨架——肽聚糖

肽聚糖：是由N—乙酰胞壁酸（NAM）和N—乙酰葡糖胺（NAG）以及少数氨基酸短肽链组成的亚单位聚合而成的大分子复合体。肽聚糖单体：是由NAG、NAM、肽尾、肽桥构成。②细胞壁的化学组成与结构微生物检验革兰氏阳性细菌肽聚糖单体革兰氏阴性细菌肽聚糖单体细胞壁的基本骨架——肽聚糖微生物检验细菌细胞壁的结构革兰氏阳性菌细胞壁：由肽聚糖和磷壁酸组成

磷壁酸：占40%。G+菌所特有,其主链由数十个磷酸甘油或磷酸核糖醇组成,有的还有由D—Ala和还原糖组成的侧链。

肽聚糖:占30~70%,不同菌种中肽聚糖(肽链)组分不同。微生物检验细菌细胞壁的结构革兰氏阴性菌细胞壁：分内壁层和外壁层。

内壁层：紧贴胞膜,仅由1—2层肽聚糖分子构成,占细胞壁干重5—10%,无磷壁酸。外壁层：位于肽聚糖层的外部。脂多糖;

脂蛋白、

包括:蛋白质层:基质蛋白、

外壁蛋白;

磷脂.微生物检验革兰氏染色

革兰染色法是微生物学中常用的一种染色方法，该染色法由丹麦医生Gram于1884年首创，故名。微生物检验通透性机制G+菌细胞壁结构致密，脂类含量少，乙醇不易透入，反而可使细胞壁脱水形成一道屏障，阻止染料从细胞内渗出；G-菌细胞壁较疏松，含脂类物质多，易被乙醇溶解，使其通透性增大，细胞内的结晶紫―碘复合物易被溶解渗出易脱色。化学机制G+菌细胞内含大量核糖核酸镁盐，与结晶紫―碘复合物结合牢固，另外，其等电点较低，结合的碱性染料多而牢固，因而染成紫色。微生物检验结晶紫初染全部紫色碘液媒染全部紫色乙醇脱色G-菌无色G+菌紫色

番红复染

G-菌红色

G+菌紫色革兰染色各步骤时细菌的颜色革兰染色操作步骤微生物检验革兰染色操作步骤

镜检涂片滴水取菌固定结晶紫（1min）水洗水洗碘液（1min）

乙醇脱色干燥水洗复染(1-2min)水洗（20-30S）微生物检验革兰染色操作步骤微生物检验革兰染色结果革兰阴性杆菌革兰阳性链球菌微生物检验革兰染色结果微生物检验涂片的厚薄涂片固定的时间脱色与染色时间细菌菌龄影响革兰染色结果的因素微生物检验可将细菌分为两大类，是对细菌进行鉴定的最基本的检验技术，可将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。两类细菌抗原性不同。致病性和对药物的敏感性均不相同。革兰染色的意义微生物检验细菌细胞的特殊结构——鞭毛鞭毛的化学组成：主要由鞭毛蛋白构成，还含有少量的多糖、脂类和核酸等。鞭毛起源于细胞质膜内侧的基粒。细胞质区内有一个颗粒状小体，此小体为基粒，鞭毛自基粒长出穿过细胞壁延伸到细胞外部。鞭毛的结构：

鞭毛丝鞭毛

鞭毛钩

基体鞭毛的观察：电镜特殊鞭毛染色，在光学显微镜下观察半固体穿刺培养从固体培养基上的菌落形态判断一般情况下：菌落形状大，薄且不规则，边缘极不平整，可能有鞭毛。菌落十分圆滑，边缘平整且相对较厚，可能没有鞭毛。具有鞭毛的细菌大多是弧菌、杆菌和个别球菌。微生物检验鞭毛的着生方式周生微生物检验菌毛芽胞荚膜细菌细胞的特殊结构某些菌体表面存在的短而多的附属物。纤毛比鞭毛更短、更细，且又直又硬。数量很多，不具有运动功能，但与菌的致病性．吸附等有关。

概念：某些菌生长到一定阶段，细胞内形成一个圆形、椭圆形或卵圆形的内生孢子，是对不良环境有较强抵抗力的休眠体许多细菌的最外表还覆盖着一层多糖类物质，边界明显的称为荚膜(capsule)，如肺炎球菌，边界不明显的称为黏液层(slimelayer)，如葡萄球菌。荚膜对细菌的生存具有重要意义，细菌不仅可利用荚膜抵御不良环境;保护自身不受白细胞吞噬;而且能有选择地黏附到特定的细菌表面上。微生物检验能形成芽孢的细菌种类：在杆菌中能形成芽孢的种类较多，在球菌和螺旋菌中只有少数菌种可形成芽孢。产生芽孢的几个属：芽孢杆菌属梭状芽孢杆菌属芽孢乳杆菌属生孢八叠球菌属（其中的一个种）芽孢微生物检验芽孢的形态及其在细胞中的位置：

A近中央

B末端

C中央微生物检验

细菌芽孢的各种类型微生物检验芽孢的组成和结构芽孢有多层结构，主要包括孢外壁、芽孢衣、皮层和核心.芽孢的结构芽孢的外壁层厚而致密，主要成分为脂蛋白，通透性差,不易着色。核心含有大量的DNA、RNA、蛋白质酶等物质，还含有2,6—吡啶二羧酸（DPA）,DPA是芽孢特有的成分。一般以DPA—Ca的形式存在。皮层主要含芽孢肽聚糖、DPA—Ca，皮层体积大，比较致密。芽孢平均含水量低,约40%.微生物检验芽孢的特性:具有很强的抗热、抗干燥、抗辐射、抗化学药物能力。含水量低、壁厚而致密，通透性差,不易着色。新陈代谢几乎停止，处于休眠状态。一个芽孢萌发产生一个个体。芽孢的抗热机制：目前尚不清楚，但可能与以下因素有关，如含水量低、壁厚而致密，芽孢中的酶分子量小，比较耐热。微生物检验四、细菌的繁殖和培养（一）繁殖一般为无性繁殖，二分裂法。同形裂殖：裂殖后形成的子细胞大小相等。异形裂殖：分裂产生两个大小不等的子细胞。细菌分裂过程：①核分裂②形成横隔壁③子细胞分离微生物检验（二）群体形态1.固体培养菌落：在固体培养基上,由单个细胞繁殖形成的肉眼可见的子细胞群体。菌苔:大量细胞密集生长,结果长成的各“菌落”连接成一片。

(1)平板培养微生物检验(2)固体斜面培养2.液体培养基