鸡血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素的测定-高效液相色谱法_第1页
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2鸡血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素的测定-高效液相色谱法本标准规定了高效液相色谱法测定鸡血藤中原儿茶酸、儿茶件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验JY/T024—1996高效液相色谱方法通则本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水；用制剂和制品按GB/T603配制。标准品：原儿茶酸(分子式C₇H₆O₄),儿茶素(分子式C₁₅H₁₄O₆),表儿茶素(分子式C₁₅H₁₄O₆),芒柄花素(分子式C1₆H₁₂O₄):纯度大于等于98.0%。精密称取原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素适量，用甲醇超声(功率100W,频率40kHz) 3超声波清洗器(功率：100W,频率：40KHz)。5测定步骤5.1样品的制备取样品粉末(过40目)约1g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入二氯甲烷-甲醇(4:1)50ml,称量，超声处理(功率100W,频率40kHz)60min,放冷，过滤，减压浓缩至干，甲醇溶解并定容至5ml,0.45um微孔滤膜过滤，即得。5.2色谱条件a)色谱柱：TechmateSTC18(4.6×250mm,5μm),或性能相当的色谱柱。b)柱温：30℃。c)流动相：0～5min,乙腈：0.2%磷酸(9:91);5～15min,乙腈：0.2%磷酸(9:91～11:89);15～28min,乙腈：0.2%磷酸(11:89～15:85);28～35min,乙腈：0.2%磷酸(15:85～20:80);35～85min,乙腈：0.2%磷酸(20:80～41:59)。d)流动相流速：1.0mL/min。f)检测波长：280nm。g)理论塔板数：≥3000。外标峰面积法定量。分别精密吸取标准品溶液与样品溶液各10μL,注入液相色谱仪，测定，即得。5.4计算公式和结果表达5.4.1计算公式试样中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素含量C,按照公式(1)计算：式中：c——鸡血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素含量(%);As——供试品峰面积；A——对照品峰面积；C——对照品浓度，单位毫克每毫升(mg/mL);V——供试品定容体积，单位为毫升(mL);m——样品称样量，单位为克(g)。5.4.2结果表达平行测定结果用算术平均值表示。结果保留三位有效数字。5.5重复性4在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。5p3241.

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