2024-2025学年河北省衡水市高二下学期期中考试生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1河北省衡水市2024-2025学年高二下学期期中考试全卷满分100分，考试时间75分钟。注意事项：1.答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试卷和答题卡上，并将条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2.请按题号顺序在答题卡上各题目的答题区域内作答，写在试卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3.选择题用2B铅笔在答题卡上把所选答案的标号涂黑；非选择题用黑色签字笔在答题卡上作答；字体工整，笔迹清楚。4.考试结束后，请将试卷和答题卡一并上交。一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.下列有关传统酿酒的叙述，正确的是（）A.酿酒利用的微生物是不具有细胞核的酵母菌B.酿酒初期应密封发酵装置，以利于酵母菌的发酵C.酿酒时的环境温度必须严格控制在30℃以上D.可用酸性重铬酸钾溶液初步检测发酵产物【答案】D〖祥解〗果酒的制作，选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。果酒制作的原理是：在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。酒精发酵时一般将温度控制在18～30℃。【详析】A、酿酒利用的微生物是酵母菌，其具有成形的细胞核，A错误；B、酿酒初期应保持通气状态，以利于酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，B错误；C、酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，因此酿酒时一般将温度控制在18～30℃进行酒精发酵，C错误；D、橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应变成灰绿色，可用酸性重铬酸钾溶液初步检测发酵产物，D正确。故选D。2.腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤。下列叙述错误的是（）A.参与豆腐发酵的微生物有酵母、毛霉等B.酒精可抑制腐乳中微生物的生长和繁殖C.香辛料具有灭菌和调节腐乳风味的作用D.酒精和香辛料可使腐乳具有独特的香味【答案】C〖祥解〗腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为小分子的肽和氨基酸。【详析】A、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，A正确；B、酒可抑制微生物的生长繁殖，以避免豆腐腐败变质，B正确；C、香辛料具有调节腐乳风味的作用，但不能灭菌，C错误；D、酒精和香辛料可使腐乳具有独特的香味，D正确。故选C。3.馒头是一种以小麦面粉为主要原料，利用微生物发酵的面团制成的中国传统面食之一。下列关于馒头制作的叙述，正确的是（）A.馒头中有许多小孔是酵母菌发酵产生酒精所致B.与面粉相比，馒头中有机物的种类和含量均减少C.冬季时制作馒头的面团发酵所需时间长于夏季D.面团内部的微生物繁殖速率比面团外的更快【答案】C〖祥解〗酵母菌属于兼性厌氧菌，既能进行需氧呼吸，也能进行无氧呼吸。需氧呼吸的产物是CO2和水，无氧呼吸的产物是酒精和CO2。【详析】A、馒头中有许多小孔是酵母菌发酵产生CO2的结果，A错误；B、与面粉相比，馒头中有机物的种类增加，含量减少，B错误；C、夏季温度较高，酵母菌更容易发酵，故冬季时制作馒头的面团发酵所需时间长于夏季，C正确；D、面团外部氧气较充足，故面团外部的微生物繁殖速率比面团内的更快，D错误。故选C。4.某小组探究了初始乙醇含量对青梅果醋发酵的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（）A.醋酸菌可利用乙醇进行果醋发酵B.初始乙醇含量过低利于醋酸发酵的进行C.初始乙醇含量过高会抑制醋酸菌的代谢D.随初始乙醇含量增加，总酸含量先上升后下降【答案】B〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、醋酸菌在氧气、糖源充足时直接将糖分解为乙酸，在糖源不足时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，A正确；B、结合实验结果可知，初始乙醇含量过低不利于醋酸发酵的进行，B错误；C、根据实验结果可知，初始乙醇浓度超过7%，随着初始乙醇浓度的增加，总酸含量表现为下降，因而可推测，若培养基中乙醇含量过高可能会导致醋酸菌发生渗透失水而死亡，从而抑制醋酸菌的生长和代谢，C正确；D、在实验浓度范围内，随初始乙醇含量增加，总酸含量先上升后下降，D正确。故选B。5.细菌计数板和血细胞计数板均可用于微生物的计数。下列叙述正确的是（）A.两种计数板的计数原理相同B.细菌计数板可用于酵母菌的计数C.血细胞计数板只统计活菌的数量D.细菌计数板比血细胞计数板略厚【答案】A〖祥解〗统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。【详析】A、细菌计数板或血细胞计数板的计数原理相同，A正确；B、细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数，B错误；C、血细胞计数板的计数结果包括了活菌和死菌，C错误；D、在结构上，血细胞计数板比细菌计数板略厚，D错误。故选A。6.如图表示倒平板的操作流程。下列叙述错误的是（）A.正确的操作顺序是3→1→2→4B.操作1、2、3在酒精灯火焰附近进行是为了避免杂菌污染C.操作2需要等培养基冷却到50℃左右再进行D.操作4将平板倒置是为减少培养基中营养成分丢失【答案】D〖祥解〗图中所示操作分别为：1→灼烧锥形瓶瓶口；2→分装（将培养基倒入培养皿）；3→在火焰旁的台面上，拔出装有培养基的锥形瓶的棉塞；4→倒置存放平板。【详析】A、倒平板的操作程序为：将灭菌后的培养皿放在火焰旁的台面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；在酒精灯火焰附近，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待培养基冷却凝固（需5～10分钟）后，将培养皿倒过来放置，以防止冷凝水滴落在培养基上引发污染。可见，正确的操作顺序是3→1→2→4，A正确；B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的污染，因此操作1、2、3在酒精灯火焰附近进行是为了避免杂菌污染，B正确；C、待培养基冷却至50℃左右（此温度下不烫手）时，在酒精灯火焰附近倒平板，因此操作2需要等培养基冷却到50℃左右再进行，C正确；D、操作4将平板倒置是为避免培养皿皿盖上的水珠滴入培养基和防止培养基表面的水分蒸发过快，D错误。故选D。7.下列有关植物细胞工程及其应用的叙述，错误的是（）A.胚状体由愈伤组织经脱分化形成B.人参皂苷属于植物细胞次生代谢物C.利用单倍体育种可快速获得纯合新品种D.快速繁殖技术能保持植物优良品种的遗传特性【答案】A〖祥解〗植物组织培养应用：1、植物离体快速繁殖。2、无病毒苗木培育，无性繁殖植物，病毒在体内积累，对生产造成极大损失。利用组织培养方法可脱除病毒，获得脱病毒小苗。3、通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限。4、培养细胞突变体的应用。5、利用组织培养的材料作为植物生物反应器。【详析】A、胚状体由愈伤组织经再分化形成，A错误；B、次生代谢物是指植物代谢产生的一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物，因此，人参皂苷属于植物细胞的次生代谢物，B正确；C、单倍体育种的技术路线包括花药离体培养和秋水仙素处理，若利用单倍体育种，可以快速获得纯合新品种，C正确；D、用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，也叫作微型繁殖技术，不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性，D正确。故选A。8.利用如图所示的植物体细胞杂交技术可获得杂种植株。下列叙述正确的是（）A.过程①应在低渗溶液中进行以维持原生质体的正常形态B.常使用灭活病毒诱导两种原生质体融合C.与杂种细胞形成有关的细胞器包括高尔基体D.杂种植株一定同时具有植物A和植物B的性状【答案】C〖祥解〗植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株，在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导，不同种植物的细胞所含染色体的种类和数目是不同的，故我们可以根据细胞中染色体的种类和形态的差异来鉴定杂种细胞.。【详析】A、过程①制备原生质体时不可以用低渗溶液，否则会导致制备的原生质体吸水涨破，A错误；B、诱导植物原生质体融合的方法主要是物理法或化学法，灭活病毒常用于诱导动物细胞融合，B错误；C、杂种细胞形成的标志是：杂种细胞再生细胞壁，细胞壁的形成与高尔基体有关，C正确；D、由于基因的选择性表达及基因间的相互作用，杂种植株不一定同时具有植物A和植物B的性状，D错误。故选C。9.为测定某药物对体外培养细胞的毒性，某小组在动物肝细胞培养液中加入不同浓度的该药物溶液。下列叙述错误的是（）A.本实验的自变量为不同浓度的该药物溶液B.制备肝细胞悬液时不能用胃蛋白酶处理肝组织C.培养肝细胞时一般需在培养基中加入适量动物血清D.培养液中需添加抗生素以保证培养细胞所需的无毒环境【答案】D〖祥解〗动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。【详析】A、本实验是为了测定药物对细胞的毒性，加入了不同浓度的药物溶液，所以不同浓度的该药物溶液就是本实验的自变量，A正确；B、胃蛋白酶的最适pH约为1.5-2.2，在动物细胞培养液的pH条件下，胃蛋白酶会失活，不能用来处理肝组织制备肝细胞悬液，一般用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，B正确；C、动物细胞培养时，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，所以一般需在培养基中加入适量动物血清，以补充细胞生长所需的未知营养物质，C正确；D、培养液中添加抗生素的目的是防止杂菌污染，保证培养细胞所需的无菌环境，而不是无毒环境，D错误。故选D。10.如图为克隆猴的部分培养过程。下列叙述正确的是（）A.克隆猴的培育仅涉及动物细胞核移植与胚胎移植技术B.刚采集的A猴卵母细胞可直接使用显微操作法去除细胞核C.用蛋白酶合成促进剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程D.重构胚是经人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力【答案】D〖祥解〗动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎经过胚胎移植最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。该过程中采用显微操作去核法去除卵母细胞中细胞核。【详析】A、克隆猴的培育涉及动物细胞培养、动物细胞核移植与胚胎移植等技术，A错误；B、采集的A猴卵母细胞需培养至MⅡ期时，才能使用显微操作法去除细胞核，B错误；C、可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误；D、重构胚是经人工重新构建的胚胎，具有发育的全能性，可发育成完整个体的能力，D正确。故选D。11.自然状态下的大熊猫繁殖能力较低，我国科学家利用胚胎工程的技术手段大大提高了熊猫的繁殖率。下列叙述正确的是（）A.卵母细胞去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物B.早期胚胎移入同期发情处理的大熊猫子宫内会引发免疫排斥反应C.在大熊猫早期胚胎发育的过程中，原肠胚期开始出现细胞的分化D.经胚胎分割技术得到的大熊猫的基因型相同，表型也完全相同【答案】A〖祥解〗胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。【详析】A、将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体和染色体复合物，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和染色体结构，A正确；B、早期胚胎移入同期发情处理的大熊猫子宫内不会引发免疫排斥反应，B错误；C、在早期胚胎发育的囊胚期就已经开始出现细胞分化，C错误；D、经胚胎分割技术得到的个体的基因型相同，但表型受环境等因素的影响，不一定完全相同，D错误。故选A。12.限制性内切核酸酶是基因工程常用工具酶。下列有关该酶的叙述，正确的是（）A.主要从原核生物中分离和纯化B.只能识别由6个核苷酸组成的序列C.可切割双链DNA分子中碱基之间的氢键D.在识别序列的中轴线处切割可形成黏性末端【答案】A〖祥解〗限制性内切核酸酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。【详析】A、限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离和纯化，A正确；B、限制性内切核酸酶大多能识别由6个核苷酸组成的序列，少数能识别4个、8个或其他数量的核苷酸序列，B错误；C、限制性内切核酸酶切割双链DNA分子中的磷酸二酯键，C错误；D、在识别序列的中轴线处切割可形成平末端，D错误。故选A。13.基因工程中常用的标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。现将某细菌分别接种于下列培养基中：对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成。则该细菌中标记基因的分布情况是（）A.含抗四环素基因，不含抗氨苄青霉素基因B.含抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因C.既含抗四环素基因，也含抗氨苄青霉素基因D.不含抗四环素基因，也不含抗氨苄青霉素基因【答案】B〖祥解〗选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基，利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。【详析】根据题意可知，对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成，而含有四环素的实验组1和3没有形成菌落，说明该细菌的标记基因含有抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因，B正确，ACD错误。故选B。二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。14.如图为泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量与腌制时间、盐浓度的关系曲线。下列叙述合理的是（）A.腌制过程中，坛中溶液量增多的主要原因是细胞呼吸产生了水B.三种盐浓度下，盐浓度越高，亚硝酸盐含量的峰值出现得越晚C.泡菜腌制16天时可适量食用，因为此时亚硝酸盐的含量较低D.盐浓度越高，亚硝酸盐含量越低，故腌制泡菜时盐浓度越高越好【答案】BC〖祥解〗据图分析，图示自变量是腌制时间和食盐浓度，因变量是亚硝酸盐含量，据此分析作答。【详析】A、腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在盐水中失水，A错误；B、由图可知，食盐浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早、越高，B正确；C、由图可知，不同盐浓度下腌制16后，泡菜中亚硝酸盐含量较低，此时比较适合食用，C正确；D、据图可知，并非盐浓度越高，相同时间后亚硝酸盐含量越低，且腌制泡菜时盐浓度过高会抑制乳酸菌的发酵，导致产生的乳酸过少，所以腌制泡菜时盐浓度并不是越高越好，D错误。故选BC。15.啤酒是人类最古老的酒精饮料之一，工业化生产啤酒的流程如图所示。下列叙述错误的是（）A.酿制啤酒时，酵母菌发酵利用的直接底物是淀粉B.步骤④利用的酵母菌菌种可通过诱变育种获得C.步骤⑤中可采用巴氏消毒法以保证啤酒的品质D.发酵的温度和时间会影响啤酒的口感和风味【答案】A〖祥解〗啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。【详析】A、酿制啤酒时，淀粉经淀粉酶的作用分解为葡萄糖，酵母菌利用葡萄糖进行酒精发酵，A错误；B、发酵中所用的性状优良的菌种可从自然界筛选，也可通过其他途径如诱变育种、基因工程等获得，B正确；C、巴氏消毒法，温度不是很高，该操作的目的既能杀死啤酒中的微生物，又能保证啤酒中的营养成分不被破坏（流失），即步骤⑤中可采用巴氏消毒法以保证啤酒的品质，C正确；D、发酵时的温度和时间会影响酒精发酵产生的酒精的含量，因此会影响啤酒的口感和风味，D正确。故选A。16.如图为某动物早期胚胎的示意图，①~④表示相关结构。下列叙述正确的是（）A.①为滋养层，将来会发育为胎膜和胎盘B.②为内细胞团，常作为性别鉴定的取样材料C.③为透明带，其破裂后胚胎从中伸展出来的过程叫作孵化D.形成该囊胚前的过程中，胚胎的总体积并未增加【答案】ACD〖祥解〗题图分析：图示为胚胎发育过程某一时期示意图，该时期为囊胚期，其中①为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；②为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；③为透明带，④为囊胚腔。【详析】A、①为滋养层，将来会发育为胎膜和胎盘，实现对胚胎的保护和与母体的联，A正确；B、②为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，常作为性别鉴定取样材料的是①滋养层，B错误；C、③为透明带，随着囊胚体积的变大，胚胎从其中伸展出来的过程叫做孵化，C正确；D、该时期为囊胚期，形成该囊胚前的过程中，胚胎的总体积并未增加，因而胚胎可以在透明带中存在，但此时胚胎中的细胞数目增多，有机营养减少，D正确。故选ACD。17.下列关于“试管牛”培育流程的叙述，正确的是（）A.过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子B.过程②体外受精依赖于精子、卵细胞的识别和细胞膜的流动性C.过程③的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移D.代孕母牛需要进行同期发情处理，在过程③后无需进行妊娠检测【答案】ABC〖祥解〗图示为“试管牛”的培养流程，①表示卵母细胞的采集和培养，②表示体外受精，③表示胚胎移植。【详析】A、过程①是卵母细胞采集和培养，可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子，A正确；B、过程②表示体外受精，依赖于精子、卵细胞的相互识别并融合成为受精卵，而精子、卵细胞的融合依赖于细胞膜的流动性，B正确；C、过程③表示胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确；D、胚胎移植时，需使受体母牛与供体母牛的生理状况保持相同，需要对代孕奶牛进行同期发情处理，在过程③（胚胎移植）之后需进行妊娠检测，以观察胚胎的发育情况，D错误。故选ABC。18.如图为利用转基因技术获取绿色荧光蛋白（G）转基因行道树的过程图。下列叙述正确的是（）A.应将目的基因插入Ti质粒的T—DNA中B.重组Ti质粒制备成功后可直接导入植物细胞中C.将目的基因导入某部位细胞的原因之一是该处细胞增殖能力强D.组织乙是愈伤组织，诱导愈伤组织生芽和生根的过程需更换培养基【答案】ACD〖祥解〗基因工程的基本操作程序包括目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。【详析】A、农杆菌侵染植物时，其质粒上的T-DNA片段可转移并整合到受体细胞染色体DNA上，所以目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，A正确；B、将目的基因导入农杆菌时，需要用Ca2＋处理，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，即重组Ti质粒制备成功后不可直接导入植物细胞中，B错误；C、将目的基因导入某部位细胞的原因之一是该处细胞增殖能力强，这里的某部位细胞可以是愈伤组织细胞，该部位细胞全能性高，而后转基因成功的愈伤组织细胞脱分化后可获得转基因植株，C正确；D、组织乙是愈伤组织，诱导愈伤组织生芽和生根的过程为脱分化过程，需更换培养基，因为培养基中细胞分裂素和生长素的比例是不同的，D正确。故选ACD。三、非选择题：本题共5小题，共59分。19.亚硒酸钠对细菌生长有明显毒害作用。土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒，下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。回答下列问题：（1）操作X是将土壤样品接种到含_________的培养基中，在②中培养瓶内_______（填“能”或“不能”）观察到富硒细菌菌落，原因是_________。（2）进行富硒细菌的梯度稀释时，可将5mL菌液加入________mL无菌水中，如此重复操作_______次，可得到图中所需各浓度的稀释液。（3）③中使用的接种工具是________，对其灭菌的具体操作是________。（4）操作Y是________，以提高富硒细菌的纯度。目的菌落的特点是________。【答案】（1）①.亚硒酸钠②.不能③.菌落只能在固体培养基中形成（2）①.45②.5（3）①.涂布器②.先将涂布器浸在酒精中，再将其放在火焰上灼烧（4）①.挑选单菌落重复分离纯化②.菌落的周围出现红色〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【小问1详析】为了进行土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程，操作X是将土壤样品接种到含亚硒酸钠的培养基中，在②中培养瓶内不能观察到富硒细菌菌落，这是因为菌落只能在固体培养基中形成（或液体培养基中无法形成菌落）。【小问2详析】进行富硒细菌的梯度稀释时，可将5mL菌液加入45mL无菌水中，如此重复操作5次，可得到图中所需各浓度的稀释液。【小问3详析】由图分析可知③中所用接种方法是稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器，对其灭菌的具体操作是先将涂布器浸在酒精中，再将其放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后可进行涂布操作。【小问4详析】操作Y是挑选单菌落重复分离纯化，以提高富硒细菌的纯度。分析题意可知，土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒，所以目的菌落的特点是菌落的周围出现红色。20.聚羟基脂肪酸酯（PHA）是某些细菌以蔗糖为原料合成的一种胞内聚酯，具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性。下图为PHA的生产工艺流程。回答下列问题：（1）培养基A中含有的糖为________，其存在于________（填“动物”或“植物”）细胞中。（2）从功能上分析，A属于________培养基，在该培养基上其他杂菌可能由于盐浓度过高导致________而死亡。（3）在发酵过程中，要随时检测培养液中的________和________浓度，以了解发酵进程。同时还要严格控制__________、pH和溶解氧等发酵条件，原因是_________。（4）发酵结束后，可采取________等措施来获得PHA产品。【答案】（1）①.蔗糖②.植物（2）①.选择②.（细胞）失水（过多）（3）①.微生物数量②.产物③.温度④.发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成（4）提取、分离、纯化〖祥解〗发酵工程中，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。【小问1详析】生产PHA需要首先筛选产PHA的细菌，根据题干可知该细菌以蔗糖为原料合成PHA，因此，在培养基A中需要添加蔗糖，蔗糖存在于植物细胞中。【小问2详析】在该培养基上其他不能利用蔗糖的微生物不能繁殖，因此是选择培养基；在该培养基上其他杂菌可能由于盐浓度过高导致细胞失水过多而死亡。【小问3详析】在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量和产物浓度，以了解发酵进程。同时还要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，因为发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。【小问4详析】PHA是胞内代谢产物，可以根据其性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。21.“定风草”也叫天麻，是著名的中药材。下图为从天麻块茎中提取主要药效成分天麻苷的流程图。回答下列问题：（1）无菌技术是该工艺成功的关键之一。获取天麻的块茎后，需对其进行______处理，使用的试剂包括______（答两点）。与上述无菌技术相比，另一种无菌技术的特点是______。（2）经过程①诱导形成愈伤组织的过程称为______，愈伤组织具有的结构特点是______。（3）过程②可使用______酶处理愈伤组织，将其置于液体培养基中悬浮振荡培养的目的是______。（4）从天麻中提取的天麻苷不是天麻植株生长和生存所必需的，其属于______（填“初生”或“次生”）代谢物。该工艺生产天麻苷的优势是______（答一点）。【答案】（1）①.消毒②.酒精、次氯酸钠和无菌水③.（使用强烈的理化方法）能杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子）（2）①.脱分化②.不定形的薄壁组织团块（3）①.纤维素酶和果胶②.保证细胞培养的物质供应和气体需求（4）①.次生②.不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，保护环境〖祥解〗分析题图，图示是通过植物细胞工程技术获得天麻苷的途径，其中①表示脱分化过程，②表示将愈伤组织分散成单个细胞，③表示细胞增殖过程。【小问1详析】获取天麻的块茎后，需对其进行消毒处理，使用的试剂包括酒精、次氯酸钠和无菌水。与上述无菌技术（消毒）相比，另一种无菌技术（灭菌）的特点是使用强烈的理化方法能杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。【小问2详析】经过程①诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化，愈伤组织具有的结构特点是不定形的薄壁组织团块。【小问3详析】过程②表示将愈伤组织分散成单个细胞，可使用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织，将其置于液体培养基中悬浮振荡培养的目的是保证细胞培养的物质供应和气体需求。【小问4详析】从天麻中提取的天麻苷不是天麻植株生长和生存所必需的，其属于次生代谢物。该工艺生产天麻苷的优势是不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，保护环境等。22.免疫抑制受体TREM2（髓系细胞触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，制备针对TREM2的抗体有望改善肿瘤的治疗效果。如图为制备抗TREM2的单克隆抗体的流程图。回答下列问题：（1）步骤①中对免疫小鼠注射的物质是________，可从免疫小鼠的________中获得B淋巴细胞。（2）SP2/0细胞应具备的特点是________，步骤②依据的原理主要是细胞膜具有________。（3）培养上述动物细胞时，需维持培养液的pH相对稳定，发挥这一作用的气体及其浓度分别为________、________。（4）步骤②中可产生________种杂交瘤细胞，需进行步骤④的原因是________。（5）对筛选得到的杂交瘤细胞可采用步骤⑤进行扩大培养，与步骤⑥相比，其具有的优点是________（答一点）。【答案】（1）①.TREM2②.脾（脏）（2）①.能在体外大量增殖②.流动性（3）①.CO2②.5%（4）①.多②.每种杂交瘤细胞均只能产生一种抗体，且大多是不符合要求的类型（5）节约培养基（节约成本）、操作简单等〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【小问1详析】步骤①中对免疫小鼠注射的物质是TREM2，该物质作为抗原会刺激机体产生特异性免疫反应，进而可从免疫小鼠的脾（脏）中获得B淋巴细胞。【小问2详析】图中SP2/0细胞应具备的特点是能在体外大量增殖，步骤②操作是促进细胞融合，该过程依据的原理主要是细胞膜具有（一定的）流动性，常用的方法是灭活病毒诱导法。【小问3详析】培养上述动物细胞时，需维持培养液的pH相对稳定，发挥这一作用的气体及其浓度分别为CO2，其浓度为5%。【小问4详析】步骤②经过诱导后中产生多种杂交瘤细胞，因而需要进行筛选，图中过程③后获得是是杂交瘤细胞，而后需进行步骤④进而获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，即进行步骤④的原因是每种杂交瘤细胞均只能产生一种抗体，且大多是不符合要求的类型，该步骤的操作是克隆化培养和抗原-抗体杂交。【小问5详析】对筛选得到的杂交瘤细胞可采用步骤⑤，即小鼠的腹水中进行扩大培养，与步骤⑥体外培养相比，其具有的优点是节约培养基、操作简单，因为体内培养过程中小鼠能为杂交瘤细胞的培养提供适宜的营养和环境条件。23.研究人员利用图中质粒构建基因表达载体并将其导入大肠杆菌，获得生产胰岛素的工程菌，以期解决胰岛素药源不足的问题。回答下列问题：注：图中几种限制酶的识别序列和切割位点为：：BamHⅠ：5'—G↓GATCC—3'，EcoRⅠ：5'—G↓AATTC—3'，SmaⅠ：5'—CCC↓GGG—3'，SalⅠ：5'—G↓TCGAC—3'。LacZ基因能编码产生β-半乳糖苷酶，可催化无色物质X-gal产生蓝色物质使菌落呈蓝色，否则为白色，这种以颜色不同为依据直接筛选含基因表达载体菌体的方法称为“蓝白斑”法。（1）先提取胰岛B细胞中的总RNA，通过一定方法分离纯化出胰岛素基因的mRNA，经_____________过程得到cDNA，然后设计引物并利用PCR扩增胰岛素基因。选择胰岛B细胞提取RNA的原因是_________。（2）已知胰岛素基因的α链为编码链。据图1分析，利用PCR扩增胰岛素基因时，需对引物①~④进行特殊处理。PCR所需的引物组合是_________，在其中一种引物的________（填“3'端”或“5'端”）需添加BamHⅠ识别序列和强启动子。胰岛素基因片段扩增4次，需消耗引物共________个。（3）为确保胰岛素基因正确插入图2的载体中，需选择的限制酶组合是________。已知胰岛素基因α链的碱基序列为5'—TTTAAAGGG…—3'，强启动子的碱基序列为5'—GCT-GCATG—3'，请写出胰岛素基因上游引物的18个碱基序列：5'—__________—3'。（4）“蓝白斑”法是基因工程中常用的筛选方法。请简述将胰岛素基因导入大肠杆菌并筛选工程菌的过程：_________。【答案】（1）①.逆转录②.胰岛素基因在胰岛B细胞中才能表达（2）①.②③②.5'端③.30（3）①.BamHⅠ和SalⅠ②.GGATCCGCTGCATGTTTA（4）（经Ca2+处理的）大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，再将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。【小问1详析】先提取胰岛B细胞中的总RNA，通过一定方法分离纯化出胰岛素基因的mRNA，经逆转录过程得到cDNA，然后设计引物并利用PCR扩增胰岛素基因。选择胰岛B细胞提取RNA是因为胰岛素基因在胰岛B细胞中才能表达。【小问2详析】DNA复制的方向是从模板链的3'开始，因此PCR所需的引物组合是②③；据图1所示，在构建重组DNA分子时需要用到BamHI和SalI识别序列，已知胰岛素基因的α链为转录模板，因此在引物②的5′端添加BamHI识别序列和强启动子，在引物③的5′端添加SalI识别序列。DNA扩增时，每条单链需要一个引物，第一次复制需要2个引物，第二次需要4个引物，第三次需要8个引物，第四次需要16个引物，因此该片段扩增4次循环，需要消耗引物30个。【小问3详析】为确保胰岛素基因正确插入图2的载体中，需选择的限制酶组合是BamHⅠ和SalⅠ。已知胰岛素基因α链的碱基序列为5'—TTTAAAGGG…—3'，强启动子的碱基序列为5'—GCTGCATG—3'，则胰岛素基因上游引物的18个碱基序列为5'—GGATCCGCTGCATGTTTA—3'。【小问4详析】将胰岛素基因导入大肠杆菌并利用“蓝白斑”法筛选工程菌的过程为经Ca2+处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，再将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌。河北省衡水市2024-2025学年高二下学期期中考试全卷满分100分，考试时间75分钟。注意事项：1.答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试卷和答题卡上，并将条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2.请按题号顺序在答题卡上各题目的答题区域内作答，写在试卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3.选择题用2B铅笔在答题卡上把所选答案的标号涂黑；非选择题用黑色签字笔在答题卡上作答；字体工整，笔迹清楚。4.考试结束后，请将试卷和答题卡一并上交。一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.下列有关传统酿酒的叙述，正确的是（）A.酿酒利用的微生物是不具有细胞核的酵母菌B.酿酒初期应密封发酵装置，以利于酵母菌的发酵C.酿酒时的环境温度必须严格控制在30℃以上D.可用酸性重铬酸钾溶液初步检测发酵产物【答案】D〖祥解〗果酒的制作，选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。果酒制作的原理是：在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。酒精发酵时一般将温度控制在18～30℃。【详析】A、酿酒利用的微生物是酵母菌，其具有成形的细胞核，A错误；B、酿酒初期应保持通气状态，以利于酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，B错误；C、酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，因此酿酒时一般将温度控制在18～30℃进行酒精发酵，C错误；D、橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应变成灰绿色，可用酸性重铬酸钾溶液初步检测发酵产物，D正确。故选D。2.腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤。下列叙述错误的是（）A.参与豆腐发酵的微生物有酵母、毛霉等B.酒精可抑制腐乳中微生物的生长和繁殖C.香辛料具有灭菌和调节腐乳风味的作用D.酒精和香辛料可使腐乳具有独特的香味【答案】C〖祥解〗腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为小分子的肽和氨基酸。【详析】A、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，A正确；B、酒可抑制微生物的生长繁殖，以避免豆腐腐败变质，B正确；C、香辛料具有调节腐乳风味的作用，但不能灭菌，C错误；D、酒精和香辛料可使腐乳具有独特的香味，D正确。故选C。3.馒头是一种以小麦面粉为主要原料，利用微生物发酵的面团制成的中国传统面食之一。下列关于馒头制作的叙述，正确的是（）A.馒头中有许多小孔是酵母菌发酵产生酒精所致B.与面粉相比，馒头中有机物的种类和含量均减少C.冬季时制作馒头的面团发酵所需时间长于夏季D.面团内部的微生物繁殖速率比面团外的更快【答案】C〖祥解〗酵母菌属于兼性厌氧菌，既能进行需氧呼吸，也能进行无氧呼吸。需氧呼吸的产物是CO2和水，无氧呼吸的产物是酒精和CO2。【详析】A、馒头中有许多小孔是酵母菌发酵产生CO2的结果，A错误；B、与面粉相比，馒头中有机物的种类增加，含量减少，B错误；C、夏季温度较高，酵母菌更容易发酵，故冬季时制作馒头的面团发酵所需时间长于夏季，C正确；D、面团外部氧气较充足，故面团外部的微生物繁殖速率比面团内的更快，D错误。故选C。4.某小组探究了初始乙醇含量对青梅果醋发酵的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（）A.醋酸菌可利用乙醇进行果醋发酵B.初始乙醇含量过低利于醋酸发酵的进行C.初始乙醇含量过高会抑制醋酸菌的代谢D.随初始乙醇含量增加，总酸含量先上升后下降【答案】B〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、醋酸菌在氧气、糖源充足时直接将糖分解为乙酸，在糖源不足时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，A正确；B、结合实验结果可知，初始乙醇含量过低不利于醋酸发酵的进行，B错误；C、根据实验结果可知，初始乙醇浓度超过7%，随着初始乙醇浓度的增加，总酸含量表现为下降，因而可推测，若培养基中乙醇含量过高可能会导致醋酸菌发生渗透失水而死亡，从而抑制醋酸菌的生长和代谢，C正确；D、在实验浓度范围内，随初始乙醇含量增加，总酸含量先上升后下降，D正确。故选B。5.细菌计数板和血细胞计数板均可用于微生物的计数。下列叙述正确的是（）A.两种计数板的计数原理相同B.细菌计数板可用于酵母菌的计数C.血细胞计数板只统计活菌的数量D.细菌计数板比血细胞计数板略厚【答案】A〖祥解〗统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。【详析】A、细菌计数板或血细胞计数板的计数原理相同，A正确；B、细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数，B错误；C、血细胞计数板的计数结果包括了活菌和死菌，C错误；D、在结构上，血细胞计数板比细菌计数板略厚，D错误。故选A。6.如图表示倒平板的操作流程。下列叙述错误的是（）A.正确的操作顺序是3→1→2→4B.操作1、2、3在酒精灯火焰附近进行是为了避免杂菌污染C.操作2需要等培养基冷却到50℃左右再进行D.操作4将平板倒置是为减少培养基中营养成分丢失【答案】D〖祥解〗图中所示操作分别为：1→灼烧锥形瓶瓶口；2→分装（将培养基倒入培养皿）；3→在火焰旁的台面上，拔出装有培养基的锥形瓶的棉塞；4→倒置存放平板。【详析】A、倒平板的操作程序为：将灭菌后的培养皿放在火焰旁的台面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；在酒精灯火焰附近，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待培养基冷却凝固（需5～10分钟）后，将培养皿倒过来放置，以防止冷凝水滴落在培养基上引发污染。可见，正确的操作顺序是3→1→2→4，A正确；B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的污染，因此操作1、2、3在酒精灯火焰附近进行是为了避免杂菌污染，B正确；C、待培养基冷却至50℃左右（此温度下不烫手）时，在酒精灯火焰附近倒平板，因此操作2需要等培养基冷却到50℃左右再进行，C正确；D、操作4将平板倒置是为避免培养皿皿盖上的水珠滴入培养基和防止培养基表面的水分蒸发过快，D错误。故选D。7.下列有关植物细胞工程及其应用的叙述，错误的是（）A.胚状体由愈伤组织经脱分化形成B.人参皂苷属于植物细胞次生代谢物C.利用单倍体育种可快速获得纯合新品种D.快速繁殖技术能保持植物优良品种的遗传特性【答案】A〖祥解〗植物组织培养应用：1、植物离体快速繁殖。2、无病毒苗木培育，无性繁殖植物，病毒在体内积累，对生产造成极大损失。利用组织培养方法可脱除病毒，获得脱病毒小苗。3、通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限。4、培养细胞突变体的应用。5、利用组织培养的材料作为植物生物反应器。【详析】A、胚状体由愈伤组织经再分化形成，A错误；B、次生代谢物是指植物代谢产生的一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物，因此，人参皂苷属于植物细胞的次生代谢物，B正确；C、单倍体育种的技术路线包括花药离体培养和秋水仙素处理，若利用单倍体育种，可以快速获得纯合新品种，C正确；D、用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，也叫作微型繁殖技术，不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性，D正确。故选A。8.利用如图所示的植物体细胞杂交技术可获得杂种植株。下列叙述正确的是（）A.过程①应在低渗溶液中进行以维持原生质体的正常形态B.常使用灭活病毒诱导两种原生质体融合C.与杂种细胞形成有关的细胞器包括高尔基体D.杂种植株一定同时具有植物A和植物B的性状【答案】C〖祥解〗植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株，在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导，不同种植物的细胞所含染色体的种类和数目是不同的，故我们可以根据细胞中染色体的种类和形态的差异来鉴定杂种细胞.。【详析】A、过程①制备原生质体时不可以用低渗溶液，否则会导致制备的原生质体吸水涨破，A错误；B、诱导植物原生质体融合的方法主要是物理法或化学法，灭活病毒常用于诱导动物细胞融合，B错误；C、杂种细胞形成的标志是：杂种细胞再生细胞壁，细胞壁的形成与高尔基体有关，C正确；D、由于基因的选择性表达及基因间的相互作用，杂种植株不一定同时具有植物A和植物B的性状，D错误。故选C。9.为测定某药物对体外培养细胞的毒性，某小组在动物肝细胞培养液中加入不同浓度的该药物溶液。下列叙述错误的是（）A.本实验的自变量为不同浓度的该药物溶液B.制备肝细胞悬液时不能用胃蛋白酶处理肝组织C.培养肝细胞时一般需在培养基中加入适量动物血清D.培养液中需添加抗生素以保证培养细胞所需的无毒环境【答案】D〖祥解〗动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。【详析】A、本实验是为了测定药物对细胞的毒性，加入了不同浓度的药物溶液，所以不同浓度的该药物溶液就是本实验的自变量，A正确；B、胃蛋白酶的最适pH约为1.5-2.2，在动物细胞培养液的pH条件下，胃蛋白酶会失活，不能用来处理肝组织制备肝细胞悬液，一般用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，B正确；C、动物细胞培养时，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，所以一般需在培养基中加入适量动物血清，以补充细胞生长所需的未知营养物质，C正确；D、培养液中添加抗生素的目的是防止杂菌污染，保证培养细胞所需的无菌环境，而不是无毒环境，D错误。故选D。10.如图为克隆猴的部分培养过程。下列叙述正确的是（）A.克隆猴的培育仅涉及动物细胞核移植与胚胎移植技术B.刚采集的A猴卵母细胞可直接使用显微操作法去除细胞核C.用蛋白酶合成促进剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程D.重构胚是经人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力【答案】D〖祥解〗动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎经过胚胎移植最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。该过程中采用显微操作去核法去除卵母细胞中细胞核。【详析】A、克隆猴的培育涉及动物细胞培养、动物细胞核移植与胚胎移植等技术，A错误；B、采集的A猴卵母细胞需培养至MⅡ期时，才能使用显微操作法去除细胞核，B错误；C、可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误；D、重构胚是经人工重新构建的胚胎，具有发育的全能性，可发育成完整个体的能力，D正确。故选D。11.自然状态下的大熊猫繁殖能力较低，我国科学家利用胚胎工程的技术手段大大提高了熊猫的繁殖率。下列叙述正确的是（）A.卵母细胞去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物B.早期胚胎移入同期发情处理的大熊猫子宫内会引发免疫排斥反应C.在大熊猫早期胚胎发育的过程中，原肠胚期开始出现细胞的分化D.经胚胎分割技术得到的大熊猫的基因型相同，表型也完全相同【答案】A〖祥解〗胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。【详析】A、将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体和染色体复合物，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和染色体结构，A正确；B、早期胚胎移入同期发情处理的大熊猫子宫内不会引发免疫排斥反应，B错误；C、在早期胚胎发育的囊胚期就已经开始出现细胞分化，C错误；D、经胚胎分割技术得到的个体的基因型相同，但表型受环境等因素的影响，不一定完全相同，D错误。故选A。12.限制性内切核酸酶是基因工程常用工具酶。下列有关该酶的叙述，正确的是（）A.主要从原核生物中分离和纯化B.只能识别由6个核苷酸组成的序列C.可切割双链DNA分子中碱基之间的氢键D.在识别序列的中轴线处切割可形成黏性末端【答案】A〖祥解〗限制性内切核酸酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。【详析】A、限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离和纯化，A正确；B、限制性内切核酸酶大多能识别由6个核苷酸组成的序列，少数能识别4个、8个或其他数量的核苷酸序列，B错误；C、限制性内切核酸酶切割双链DNA分子中的磷酸二酯键，C错误；D、在识别序列的中轴线处切割可形成平末端，D错误。故选A。13.基因工程中常用的标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。现将某细菌分别接种于下列培养基中：对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成。则该细菌中标记基因的分布情况是（）A.含抗四环素基因，不含抗氨苄青霉素基因B.含抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因C.既含抗四环素基因，也含抗氨苄青霉素基因D.不含抗四环素基因，也不含抗氨苄青霉素基因【答案】B〖祥解〗选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基，利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。【详析】根据题意可知，对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成，而含有四环素的实验组1和3没有形成菌落，说明该细菌的标记基因含有抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因，B正确，ACD错误。故选B。二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。14.如图为泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量与腌制时间、盐浓度的关系曲线。下列叙述合理的是（）A.腌制过程中，坛中溶液量增多的主要原因是细胞呼吸产生了水B.三种盐浓度下，盐浓度越高，亚硝酸盐含量的峰值出现得越晚C.泡菜腌制16天时可适量食用，因为此时亚硝酸盐的含量较低D.盐浓度越高，亚硝酸盐含量越低，故腌制泡菜时盐浓度越高越好【答案】BC〖祥解〗据图分析，图示自变量是腌制时间和食盐浓度，因变量是亚硝酸盐含量，据此分析作答。【详析】A、腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在盐水中失水，A错误；B、由图可知，食盐浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早、越高，B正确；C、由图可知，不同盐浓度下腌制16后，泡菜中亚硝酸盐含量较低，此时比较适合食用，C正确；D、据图可知，并非盐浓度越高，相同时间后亚硝酸盐含量越低，且腌制泡菜时盐浓度过高会抑制乳酸菌的发酵，导致产生的乳酸过少，所以腌制泡菜时盐浓度并不是越高越好，D错误。故选BC。15.啤酒是人类最古老的酒精饮料之一，工业化生产啤酒的流程如图所示。下列叙述错误的是（）A.酿制啤酒时，酵母菌发酵利用的直接底物是淀粉B.步骤④利用的酵母菌菌种可通过诱变育种获得C.步骤⑤中可采用巴氏消毒法以保证啤酒的品质D.发酵的温度和时间会影响啤酒的口感和风味【答案】A〖祥解〗啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。【详析】A、酿制啤酒时，淀粉经淀粉酶的作用分解为葡萄糖，酵母菌利用葡萄糖进行酒精发酵，A错误；B、发酵中所用的性状优良的菌种可从自然界筛选，也可通过其他途径如诱变育种、基因工程等获得，B正确；C、巴氏消毒法，温度不是很高，该操作的目的既能杀死啤酒中的微生物，又能保证啤酒中的营养成分不被破坏（流失），即步骤⑤中可采用巴氏消毒法以保证啤酒的品质，C正确；D、发酵时的温度和时间会影响酒精发酵产生的酒精的含量，因此会影响啤酒的口感和风味，D正确。故选A。16.如图为某动物早期胚胎的示意图，①~④表示相关结构。下列叙述正确的是（）A.①为滋养层，将来会发育为胎膜和胎盘B.②为内细胞团，常作为性别鉴定的取样材料C.③为透明带，其破裂后胚胎从中伸展出来的过程叫作孵化D.形成该囊胚前的过程中，胚胎的总体积并未增加【答案】ACD〖祥解〗题图分析：图示为胚胎发育过程某一时期示意图，该时期为囊胚期，其中①为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；②为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；③为透明带，④为囊胚腔。【详析】A、①为滋养层，将来会发育为胎膜和胎盘，实现对胚胎的保护和与母体的联，A正确；B、②为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，常作为性别鉴定取样材料的是①滋养层，B错误；C、③为透明带，随着囊胚体积的变大，胚胎从其中伸展出来的过程叫做孵化，C正确；D、该时期为囊胚期，形成该囊胚前的过程中，胚胎的总体积并未增加，因而胚胎可以在透明带中存在，但此时胚胎中的细胞数目增多，有机营养减少，D正确。故选ACD。17.下列关于“试管牛”培育流程的叙述，正确的是（）A.过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子B.过程②体外受精依赖于精子、卵细胞的识别和细胞膜的流动性C.过程③的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移D.代孕母牛需要进行同期发情处理，在过程③后无需进行妊娠检测【答案】ABC〖祥解〗图示为“试管牛”的培养流程，①表示卵母细胞的采集和培养，②表示体外受精，③表示胚胎移植。【详析】A、过程①是卵母细胞采集和培养，可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子，A正确；B、过程②表示体外受精，依赖于精子、卵细胞的相互识别并融合成为受精卵，而精子、卵细胞的融合依赖于细胞膜的流动性，B正确；C、过程③表示胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确；D、胚胎移植时，需使受体母牛与供体母牛的生理状况保持相同，需要对代孕奶牛进行同期发情处理，在过程③（胚胎移植）之后需进行妊娠检测，以观察胚胎的发育情况，D错误。故选ABC。18.如图为利用转基因技术获取绿色荧光蛋白（G）转基因行道树的过程图。下列叙述正确的是（）A.应将目的基因插入Ti质粒的T—DNA中B.重组Ti质粒制备成功后可直接导入植物细胞中C.将目的基因导入某部位细胞的原因之一是该处细胞增殖能力强D.组织乙是愈伤组织，诱导愈伤组织生芽和生根的过程需更换培养基【答案】ACD〖祥解〗基因工程的基本操作程序包括目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。【详析】A、农杆菌侵染植物时，其质粒上的T-DNA片段可转移并整合到受体细胞染色体DNA上，所以目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，A正确；B、将目的基因导入农杆菌时，需要用Ca2＋处理，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，即重组Ti质粒制备成功后不可直接导入植物细胞中，B错误；C、将目的基因导入某部位细胞的原因之一是该处细胞增殖能力强，这里的某部位细胞可以是愈伤组织细胞，该部位细胞全能性高，而后转基因成功的愈伤组织细胞脱分化后可获得转基因植株，C正确；D、组织乙是愈伤组织，诱导愈伤组织生芽和生根的过程为脱分化过程，需更换培养基，因为培养基中细胞分裂素和生长素的比例是不同的，D正确。故选ACD。三、非选择题：本题共5小题，共59分。19.亚硒酸钠对细菌生长有明显毒害作用。土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒，下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。回答下列问题：（1）操作X是将土壤样品接种到含_________的培养基中，在②中培养瓶内_______（填“能”或“不能”）观察到富硒细菌菌落，原因是_________。（2）进行富硒细菌的梯度稀释时，可将5mL菌液加入________mL无菌水中，如此重复操作_______次，可得到图中所需各浓度的稀释液。（3）③中使用的接种工具是________，对其灭菌的具体操作是________。（4）操作Y是________，以提高富硒细菌的纯度。目的菌落的特点是________。【答案】（1）①.亚硒酸钠②.不能③.菌落只能在固体培养基中形成（2）①.45②.5（3）①.涂布器②.先将涂布器浸在酒精中，再将其放在火焰上灼烧（4）①.挑选单菌落重复分离纯化②.菌落的周围出现红色〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【小问1详析】为了进行土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程，操作X是将土壤样品接种到含亚硒酸钠的培养基中，在②中培养瓶内不能观察到富硒细菌菌落，这是因为菌落只能在固体培养基中形成（或液体培养基中无法形成菌落）。【小问2详析】进行富硒细菌的梯度稀释时，可将5mL菌液加入45mL无菌水中，如此重复操作5次，可得到图中所需各浓度的稀释液。【小问3详析】由图分析可知③中所用接种方法是稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器，对其灭菌的具体操作是先将涂布器浸在酒精中，再将其放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后可进行涂布操作。【小问4详析】操作Y是挑选单菌落重复分离纯化，以提高富硒细菌的纯度。分析题意可知，土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒，所以目的菌落的特点是菌落的周围出现红色。20.聚羟基脂肪酸酯（PHA）是某些细菌以蔗糖为原料合成的一种胞内聚酯，具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性。下图为PHA的生产工艺流程。回答下列问题：（1）培养基A中含有的糖为________，其存在于________（填“动物”或“植物”）细胞中。（2）从功能上分析，A属于________培养基，在该培养基上其他杂菌可能由于盐浓度过高导致________而死亡。（3）在发酵过程中，要随时检测培养液中的________和________浓度，以了解发酵进程。同时还要严格控制__________、pH和溶解氧等发酵条件，原因是_________。（4）发酵结束后，可采取________等措施来获得PHA产品。【答案】（1）①.蔗糖②.植物（2）①.选择②.（细胞）失水（过多）（3）①.微生物数量②.产物③.温度④.发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成（4）提取、分离、纯化〖祥解〗发酵工程中，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。【小问1详析】生产PHA需要首先筛选产PHA的细菌，根据题干可知该细菌以蔗糖为原料合成PHA，因此，在培养基A中需要添加蔗糖，蔗糖存在于植物细胞中。【小问2详析】在该培养基上其他不能利用蔗糖的微生物不能繁殖，因此是选择培养基；在该培养基上其他杂菌可能由于盐浓度过高导致细胞失水过多而死亡。【小问3详析】在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量和产物浓度，以了解发酵进程。同时还要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，因为发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。【小问4详析】PHA是胞内代谢产物，可以根据其性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。21.“定风草”也叫天麻，是著名的中药材。下图为从天麻块茎中提取主要药效成分天麻苷的流程图。回答下列问题：（1）无菌技术是该工艺成功的关键之一。获取天麻的块茎后，需对其进行______处理，使用的试剂包括______（答两点）。与上述无菌技术相比，另一种无菌技术的特点是______。（2）经过程①诱导形成愈伤组织的过程称为______，愈伤组织具有的结构特点是______。（3）过程②可使用______酶处理愈伤组织，将其置于液体培养基中悬浮振荡培养的目的是______。（4）从天麻中提取的天麻苷不是天麻植株生长和生存所必需的，其属于______（填“初生”或“次生”）代谢物。该工艺生产天麻苷的优势是______（答一点）。【答案】（1）①.消毒②.酒精、次氯酸钠和无菌水③.（使用强烈的理化方法）能杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子）（2）①.脱分化②.不定形的薄壁组织团块（3）①.纤维素酶和果胶②.保证细胞培养的物质供应和气体需求（4）①.次生②.不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，保护环境〖祥解〗分析题图，图示是通过植物细胞工程技术获得天麻苷的途径，其中①表示脱分化过程，②表示将愈伤组织分散成单个细胞，③表示细胞增殖过程。【小问1详析】获取天麻的块茎后，需对其进行消毒处理，使用的试剂包括酒精、次氯酸钠和无菌水。与上述无菌技术（消毒）相比，另一种无菌技术（灭菌）的特点是使用强烈的理化方法能杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。【小问2详析】经过程①诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化，愈伤组织具有的结构特点是不定形的薄壁组织团块。【小问3详析】过程②表示将愈伤组织分散成单个细胞，可使用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织，将其置于液体培养基中悬浮振荡培养的目的是保证细胞培养的物质供应和气体需求。【小问4详析】从天麻中提取的天麻苷不是天麻植株生长和生存所必需的，其属于次生代谢物。该工艺生产天麻苷的优势是不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，保护环境等。22.免