天然药物成分分离精制和鉴定的方法与技术53课件

天然药物成分

分离精制和鉴定的方法与技术滨州职业学院本节内容七、色谱法色谱法（chromatography），又称为层析法，是一种分离、纯化和鉴定化合物的物理化学分离分析方法。

色谱法目前被广泛应用与物质的分离纯化和鉴定，具有试样用量少、分离效率高的特点。七、色谱法

色谱法基本原理:是利用混合物中各成分在固定相和移动相中吸附、分配及其亲和力的差异而达到分离。七、色谱法固定相：在色谱分离中固定不动、对化学成分产生保留的一相。移动相：指与固定相处于平衡状态、带动化学成分向前移动的另一相。色谱法的分类依据分类按固定相或支持剂种类不同氧化铝色谱、硅胶色谱、聚酰胺色谱、凝胶色谱等按移动相种类不同气相色谱、液相色谱按色谱原理不同吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱等按操作方式不同柱色谱、纸色谱、薄层色谱等七、色谱法（一）柱色谱法是一种将分离材料装入柱状容器中，以适当的洗脱剂进行洗脱，而使不同成分得到分离的色谱分离方法，也是色谱法最早出现的形式，可用于分离天然药物中各种化学成分。七、色谱法（一）柱色谱法根据分离机制的不同，分为：七、色谱法柱色谱法吸附柱色谱法分配柱色谱法离子交换色谱法凝胶滤过柱色谱法大孔吸附柱色谱法1．吸附柱色谱法

是一种在柱状容器中，利用作为固定相的吸附剂对混合物中各种成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互分离的方法。七、色谱法1．吸附柱色谱法

（1）基本原理：当混合物成分遇到吸附剂固定相的表面时，由于吸附剂表面与成分分子的产生吸附作用；当移动相连续通过吸附剂表面时，由于移动相与混合物成分争夺吸附剂活性表面，产生了成分分子溶解于移动相的解吸附现象；随着移动相的移动，混合物在不断进行着吸附-解吸附的可逆过程，利用各成分在两相中迁移速度的不同而达到分离。七、色谱法1．吸附柱色谱法

七、色谱法1．吸附柱色谱法

（2）常用的吸附剂有以下几种：1）硅胶2）氧化铝3）聚酰胺4）活性炭七、色谱法1）硅胶硅胶是一种微呈酸性的多孔性物质。常用SiO2·xH2O表示。其骨架表面具有很多硅醇基，能与许多化合物形成氢键而产生吸附作用。游离硅醇基数目的多少决定了硅胶吸附作用的强弱。硅醇基也容易通过氢键与水结合，随着含水量的增加，硅胶表面的游离硅醇基数目减少，硅胶吸附其他化合物的能力便随之减弱。七、色谱法活化2）氧化铝氧化铝是一种吸附力很强的亲水性吸附剂，有酸性、碱性、中性三种规格。其吸附活性也与含水量有关，随着含水量的增加，吸附能力减弱。七、色谱法硅胶、氧化铝活度与含水量关系活度等级含水量%硅胶氧化铝Ⅰ00Ⅱ53Ⅲ156Ⅳ2510Ⅴ3815七、色谱法3）聚酰胺聚酰胺是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物。商品名又称为绵纶、尼龙。色谱分离常用聚己内酰胺（绵纶6）和聚己二酰己二胺（绵纶66），其中聚己内酰胺可用结构式表示为：七、色谱法3）聚酰胺移动相聚酰胺吸附色谱的原理固定相七、色谱法3）聚酰胺聚酰胺对化合物吸附力的强弱取决于形成氢键的能力，形成氢键的能力受以下因素影响：①溶剂的种类：聚酰胺形成氢键的能力在水中最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱。若应用各种溶剂在聚酰胺柱色谱中作为洗脱剂，则洗脱能力的顺序如下：水＜甲醇或乙醇＜丙酮＜稀氢氧化钠液或稀氨溶液＜甲酰胺或二甲基甲酰胺＜尿素水溶液。②化合物分子结构：在含水溶剂中，化合物分子结构对氢键缔合的影响有以下几点规律：七、色谱法3）聚酰胺A.化合物分子中能形成氢键的基团数目越多，被聚酰胺吸附越强。如：七、色谱法3）聚酰胺B.形成氢键的基团所处位置不同，被吸附的强度也不同。如：C.分子中芳香核、共轭双键多者被吸附强度大，少者则被吸附强度小。如：七、色谱法3）聚酰胺

D.能形成分子内氢键者被吸附强度减小。如：七、色谱法4）活性炭活性炭是一种非极性吸附剂，具有较强的吸附能力，其吸附能力受溶剂的影响，在水溶液中的吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。在一定条件下，对不同物质的吸附力也有差别。一般对极性基团多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物；对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。七、色谱法1．吸附柱色谱法（3）移动相：用吸附柱色谱法分离混合物，选择何种溶剂为移动相，对分离效果有极大的影响。对于极性吸附剂，若选择的移动相极性越大，则其展开或洗脱能力就越强；对于非极性吸附剂，则刚好相反，选择的移动相极性越小，其展开或洗脱能力就越强。具体选择移动相时，需结合被分离物质的极性来综合考虑。七、色谱法1．吸附柱色谱法

（4）被分离物质：被分离成分、吸附剂、移动相三者为组成吸附柱色谱必不可少的要素，被分离成分的结构和极性大小决定了其与吸附剂、移动相之间的相互作用。对于极性吸附剂，被分离物质的极性越大，被吸附越强，移动相进行洗脱就越困难。七、色谱法1．吸附柱色谱法

（4）被分离物质：常见一些化合物官能团的极性大小顺序如下：七、色谱法1．吸附柱色谱法

（5）操作技术：