（正式版）DB15∕T 2816-2022 《玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料技术规程》

152022-09-09发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC1李学朋、刘敏、郜晋楠、胡建华、陈晓妮、王典I玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料技术规程GB/T6432饲料中粗蛋白的测定凯GB/T6434饲料中粗纤维的含量测定GB/T6682分析实验室用水规格和GB10648《饲料标签》国家标准第1号修玉米经过浸泡、破碎后分离出来的玉米表皮，经烘干、挤水、烘干等工序加工而124要求枯草芽孢杆菌培养基：蛋白胨10g,酵母提取粉5g,氯化钠10g,蒸馏水1L,pH为7.0～7.4,酵母菌培养基：蛋白胨20g,酵母提取粉10g,葡萄糖20g,蒸馏水1L,pH为7.0～7.4,115℃4.5菌液细胞数枯草芽孢杆菌细胞数均培养至1×10⁹cfu/mL～2×10⁹cfu/mL时使用；酵母菌细胞数培养至1×10⁹~饲料级硫酸铵5kg、糖蜜(10°Brix)5L、饲料级磷酸二氢钾0.5kg、饲料级氯化钠0.25kg。3图1生产工艺流程5.2菌种培养菌种选用中国微生物普通菌种保藏中心的枯草芽孢杆菌BacillussubtilisCGMCC1.7417、产肮假丝酵母CandidautilisCGMCC2.2878以及中国工业微生物菌种保藏中心的枯草芽孢杆菌BacillussubtilisCICC10090和酿5.2.2发酵菌剂制备5.2.2.1以1%接种量将枯草芽孢杆菌B.subtilisCGMCC1.7417和枯草芽孢杆菌B.subtilisCICC10090种子液接种至LB培养基中，37℃培养至种子液细胞数达到1×10⁹~2×10⁹CFU/ml。5.2.2.2以1%接种量将产肮假丝酵母C.utilisCGMCC2.2878和酿酒酵母S.cerevisiaeCICC32236种子液接种至YPD培养基中30℃培养至种子液细胞数达到1×10⁹~2×10⁹个/ml。5.2.2.3将菌种(枯草芽孢杆菌B.subtilisCGMCC1.7417:枯草芽孢杆菌B.subtilisCICC10090:合均匀作为发酵菌剂备用。发酵底物与发酵菌剂充分混合均匀后置于发酵设施，菌剂接种总量为15%,接种量为菌剂体积与发酵底物质量的比。5.4.1发酵条件发酵应在好氧条件下进行，料层厚度保持在发酵设施高度的2/3处，发酵室温度在25℃~30℃,相对湿度不低于95%,发酵品温控制在30℃~35℃,发酵72h±2h。5.4.2发酵过程控制5.4.2.1发酵过程中每12h翻拌一次。5.4.2.2冬季发酵应采取增温、保温措施，夏季发酵应采取降温措施，避免阳光直射。5.4.2.3在发酵过程中，采用间歇通风调节品温在30℃~35℃;当品温高于35℃且连续通风仍不能降至35℃以下时，则应翻拌一次。5.5取样及检测46.4.1符合感官要求及卫生指标后,再6.4.2根据品质定级时，当样品的各项品质指标同时符合某一等级时，则判定所代表的该批次产品为产品质量检验合格后，装入带有单向阀的呼吸袋进行密封5A.2试剂或材料A.2.1水GB/T6682，三A.2.6混合催化剂。称取0.4g五水硫酸铜、6.0g硫酸钾或硫酸钠，研磨均匀；或购买商品化的凯式A.2.7硼酸吸收液Ⅰ。称取20g硼酸，用水溶解并稀释1000mL。A.2.8硼酸吸收液Ⅱ。1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mA.2.9氢氧化钠溶液Ⅰ。称取40.0g氢氧化钠，用水溶解，冷却至室温稀释至1000A.2.10氢氧化钠溶液Ⅱ。称取25.0g氢氧化钠，用水溶解，冷却至室温稀释至1000A.2.11硫酸铜溶液。称取100.0g五水硫酸铜，用水溶解，冷却至室温稀释至1000mL。A.3仪器设备A.3.1分析天平：感量0.0001g。A.3.6定氮仪：以凯式原理制造的各类型半自动、全自动定氮仪。A.4样品碎，全部通过0.42mm试验筛，混匀，装入密闭容器6准确称取玉米皮0.5g～1g，加入75mL蒸馏水，记录刻度线，加热75mL处，加入2.5%氢氧化钠溶液20mL，10%硫酸铜溶液20mL，微沸10待试样静置至室温时，使用65℃~75℃热水冲洗，冲洗至滤液使用5%氯化钡溶液5滴和数滴盐酸A.5.3烘干消煮