hpv 主要竞争产品分析

mRNA检测分型不分型PCR-荧光探针法上海透景科华罗氏科蒂亚PCR-反向点杂交法原理基因芯片技术原理亞能生物PCR-反向点杂交法技术特点高灵敏度-PCR高特异性-核酸分子杂交高通量-膜上固定多种探针能实现HPV分型检测亚能和凯普HPV基因分型产品对比亚能PCR+反向点杂交PCR+膜杂交法(实质为PCR+反向点杂交)宫颈脱落细胞，疣体组织，病理石蜡切片，液基细胞学标本宫颈脱落细胞●23型●无HPV44,低危型●21型●无HPV73,83,MM4(82)而73、82型为IARC认定的15种常见高危型之一●提取试剂只含裂解液一种成分●提取试剂分溶液I,Ⅱ,Ⅲ,提取步骤复杂PCR反应液已分装PCR反应液未分装，需人工配制反应液全自动核酸分子杂交手工杂交结果判读●显色斑点大，边界清晰●判读结果方便快捷●膜条小，显色斑点小●判读结果时需与对照卡进行比对●有真正意义的内部质控●无真正意义的内部质控膜条尺寸：12mm×78mm膜条尺寸：22mm×22mm亚能产品与凯普HPV分型产品的比较优势有配套的全自动核酸分子杂交仪检测HPV型别多：23型有真正意义的内部质控可检测更多类型的标本，有文献支持灵敏度、特异性、重复性好PCR扩增体系预分装显色斑点大而清晰，易于进行结果判读HPV检测mRNA检测分型不分型PCR-荧光探针法PCR-荧光探针法科华罗氏科蒂亚流式荧光杂交法代表厂家：上海透景高危型人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒7种低危型(6,11,40,42,44,53,54)(无注册证)进口专用仪器(美国Luminex多功能流式点阵分析仪)流式荧光杂交法·流式荧光杂交法是将PCR产物和微球杂交液进行混合，并经过杂交，荧光素标记，Luminex流式分析仪阅读得到相应微球杂交液中包含多种荧光编码微球，每种编码微球的表面都共价交联有与探针特异性识别并结合相应的靶序列，产物-荧光素的复合物，经Luminex流式分析仪阅读，可以获得每种复合物的微球编码及对应的荧光信号强弱，得出检测结果检测原理N见激光阅读DNA提取加入PCR产物杂交，48℃,30minLuminex100M多功能流式点阵仪/Forms/Root/Chinese/JiShuZCshowaspxShowidQEoWjHIVEWVtJJDNXbKURBKUZdRQdX请问HPV分型可否定量?如果可以定量以什么为标准?是否有标准品。贵试剂是否与其他试剂或测序结果做比对?谢谢透景HPVDNA分型试..肿瘤2008年5月第28卷第5期TumorVol.28,No.5,May,2008流式荧光杂交法检测高危型人乳头瘤病毒的临床价值廖光东',刘彬²,陈凤²,刘新伏²,崔剑峰²,王秀荣²,陈汶²,罗子国',乔友林²(1.重庆医科大学基础医学院电镜室，重庆400016;2.中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所流行病学室，北京[摘要]目的：探索流式荧光杂交法检测高危型人乳头瘤病毒的临床价值。方法：收集山西省子宫颈癌高发区妇女的宫颈流式荧光杂交法检测的灵敏度、特异度、准确度分别为77.78%、93.59%和92.42%,阴、阳性预测值分别为98.13%和49.30%。该人群中高危型HPV的感染率为11.7%,非瘤样病变和子宫颈上皮内流式荧光杂交法检测宫颈人乳头状瘤病毒多重感染的临床意义陈庆云卞美璐张小燕欧华马莉【摘要】目的探讨流式荧光杂交法检测宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)多重感染的临床意义。方法对宫颈癌机会性筛查人群301例，组织病理学诊断≥宫颈上皮内瘤变2级(CIN2)者48例作为病例组，组织病理学诊断为正常或炎症者253例作为对照组。应用流式荧光杂交法进行HPV分型检测，以组织病理学诊断为金标准对检测结果进行评价，并进行HPV多重感染分析。结果流式荧光杂交法检测出≥CIN2宫颈病变的灵敏度、特异度分别为80.49%、80.00%。HPV多重感染总的阳流式荧光杂交法技术总结·原理：普通PCR技术，核酸分子杂交技术和项目基因芯片法流式荧光杂交法DNA提取—PCR—杂交—化学显色—判读结果DNA提取-PCR一杂交一荧光标记一激光判读检测23种HPV基因型(18种高危型和5种低危型)检测26种HPV基因型(19种高危型和7种低危型，注册证只批检19高危)离心机、PCR仪、普通杂交仪离心机、PCR仪、Luminex多功能流式点阵分析仪宫颈脱落细胞、疣体组织、石蜡切片、液基细胞学标本宫颈脱落细胞高较低高较低6小时5小时室温下放置时间长(12小时)室温下放置时间短(1小时)已配制并预分装分成引物混合液，PCR预混液，聚合酶三部分，需人工配制亚能产品与上海透景产品的比较优势灵敏度，特异度更高通用仪器设备可检测更多来源的标本标本保存时间更长PCR反应液预分装亞能生物亚能生物与港龙HPV基因分型对比亚能生物基因芯片技术基因芯片技术检测HPV型别18种高危，5种低危16种高危，10种低危离心机、普通PCR仪、普通杂交仪离心机、普通PCR仪、HPV分型基因芯片检测阅读系统宫颈脱落细胞、液基细胞学标本、疣体组织、石蜡切片标本宫颈脱落细胞高(1×10³拷贝/毫升)低(1×10⁵拷贝/毫升)PCR扩增PCR反应液已分装，减少操作人员工作量，避免污染PCR反应液未分装，增加操作人员工作量，带来污染风险杂交方式单管密封杂交，避免污染在96微孔板中杂交，敞开环境，易污染。结果判读可直接用肉眼判读结果，无需专用设备必须用配套的基因芯片检测阅读系统来判读结果分型基本原理：利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测13种高危HPV基因型，不能提示具体的基因型捕获判读吸取变性剂于对照和样本管中旋涡振荡10秒准备HPV探针混合物将已变性的样本混匀，吸取75ul于"杂交微孔板"中20-25℃孵育10分钟65℃孵育60分钟HC2操作步骤-抗体捕获及酶标将杂交产物转移至"捕获微孔板"相应的小孔中于"捕获"微孔板相应的小孔中20-25℃孵育30-45分钟HC2操作步骤-洗板及化学显色2(化学显色底物)于"捕获"微孔板相应的小孔中20-25℃孵育15-30分钟DigenemicroplateluminometHC2如何进行结果判读?每次实验必须同时做3份阴性对照。阴性对照的结果必须为10-250RLU(相对光单位)。变异系数(%CV)应该≤25%,如果>25%,那么去掉偏离平均值最远的一个阴性对照，用剩下的两个阴性对照计算平均值以及变异系数。%CV必须≤25%,否则，本次实验结果无效，必须重做，无法给病人出报告应该≤15%,如果>15%,那么去掉偏离平均值最远的一个标准品，用剩下的两个标准品计算平均值以及变异系数。%CV必须≤15%,否则，本次实验结果无效，必须重做，无法给病人出报告如巢<2.0或>15,本次实验结果无效，必须重做。4.如果符合以上的标准，检测结果是可靠的。此时的Cutoff值(阳性标本评判的标准)就是MμRc阴性对照平均值Cutoff值=318,所有标本的相对光单位(RLU)应该转换为与Cutoff值的比值，比值大于1为阳性，比值小于1则为阴性对照HPV基因型最小值最大值283份阴性对照，3份高危HPV标准品，2份质控，共需额外消耗8人份试剂!Thehc2High-RiskHPVDNATestMusingHybridCapture2(hc2)technologyisanucleicacidhybridizationassaywithsignalamplificationusingmicroplatechemiluminescenceforthequalitativedetectionofthirteenhigh-risktypesofhumanpapillomavirus(HPV)DNAincervicalspecimens.批准的说明书中内容截图亞能生物HC2技术总结原理：采用核酸分子杂交，抗体捕获(吸附杂交体),化学显色不分型不能检测HPV多重感染不定量有交叉杂交反应手动操作很多，步骤繁琐每次实验要额外消耗8人份试剂，试剂成本高需基因杂交信号放大系统，设备成本高项目基因芯片(亚能)PCR+反向点杂交+化学显色分子杂交+抗体捕获+化学显色分型，确定具体的基因型不能分型，仅提示是否有HPV感染检测HPV种类检测23种HPV基因型，18种高危，5种低危检测13种高危型宫颈脱落细胞、疣体组织、病理石蜡切片，液基细胞学标本宫颈脱落细胞，液基细胞学标本高(1000copies/mL)低(100000copies/mL)无有离心机、普通PCR仪、普通杂交仪(价格低廉)基因杂交信号放大系统(价格昂贵)量96个或更多每次实验需额外消耗8人份试剂，试剂成本高亚能HPV产品与HC2的比较优势能分型检测23种HPV基因型可检测更多来源的标本无交叉杂交反应，特异性高通用仪器设备，如PCR仪和杂交仪检测成本低定性检测14种高危型亞能生物分型不分型学在PCR反应体系中加入荧光基团，整个PCR过程。基于Taqman探针1.每产生一条DNA链，就切断一条探针2.每切断一条探针，就产生一个单位信号3.信号强度与结合探针的DNA分子数成正比亚能与PCR-荧光探针法对比PCR+反向点杂交+化学显色PCR+荧光标记+发光、读数6小时3小时宫颈脱落细胞、疣体组织、病理石蜡切片，液基细胞学标本宫颈脱落细胞，液基细胞学标本普通PCR仪、普通杂交仪(价格低廉)荧光定量PCR仪(价格昂贵)2/8/10/13型等分型，确定具体的基因型不分型，仅提示是否有HPV感染能检测多重感染检测不能检测多重感染检测亚能产品与PCR-荧光探针法的比较优势能分型检测23种HPV基因型能检测HPV多重感染可检测更多来源的标本特异性更高亚能生物HPV基因分型与罗氏对比罗氏原理PCR-反向点杂交法PCR-荧光探针法仪器设备离心机、PCR仪、杂交仪。价格低廉，适合各级实验室使用价格昂贵检测HPV型别数量23种14种能否分型能标本类型宫颈脱落细胞、疣体组织、石蜡切片宫颈脱落细胞HPV检测mRNA检测分型不分型上海透景科华科蒂亚酶切信号放大法■产品名称(中文):高危型人乳头瘤状病毒DNA检测试剂盒(酶切信号放大法)产品名称(英文):CervistaHPVHR探针针对特定目标针对特定目标f4片段⑤⑤