微生物实验总结

微生物实验总结

微生物实验总结「篇一」

为期五天（20XX年6月11日—15日）的食品卫生综合检测实验已经告一段落

了，在这一周的微生物实验主要包括牛奶中大肠菌群的计数、鸡蛋中沙门氏菌的检

验和牛奶中金黄色葡萄球菌的检验三个实验，经过三个综合实验的课程，能让我更

能理解试验时要掌握的细节，也要保持头脑的时刻清醒。同时让我对这三种微生物

有了更进一步的认识，同时让我也对实验也更加熟悉了。

首先我们做的是大肠菌群的计数，它是采用MPN（最大可能数法）的计数来测

定的。大肠菌群的特性为：在37C,24小时内能发酵乳糖，产酸、产气，好氧或

兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌，一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠

檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。其检测原理为细菌在样品内的分布是

随机的，所以检测细菌时，可按概率理论计算菌数。大肠菌群MPN计数的检验程序

为样品的稀释、初发酵试验、复发酵试验和最后的大肠菌群最可能数（MPN）的报

告。那么在第一天的上午，老师基本给我们讲了实验的原理和步骤，以及一些需要

注意的地方，我们便开始计算自己需要配制的实验试剂的量，并且称取试剂的量和

清洗所要用的实验器皿，首先配置的是生理盐水和LST肉汤，并且把生理盐水和

LST肉汤分装到试管内，盖好盖子包扎好进行灭菌，灭完菌也就到了吃饭时间，等

下午来接种培养了。

牛奶样品与生理盐水以1：9的比例进行混合，摇匀后做10倍系列的稀释，做

了3个稀释度。随后将三个稀释度的样品匀液以每个稀释度3支试管接种到内装小

导管的含LST肉汤的试管中，最后放入恒温培养箱中培养24h。在经过24h的培养

后，所有的试管内均产生气体，而后我们要将培养后的有菌落的LST肉汤接种到

BGLB肉汤试管中进行培养24—48h,观察后发现所有的BGLB管都产气，颜色也有

原来的绿色变成暗黄色，证明也产生了酸，所以记为所有产气管为大肠菌群阳性

管。最后查MPN表可得出每亳升样品中大肠菌群的MPN为大于等于llOOml/MPN。

我们小组在做大肠菌群测定还是很顺利的，中途没有出现什么错误，实验很顺

利，小组成员的配合和分工也都很好。

第二个实验是鸡蛋中的沙门氏菌的检测，他的特性是：沙门氏菌需氧或兼性厌

氧，10—42℃都可生长，最适温度为37C,大部分可发酵葡萄糖，产酸产气，是

革兰氏阴性的无芽泡杆菌。在营养琼脂平板上生长产生光滑，湿润，半透明，边缘

整齐的菌落。在血平板上产生透明溶血环，形成大小中等的灰白色菌落。实验过程

可分为前增菌、选择性增菌、选择性平板分离、生物化学筛选四个阶段。

实验首先配制BPW溶液，进行分装和高压灭菌，在无菌条件下，移取5nli鸡蛋

液样品于盛有45mlBPW的组织培养瓶中，混匀，放置于36℃±1℃的恒温培养箱中

培养24h±2h,观察生长现象。接下来的增菌阶段，需要配制TTB增菌液和SC增

菌液,移取1ml的前增菌液接种到lOmlTTB增菌液内,在恒温培养箱内培养18h〜

24h,SC增菌液过程与7TB一样。接下来需要制备BS平板和HE平板，等平板凝固

后便可以开始接种了，是采用平板分多区划线的方法，然后放在37度温箱培养

18~24h.最后要进行生叱实验，要先配制三糖铁琼脂，从培养皿的平板上挑取可疑

菌落，接种到三糖铁琼脂，先与底层穿刺，再在斜面划线。同时把菌落接种到各种

生化试剂里，封口后一起放入恒温培养箱培养18hc取出培养皿和生化小试管观察

结果，记录。

第三个实验是金黄色葡萄球菌的检验，它的特性一般是无芽抱，鞭毛。大多数

无荚膜，革兰氏染色阳性，它培养的营养要求不高，在普通培养基上就能生长良

好，需氧或兼性状氧。在血平板上培养会使红细胞破裂，形成透明的溶血环。在显

微镜下可以看到是紫色的，排列成葡萄状的.圆形的菌。

首先是样品的处理，称取22g7.5%氯化钠肉汤溶解于250nli水中，在每个均质

瓶内移取45ml,同时制取Baird—Parker培养基，高压灭菌后吸取牛奶样品5ml

到均质瓶内。放入恒温箱培养18—24h。然后用接种环取培养物分别划线接种到

Baird一Parker平板和血平板上，培养18—24h,Baird一Parker平板有可能需要

培养45—48h。最后进行血浆凝固酶试验，挑取BP平板或血平板上可疑菌落1个

或以上，分别接种到5ml左右BHI肉汤中,36±1℃培养18—24h。取新鲜兔血浆

0.5ml,加入BHI培养物0.2—0.3ml,振荡摇匀，置36土1C温箱培养，半小时观

察一次，6小时观察，直至出现凝固，判为阳性结果。也有小组6h后也没凝固

的，则判为阴性。最后进行革兰氏染色实验，观察细菌的形态特征。最后记录结

果。

三个实验虽然不多，但是三个实验的跨度刚好是一个星期，所以我们实验刚好

可以做完，实验从刚开始的懵懂到慢慢的熟悉，到最后的成功，少不了的是小组合

作和老师的帮助。经过三个微生物的实验，让我对微生物实验的过程。不过对于微

生物的实验一定要细心，一个是它需要的时间很长，要灭菌和培养，如果做错都得

重新再来，并且实验过程中不能被污染，否则会对实验结果造成一定的污染或完全

不可用。对实验流程一定要熟悉，现象一定要观察仔细，因为类似的菌类有很多，

其生产的习性也类似，若不观察仔细，就会有结果的偏差。我们小组的实验都很顺

利，中途虽有一点点过失，但对实验的进度和结果没有什么大的影响，实验结果也

是让我们蛮有成就感的，感谢小组的配合。操作不像理论，只有多次练习才有体

会，在今后的实验中，我会更加努力。

微生物实验总结「篇二」

微生物在地球上存在了30多亿年，人类在数百万年前出现之后就一直和微生

物发生着千丝万缕的联系。发面、果酒和啤酒酿造、牛奶和奶制品的发酵等都是那

些看不见的小生命做出的贡献。微生物存在于我们生活中的每一个角落，通过微生

物实验我们可以更加的了解微生物的“习性”就如同养的宠物一样，什么样的食物

会发育更好，什么样的天气会心情好，什么样的玩具会有益等等。培养、分离、鉴

别微生物或积累代谢产物。自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一

般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要

求一般不同。同过这些实验便能一一考证。

实验是培养学生的动手能力、观察能力、思维能力、表达能力、合作能力、创

新能力等的最佳途径。还要求实验技术人员必须具备相应的素质，实验操作人员必

须具备较扎实的专业基础、熟练的实验技能及高度的责任心，在工作中要善于总

结，同时还要和理论课老师积极沟通，这样才能够真正的学好微生物实验这门课

程。在每一次实验中不仅仅要专心认真的做实验，还要认真的写实验报告，并从实

验中总结不足。再比如在调试显微镜的时候由低倍向高倍慢慢调试，在使用高倍时

更应该小心调试细准焦螺旋，以免压坏我玻片，在使用油镜后要将油镜拭擦干净，

保证显微镜的清洁，这些细节是需要注意的。

以下就我们做的实脸错误做列举：

进行菌种接种的时候，选择合适的方式并，注意不要把平板弄破，等到平板凝

固后才可以进行接种。接种时也要注意在无菌条件下接种。经过培养后，再观察最

后得出结论。在酸奶中菌落测定时，封口不及时有外界的细菌污染。药敏实验中因

为试验中放置牛津杯时也将培养基戳破，导致实验观察受到影响，并且在接种时因

为乱放培养基将未接种和已接种的培养基混淆导致试验中3个培养基并没有实验结

果，实验失败。

我们的自主设计实验是探究渗透压对微生物生长的影响，原理是将细菌置于抵

渗液中，菌体因吸收水分膨胀甚至破裂；如果将菌体置于高渗液中，则菌体内的水

分就会渗出，结果发生质壁分离现象。不同的细菌对渗透压的抵抗力不同。但无论

哪种细菌对渗透压的抵抗力是有一定限度的，超过一定限度则使菌体生长受到抑制

只有在等渗溶液中，微生物才能正常生长、繁殖。实现这一理论我们需要制作

200ml的牛肉膏蛋白陈培养基（牛肉膏1g,蛋白陈2g,蒸储水200nl）,将其调

PH至7.2,后平均分成四份各50ml,分别加入0g、1g、2.5g、5g的NaCl固体，

配置成NaCl浓度分别为0%、2%.5%、10舟的4种不同浓度的牛肉膏蛋白陈培养

基。从培养基中吸取1加1加入试管中，不同浓度的培养基各取三支试管。在此操

作时因实验思考不严谨是采取分别称量配置了3份不同浓度的溶液，而正确的做法

应该是配一份未加入NaCl的培养基，再份为3份，加入不同克数的NaCl,这样一

来可以避免由于营养素的计量不同导致的误差。虽后来的实验结果并未受到影响，

但思考不严谨是值得反思的。

通过以上的错误我们明白了做好实验的具体要求，实验前做好预习，并思考实

验原理。实验中正确选择实验方法与实验器材，学会控制实验条件。知道如何实

验、判断结果的可靠程度。理解和掌握有关课程内容和重要的物理概念，以形成物

理思想，培养解决物理问题的能力。通过实验培养掌握基本物理量的测量方法，以

培养实验技能。最后就是最重要的一点，培养自己严谨的实验态度、科学的实验方

法及良好的实验习惯。

微生物实验总结「篇三」

微生物实验优秀总结

这学期的微生物实验已经结束，这是我第一次接触到微生物的世界中，以前也

只是在书本中学习，但是真正走进它们的世界中是通过这个课程开始的。在开始微

生物实验之前我是以为这个实验不会很难，但是通过本学期的学习发现这个课程真

的很难。你不仅需要理论知识作为铺垫，你还需要有严谨的实验精神。

第一节课老师给我们介绍了我们本学期微生物实验的几个实验和报告的要求，

也让我们了解了微生物实验和以往其他实验的不同。实验步骤虽然很简单，但是往

往一个微小的细节处理不当也会导致你整个实验结果的失败。这个我真的深有体

会，我们小组的实验结果都很不理想。实验步骤说难也不难，其实无非是先对配置

培养液，然后对清洗干净的试管、培养皿以及配置好的‘培养液进行灭菌，等灭菌

完了就放入无菌室进行细菌的接种，最后将接种好细菌和培养液的培养皿放进恒温

培养箱进行培养。看似夕艮简单的操作过程我却状况百出。我总结了几点导致这么多

次实验失败的地方。第一是操作不够规范，在培养皿中倒入培养液后没有摇匀导致

培养基边缘开裂，未等琼脂培养液凝固就倒置导致培养基分布不均匀。第二是理论

知识欠缺，没有等培养液冷却至40到50摄氏度就倒入培养基然后马上就接种了细

菌，导致细菌己经被烫死。

好在值得欣慰的是最后一个自主实验还是比较成功的。试验以环境对微生物生

长的影响为题设计实验，我们小组通过PH值，温度，紫外线照射三个方面进行研

究，结果很满意，很明显。大肠杆菌在PH值为7时生长最适，在温度为37℃时生

长最佳，紫外线会抑制其生长。

不得不承认，通过这次实验的学习，我们学到了很多，得到了很多，有些是书

本上学不到的，只有自己参与了，操作了，才会知道。也要感谢老师对我们的照

顾。

微生物实验总结「篇四」

一、培养基

（一）培养基的营养成分

一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有些微生物需要添加特殊营养物质（如

培养乳酸杆菌时需添加生长因子：维生素）

高考警示钟：自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同

（1）自养微生物所需的碳源来自含碳的无机物（如C02），而异养微生物需要

的碳源来自含碳的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。

（2）含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能

量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。

（二）培养基的配制原则

（D目的明确。要根据微生物的种类、培养目的等选择原料、配制培养基。

（2）营养要协调。各种营养物质要保证适当的浓度和比例。营养物质比例过

低，不能满足微生物生长；浓度过高则会抑制微生物的正常生长。

（3）pH要适当。不同微生物生长所需pH不同。如细菌为中性或微碱性（65〜

7.5）；霉菌等真菌为酸性（5.0〜6.0）。

（三）培养基的分类及作用：

1.物理性质：根据是否添加琼脂等凝固剂

（1）液体培养基：不加凝固剂，常用于工业生产

（2）固体培养基：加凝固剂，常用于微生物分离、鉴定、活菌计数

2.用途或功能

（1）选择培养基：培养基中加入或去除某种化学物质，允许特定种类的微生

物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。

常见例子：

①培养基中加入青霉素，筛选酵母菌或霉菌等真菌；

②培养基中加入高浓度食盐，筛选金黄色葡萄球菌；

③无氮培养基，筛选固氮微生物；

④无碳培养基，筛选自养微生物；

⑤以石油为唯一碳源，选择能分解石油的微生物；

⑥以尿素为唯一氮源，筛选尿素分解菌；

⑦以纤维素为唯一碳源，通过是否产生透明圈筛选纤维素分解菌。

⑧将培养基放在高温环境中培养，分离耐高温的微生物。

（2）鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化

学药品，以鉴别不种类的微生物。

①伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，茵落呈深

紫色，并带有金属光泽;；

②培养基中加入酚红指示剂，鉴定尿素分解菌；

③培养基中加入刚果红（CR）,鉴定纤维素分解菌。

注意:

①病毒为非细胞结沟的生物体，专营活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来

培养，需接种在动植物组织中才能增殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。

②加入培养基中的凝固剂（如琼脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作

用。

二、无菌技术

（-）关键

获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。

（二）消毒、灭菌：

二者主要区别中；芽泡和泡子是否存活（芽泡是微生物度过不良环境的体眠

体，而剂子是微生物进行无性生殖时的繁殖体即无性生殖细胞。）

1.消毒:使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人

体等有害的微生物（不包括抱子和芽抱）

常用方法

应用范围

巴氏消毒法：70〜75c水中煮30min或在80℃水中煮15min

一些不耐高温的物体如牛奶

煮沸消毒法：在100℃水浴中煮沸5〜6min

一般物品

化学药剂消毒法：用乙醇、氯气、KMnO4等药剂来杀死或抑制细菌生长或繁殖

可用来对环境、双手和衣物等消甫

紫外线消毒法：30W紫外灯照射30min

接种室、接种箱、超净工作台

2.灭菌:使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生.物，包括芽抱和抱子

常用方法

应用范围

灼烧灭菌法：酒精灯火焰

接种工具如接种环、接种针等

干热灭菌法：在160〜170C加热1〜2h

如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具

高压蒸汽灭菌：压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15〜30min

培养基及容器的灭菌

注意：

(1)酒精消毒用体积分数为70%的酒精效果最好，浓度过低。杀菌力弱，浓

度过高，会使菌体表面蛋白凝固成一层保护膜，乙醇分子不能进入其中

(2)关于高压蒸汽灭菌注意以下几点：

①压力为100kPa,温度为121C的条件下，维持15〜30min；

②注意同时旋紧相对的两个螺旋，使螺栓松紧一致;

③到灭菌时间后，当压力表的压力降为零时，才能打开排气阀，否则灭菌锅的

液体会冲出容器，造成污染。

（3）灭菌消毒的原理.，就是通过一定理化手段，使病原菌蛋白质变性，失去

生命活性。

（4）灼烧灭菌用的是酒精灯火焰的充分燃烧层。

三、微生物的纯化培养技术

（-）常用细菌培养基一一牛肉膏蛋白陈培养基配制流程：

计算

称量

溶化

火菌

注意：据配方计算配制一定体积培养基时各成分的用量

注意：

①倒平板时，烧杯口要通过酒精灯火焰灭菌。

②平板冷凝后要将平板倒置，既可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基造成污

染；又可使培养基表面的水分更好的挥发。

（调PH）

倒平板

注意:

①牛肉膏较粘稠，应玻棒挑取，在称量纸上称量

②牛肉膏蛋白陈易吸潮，动作要迅速

注意：

①溶化琼脂时要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂；

②加热过程中部分水分蒸发，待琼脂完全溶化后应补加蒸馈水，以保持溶液的

浓度

注意：

由于不同微生物适宜的pH不同，因此在熔化后，必须用NaOH或HC1来调节

pH

注意：

①用高压蒸汽灭菌法

②培养基先调PH再灭菌

③一般是培养基先灭菌再倒平板

计算

称量

溶化

灭菌

注意：据配方计算配制一定体积培养基时各成分的用量

注意:

①倒平板时，烧杯口要通过酒精灯火焰灭菌。

②平板冷凝后要将平板倒置，既可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基造成污

染；又可使培养基表面的水分更好的'挥发。

（调PH）

倒平板

注意：

①牛肉膏较粘稠，应玻棒挑取，在称量纸上称量

②牛肉膏蛋白脓易吸潮，动作要迅速

注意：

①溶化琼脂时要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂；

②加热过程中部分水分蒸发，待琼脂完全溶化后应补加蒸储水，以保持溶液的

浓度

注意：

由于不同微生物适宜的pH不同，因此在熔化后，必须用NaOH或HC1来调节

pH

注意:

①用高压蒸汽灭菌法

②培养基先调PH再灭菌

③一般是培养基先灭菌再倒平板

（二）纯化大肠杆菌

1.原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，

这个菌落就是纯化的细菌菌落。

2.微生物接种方法：

平板划线法（只可纯化）和稀释涂布平板法（既可纯化又可计数）

（1）平