2025年生化与分子生物学实验操作考察答案及解析

2025年生化与分子生物学实验操作考察答案及解析一、单项选题1.下列哪种技术可用于分离蛋白质（）A.离心B.电泳C.层析D.以上都是2.用于DNA测序的方法是（）A.聚合酶链式反应B.凝胶电泳C.双脱氧末端终止法D.Southernblotting3.蛋白质变性后，其主要变化是（）A.一级结构改变B.空间结构改变C.溶解度增加D.生物活性增强4.下列哪种物质不是酶的辅助因子（）A.金属离子B.维生素C.辅酶D.底物5.限制性内切酶的作用是（）A.切割DNAB.合成DNAC.连接DNAD.转录DNA6.下列哪种方法可用于检测基因表达水平（）A.WesternblottingB.NorthernblottingC.免疫组化D.原位杂交7.核酸分子杂交的原理是（）A.碱基互补配对B.抗原抗体结合C.酶与底物结合D.受体与配体结合8.下列哪种物质可用于沉淀蛋白质（）A.硫酸铵B.乙醇C.丙酮D.以上都是9.下列哪种方法可用于测定蛋白质的分子量（）A.凝胶过滤B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.超速离心D.以上都是10.基因工程中常用的载体是（）A.质粒B.噬菌体C.病毒D.以上都是二、多项选题1.下列哪些技术可用于蛋白质的分离和纯化（）A.盐析B.离子交换层析C.亲和层析D.凝胶过滤2.下列哪些物质可作为酶的抑制剂（）A.竞争性抑制剂B.非竞争性抑制剂C.反竞争性抑制剂D.不可逆抑制剂3.下列哪些方法可用于检测DNA的损伤（）A.彗星试验B.微核试验C.染色体畸变分析D.基因突变检测4.下列哪些技术可用于基因克隆（）A.聚合酶链式反应B.限制性内切酶酶切C.DNA连接酶连接D.转化或转染5.下列哪些物质可用于细胞培养（）A.培养基B.血清C.抗生素D.缓冲液6.下列哪些技术可用于蛋白质的鉴定（）A.氨基酸分析B.肽指纹图谱分析C.质谱分析D.免疫印迹三、填空题1.蛋白质的基本组成单位是_____。2.DNA的中文名称是_____。3.酶的活性中心包括_____和_____两个功能部位。4.基因表达调控主要发生在_____水平和_____水平。5.蛋白质的二级结构主要有_____和_____两种形式。6.核酸的基本组成单位是_____。四、判断题（√/×）1.所有的酶都具有催化活性。（）2.DNA复制是半保留复制。（）3.蛋白质的三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。（）4.基因工程中，目的基因只能从基因组DNA中获取。（）5.细胞培养过程中，需要定期更换培养基。（）6.Westernblotting可用于检测蛋白质的表达水平。（）五、简答题1.简述蛋白质的功能。六、案例分析患者，男性，50岁，因“反复乏力、纳差、腹胀1年，加重伴黄疸1周”入院。患者1年前无明显诱因出现乏力、纳差、腹胀，未予重视。1周前上述症状加重，伴皮肤巩膜黄染，尿色加深。既往有慢性乙型肝炎病史10年。查体：T36.5℃，P80次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。神志清楚，皮肤巩膜中度黄染，未见肝掌、蜘蛛痣。腹平软，无压痛及反跳痛，肝肋下未触及，脾肋下2cm，移动性浊音阴性。实验室检查：ALT1200U/L，AST800U/L，TBil120μmol/L，DBil80μmol/L，HBsAg（+），HBeAg（+），抗-HBc（+）。问题1：该患者的初步诊断是什么？问题2：为明确诊断，还需要做哪些进一步检查？试卷答案一、单项选题（答案）1.答案：D解析：离心、电泳、层析都可用于分离蛋白质。2.答案：C解析：双脱氧末端终止法是DNA测序的常用方法。3.答案：B解析：蛋白质变性主要是空间结构改变，一级结构不变，溶解度降低，生物活性丧失。4.答案：D解析：底物是酶作用的对象，不是辅助因子。5.答案：A解析：限制性内切酶能特异性切割DNA。6.答案：B解析：Northernblotting可用于检测基因表达水平。7.答案：A解析：核酸分子杂交基于碱基互补配对原理。8.答案：D解析：硫酸铵、乙醇、丙酮都可沉淀蛋白质。9.答案：D解析：凝胶过滤、聚丙烯酰胺凝胶电泳、超速离心都可测蛋白质分子量。10.答案：D解析：质粒、噬菌体、病毒都是基因工程常用载体。二、多项选题（答案）1.答案：ABCD解析：盐析、离子交换层析、亲和层析、凝胶过滤都是蛋白质分离纯化技术。2.答案：ABCD解析：竞争性、非竞争性、反竞争性、不可逆抑制剂都可抑制酶活性。3.答案：ABCD解析：彗星试验、微核试验、染色体畸变分析、基因突变检测都可检测DNA损伤。4.答案：ABCD解析：聚合酶链式反应、限制性内切酶酶切、DNA连接酶连接、转化或转染都是基因克隆技术。5.答案：ABCD解析：培养基、血清、抗生素、缓冲液都是细胞培养所需物质。6.答案：ABCD解析：氨基酸分析、肽指纹图谱分析、质谱分析、免疫印迹都可鉴定蛋白质。三、填空题（答案）1.答案：氨基酸解析：氨基酸是蛋白质的基本组成单位。2.答案：脱氧核糖核酸解析：DNA即脱氧核糖核酸。3.答案：结合基团；催化基团解析：酶活性中心包括结合基团和催化基团。4.答案：转录；翻译解析：基因表达调控主要在转录和翻译水平。5.答案：α-螺旋；β-折叠解析：蛋白质二级结构主要是α-螺旋和β-折叠。6.答案：核苷酸解析：核苷酸是核酸的基本组成单位。四、判断题（答案）1.答案：×解析：酶原无催化活性，激活后才有。2.答案：√解析：DNA复制是半保留复制。3.答案：√解析：蛋白质三级结构是全部氨基酸残基相对空间位置。4.答案：×解析：目的基因还可通过人工合成等方法获取。5.答案：√解析：细胞培养需定期换培养基以提供营养和去除代谢废物。6.答案：√解析：Westernblotting可检测蛋白质表达水平。五、简答题（答案）1.答：蛋白质具有催化、运输、调节、免疫、结构支持、运动等多种功能。如酶具有催化化学反应的作用；血红蛋白可运输氧气；激素调节生理过程；抗体参与免疫反应；胶原蛋白起结构支持作用；肌动蛋白和肌球蛋白参与肌肉