药品质量检测综合实训技能-教案 项目八 山楂的质量检验

山楂的质量检验一、实训目标本实训旨在模拟中药检验的真实工作场景，使学生能够依据《中国药典》的法定要求，独立、规范、并带有严谨科学思维地完成山楂药材的全项质量检验，达成以下具体目标：（一）知识目标1.系统掌握法定标准：

能够准确复述并深度理解《中国药典》中关于山楂的各项质量标准，包括性状、鉴别（显微鉴别、薄层色谱鉴别）、检查（水分、总灰分）、浸出物及含量测定的技术要求、方法原理及法定限度。2.精通核心检验原理：

深刻理解中药显微鉴定的细胞组织学基础；掌握薄层色谱法（TLC）对特定化学成分（熊果酸）进行定性鉴别的分离原理；理解水分、灰分、浸出物的测定原理和酸碱滴定法（有机酸含量测定）的基本原理和应用。（二）能力目标1.精准实验操作技能：

能够熟练进行山楂药材的取样和粉碎；掌握药材性状描述的专业术语；能够独立完成中药粉末的显微制片、观察与特征识别；熟练掌握薄层色谱的点样、展开、显色等全套操作；能够独立、规范地操作烘箱、马弗炉及滴定装置。2.卓越数据处理与分析能力：

能够准确、规范地记录所有原始数据，独立完成水分、灰分、浸出物和有机酸含量的全部计算；能对薄层色谱图谱进行正确的判读，并依据药典标准对所有检验结果做出准确无误的判断。3.综合方案与报告能力：

能够依据检验标准，设计并执行完整的检验方案，并最终整合所有检验结果，撰写一份格式规范、数据完整、逻辑清晰、结论明确，能体现GLP（良好实验室规范）要求的《药品检验报告书》。（三）素质目标1.质量与合规核心意识：

深刻认识到中药材的质量是保证中医临床用药安全、有效、可控的源头和基础，树立“质量源于设计、数据即是生命”的质量核心价值观，增强职业责任心和使命感。2.严谨求实的科学作风：

在样品处理的每一步、仪器操作的每一项参数设置、数据的每一次读取与计算中，培养一丝不苟、实事求是、可追溯的科学态度和严谨细致的职业习惯。3.安全环保与协作意识：

在实验中能自觉进行实验“三废”（尤其是有机溶剂和废酸废碱）的分类与妥善处理，强化实验室安全操作意识；在分组实训中能够有效沟通、协同操作，共同解决检验过程中遇到的问题。二、实训重难点（一）教学重点1.山楂的鉴别（显微鉴别与薄层色谱鉴别）这是判定药材真伪与品质优劣的关键步骤。显微鉴别关注其内在组织构造的“指纹”特征；薄层色谱则从化学成分层面进行定性确证。教学策略：

采用“图物结合、由表及里”的教学法。先通过性状鉴别熟悉其宏观特征，然后引导学生使用显微镜，对照药典图谱寻找石细胞、草酸钙晶体等关键微观特征。对于薄层色谱，重点讲解对照品与供试品“三点一线”（原点、斑点、溶剂前沿）和“Rf值一致”的原理。2.山楂的含量测定（酸碱滴定法）：掌握有机酸类成分的提取方法和经典的酸碱滴定定量技术，是评价山楂内在质量的核心指标。教学策略：

采用“关键点控制”教学法。重点讲解并演示：（1）室温下浸泡4小时的必要性（确保有效成分的充分溶出）；（2）滴定终点的准确判断，特别是指示剂颜色变化的瞬间。（二）教学难点1.显微特征的准确识别：中药粉末显微图像复杂，多种组织细胞混杂在一起，初学者很难从纷繁的视野中准确找到并识别出药典描述的石细胞、草酸钙方晶与簇晶等关键特征。突破策略：

采用“标准比对”与“分步聚焦”的训练模式。为学生提供已由教师确认的、含有典型特征的标准玻片进行比对学习。指导学生采用“低倍镜找视野、高倍镜看特征”的分步聚焦法，并利用教学投影系统，集体讲解和识别同一个视野下的不同细胞结构。2.薄层色谱操作的规范性与重现性：TLC实验结果的优劣高度依赖于操作细节，如点样量、点样斑点大小、展开剂配比的精确性、展开槽的密闭与饱和程度等。任何一个环节的疏忽都可能导致斑点拖尾、分离效果差或结果无法重现。突破策略：

采用“SOP清单式”操作。将TLC的每一步操作制成一个标准操作程序（SOP）检查清单，要求学生每完成一步就进行勾选确认。教师进行点样和展开槽预饱和的慢动作、特写演示，强调“点样要小而浓、展开环境要恒定”的核心要诀。三、实训准备1.仪器与设备：

生物显微镜、分析天平（万分之一）、薄层色谱全套装置（点样毛细管、展开槽、玻璃板、喷雾器）、电热恒温干燥箱、高温电阻炉（马弗炉）、超声波清洗机、酸式滴定管（25mL）、容量瓶、具塞锥形瓶、坩埚（已编号并灼烧恒重）、坩埚钳、干燥器等。2.试剂与样品：

山楂药材（供试品，符合性状描述）、山楂对照药材、熊果酸对照品、乙酸乙酯（AR）、甲苯（AR）、甲酸（AR）、硫酸（AR）、乙醇（95%）、氢氧化钠标准滴定液（0.1mol/L，已标定）、酚酞指示液、新沸过的冷水、稀盐酸、水合氯醛等试液。3.文件与资料：

《中华人民共和国药典》（现行版）山楂项下内容复印件及通则（0832,2302,2302、0502）、本项目的标准操作规程（SOP）、检验原始记录模板（包含计算公式）、仪器使用SOP、化学品安全技术说明书（MSDS）。四、实训内容（一）性状1.检验目的：

通过宏观感官特性，对山楂药材进行初步的真伪、优劣判断，是中药鉴定工作的第一步，为后续检验提供依据。2.方法原理：

物理感官观察法。3.操作步骤：（1）取本品置于洁净白板上，在自然光下观察其形状（圆形片）、大小（用直尺测量直径）、表面颜色（深红色）与特征（有无皱纹和灰白色小斑点）。（2）随机取3-5枚，观察果肉颜色（深黄色至浅棕色）。（3）仔细观察并计数种子的数量（3～5枚）、颜色（黄白色）和形状（三角状卵形）。（4）最后鼻闻其气（气微），口尝其味（味酸、微甜）。4.结果判断：

检验结果应与药典描述：“本品为圆形片，皱缩不平，直径1～2.5cm，厚0.2～0.4cm。外皮红色，具皱纹，有灰白色小斑点。果肉深黄色至浅棕色。中部横切片具5粒浅黄色果核，但核多脱落而中空。有的片上可见短而细的果梗或花萼残迹。气微清香，味酸、微甜。”完全相符。（二）鉴别1.粉末显微鉴别（1）检验目的：

通过观察山楂粉末的内在组织构造特征（这些特征是遗传决定的，具有物种特异性），进行准确的品种鉴定。（2）检验方法：

本品粉末暗红棕色至棕色。石细胞单个散在或成群，无色或淡黄色，类多角形、长圆形或不规则形，直径19～125μm，孔沟及层纹明显，有的胞腔内含深棕色物。果皮表皮细胞表面观呈类圆形或类多角形，壁稍厚，胞腔内常含红棕色或黄棕色物。草酸钙方晶或簇晶存于果肉薄壁细胞中。2.薄层色谱法（1）检验目的：

通过与对照品的色谱行为比对，定性鉴别山楂中是否含有指标性成分——熊果酸，以辅助鉴别真伪。（2）操作步骤：①溶液制备：供试品溶液：

取本品粉末1g，加乙酸乙酯4ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。对照品溶液：

另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。②点样：

在同一硅胶G薄层板上，用点样毛细管分别吸取上述两种溶液各4μL，交叉点样于点样线上，斑点宜小，直径不超过3mm，点间距约1.5cm。③展开：

在展开槽中加入展开剂

甲苯－乙酸乙酯－甲酸（20:4:0.5）

约0.5cm高，将一张与薄层板等大的滤纸浸湿并贴壁，盖上盖子，预饱和15-20分钟。然后将点好样的薄层板放入，液面不得触及点样线，密封展开。④显色：

待溶剂前沿上行至距上沿约1cm处，取出薄层板，晾干。均匀喷以硫酸乙醇溶液（3→10），在80℃加热至斑点显色清晰。（3）结果判断：

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；置紫外光灯（365nm）下检视，显相同的橙黄色荧光斑点。（三）检查1.水分依法（通则0832第二法）测定。限度：

不得过12.0%。2.总灰分依法（通则2302）测定。限度：

不得过3.0%。3.重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法）测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过1mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。（四）浸出物1.检验目的：

测定药材中可被水溶出的有效成分和水溶性杂质的总量，是综合反映药材内在成分含量，控制药材质量的综合性指标。2.操作方法：照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂。3.结果判断：

不得少于21.0%。（五）含量测定1.检验目的定量测定山楂中总有机酸的含量，这是评价其内在质量和药效物质基础（助消化、降血脂等）的关键定量指标。2.方法原理酸碱中和滴定法。山楂中的有机酸（主要是枸橼酸、苹果酸等）能与强碱氢氧化钠发生中和反应。利用指示剂判断反应终点，根据消耗的氢氧化钠标准溶液的量来计算有