核酸pcr实验室考试题及答案

核酸pcr实验室考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）1.PCR反应中，延伸温度一般为（）A.55℃B.72℃C.94℃D.4℃2.核酸提取过程中，常用的裂解液成分不包括（）A.Tris-HClB.EDTAC.SDSD.NaCl3.PCR反应体系中，Taq酶的作用是（）A.解链DNAB.连接DNA片段C.催化DNA合成D.修饰DNA4.核酸检测样本采集后，暂时保存的温度一般是（）A.37℃B.25℃C.4℃D.-20℃5.下列哪种物质不是PCR反应的原料（）A.dATPB.dUTPC.dCTPD.dGTP6.实验室进行核酸检测时，常使用的阳性对照是（）A.水B.已知核酸样本C.空气D.试剂空白7.核酸提取时，离心的主要目的是（）A.混合均匀B.使核酸变性C.分离不同成分D.加热样本8.荧光定量PCR技术的英文缩写是（）A.RT-PCRB.qPCRC.ddPCRD.LAMP9.进行PCR实验时，防止交叉污染的措施不包括（）A.分区操作B.戴手套C.实验后不消毒D.使用一次性耗材10.核酸的基本组成单位是（）A.氨基酸B.脂肪酸C.核苷酸D.单糖答案：1.B2.D3.C4.C5.B6.B7.C8.B9.C10.C二、多项选择题（每题2分，共20分）1.PCR反应的基本步骤包括（）A.变性B.退火C.延伸D.复性2.核酸提取方法有（）A.酚氯仿抽提法B.磁珠法C.硅胶膜吸附法D.离心法3.实验室常用的核酸检测仪器有（）A.离心机B.荧光定量PCR仪C.生物安全柜D.核酸蛋白分析仪4.核酸样本采集部位可能包括（）A.鼻咽拭子B.口咽拭子C.血液D.粪便5.影响PCR反应结果的因素有（）A.引物设计B.模板质量C.反应体系成分D.反应温度和时间6.核酸检测质量控制包括（）A.室内质控B.室间质评C.人员培训D.仪器校准7.防止核酸污染的措施有（）A.严格分区B.定期清洁消毒C.正确处理废弃物D.通风良好8.PCR引物设计的原则包括（）A.长度合适B.避免形成二聚体C.特异性强D.GC含量适中9.核酸检测相关的防护用品有（）A.防护服B.口罩C.护目镜D.手套10.核酸检测的应用领域包括（）A.疾病诊断B.基因分型C.法医鉴定D.动植物检疫答案：1.ABC2.ABC3.ABD4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD三、判断题（每题2分，共20分）1.PCR反应中，引物浓度越高越好。（）2.核酸提取后可以直接进行PCR反应，无需检测浓度。（）3.生物安全柜可以完全防止核酸污染。（）4.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）5.核酸样本采集后可以长时间室温放置。（）6.不同的核酸提取方法可能得到不同质量的核酸。（）7.PCR实验中，阴性对照出现扩增曲线说明实验无污染。（）8.核酸检测操作人员不需要进行专门培训。（）9.引物的特异性决定了PCR反应的特异性。（）10.核酸在酸性环境中更稳定。（）答案：1.×2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.×9.√10.×四、简答题（每题5分，共20分）1.简述PCR反应原理。答案：PCR即聚合酶链式反应，以目的DNA为模板，在引物、dNTP、Taq酶等作用下，经过高温变性使双链DNA解开，低温退火让引物与模板结合，适温延伸由Taq酶催化合成新的DNA链，如此循环扩增目的DNA片段。2.核酸提取过程中需要注意哪些问题？答案：要注意防止核酸降解，控制好温度、时间；避免核酸污染，实验环境和器材要清洁消毒；确保提取效率，选择合适方法和试剂；提取后及时检测核酸浓度和纯度，判断质量。3.荧光定量PCR的优点有哪些？答案：能实现对核酸的准确定量，灵敏度高，可检测低拷贝核酸；特异性强，减少非特异性扩增干扰；实时监测反应进程，结果重复性好；操作简便、快速，适用于多种样本检测。4.实验室如何做好核酸检测的质量控制？答案：开展室内质控，定期分析检测结果准确性；参加室间质评，与其他实验室比对；对仪器定期校准维护；规范人员操作，加强培训考核，确保检测质量稳定可靠。五、讨论题（每题5分，共20分）1.当PCR扩增结果出现异常条带时，可能的原因有哪些及如何解决？答案：原因可能是引物设计不佳、模板有杂质、反应条件不当等。解决办法：重新设计引物；优化模板提取方法，纯化模板；调整退火温度、循环次数等反应条件，通过预实验确定合适参数。2.如何确保核酸检测实验室的生物安全？答案：合理分区，防止交叉污染；规范操作流程，正确使用防护用品；严格处理废弃物，防止病原传播；定期对实验室环境和仪器消毒；加强人员培训，提高生物安全意识。3.核酸检测新技术不断发展，对传统PCR技术有哪些影响？答案：新技术如数字PCR等使核酸检测更精准、灵敏。这促使传统PCR技术不断改进优化，拓展应用领域，同时传统技术也在成本、操作简便性上与