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6103TechnicalspecificationforsemenqualityidentificationofdairygoatI 2 3 3 4 5 8 9本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定1奶山羊精液品质鉴定技术规范本文件规定了奶山羊精液品质鉴定的术语和定义、采精、检测、结果判定和鉴定记录的要323.7前进运动精子数progressivemo在37℃环境下,精液中直线前进运动的精子数占总精子数的百分3.10精子畸形率abnormal4.1基本要求4.1.1种公羊4.1.2采精员4.1.3采精室4.1.4精液处理室应符合NY/T3186-2018中4.1的规定,地面清洁,室温控制在18℃~25℃。4.1.5稀释液商品稀释液按产品说明书使用。自制稀释液应按附录A.2.2.1精液4.1.6器械清洗消毒应按NY/T3186-2018中附录A的4.2精液采集4.2.1采精应按NY/T3186-2018中第5章的要求执34.2.2采精频次连续采精2次以上时,中间间隔30min~5检测5.1精液处理5.2检测项目5.2.1.1射精量5.2.1.2颜色5.2.1.3云雾状5.2.1.5pH用玻璃棒蘸取1滴精液于精密pH试纸上,对照比色。或用5.2.1.6杂质5.2.2.1显微镜检测5.2.2.2精液分析仪检测46.2.2感官检测判定为不合格的精液,均不做实验6.3.1原精液,精子密度≥20×108/mL,精子活力≥70%,精子畸形率%,5A.1精子密度测定A.1.1仪器、试剂药棉、小试管、试管架、水浴锅、白绸布;3.A.1.2方法A.1.2.1精液稀释围附着的精液,再吸3.0%氯化钠至“10A.1.2.2精液计数A.1.2.2.1将盖好盖玻片的血球计数板置于显微镜下低倍观察(显微镜恒温台温度37℃),找到清晰动渗入计数室内。要求精液均匀充满计数室,无气泡、不溢出A.1.2.2.2将充满精液的血球计数板置于显微镜下放A.1.3计算A.1.3.1精子密度A.1.3.2前进运动精子数按GB20557-2006附录A.4A.1.3.3精子活力精子活力按式计算式中:M——精子活力;C——直线前进运动精子数,单位为个;6A.2精子活率测定A.2.1仪器、试剂2mL吸管、试管、试管架、水浴锅、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜或显微电视装置;5%伊红、1%A.2.2方法A.2.2.1染色将5%的伊红和1%苯胺黑按1:1混匀,分装于1mL~2mL容量的试管中,并在37℃水浴锅中加温,随后加入原精液1滴~3滴,混匀后再放回水浴锅中,3min后立A.2.2.2抹片A.2.2.3计数A.2.3计算精子活率按公式(A.3)计算:H=×100……………(A.3)A.3精子畸形率测定A.3.1仪器、试剂管架、过滤纸、漏斗架、漏斗、载玻片、盖玻片、1ml玻璃管、恒温箱;复红原液、95%的酒精、5%石A.3.2方法A.3.2.1试剂配制7A.3.2.1.3福尔马林-缓冲液制述缓冲液100mL加40%(V/V)福尔马林溶液62A.3.2.2头部畸形精子数A.3.2.2.1抹片按照GB20557-2006附录A.5.2.2.1的规定制作精液抹片,风干后浸入无水酒精中固定1min~2min,浸入0.5%氯胺T中1min~2min,用清水冲洗1min~2min,再迅速通过95%的酒精A.3.2.2.3染色放入复红染色液中10min~15min。清水中蘸2次。再迅速通过美蓝染色液,清水冲洗后A.3.2.2.4计数将制备好的抹片在显微镜油镜下随机观察200个以上的精子(分左、右两个区),计数头部子数取两个片区的平均值。两个片区变异系数<20%,若>20A.3.2.3尾部畸形精子数A.3.2.3.1将福尔马林-缓冲液注入1mL玻璃管,置37℃恒温箱中备用。A.3.2.3.3取一滴混匀后的精液置于载玻片上,加上盖玻片静置A.3.3计算精子畸形率按公式(A.4)计算:A=×100………(A.4)A——精子畸形率,%;8打开电脑,启动精子分析软件,在显示屏中选择测试参数,吸取一定量原精液和稀释液,按精子分析软件说明书的比例在试管将载玻片、盖玻片或

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