生物医药蛋白质分析工程师岗位考试试卷及答案_第1页
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文档简介

生物医药蛋白质分析工程师岗位考试试卷及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1.SDS主要用于分离()A.核酸B.蛋白质C.多糖D.脂类2.蛋白质定量常用的方法是()A.凯氏定氮法B.茚三酮反应C.双缩脲法D.以上都是3.等电聚焦电泳的原理是根据蛋白质的()A.分子大小B.电荷多少C.等电点不同D.亲和力4.下列哪种层析方法基于蛋白质电荷性质分离()A.凝胶过滤层析B.离子交换层析C.亲和层析D.疏水层析5.Westernblot检测的是()A.DNAB.RNAC.蛋白质D.小分子化合物6.Bradford法测定蛋白质浓度是利用蛋白质与()结合。A.考马斯亮蓝B.溴酚蓝C.甲基绿D.酚酞7.蛋白质的一级结构是指()A.氨基酸序列B.多肽链的折叠方式C.亚基的聚合方式D.以上都不对8.以下哪种仪器常用于蛋白质纯度分析()A.紫外可见分光光度计B.高效液相色谱仪C.原子吸收光谱仪D.气相色谱仪9.蛋白质在280nm波长处有特征吸收峰是因为含有()A.脯氨酸B.色氨酸C.丙氨酸D.甘氨酸10.二维电泳第一向是()A.等电聚焦电泳B.SDSC.琼脂糖凝胶电泳D.毛细管电泳二、多项选择题(每题2分,共20分)1.蛋白质分析常用的技术有()A.电泳B.层析C.质谱D.核磁共振2.以下属于蛋白质定量方法的有()A.福林酚法B.BCA法C.紫外吸收法D.凯氏定氮法3.影响蛋白质电泳迁移率的因素有()A.蛋白质的分子量B.蛋白质的电荷数C.电场强度D.缓冲液pH4.离子交换层析可选用的介质有()A.阴离子交换树脂B.阳离子交换树脂C.葡聚糖凝胶D.琼脂糖凝胶5.亲和层析常用的配体有()A.抗体B.抗原C.酶的底物D.辅酶6.质谱技术可用于分析蛋白质的()A.分子量B.氨基酸序列C.修饰位点D.空间结构7.蛋白质的二级结构包括()A.α-螺旋B.β-折叠C.无规卷曲D.β-转角8.凝胶过滤层析的特点有()A.按分子大小分离B.分辨率高C.可用于脱盐D.上样量不受限9.蛋白质结晶的方法有()A.气相扩散法B.坐滴法C.悬滴法D.透析法10.蛋白质分析中常用的缓冲液有()A.Tris-HClB.PBSC.甘氨酸缓冲液D.柠檬酸钠缓冲液三、判断题(每题2分,共20分)1.蛋白质的等电点是其净电荷为零时的溶液pH。()2.SDS中SDS使蛋白质带上负电荷,消除了电荷对迁移率的影响。()3.亲和层析特异性高,可一步纯化得到高纯度蛋白质。()4.蛋白质在260nm波长处有特征吸收峰。()5.凝胶过滤层析中,小分子物质先被洗脱下来。()6.等电聚焦电泳分辨率高,可分离等电点相差很小的蛋白质。()7.二维电泳可以同时分离上千种蛋白质。()8.质谱分析前蛋白质需要进行酶解。()9.蛋白质的空间结构只由一级结构决定。()10.蛋白质定量时,所有方法都不受样品中其他物质干扰。()四、简答题(每题5分,共20分)1.简述SDS的原理。SDS是一种变性剂,它能与蛋白质结合,使蛋白质带上大量负电荷,掩盖了蛋白质原有的电荷差异。在电场作用下,蛋白质-SDS复合物在聚丙烯酰胺凝胶中按分子大小进行分离,分子小的迁移快,分子大的迁移慢。2.说明离子交换层析的基本操作步骤。首先选择合适的离子交换介质,装柱平衡。将样品上样,使蛋白质与介质结合,然后用不同离子强度或pH的缓冲液进行洗脱,根据蛋白质与介质结合能力不同依次洗脱下来。3.简述蛋白质结晶的意义。蛋白质结晶有助于解析蛋白质的三维空间结构,了解其结构与功能的关系,为药物设计、蛋白质工程改造等提供重要依据,推动生物医药等领域的研究发展。4.列举两种蛋白质纯度鉴定的方法并简要说明。(1)SDS:若蛋白质样品在凝胶上呈现单一清晰条带,说明纯度较高。(2)高效液相色谱:根据色谱峰的数量判断,单一尖锐色谱峰表明纯度较好。五、讨论题(每题5分,共20分)1.讨论蛋白质分析技术在生物医药研发中的应用及发展趋势。在生物医药研发中,蛋白质分析技术用于药物靶点发现、药物筛选、蛋白质药物质量控制等。如质谱技术可鉴定蛋白质的组成和修饰。未来趋势是技术更精准、快速、高通量,多技术联用,如质谱与色谱联用,更好满足生物医药发展需求。2.当蛋白质样品在电泳中出现条带模糊或拖尾现象,可能的原因有哪些及如何解决?原因可能是样品浓度过高、缓冲液pH不合适、凝胶不均匀、有杂质等。解决方法:适当稀释样品;检查缓冲液,确保pH准确;重新制备均匀凝胶;对样品进行预处理去除杂质等。3.结合实际,谈谈如何选择合适的蛋白质分离纯化方法。需考虑蛋白质的性质,如分子量大小、电荷性质、等电点、稳定性等,以及样品来源、纯度要求、实验规模等。小分子可选用凝胶过滤;带电荷差异大的用离子交换;对特异性要求高的选亲和层析等。4.蛋白质分析工程师在项目中如何与其他部门有效沟通协作?与研发部门沟通了解实验目的和对蛋白质分析的要求;与生产部门交流,确保分析方法适用于生产规模;和质量控制部门协作,制定蛋白质质量标准。及时反馈分析结果,共同解决问题,推动项目顺利进行。答案一、单项选择题1.B2.D3.C4.B5.C6.A7

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