2024年高二生物教材实验大盘点:DNA的粗提取与鉴定(人教版选择性必修3)解析版_第1页
2024年高二生物教材实验大盘点:DNA的粗提取与鉴定(人教版选择性必修3)解析版_第2页
2024年高二生物教材实验大盘点:DNA的粗提取与鉴定(人教版选择性必修3)解析版_第3页
2024年高二生物教材实验大盘点:DNA的粗提取与鉴定(人教版选择性必修3)解析版_第4页
2024年高二生物教材实验大盘点:DNA的粗提取与鉴定(人教版选择性必修3)解析版_第5页
已阅读5页,还剩11页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

专题05DNA的粗提取与鉴定

目录导航

01实验梳理

02考点透析

03真题赏析

04巩固训练

一、实验原理

1.提取DNA的原理

利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。

如:(l)DNA在酒精溶液中的溶解性:DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精。

⑵DNA在NaCl溶液中的溶解性:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,它能溶于2mol/L

的NaCl溶液。

2.鉴定DNA的原理

在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

二、方法步骤

1.称取约30g洋葱,切碎,然后放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨。

2.去除滤液中的杂质

在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在4℃冰箱中

方案一

放置几分钟后,再取上清液

直接将研磨液倒入塑料离心管中,在1500r/min的转速下离心5

方案二

min,再取上清液

3.DNA的析出

在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%),

方案一静置2〜3min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA;用

玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分

将溶液倒入塑料离心管中,在10000r/min的转速下离心5min,

方案二

弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干

4.DNA的鉴定

取两支20mL的试管,各加入2mol/L的NaCl溶液5mLo将丝状物或沉淀物溶于其中一支试

管的NaCl溶液中,再向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水

中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化。

三、操作提示

1.以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。

2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DM分子不能

形成絮状沉淀。

四、关键点拨

1.利用动物细胞提取DNA时,破碎细胞的方法:动物细胞无细胞壁,可直接使其吸水涨破。

2.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。

3.提纯DNA时,选用体积分数为95%的冷酒精的原因:体积分数为95%的冷酒精提纯效果更佳。

DNA的粗提取与鉴定实验成功关键点

(1)本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞

核[无DNA),可选用鸡血细胞作材料。

⑵二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。

⑶提取植物细胞的DNA,在研磨时加入NaCl的目的是溶解DNA。

⑷在DNA进一步提纯时,选用预冷的体积分数为95%的酒精的作用是溶解杂质和析出DNAo

1.(2023•广东•统考高考真题)“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是:裂解一分离一沉

淀一鉴定。下列叙述错送的是()

A.裂解:使细胞破裂释放出DNA等物质

B.分离:可去除混合物中的多糖、蛋白质等

C.沉淀:可反复多次以提高DNA的纯度

D.鉴定:加入二苯胺试剂后即呈现蓝色

【答案】D

【分析】DNA粗提取和鉴定的原理:

1、DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在

0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低);DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

3、DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、裂解是加蒸镭水让细胞吸水涨破,释放出境人等物质,A正确;

B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,能溶于2mol/L的NaCl溶液,将溶液过滤,

即可将混合物中的多糖、蛋白质等与DNA分离,B正确;

C、DNA不溶于酒精,而某些蛋白质溶于酒精,可以反复多次用酒精沉淀出DNA,提高DNA纯度,

C正确;

D、将DNA溶解于NaCl,加入二苯胺试剂,沸水浴五分钟,待冷却后,能呈现蓝色,D错误。

故选D。

2.(2023•江苏•统考高考真题)某生物社团利用洋葱进行实验。下列相关叙述正确的是()

A.洋葱鳞片叶内表皮可代替半透膜探窕质膜的透性

B.洋葱匀浆中加入新配制的斐林试剂,溶液即呈砖红色

C.制作根尖有丝分裂装片时,解离、漂洗、按压盖玻片都能更好地将细胞分散开

D.粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中,加入二去胺试剂后显蓝色

【答案】A

【分析】观察细胞有丝分裂实验的步骤:解离(解离液由盐酸和酒精组成,目的是使细胞分散

开来)、漂洗(洗去解离液,便于染色)、染色(用龙胆蔻、醋酸洋红等碱性染料)、制片(该

过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层,使之不相互重叠影响观察)和观察(先低倍镜观察,

后高倍镜观察)。

【详解】A、洋葱鳞片叶内表皮的原生质层具有选择透过性,可代替半透膜探究质膜的透性,A

正确;

B、洋葱匀浆中加入新配制的斐林试剂,需要水浴加热才可能出现砖红色沉淀,若出现砖红色,

则可说明洋葱匀浆中含有还原糖,B错误:

C、制作根尖有丝分裂装片时,解离、按压盖玻片得目的都是为了获得单层细胞,即这些操作

均能更好地将细胞分散开,C错误:

D、粗提取的DNA溶于2moi/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂后经过水浴加热可显蓝色,D错

误。

故选Ao

3.(2022•湖北•统考高考真题)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙

述正确的是()

A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行

B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白陈培养基进行灭菌

D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

【答案】D

【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽狗和抱子的过程称为灭菌,

常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死

物体体表或内部的一部分微生物的过程。

【详解】A、动、植物细胞DV\的提取不需要在无菌条件下进行,A错误;

B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保证无菌环境,而微生物的培养不

能加入抗生素,B错误;

C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白月东培养基进行灭菌,以防止杂菌污染,C错误;

D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌,以防止杂菌污染,

D正确。

故选D。

4.(2022•山东•高考真题)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是':)

A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解

B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀

C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色

D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质

【答案】B

【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是:①DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不

同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同,利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶

解或析出,从而达到分离的目的;②DNA不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒

精,利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离;③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现

蓝色。

【详解】A、低温时DNA酶的活性较低,过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降

解,A正确:

B、离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀,B错误;

C、在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色,C正确;

D、细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,可能有蛋白质不溶于酒精,在95%的冷酒精中与DNA

一块儿析出,故粗提取的DNA中可能含有蛋白质,D正确。

故选Bo

5.(2021•天津•统考高考真题)孟德尔说:“任何实验的价值和效用,取决于所使用材料对

于实验目的的适合性。”下列实验材料选择不适合的是()

A.用洋葱鳞片叶表皮观察细胞的质壁分离和复原现象

B.用洋葱根尖分生区观察细胞有丝分裂

C.用洋葱鳞片叶提取和分离叶绿体中的色素

D.用洋葱鳞片叶粗提取DXA

【答案】C

【分析】洋葱是比较好的实验材料:

①洋葱根尖分生区细胞观察植物细胞的有丝分裂;

②洋葱鳞片叶外表皮细胞,色素含量较多,用于观察质壁分离和复原;

③洋葱的绿叶做叶绿体中色素的提取和分离实验,叶肉细胞做细胞质流动实验。

④洋葱的内表皮细胞颜色浅、由单层细胞构成,适合观察DNA、RNA在细胞中的分布状况。

【详解】A、洋葱鳞片叶外表皮细胞的液泡为紫色,便于观察细胞的质壁分离和复原现象,A

正确;

B、洋葱根尖分生区细胞分裂旺盛,可以用来观察细胞有丝分裂,B正确;

C、洋葱鳞片叶不含叶绿体,不能用来提取和分离叶绿体中的色素,C错误;

D、洋葱鳞片叶细胞有细胞核且颜色浅,可以用来粗提取DNA,D正确。

故选Co

6.(2021•北京•统考高考真题)关于物质提取、分离或鉴定的高中生物学相关实验,叙述错

误的是()

A.研磨肝脏以破碎细胞用于获取含过氧化氢酶的粗提液

B.利用不同物质在酒精溶液中溶解性的差异粗提DNA

C.依据吸收光谱的差异对光合色素进行纸层析分离

D.利用与双缩赧试剂发生颜色变化的反应来鉴定蛋白质

【答案】C

【分析】绿叶中色素的提取和分离实验,提取色素时需要加入无水乙醇(溶解色素)、石英砂

(使研磨更充分)和碳酸钙(防止色素被破坏);分离色素时采用纸层析法,原理是色素在层

析液中的溶解度不同,随着层析液扩散的速度不同,最后的结果是观察到四条色素带,从上到

下依次是胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。

【详解】A、肝脏细胞中存在过氧化氢酶,故需要破碎细胞制成肝脏研磨液来获得过氧化氢酶

的殂提液,A正确;

B、不同物质在酒精溶液中的溶解度不同,故可粗提取供A,B正确;

C、依据光合色素在层析液中的溶解度不同,对光合色素进行纸层析分离,C错误;

D、蛋白质与双缩麻试剂会发生紫色反应,可以利用与双缩胭试剂发生颜色变化的反应来鉴定

蛋白质,D正确。

故选C。

7.(2021•山东-统考高考真题)粗提取DNA时,向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馅水并搅

拌,过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤,在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出

DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是()

A.加入适量的木瓜蛋白酶

B.37〜40℃的水浴箱中保温10〜15分钟

C.加入与滤液体积相等的、体积分数为95%的冷却的酒精

D.加入NaCl调节浓度至2mol/Lf过滤一调节滤液中NaCl浓度至0.14mol/L

【答案】A

【分析】DNA粗提取和鉴定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度

NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于泗精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于泗精;DNA对酶、

高温和洗涤剂的耐受性。(2)DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白质类杂质,由于酶具有专一性,不能水解DNA,

过滤后在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA相对含量较高的白色丝状物,A正确;

B、37〜40℃的水浴箱中保温10-15分钟不能去除滤液中的杂质,应该放在60~75℃的水浴

箱中保温10〜15分钟,使蛋白质变性析出,B错误;

C、向鸡血细胞液中加入一定量的蒸储水并搅拌,过滤后在得到的滤液中加入与滤液体积相等

的、体积分数为95%的冷却的酒精,此时DNA析出,不会进入滤液中,C错误;

D、加入NaCl调节浓度至2nol/Lf过滤一调节滤液中NaCl浓度至0.14mol/L,DNA在

0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度小,DNA析出,不会进入滤液中,D错误。

故选A。

8.(2014•江苏・高考真题)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是

A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料

B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸福水

C.向鸡血细胞液中加蒸储水搅拌,可见玻璃棒上有白色絮状物

D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝

【答案】C

【详解】A、酵母菌和菜花含有DNA,可作为提取DNA的材料,A正确;

B、DNA溶于2moi/L的NaCl溶液,也可溶于蒸储水,BZE确;

C、向鸡血细胞液中加蒸储水搅拌,鸡血细胞吸水涨破,获得鸡血细胞液,DMA溶于蒸储水,

观察不到白色絮状物,C错误;

D、DNA与一聚胺沸水浴加热呈蓝色,D正确。

故选Co

X

1.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()

A.用蒸储水使家兔的红细胞涨破,可获取富含DNA的滤液

B.植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破,释放DNA

C.DNA不溶于95%的冷酒精,但可溶于2moi/L的NaCl溶液

D.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴

【答案】C

【分析】1、DNA的溶解性:

(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最

低),利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以

达到分离目的;

⑵DNA不溶于泗精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA

与蛋白质进一步的分离。

2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响;大多数

蛋白质不能忍受60-80C的高温,而DNA在80℃以上才会变性;洗涤剂能够瓦解细胞膜,但

对DNA没有影响。

3、DNA的鉴定:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA

的试剂。

【详解】A、兔属于哺乳动物,哺乳动物成熟红细胞中没有细胞核,不能用于DNA的粗提取,A

错误;

B、洗涤剂是去掉植物材料的细胞膜,不是细胞壁,B错误;

C、DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液,而溶于2mol/L的NaCl溶液,C正确;

D、将丝状物溶于21noi/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂,沸水浴冷却后呈蓝色,D错误。

故选C。

2.下列有关生物学实验的叙述正确的是()

A.将粗提取出的DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝

B.在紫色洋葱鳞片叶外表皮的不同部位观察到的质壁分离程度可能不同

C.用显微镜观察洋葱根尖装片时,需保持细胞活性以观察有丝分裂过程

D.检测酵母菌细胞呼吸产物时,加入酸性重倍酸钾溶液出现灰绿色,说明一定有酒精产生

【答案】B

【分析】1、植物细胞质壁分离和复原的条件有:①必须是活细胞;②细胞液与外界溶液必须

有浓度差;③植物细胞必须有大的液泡(成熟的植物细胞),旦液泡最好有颜色便于观察。

2、DNA粗提取和鉴定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋臼质等其他成分在不同浓度NaCl

溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。(2)DNA的鉴定:

在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、将组织中提取的DNA丝状物溶解于2mol/L的氯化钠溶液中,与二苯胺试剂混合,

沸水浴后冷却变蓝,不能直接放入二苯胺试剂中,A错误;

B、紫色洋葱鳞片叶外表皮不同部位细胞的细胞液的浓度可能不同,因此用紫色洋葱鳞片叶外

表皮不同部位观察到的质壁分离程度可能不同,B正确;

C、在观察植物细胞有丝分裂实验过程中,解离步骤时细胞已经被杀死,C错误;

D、由于酒精和葡萄糖都能与酸性重锯酸钾溶液发生相同颜色反应,所以向A瓶的滤液中加入

酸性重倍酸钾溶液,溶液若变为灰绿色,还不能说明一定有酒精产生,D错误。

故选Bo

3.关于“DNA的粗提取及鉴定”实验的叙述,错误的是()

A.初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精

B.鉴定提取物中有DNA的原理是在常温下,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色

C.在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA

D.往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA

【答案】B

【分析】DNA的溶解性:DMA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不

溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

【详解】A、初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精,A正确;

B、鉴定提取物中有DNA的原理是在水浴加热条件下,I^A遇二苯胺试剂呈蓝色,B错误;

C、在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA,C正确;

D、往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA,D正确。

故选B。

4.某实验小组进行“DNA的粗提取与鉴定”实验。下列有关叙述正确的是()

A.取材时可选用鸡血、洋葱、菜花等富含DNA的材料进行实验

B.破碎植物细胞时,加入洗涤剂以加速细胞壁瓦解

C.DNA的释放和溶解是实验成功与否的关键,调节NaCl溶液浓度利于DNA释放

D.鉴定时,需将DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中,再加入二苯胺试剂即可出现蓝色

【答案】A

【分析】DNA粗提取和鉴定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋臼质等其他成分在不同浓度

NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精;DNA对酶、

高温和洗涤剂的耐受性。(2)DNA的鉴定:在沸水浴的袋件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、鸡血、洋葱、菜花等材料富含DNA,可以用来进行“DNA的粗提取与鉴定”实验,

A正确;

B、破碎植物细胞时,加入洗涤剂以加速细胞膜瓦解,B错误:

C、用蒸馀水处理动物细胞即可促进细胞破裂,释放内容物,有利于DNA的释放:调节NaCl溶

液浓度利于DNA的溶解或析出,C错误;

D、用二苯胺试剂鉴定提取的DNA时,沸水浴加热冷却后会出现蓝色,D错误。

故选Ao

5.下图表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程,下列叙述错误的是()

①取材f②破碎细胞f③获得滤液f④去除杂质f⑤进一步提纯f⑥DNA鉴定

A.本实验使用的酒精的浓度与“低温诱导植物细胞臭色体数目的变化”实验中的相同

B.步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料

C.步骤①中可以使用纱布对研磨液进行过滤,并获取上清液

D.步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5min后即可呈现蓝色

【答案】D

【分析】DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些差异,选

用适当的物理或化学方法对它们进行提取。DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精;DNA在

不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2moi/L的NaCl溶液;在一定温度下,DNA遇

二苯胺试剂会呈蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】A、本实验和“低温诱导植物细胞染色体数目的变化”实验所用的酒精浓度相同,都

是体积分数为95%的酒精,A正确;

B、猪的肝细胞中含有DNA,所以,步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料,B正确;

C、步骤①中可以使用纱布对研磨液进行过滤,并获取上清液,C正确:

D、步骤⑥中DNA鉴定时向试管中加入二苯胺试剂后,应将试管置于沸水中加热5min,待试

管冷却后可观察到蓝色,D错误。

故选Do

6.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,下列

相关叙述中,正确的是()

体积分数z蒸储水

95%的酒精

鸡血」

细胞液锂

(4)

A.该实验的正确操作顺序是③一①一②一④一⑤

B.用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近

C.⑤表示要鉴定步骤①中所得到的白色丝状物主要成分为DNA,可使用二苯胺试剂来鉴定,

沸水浴冷却后,出现蓝色的试管组别是对照组

D.步骤①的目的是初步分离DNA与蛋白质,析出并获得DNA;步骤④中在2mol/L的NaCl

溶液中,DNA的溶解度较大

【答案】D

【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理是:

(l)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。

(2)DNA不溶于泗精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶液酒精。

(3)DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

(4)DNA的鉴定:在沸水浴条件下,DNA遇一苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、DNA的粗提取和鉴定步骤是:加入蒸偏水,破碎细胞f过滤,获取含DNA的滤液

一去除滤液中杂质fDNA的析出一鉴定,因此图中表示正确的实验操作顺序是③一②一①一④

->⑤,A错误;

B、猪血红细胞中没有细胞核,提取不到DNA,用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA

量不相同,B错误;

C、⑤表示要鉴定步骤①中所得到的白色丝状物主要成分为DNA,可使用二苯胺试剂来鉴定,

沸水浴冷却后,出现蓝色的试管组别是实验组,C错误;

D、步骤①的目的是析出并获得DNA,步骤④中在2moi/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度较大,

D正确。

故选Do

7.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是()

A.羊的成熟红细胞可作为提取DNA的材料

B.提取植物细胞的DNA时,需要加入一定量食盐

C.预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性,防止DNA水解

D.在沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色

【答案】A

【分析】1、DNA粗提取与鉴定的原理

(DDNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最低),

利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分

离日的;

(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理,可以将DNA

与蛋白质进一步的分离;

2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数

蛋白质不能忍受60-80C的高温,而DNA在80C以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对

DNA没有影响;

3、DNA的鉴定:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA

的试剂。

【详解】A、羊的成熟红细胞没有细胞核,因此不可作为提取DNA的材料,A错误;

B、提取植物细胞的DNA时,需要加入一定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,

而食盐的作用是提高DNA的溶解度,B正确:

C、预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性,防止DNA水解,同时根据蛋白质溶于酒精,而DNA

不溶于酒精的特性将其析出,C正确;

D、在沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色,据此鉴定DNA的存在,D正确。

故选A。

8.下列关于“DNA粗提取”的相关操作,错误的是()

A.应选用DNA含量相对较高的材料,如鸡血、洋葱、菜花、杳蕉、菠菜

B.可利用DNA和蛋白质在不同浓度NaCl溶液中溶解度的不同,将两者分开

C.研磨材料得到的滤液应在4c冰箱中静置或离心,取沉淀进行后续操作

D.向经酒精处理得到的白色丝状物中加入蛋白酶,可提高DNA的相对含量

【答案】C

【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理:DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精,利用这一原

理,可以初步分离DNA和蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2的

NaCl溶液中。在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

【详解】A、鸡血、洋葱、菜花、香蕉、菠菜等材料中I^A含量较高,可作为该实验材料,A

正确;

B、在不同浓度的NaCl溶液中,DNA和蛋白质的溶解度不同,如DNA可溶于2mol/LNaCl溶液

中,蛋白质则不能,B正确;

C、为防止DNA断裂,应将研磨液在4℃冰箱中静置或离心,但要取滤液进行后续操作,C错误;

D、经酒精处理得到的白色丝状物中含有一定的蛋白质杂质,可加入蛋白酶,去除蛋白质杂质,

提高DNA的相对含量,D正确。

故选Co

9.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是()

A.新鲜的洋葱、菜花、香蕉、猪肝等可作为提取DNA的材料

B.DNA析出过程中,搅拌操作要轻柔并沿一个方向搅拌以防DNA断裂

C.预冷的酒精溶液可用来进一步纯化粗提取的DNA

D.将白色丝状物溶于2moi/L的NaCl溶液后加入二芸胺试剂,混匀后呈蓝色

【答案】D

【分析】DNA粗提取和鉴定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度

NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于泗精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。(2)DNA的

鉴定:在沸水浴的条件下,DM遇一苯胺会被染成蓝色。

【详解】A、新鲜的洋葱、菜花、香蕉、猪肝等都含有DNA,能够作为提取DNA的材料,A正确;

B、DNA分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌,DNA

链可能会被破坏,因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的DNA分子,B正确;

C、在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的沉淀量最大,可用来进一步纯化粗提取的

DNA,C正确;

D、将白色丝状物溶于2moi/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺试剂,混匀后,在沸水浴条件下,

呈蓝色,D错误。

故选Do

10.叶绿体DNA(cpDNA)大多为环状双链,其基因组序列高度保守,目前已在分子标记、核

质互作、叶绿体基因工程等方面开展了广泛研窕。下列为提取cpDNA的相关步骤。其中,SDS

使膜瓦解,苯酚使蛋白质变性析出,氯仿与苯酚互溶,易于除去苯酚。

⑴叶绿体的分离:①匀浆使细胞破碎:将叶片于4℃冰箱黑暗饥饿处理12~24h后,剪成1cm

长度,放入匀浆机,倒入缓冲液,先低速匀浆2次,再高速匀浆3次,每次5〜10s。匀浆前黑

暗饥饿处理的目的是,有利于cpDNA的提取。②离心得到叶绿体粗提物:将匀浆液过

滤后离心,弃沉淀去除细胞残骸;将得到的上清液再次离心,弃上清,即得叶绿体粗提物,第

二次离心的速度比第一次o此过程中,线粒体分布在中,从而避免了线粒体

DNA对cpDNA的污染。

⑵去除核DNA:向叶绿体粗提物中加入、缓冲液,37℃静置15min后,离心取沉淀,

从而去除吸附在叶绿体外膜上的核DNA.

⑶叶绿体的裂解和cpDNA的殂提:将纯化的叶绿体加入缓冲液、SDS、蛋白酶K,55C水浴3h,

使叶绿体裂解,释放出cpDNA,离心取上清液。在上清液中加入苯酚和氯仿,离心后的液体包

括上层水相、中层变性蛋白和下层有机溶剂,cpDNA分布于中,小心用移液枪吸取该

层液体。

⑷获得cpDNA:向粗提溶液中加入3moi.I?醋酸钠及预冷的,离心取。

⑸电泳检测cpDNA:图1、2是某品种茶树用上述方法提取到的cpDNA凝胶电泳结果,其中M

是—。2组无条带,表明提取不成功,其可能的原因之一是操作过程中叶绿体裂解时间过长,

导致—o

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论