农产品食品检验员中级微生物检测考试题及操作规程

农产品食品检验员中级微生物检测考试题及操作规程一、单项选择题（共20题，每题1分，总计20分）1.在农产品食品微生物检测中，用于稀释和培养样品的培养基通常是（）。A.血清培养基B.选择性培养基C.基础培养基D.储存培养基2.计数食品中细菌总数时，最常用的培养基是（）。A.麦康凯琼脂B.营养琼脂C.碱性蛋白胨水D.三糖铁琼脂3.在平板计数法中，为避免菌落过度生长，每皿接种的菌液稀释倍数通常控制在（）。A.10⁻²～10⁻⁴B.10⁻³～10⁻⁵C.10⁻⁴～10⁻⁶D.10⁻¹～10⁻³4.检测食品中沙门氏菌时，常用的前增菌步骤是（）。A.45℃培养18小时B.37℃培养6小时C.30℃培养24小时D.56℃水浴10分钟5.菌落计数时，若平板上菌落数在30～300之间，应选择（）。A.10⁻²稀释液B.10⁻³稀释液C.10⁻⁴稀释液D.10⁻¹稀释液6.检测李斯特菌时，样品前处理通常包括（）。A.煮沸30分钟B.80℃加热1分钟C.121℃高压灭菌15分钟D.50℃水浴30分钟7.食品中酵母菌和霉菌的计数通常采用（）。A.MPN法B.平板计数法C.显微镜直接计数法D.液体培养基计数法8.在进行大肠菌群检测时，选择伊红美蓝（EMB）琼脂的目的是（）。A.增强抑菌效果B.促进细菌生长C.鉴别大肠菌群D.防止杂菌污染9.检测金黄色葡萄球菌时，常用（）。A.沙氏培养基B.血清培养基C.高盐碱性蛋白胨水D.麦康凯琼脂10.培养厌氧菌时，常用的设备是（）。A.恒温培养箱B.厌氧培养罐C.灭菌锅D.显微镜11.计数饮料中酵母菌时，通常使用（）。A.琼脂培养基B.蛋白胨水C.蔗糖蛋白胨琼脂D.碱性蛋白胨水12.检测食品中致病性大肠杆菌时，常用的培养基是（）。A.营养琼脂B.伊红美蓝琼脂C.沙氏培养基D.麦康凯琼脂13.在平板计数法中，若菌落过于密集，应（）。A.增加稀释倍数B.减少稀释倍数C.增加接种量D.延长培养时间14.检测沙门氏菌时，常用的生化试验包括（）。A.动力试验B.凝固酶试验C.硫化氢试验D.以上都是15.计数水果蔬菜表面微生物时，通常采用（）。A.表面消毒法B.研磨法C.涂抹法D.灭菌法16.在进行霉菌计数时，常用的培养基是（）。A.麦康凯琼脂B.营养琼脂C.霉菌计数琼脂D.血清培养基17.检测食品中蜡样芽孢杆菌时，常用的培养基是（）。A.营养琼脂B.沙氏培养基C.麦康凯琼脂D.碱性蛋白胨水18.在平板计数法中，若菌落出现拖尾现象，可能是由于（）。A.稀释倍数过高B.培养基不均匀C.污染D.培养时间过长19.检测李斯特菌时，样品的冷藏条件通常为（）。A.4℃B.-20℃C.25℃D.37℃20.在进行MPN法计数时，常用的稀释液是（）。A.蒸馏水B.无菌生理盐水C.蛋白胨水D.血清培养基二、多项选择题（共10题，每题2分，总计20分）1.食品微生物检测中，常用的培养基包括（）。A.营养琼脂B.麦康凯琼脂C.沙氏培养基D.伊红美蓝琼脂E.碱性蛋白胨水2.检测沙门氏菌时，常用的前增菌方法包括（）。A.37℃培养6小时B.44℃培养18小时C.40℃培养24小时D.45℃培养8小时E.50℃加热30分钟3.在进行平板计数法时，需要注意的事项包括（）。A.接种量要均匀B.培养基要平整C.稀释倍数要合适D.培养温度要准确E.避免污染4.检测食品中酵母菌和霉菌时，常用的方法包括（）。A.平板计数法B.显微镜直接计数法C.MPN法D.霉菌计数琼脂E.碱性蛋白胨水5.食品中常见的致病菌包括（）。A.沙门氏菌B.金黄色葡萄球菌C.李斯特菌D.大肠菌群E.蜡样芽孢杆菌6.在进行厌氧菌培养时，需要注意的事项包括（）。A.使用厌氧培养罐B.避免氧气进入C.使用低盐培养基D.培养温度要控制在35℃E.培养时间要延长7.检测食品中大肠菌群时，常用的培养基包括（）。A.营养琼脂B.伊红美蓝琼脂C.麦康凯琼脂D.碱性蛋白胨水E.三糖铁琼脂8.在进行霉菌计数时，需要注意的事项包括（）。A.培养基要含高糖B.培养温度要控制在25℃C.培养时间要延长D.避免杂菌污染E.使用霉菌计数琼脂9.检测李斯特菌时，样品的保存条件通常为（）。A.4℃冷藏B.-20℃冷冻C.室温保存D.37℃培养E.45℃加热10.在进行微生物检测时，常用的设备包括（）。A.恒温培养箱B.灭菌锅C.显微镜D.厌氧培养罐E.移液器三、判断题（共10题，每题1分，总计10分）1.平板计数法适用于所有食品微生物的计数。（×）2.沙门氏菌检测时，前增菌步骤必须使用碱性蛋白胨水。（√）3.霉菌计数时，若菌落过于密集，应增加接种量。（×）4.大肠菌群检测时，MPN法比平板计数法更准确。（√）5.厌氧菌培养时，可以使用普通培养箱。（×）6.检测金黄色葡萄球菌时，凝固酶试验是必做项目。（√）7.食品中酵母菌和霉菌的计数通常使用麦康凯琼脂。（×）8.检测李斯特菌时，样品必须冷藏保存。（√）9.在进行平板计数法时，每皿菌落数应在30～300之间。（√）10.检测沙门氏菌时，生化试验包括动力试验和硫化氢试验。（√）四、简答题（共5题，每题4分，总计20分）1.简述平板计数法的操作步骤。答：平板计数法的操作步骤包括：样品稀释、涂布平板、培养、计数、计算。具体步骤为：（1）将样品用无菌生理盐水稀释至适当倍数；（2）取一定量的稀释液涂布在营养琼脂平板上；（3）将平板倒置放入37℃恒温培养箱中培养24～48小时；（4）计数平板上的菌落数，计算每克样品的菌落数。2.检测沙门氏菌时，前增菌的目的是什么？答：前增菌的目的是提高沙门氏菌在样品中的浓度，使其在后续培养中更容易检出。通常使用碱性蛋白胨水或缓冲蛋白胨水进行前增菌，培养温度为37℃，时间6～8小时。3.检测食品中酵母菌和霉菌时，常用的培养基是什么？答：检测食品中酵母菌和霉菌时，常用的培养基包括：（1）酵母菌计数琼脂（YMA）；（2）霉菌计数琼脂（MMA）；（3）沙氏培养基（用于酵母菌）。4.简述MPN法的原理。答：MPN法（最可能数法）是一种用于估计样品中微生物数量的方法。其原理是：将样品分成若干组，分别接种到不同稀释倍数的液体培养基中，培养后计算每组中的阳性管数，再根据概率理论推算样品中的微生物数量。5.检测李斯特菌时，样品的保存条件是什么？答：检测李斯特菌时，样品必须冷藏保存（4℃），因为李斯特菌在低温环境下仍能生长。样品保存时间不宜超过24小时，以避免细菌死亡。五、操作规程题（共5题，每题10分，总计50分）1.操作规程：平板计数法检测食品中细菌总数步骤：（1）将样品用无菌生理盐水稀释至10⁻¹、10⁻²、10⁻³等倍数；（2）取0.1mL稀释液涂布在营养琼脂平板上；（3）将平板倒置放入37℃恒温培养箱中培养24～48小时；（4）计数平板上的菌落数，计算每克样品的菌落数（cfu/g）。2.操作规程：检测食品中沙门氏菌步骤：（1）取25g样品加入225mL碱性蛋白胨水中，均质；（2）取10mL前增菌液接种到三糖铁琼脂（TSI）和麦康凯琼脂平板上；（3）37℃培养6小时后，挑选可疑菌落进行生化试验；（4）阳性菌株进行血清学鉴定。3.操作规程：检测食品中酵母菌和霉菌步骤：（1）将样品用无菌生理盐水稀释至适当倍数；（2）取0.1mL稀释液涂布在霉菌计数琼脂（MMA）平板上；（3）25℃培养48～72小时；（4）计数平板上的酵母菌和霉菌菌落数，计算每克样品的菌落数（cfu/g）。4.操作规程：检测食品中李斯特菌步骤：（1）取25g样品加入225mL胰酪大豆胨液体培养基（TSB），44℃培养24小时；（2）取1mL培养液接种到选择性培养基（如LST琼脂）；（3）36℃培养24～48小时；（4）挑选可疑菌落进行生化试验和血清学鉴定。5.操作规程：检测食品中金黄色葡萄球菌步骤：（1）取25g样品加入225mL高盐中性蛋白胨水，35℃培养6小时；（2）取1mL培养液接种到血平板和凝固酶试验管；（3）35℃培养18～24小时；（4）挑取可疑菌落进行凝固酶试验和生化鉴定。答案及解析一、单项选择题答案及解析1.C解析：基础培养基是微生物生长的基础，用于培养大多数细菌。选择性培养基用于分离特定细菌，如麦康凯琼脂用于分离大肠菌群。储存培养基用于长期保存菌种。2.B解析：营养琼脂是通用培养基，适用于大多数细菌的计数。麦康凯琼脂用于分离大肠菌群，碱性蛋白胨水用于增菌，三糖铁琼脂用于鉴别。3.C解析：平板计数法要求每皿菌落数在30～300之间，过高或过低都会影响计数准确性。10⁻⁴～10⁻⁶的稀释倍数通常能满足要求。4.B解析：沙门氏菌的前增菌通常在37℃培养6小时，以增加细菌浓度。其他温度和时间组合均不适用于前增菌。5.B解析：平板计数法要求每皿菌落数在30～300之间，10⁻³稀释液通常能满足要求。6.D解析：李斯特菌在低温环境下仍能生长，因此样品必须冷藏保存（4℃）以抑制其他细菌生长。7.B解析：平板计数法适用于酵母菌和霉菌的计数。MPN法用于液体样品，显微镜直接计数法适用于快速检测。8.C解析：伊红美蓝琼脂用于鉴别大肠菌群，其颜色反应可以区分大肠菌群和其他细菌。9.C解析：金黄色葡萄球菌在高盐碱性蛋白胨水中生长良好，因此常用该培养基进行检测。10.B解析：厌氧菌培养需要隔绝氧气，厌氧培养罐是常用设备。恒温培养箱用于常规培养，灭菌锅用于灭菌，显微镜用于观察。11.C解析：饮料中酵母菌计数常用蔗糖蛋白胨琼脂，以促进酵母菌生长。12.D解析：麦康凯琼脂是选择性培养基，用于分离和鉴定大肠菌群及其肠杆菌科细菌。13.A解析：若菌落过于密集，应增加稀释倍数，以减少每皿菌落数。14.D解析：沙门氏菌的生化试验包括动力试验、硫化氢试验、凝固酶试验等。15.B解析：水果蔬菜表面微生物检测常用研磨法，以充分释放微生物。16.C解析：霉菌计数琼脂是选择性培养基，用于分离和计数霉菌。17.A解析：蜡样芽孢杆菌在营养琼脂上生长良好，因此常用该培养基进行检测。18.B解析：菌落拖尾现象可能是由于培养基不均匀，导致接种区域菌液浓度过高。19.A解析：李斯特菌在4℃环境下仍能生长，因此样品必须冷藏保存。20.B解析：MPN法通常使用无菌生理盐水作为稀释液。二、多项选择题答案及解析1.ABCDE解析：营养琼脂、麦康凯琼脂、沙氏培养基、伊红美蓝琼脂、碱性蛋白胨水都是常用的微生物培养基。2.ABCD解析：沙门氏菌的前增菌方法包括37℃培养6小时、44℃培养18小时、40℃培养24小时、45℃培养8小时。50℃加热30分钟不属于前增菌方法。3.ABCDE解析：平板计数法需要注意接种量、培养基平整度、稀释倍数、培养温度和避免污染。4.ABDE解析：酵母菌和霉菌计数常用平板计数法、显微镜直接计数法、霉菌计数琼脂、碱性蛋白胨水。MPN法不适用于霉菌计数。5.ABCDE解析：沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌、大肠菌群、蜡样芽孢杆菌都是食品中常见的致病菌。6.ABDE解析：厌氧菌培养需要使用厌氧培养罐、避免氧气进入、低盐培养基、35℃培养、延长培养时间。7.BCE解析：检测大肠菌群时，常用的培养基包括麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、碱性蛋白胨水。营养琼脂和三糖铁琼脂不用于大肠菌群检测。8.ABCDE解析：霉菌计数时需要注意培养基含高糖、25℃培养、延长培养时间、避免杂菌污染、使用霉菌计数琼脂。9.AB解析：李斯特菌在4℃和-20℃环境下均能存活，但4℃冷藏更适合快速检测。室温保存和37℃培养均不适用于李斯特菌。10.ABCDE解析：微生物检测常用的设备包括恒温培养箱、灭菌锅、显微镜、厌氧培养罐、移液器。三、判断题答案及解析1.×解析：平板计数法不适用于所有微生物，如厌氧菌和孢子。2.√解析：沙门氏菌检测时，前增菌步骤必须使用碱性蛋白胨水，以增加细菌浓度。3.×解析：霉菌计数时，若菌落过于密集，应增加稀释倍数，而不是增加接种量。4.√解析：MPN法适用于液体样品，且可以排除干扰，比平板计数法更准确。5.×解析：厌氧菌培养必须使用厌氧培养罐，普通培养箱无法提供无氧环境。6.√解析：凝固酶试验是金黄色葡萄球菌的必做项目，用于初步鉴定。7.×解析：酵母菌和霉菌计数常用霉菌计数琼脂或沙氏培养基，麦康凯琼脂用于分离大肠菌群。8.√解析：李斯特菌在4℃环境下仍能生长，因此样品必须冷藏保存。9.√解析：平板计数法要求每皿菌落数在30～300之间，以保证计数准确性。10.√解析：沙门氏菌的生化试验包括动力试验（硫化氢试验）和硫化氢试验。四、简答题答案及解析1.平板计数法的操作步骤答：平板计数法的操作步骤包括：样品稀释、涂布平板、培养、计数、计算。具体步骤为：（1）将样品用无菌生理盐水稀释至适当倍数；（2）取一定量的稀释液涂布在营养琼脂平板上；（3）将平板倒置放入37℃恒温培养箱中培养24～48小时；（4）计数平板上的菌落数，计算每克样品的菌落数（cfu/g）。2.检测沙门氏菌时，前增菌的目的是什么？答：前增菌的目的是提高沙门氏菌在样品中的浓度，使其在后续培养中更容易检出。通常使用碱性蛋白胨水或缓冲蛋白胨水进行前增菌，培养温度为37℃，时间6～8小时。3.检测食品中酵母菌和霉菌时，常用的培养基是什么？答：检测食品中酵母菌和霉菌时，常用的培养基包括：（1）酵母菌计数琼脂（YMA）；（2）霉菌计数琼脂（MMA）；（3）沙氏培养基（用于酵母菌）。4.简述MPN法的原理。答：MPN法（最可能数法）是一种用于估计样品中微生物数量的方法。其原理是：将样品分成若干组，分别接种到不同稀释倍数的液体培养基中，培养后计算每组中的阳性管数，再根据概率理论推算样品中的微生物数量。5.检测李斯特菌时，样品的保存条件是什么？答：检测李斯特菌时，样品必须冷藏保存（4℃），因为李斯特菌在低温环境下仍能生长。样品保存时间不宜超过24小时，以避免细菌死亡。五、操作规程题答案及解析1.操作规程：平板计数法检