2023届一轮复习人教版 微生物的培养与应用作业

课时作业（三十三）微生物的培养与应用

（本栏目内容，在学生用书中以独立形式分册装订！）

一、选择题

1.（2020•浙江7月选考）下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（）

A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物

B.配制培养基时应杈据微生物的种类调整培养基的pH

C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒

D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌（醋酸菌）活化

A［利用尿素固体培养基筛选尿素分解菌时，尿素固体培养基并不直接杀死其他微生

物，而是其他微生物不能乂尿素为氮源，无法在尿素固体培养基中存活，A错误；不同的微

生物生长所需的最适pH不同，如细菌适宜生活在中性偏碱的环境中，霉菌适宜生活在中性

偏酸的环境中，因此配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH,B正确；利用糯

米酿酒需要先进行糖化，解母菌不能直接利用淀粉进行发酵，C正确；当缺少糖源时醋酸菌

可将乙醉转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，因此适宜浓度的酒精可使醋酸菌活化，D正确。］

2.（2019・高考江苏卷）下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是（）

A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

B.接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧

C.接种后的培养皿要倒置，以防培养污染

D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基

A［接种环、涂布器需进行灼烧灭菌，A错误。接种操作的第一步灼烧接种环是为了避

免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束

后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从

而通过划线次数的增加，使每次划线时的菌种数目逐渐减少，以便得到单菌落；划线结束后

灼烧接种环，避免细菌污染环境和感染操作者，B正确。接种后将培养皿倒置，可防止冷凝

水污染培养基，C正确。固体培养基既可用于分离菌种，也可用于菌落计数，D正确。］

3.如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1-2f3-4-5,下列说法正确的是

（）

A.操作前要将接种环用酒精消毒

B.划线操作须在酒精灯火焰上方进行

C.只有在5区才可以得到所需菌落

D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

D［在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在酒精灯火焰上

灼烧，不能用酒精消毒，A错误；接种时划线操作是在酒精灯火焰附近进行，B错误；在5

个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需茵落，C错误；每次划线前都要灼烧

接种环，目的是杀死接种不上原有的微生物（第一次划线前）和上次划线结束后接种环上残留

的菌种，使每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，划线结束后灼烧接种环以防止污染环

境和感染操作者，D正确，］

4.（2022•苏州模拟）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学

设计了如下两种培养基（成分见表，CR为刚果红），下列相关叙述不正确的是（）

纤维

酵母膏无机盐琼脂CR溶液蒸镭水

素粉

培养基①++——++

培养基②+++4-++

注：“+”表示有，“一”表示无。

A.配制好的培养基在灭菌之前均需调pH

B.培养基①无法用于分离和鉴别纤维素分解菌

C.培养基②上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈

D.若计数培养基②上的纤维素分解菌落，则可采用平板划线法

D［配制好的培养基，需先调pH,后灭菌，防止杂菌污染，A正确；分析表格可知，

培养基①为液体培养基，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，纤维素分解菌鉴别培养基属于

固体培养基，B正确；在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色

复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中

心的透明圈，C正确；若计数培养基②上的纤维素分解菌落，则可采用稀释涂布平板后，D

错误。］

5.细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关

的说法正确的是（）

A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的

B.无机氮源不可能作为细菌的能源物质

C.琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质

D.以纤维素为唯一碳源的培养基上长出的不都是能分解纤维素的微生物

D［乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是不同的，硝化细菌利用的碳源是二氧化碳，

A错误；无机氮源也可能作为细菌的能源物质，如圆褐固氮菌，B错误；琼脂是凝固先，加

入液体培养基后，制成固体培养基，有利于微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可

见的菌落，C错误；以纤维素为唯一碳源的培养基上长出的不都是能分解纤维素的微竺物，

也可能是利用无机氮源的细菌，D正确°］

6.尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的微生物将尿素分解成期后，才能被植

物吸收利用。下列有关分离土壤中分解尿素的微生物的叙述，错误的是（）

A.分离土壤中分解尿素的微生物时需要配制选择培养基

B.鉴定分解尿素的微生物时，培养基中常加入酚红指示剂

C.利用稀释涂布平板法接种时，常直接将涂布器在酒精灯火焰I：进行灼烧灭菌

D.接种前，稀释土壤样液的目的是使聚集在一起的微生物分开

C［利用稀释涂布平板法接种时，对涂布器进行灭菌的方法是将沾有少量酒精的涂布

器在酒精灯火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，耳进行涂布，C错误。］

7.（2021・上海一模）下图表示培养和分离某种细菌的部分操作步骤，下列叙述正确的是

（）

A.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

B.步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液并划线

C.步骤③向多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D.步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

C［步骤①倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错误;

灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再蘸取菌液进行平板划线，B错误；步骤③通过向多个方

向连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离得到由一

个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确；在平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集,

因此无法对其计数，D错误。］

8.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析

下列描述错误的是（）

1mL1mL1mL

用无菌水定

容到100mL

A.在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时，可用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次,

使菌液与水充分混匀

B.对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍

C.5X108

D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低

123

I琼脂、C6Hl2。6、NH4NO3303127

琼脂、C6Hl2。6、

II169178193

NH4NO3、维生素

III琼脂、NH4NO3、维生素00I

A.I组和II组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

B.I组和in组说明天肠杆菌正常生长需要糖类物质

C.三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

D.三组实验所使用的培养基均需62℃、30min消毒

A［由表格分析可知：I组和II组说明维生素可以促进大肠杆菌生长；II组和川组作

对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖；由题意知：每个平板都

含有琼脂，属于固体培养基；三组实验所使用的培养基沟需高压蒸汽灭菌。］

12.（2022・泰安模拟）一定浓度的福尔马林（甲醛的水溶液）通过使蛋白质变性而起防腐作

用。可从活性污泥中分离出高效分解甲醛的细菌，以处理废弃的福尔马林。如图是筛选和纯

化甲醛分解菌的实验过程示意图，其中LB培养基能使齿种成倍扩增。卜列相关叙述错误的

是（）

挑取不产八-,取样测

同曲落定甲解

疑心皿胪一

无机液体培p无机应体培

基+甲解.养耘+甲脩,@无机液体培

振荡培界恒温培养养基+甲脩.

振荡培养

A.筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳源

B.③一④接种的目的是通过单个菌落分离出甲醛分解菌

C.步骤⑤中，各个培养瓶中的甲醛溶液要有•定的浓度梯度

D.测定并选出甲醛浓度最低的培养瓶后，筛选对•应的菌株

C［由于甲醛分解菌能利用甲醛作为碳源，而不能分解甲醛的菌体，不能利用甲醛做

碳源，所以筛选甲醛分解菌的培赛基中要添加甲醛作为唯一的碳源，在此培养基上不能分解

甲醛的菌体因缺少碳源而不能生长，A正确；③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，④过

程可以获得单菌落，接种目的是通过单个菌落分离出分解甲醛的菌体，B正确；步骤⑤中，

各个培养瓶中的甲醛溶液的浓度要相同，将不同的甲醛分解菌分别接种到各个培养瓶中，一

段时间后检测培养瓶中甲醛的含量，选出甲醛浓度最低的培养瓶后，筛选对应的菌株可获得

分解甲醛能力强的甲醛分解菌，C错误；D正确。］

二、非选择题

13.（2021・湖南高考）大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子

量可达12〜38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊

猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：

(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即。

为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以为唯一碳源的固

体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于培养基。

(2)配制的培养基必笈进行灭菌处理，目的是。检测固体培养基

灭菌效果的常用方法是______________________________________________________

___________________________________________________________________________O

(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路

(4)为高效降解农业桔秆废弃物，研究人员利用从土禳中筛选获得的3株纤维素分解菌,

在37°C条件卜进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件卜.纤维素酶活力最高的是

菌株,理由是o

秸秆秸秆秸秆纤维素

菌株

总重(g)残重(g)失重(％)降解率(％)

A

B

C0

解析：(1)纤维素是一种复合酶，由Ci酶、Cx晦和小葡糖甘酶组成。纤维素分解菌可

分泌纤维素酶，将纤维素分解为寡糖单糖来利用，而其他的菌没这种能力，在仅以纤维素为

碳源的培养其中只有该类菌可以生存。若想筛选纤维素分解菌，应将大熊猫新鲜粪便样品稀

释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养。由于该培养基能够筛选纤维素分

解菌，因此该培养基从功能上分类属于选择培养基。(2)由于培养基具有适宜细菌、真菌等

杂菌生长的条件，所以在配制完培养基后应进行灭菌处理，将培养基上原有的细菌或真菌的

匏子杀灭，以防止杂菌对实验的或真菌的袍子杀灭，以防止杂菌对实验的干扰。检测培赛基

灭菌是否合格时，一般灭完菌后将培养基放在30〜37c的环境中培养一天，看其有没有长

菌(液体看是否变浑浊，固体看是否长菌落)，即知是否灭菌后为无菌。(3)测定大熊猫新鲜粪

便中纤维素分解菌活菌数可采用间接计数法：面先要将待测样品配制成均匀的梯度稀释液，

尽量使微生物细胞分散开，再把稀释液接种到平板上，进行培养观察，最后根据公式计算。

(4)分析图表可知：在相同条件下，C组纤维素降解率最高，秸秆失重最多，说明其被分解

的最多，即C组纤维素分解菌纤维素酶的活力最高。

答案：(1)G酶、Cx酶和供葡糖甘酶纤维素选择(2)防止杂菌对实验的干扰灭

完菌后将培养基放在30〜37c的环境中培养一天，看其有没有长菌(3)首先要将待测样品

配制成均匀的梯度稀释液，尽量使微生物细胞分散开，再把稀释液接种到平板上，进行培养

观察，最后根据公式计算（4）C组纤维素降解率最高,秸秆失重最多

14.（2021•河北高考，节选）葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣）。目前这些

皮渣主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：

（1）为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入9DmL无菌水，混匀、静置后取上清

液，mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三人平板中菌落数量分别为78、91和

95,则每克皮渣中微生物数量为个。

（2）皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时.，需要将培

养基的pH调至____________性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分

混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是______________________________________________

培养筛选得到的醋酸菌时.，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为O

（3）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混

入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。

（简要写出实验步骤和预期结果）

解析：（1）为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置

后取上清液，mL稀释液接种于培养基上。IO”倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、

91和95,则每克皮渣中微生物数量为（78+91+95）X104X1（）6个。（2）皮渣堆积会积累醋酸

菌，可从中筛选优良菌株。醋酸菌属于细菌，故制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的

pH调至中性或微碱性，灭菌后在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平

板，加入碳酸钙的目的是使培养基不透明，从而使醋酸菌茵落周围出现透明圈，这是因为醋

酸菌产生的醋酸可分解碳酸钙，产生透明圈。在缺少糖源的液体培养基中醋酸菌以乙醉为碳

源，先把乙醇氧化为乙醛，再把乙醛氧化为乙酸。（3）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌

氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。由于醋酸菌是

好氧菌，而乳酸菌是厌氧菌，为将醋酸菌和乳酸菌进行分析，可先将平板置于无氧环境下继

续培养，观察菌落形态和透明圈大小。若菌落继续生长，且透明圈增大，则为兼性厌氧型的

乳酸菌菌落，若菌落不能继续生长，透明圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。故：实验步骤.：将

平板置于无氧环境下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小。预期结果：若菌落继续生长，

且透明圈增大，则为兼性决氧型的乳酸菌菌落，若菌落天能继续生长，透明圈不再扩大，则

为醋酸菌菌落。

答案：（1）X106（2）中性或微碱使培养基不透明，从而使醋酸菌菌落周围出现透明

圈碳源

（3）实验步骤：将平板置于无氧环境下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小。预期结

果：若菌落继续生长，且透明圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能继续生长,

透明圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。

15.某"土壤细菌可将尿素分解成CO?和NH3,供植物吸收和利用。何答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生__________o能分解尿

素的细菌不能以尿素的分解产物C02作为碳源，原因是

。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的

主要作用