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文档简介

章免疫学技术概论

一、名词解释

免疫学技术:是利用免疫反应的特异性原理,建立的各种检测与分析技术,以及

建立这些技术的各种制备主意。

免疫血清学技术/血清学反应:抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结

合反应,因抗体主要来自血清,因此在体外举行的抗原抗体反应称为血清学反应

或免疫血清学技术。

抗体亲和力(affinity):指抗体的抗原结合位点与相应的抗原决定簇之间的结合

强度,它是抗原抗体间固有的结合力。

抗体亲合力(avidity):指一个抗体分子与阿囹抗原表位之间结合的强度,与抗

体结合价直接相关。亲合力表现为多价优势。

带现象:因反应体系中抗原过多或抗体过多而浮上抑制可见反应的现象.

格子学说:大多数抗体为二价,大多数抗原为多价,惟独两者比例适当初,才干

形成彼此衔接的大复合物,而抗原过多或抗体过多时,形成的单个复合物不能被

肉眼所见。

细胞免疫技术:与细胞免疫有关的各种检测技术,包括对免疫细胞,细胞因子的

检测及功能分析。

免疫制备技术:制备与免疫检测有关制剂的技术,包括抗原制备、抗体纯化、抗

体标记等技术。

反应的特异性:以“金标准”为参照,用该实验检查非患畜时浮上阴性的可能性。

反应的敏感性:以“金标准”为参照,指用该实验检查患畜时浮上阳性的可能性。

二、简答题

L免疫学技术包括哪三大技术?举例说明各有哪些类型?

(1)免疫血清学技术:

①凝集实验:直接凝集、间接凝集

②沉淀实验:絮状沉淀、琼扩

③补体参加的实验:补体结合实验

④中和实验:病毒中和实验

朽木易折,金石可镂。

⑤标记抗体技术:免疫荧光抗体技术、免疫酶标记技术

⑥血清学新技术:免疫传感器技术、免疫核酸探针技术

(2)细胞免疫技术:

①淋巴细胞计数与分类:E玫瑰花环实验

②淋巴细胞功能测定:淋巴细胞转化实验

③免疫细胞因子检测:白细胞介素测定、干扰素测定

④体内细胞免疫实验:皮肤实验

(细胞免疫技术的特点:主意复杂、依赖于先进的检测仪器、逐渐与血清学技术

融为一体)

(3)免疫制备技术:

①抗原制备:彻低抗原、人工抗原的制备

②抗体制备:单、多克隆抗体的制备

③淋巴细胞制备:淋巴细胞分离技术

④抗体和细胞因子纯化:层析技术

⑤抗体标记或致敏:酶标记、荧光素标记抗体技术

2.免疫血清学反应的原理、特点、影响因素、优势有哪些?

(一,)基本原理

(1)抗原抗体的结合力:静电引力、范德华力、氢键、疏水作用

(2)抗原抗体的亲和力与亲合力

(3)亲水胶体转化为疏水胶体

(二)反应特点

(1)特异性与交错性:

抗原与抗体结合具有高度特异性,若两种天然抗原之间含有部分相同抗原表位时

则发生交错反应

(2)可逆性:

抗原与抗体的结合仅是分子表面的结合,为可逆反应

(3)最适比例性:

抗原抗体结合浮上可见反应具有一定的量比关系,惟独当两者分子比例合适时,

才发生最强的结合反应(带现象,格子学说)

(4)反应的阶段性:

特异性结合阶段一一反应快,无可见反应

可见阶段一一反应慢,表现为凝集,沉淀,补体结合等反应,受多种因素影响

(三)影响因素

(1)抗原抗体本身的性质,活性和浓度

(2)环境条件

电解质:普通用生理盐水做为稀释液

酸碱度:最适pH为pH6-8

温度:37℃是抗原抗体反应最适温度

(四)优势

(1)检样量少,预处理容易

(2)检测主意多,择优选用

(3)主意容易迅速,易推广

(4)特异性强,敏感性高

(5)可用于抗原抗体的定性、定量、定位

3.免疫学主意的评估与挑选?

(1)评估指标:以“金标准”为参照

特异性:指用该实验检查非患畜时浮上阴性结果的可能性

特异性二真阴性/(真阴性+假阳性)XI00%

敏感性:指用该实验检查某病畜时浮上阳性结果的可能性

敏感性二真阳性/(真阳性+假阴性)XI00%

(2)主意的挑选:按照检测的不同要求挑选敏感、特异、迅速、简便、经济、

实用的主意

4.免疫技术可应用于哪些领域?发展趋势如何?

(1)应用领域:

动物疫病诊断、微生物鉴定、生物制品研究(疫苗)、疫病致病机理研究等

朽木易折,金

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