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文档简介
章免疫学技术概论
一、名词解释
免疫学技术:是利用免疫反应的特异性原理,建立的各种检测与分析技术,以及
建立这些技术的各种制备主意。
免疫血清学技术/血清学反应:抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结
合反应,因抗体主要来自血清,因此在体外举行的抗原抗体反应称为血清学反应
或免疫血清学技术。
抗体亲和力(affinity):指抗体的抗原结合位点与相应的抗原决定簇之间的结合
强度,它是抗原抗体间固有的结合力。
抗体亲合力(avidity):指一个抗体分子与阿囹抗原表位之间结合的强度,与抗
体结合价直接相关。亲合力表现为多价优势。
带现象:因反应体系中抗原过多或抗体过多而浮上抑制可见反应的现象.
格子学说:大多数抗体为二价,大多数抗原为多价,惟独两者比例适当初,才干
形成彼此衔接的大复合物,而抗原过多或抗体过多时,形成的单个复合物不能被
肉眼所见。
细胞免疫技术:与细胞免疫有关的各种检测技术,包括对免疫细胞,细胞因子的
检测及功能分析。
免疫制备技术:制备与免疫检测有关制剂的技术,包括抗原制备、抗体纯化、抗
体标记等技术。
反应的特异性:以“金标准”为参照,用该实验检查非患畜时浮上阴性的可能性。
反应的敏感性:以“金标准”为参照,指用该实验检查患畜时浮上阳性的可能性。
二、简答题
L免疫学技术包括哪三大技术?举例说明各有哪些类型?
(1)免疫血清学技术:
①凝集实验:直接凝集、间接凝集
②沉淀实验:絮状沉淀、琼扩
③补体参加的实验:补体结合实验
④中和实验:病毒中和实验
朽木易折,金石可镂。
⑤标记抗体技术:免疫荧光抗体技术、免疫酶标记技术
⑥血清学新技术:免疫传感器技术、免疫核酸探针技术
(2)细胞免疫技术:
①淋巴细胞计数与分类:E玫瑰花环实验
②淋巴细胞功能测定:淋巴细胞转化实验
③免疫细胞因子检测:白细胞介素测定、干扰素测定
④体内细胞免疫实验:皮肤实验
(细胞免疫技术的特点:主意复杂、依赖于先进的检测仪器、逐渐与血清学技术
融为一体)
(3)免疫制备技术:
①抗原制备:彻低抗原、人工抗原的制备
②抗体制备:单、多克隆抗体的制备
③淋巴细胞制备:淋巴细胞分离技术
④抗体和细胞因子纯化:层析技术
⑤抗体标记或致敏:酶标记、荧光素标记抗体技术
2.免疫血清学反应的原理、特点、影响因素、优势有哪些?
(一,)基本原理
(1)抗原抗体的结合力:静电引力、范德华力、氢键、疏水作用
(2)抗原抗体的亲和力与亲合力
(3)亲水胶体转化为疏水胶体
(二)反应特点
(1)特异性与交错性:
抗原与抗体结合具有高度特异性,若两种天然抗原之间含有部分相同抗原表位时
则发生交错反应
(2)可逆性:
抗原与抗体的结合仅是分子表面的结合,为可逆反应
(3)最适比例性:
抗原抗体结合浮上可见反应具有一定的量比关系,惟独当两者分子比例合适时,
才发生最强的结合反应(带现象,格子学说)
(4)反应的阶段性:
特异性结合阶段一一反应快,无可见反应
可见阶段一一反应慢,表现为凝集,沉淀,补体结合等反应,受多种因素影响
(三)影响因素
(1)抗原抗体本身的性质,活性和浓度
(2)环境条件
电解质:普通用生理盐水做为稀释液
酸碱度:最适pH为pH6-8
温度:37℃是抗原抗体反应最适温度
(四)优势
(1)检样量少,预处理容易
(2)检测主意多,择优选用
(3)主意容易迅速,易推广
(4)特异性强,敏感性高
(5)可用于抗原抗体的定性、定量、定位
3.免疫学主意的评估与挑选?
(1)评估指标:以“金标准”为参照
特异性:指用该实验检查非患畜时浮上阴性结果的可能性
特异性二真阴性/(真阴性+假阳性)XI00%
敏感性:指用该实验检查某病畜时浮上阳性结果的可能性
敏感性二真阳性/(真阳性+假阴性)XI00%
(2)主意的挑选:按照检测的不同要求挑选敏感、特异、迅速、简便、经济、
实用的主意
4.免疫技术可应用于哪些领域?发展趋势如何?
(1)应用领域:
动物疫病诊断、微生物鉴定、生物制品研究(疫苗)、疫病致病机理研究等
朽木易折,金
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