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动物微生物与免疫技术项目二

任务五病毒其他特征的认知任务六病毒致病作用的认知任务七病毒病的实验室诊断Page

2任务五病毒其他特征病毒干扰现象和干扰素(掌握)病毒血凝现象及应用(掌握)病毒过滤性及其应用(掌握)病毒的包涵体、噬菌体、病毒对理化因素的抵抗力(了解)1234任务五病毒其他特征一、病毒的干扰现象和干扰素概念两种病毒感染同一个细胞时,可发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象。

干扰现象的类型干扰现象发生的原因病毒干扰现象与疫苗接种任务五病毒其他特征干扰现象产生的原因:1、受体相同:占据或破坏细胞表面的病毒受体。2、先入为主:争夺酶系统、原材料及合成场所。3、产生干扰素:是最主要的原因。先进入的病毒可诱导细胞产生干扰素,抑制病毒的增殖。干扰类型:1、异种干扰2、同种异型干扰3、自身干扰

病毒干扰现象与疫苗接种生产上,需要接种两种以上疫苗时候,应注意时间间隔。任务五病毒其他特征任务五病毒其他特征

干扰素是机体活细胞受病毒感染或干扰素诱生剂的刺激后产生的一种低分子量的糖蛋白。干扰素诱生剂类型病毒:最好的干扰素诱生剂细菌:细胞内寄生菌支原体立克次氏体植物:中草药、水果、蔬菜合成多聚物:硫酸葡萄糖、聚肌胞Page

7任务五病毒其他特征病毒诱生干扰素的特点1、RNA病毒诱生干扰素产生的能力较DNA病毒强,RNA病毒中,正粘病毒(如流感病毒)诱生能力最强;2、DNA病毒中痘病毒诱生能力较强,带囊膜的病毒比无囊膜的病毒的诱生能力强。3、病毒诱生能力与毒力无明显关系,甚至有的恰好相反4、有些灭活的病毒也可诱生干扰素,如新城疫病毒和禽流感病毒等。任务五病毒其他特征干扰素按照化学性质可分为α、β、γ三种类型α干扰素主要由白细胞和其他多种细胞在受到病毒感染后产生的,人类的α干扰素至少有二十二个亚型,动物的较少;β干扰素由成纤维细胞和上皮细胞受到病毒感染时产生,只有一个亚型;γ干扰素由T淋巴细胞和NK细胞在受到抗原或有丝分裂原的刺激产生,是一种免疫调节因子,主要作用于T、B淋巴细胞和NK细胞,增强这些细胞的活性,促进抗原的清除。所有哺乳动物都能产生干扰素,而禽类体内无γ干扰素。任务五病毒其他特征干扰素的生物学活性有:1.抗病毒作用干扰素具有广谱抗病毒作用,作用是非特异性的,甚至对某些细菌、立克次氏体等也有干扰作用。2.免疫调节作用主要是γ干扰素的作用。γ干扰素可作用于T细胞、B细胞和NK细胞,增强它们的活性。3.抗肿瘤作用干扰素不仅可抑制肿瘤病毒的增殖,而且能抑制肿瘤细胞的生长,又能调节机体的免疫机能。任务五病毒其他特征二、病毒的血凝现象许多病毒表面有血凝素,能与鸡、豚鼠、人等红细胞表面受体(多数为糖蛋白)结合,从而出现红细胞凝集现象,称为病毒的血凝现象,简称病毒的血凝。

任务五病毒其他特征当病毒与相应的抗病毒抗体结合后,能使红细胞的凝集现象受到抑制,称为病毒血凝抑制现象,简称病毒的血凝抑制。任务五病毒其他特征血凝和血凝抑制的应用生产中病毒的血凝和血凝抑制试验主要用于鸡新城疫、禽流感等病毒性传染病的诊断以及鸡新城疫、禽流感、EDS-76等病的免疫监测。任务五病毒其他特征三、病毒包含体概念:包涵体是某些病毒在细胞内增殖后,在细胞内形成的一种用光学显微镜可以看到的特殊“斑块”。特点与应用:病毒不同,所形成包涵体的形状、大小、数量、染色性(嗜酸性或嗜碱性)、及存在哪种感染细胞和在细胞中的位置等均不相同,故可作为诊断某些病毒病的依据。任务五病毒其他特征任务五病毒其他特征任务五病毒其他特征五、病毒的抵抗力温度:耐寒不耐热低温保存病毒,病毒毒种和病料通常保存于-20度以下甘油:对甘油有较强的抵抗力常用50%的甘油缓冲盐水保存病毒性病料任务五病毒其他特征五、病毒的抵抗力脂溶剂:能破坏病毒的囊膜而使有囊膜病毒灭活研究中,利用此特征可鉴定病毒是否有囊膜,如用氯仿或乙醚处理病毒后,检测病毒活性。消毒药:对氧化剂、重金属盐类、碱类与蛋白结合的消毒药都很敏感酸碱度:病毒一般能耐PH5-9强酸或强碱用于消毒任务六病毒致病作用的认知病毒的致病作用病毒感染对宿主细胞的直作用病毒感染的免疫病理作用任务六病毒致病作用的认知一、病毒感染对宿主细胞的直接作用1、杀细胞效应2、稳定状态感染3、包含体形成4、细胞凋亡5、基因整合与细胞转化任务六病毒致病作用的认知1、杀细胞效应:病毒在宿主细胞内复制完毕,可在短时间内一次释放大量子代病毒,细胞被裂解死亡,主要见于无囊膜、杀伤性强的病毒,如脊髓灰质炎病毒等。病毒破坏宿主细胞的溶酶体,溶酶体释放的酶引起细胞自溶。病毒的衣壳蛋白导致宿主细胞的死亡。-病毒复制引起细胞器损伤、病毒蛋白抑制细胞代谢的障碍任务六病毒致病作用的认知任务六病毒致病作用的认知细胞融合融合原因溶酶体酶导致感染细胞与邻近未感染细胞融合,形成合胞体。病毒借助于细胞融合,扩散到未感染的细胞内结果形成多核巨细胞或合胞体等病理特征三、包含体形成概念某些病毒在感染细胞中形成光学显微镜可看到特殊结构如狂犬病病毒在脑细胞中形成嗜酸性包含体。4、细胞凋亡细胞凋亡是由宿主细胞基因控制的程序性细胞死亡,是一种正常的生物学现象。病毒诱导细胞凋亡有些病毒在细胞中复制可激活细胞的凋亡基因,出现细胞膜鼓泡、核浓缩、染色体DNA降解等凋亡特征。如:人类免疫缺陷病、腺病毒。二、病毒感染的免疫病理作用抗体介导的免疫病理作用细胞介导的免疫病理作用免疫抑制作用任务七病毒病的实验室诊断病料的采集、保存和送检病毒的分类培养包含体检查血清学诊断动物试验分子生物学诊断任务七病毒病的实验室诊断诊断方法用途电镜观察病毒粒子只用于研究病毒的分离培养常用血清学检测常用包含体检查少用血凝与血凝抑制常用PCR较常用任务七病毒病的实验室诊断病毒性病料的采集采集原则防止污染、无菌采样、适当时机、适当部位采集方法同细菌病采集方法保存和送检保存:短期保存于4度;长期保存-20度以下冰箱。送检:做好记录,尽快送检任务七病毒病的实验室诊断病毒培养的病料处理1.均浆,破碎组织,释放病毒称重,加入生理盐水(组织:生理盐水=1:4)剪碎匀浆(匀浆管或研钵)2.冻融进一步释放病毒反复冻融3-5次3.离心除去细胞碎片低速离心4.除菌除去样品中的细菌高速离心、抗生素处理、过滤除菌任务七病毒病的实验室诊断病毒的分离培养目的诊断:病毒鉴定、制备生物制品(诊断抗原、诊断学清、疫苗等)方法动物接种、禽胚培养、细胞培养病毒增殖具有一定的细胞特异性,因此培养时应选择适当的方法任务七病毒病的实验室诊断病毒的鸡胚接种感染鸡的多数病毒、某些其他病毒接种方法:尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、卵黄囊接种等病毒在鸡胚中的增殖表现:鸡胚死亡、出血、发育迟缓、畸形、痘斑等鸡胚无变化。通过检测病毒的某些特性鸡传染性喉气管炎病毒鸡传染性法氏囊炎鸡传染性支气管炎任务七病毒病的实验室诊断病毒的细胞培养将细胞在体外容器中进行培养,将病毒接种于体外培养的细胞中使病毒增殖。六、分子生物学

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