北中大中药化学实验指导02基本实验项目

第二章基本实验项目

实验一虎杖中葱醍类成分及白藜芦醇昔的提取分离和鉴定

虎杖系蓼科蓼属植物(Polygonumcuspidatumsieb.etzucc.)的根茎，又名阴

阳莲。味苦，性微寒，具有泻下、健胃、清热、解毒之功。民间多用于消炎、杀

菌、利尿、通经、镇痛，近年来用于烫伤、止血、消结石、降血脂的治疗。近年

来用于治疗烫伤、止血、消结石和降低血脂均有疗效。虎杖根茎中含有大量的意

醍成份和二苯乙烯类成份，后者具降血脂的作用。

一、部分己知成分的理化性质

1.大黄素(Emodin)：

橙黄色长结晶(丙酮中为橙色，甲醇中为黄色)，mp.256℃-257℃,能升华。

其溶解度如下:Et2O0.14%,CC140.01%,CHCh0.0718%,CS20.009%,乙醛

0.14%；易溶于乙醇；可溶于氨水、Na2c03和NaOH水溶液；儿乎不溶于水。

2.大黄素-6-甲醛(Physion)：

金黄色针晶，mp.207℃,能升华。溶解性与大黄酚相似。

3.大黄素-3-D-葡萄糖普(Emodinmonoglucoside)

mp.I90℃-191℃,浅黄色针晶，(稀乙醇中结出，含一分子结晶水)。

4.大黄素-6-甲健-8-D-葡萄糖昔

mp.230℃—232℃?黄色针晶(稀甲醇中结出)。

5.白藜芦醇(resveratrol)：

无色针状结晶。mp.256℃—257℃,26TC—264℃,能升华。易溶于乙醛、

氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等。

6.白藜芦醇葡萄糖甘(polydatin,pcceid)：

CH=CH

又名3,4,5-三羟基茂-3-B-D-葡萄糖甘，mp.225℃,232℃(分解)。无

色针状族晶。易溶于甲醇、乙醇、丙酮、热水；可溶于乙酸乙酯，稍溶于Na2cCh

和NaOH水溶液，难溶于乙醛。

UV：燔,nm(logc)216(4.42),230sh(4.29),303(4.52),318(4.52)

IR：u黑(cm")3400,1600,1525,1470,1270,1185,1160,1100,1040,

970,850,690

附注：此化合物具顺反二种异构体，能互相转化，所得常是二者的混合物以

反式为多，故前人工作中所报道的熔点有所不同，按本实验方法所得的白藜芦醇

昔结晶含一分子结晶水，在130〜140℃先融化，继续加热固化，至225〜226℃

全熔。

二、实验目的

1.学习脂溶性成分(甘元)和水溶性成份(甘)的分离方法。

2.学习用pH梯度萃取法分离酸性不同的慈醍类成分。

3.了解慈醍类成分的一般性质和鉴别反应。

三、实验原理

根据游离慈配与昔溶解性能的差异，先用乙醛萃取出游离慈醛等脂溶性成份,

从而使脂溶性成分（昔元）和水溶性成份（背）得到分离。再根据虎掌中葱配类

成分由于结构中酚羟基数目及位置不同而成不同强度的酸性，用碱性递加的治水

溶液（5%NaHCO3,5%Na2co3,2%NaOH）自乙醛中提出不同酸性强弱的游离

葱醍类成分，达到分离的目的。

四、提取分离流程

虎杖粗粉

乙醇提取

乙罅提取液

回收乙醇

绰膏

加水稀释，乙醛萃取

水！层乙酸层

卜舌性炭脱色，趁热过滤5%NaHCO3萃取

滤液

放冷

乙酸乙酯萃取

乙酸乙酯液

回收溶剂

残留物

A，。?柱净化

80%乙醇洗脱

洗脱液

浓缩，放置，析晶样品酸化，过滤回收溶剂

硅胶竺层析

白蓼芦醇葡萄糖昔3藐盘臂脱大黄素4-甲醒中性脂溶性成分

洗脱液

回收溶剂至干

少量乙醇溶解

大黄素乙醇液

五、溶剂、试剂、展开剂及显色剂

1.原料：虎杖粗粉50g

2.溶剂：

90-95%乙醇500mL80%乙醇200ml,乙醛500ml,CHCh,McOH各50〜

lOOinL

3.试剂：

HC1,NaHCOs,Na2cO3,NaOH,无水硫酸钠，活性炭(2g),AI2O3(30g),

硅胶G。

4.展开剂：

(1)石油酸(bp30〜60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1,上层)15ml.

(2)氯仿-甲醇(9:2)

5.显色剂

(1)5%KOH/MeOH液

(2)l%FeC13・l%铁冢化钾(1:1)

6.定性试剂

2%NaOH,0.5%Mg(Ac)2

六、实验方法

1.乙醇总提取物的制备

取虎杖粗粉50g,用90〜95%乙醇回流提取二次(200mllh；150mllh),过

淀合并乙醉液，如有沉淀，抽滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，得乙醇总提取物。

2.总游离慈醍的提取

将上述提取物，加入15ml水稀释至分液漏斗中，用乙醛萃取(25mlX2,

20mlX4),合并乙酸液即为总游离慈醒。乙醛萃取后的水层含有水溶性成分。

3.游离慈醍得分离

(1)大黄素的分离

上述乙醛液移至分液漏斗中，用5%NaHCO3水溶液萃取3〜4次(20mlX2,

15mlXl〜2),弃去NaHCCh液。乙醛溶液再用5%Na2co3水溶液萃取7〜9次

(25mlX2,20mlX2〜3,15mlX3〜4)。合并Na2cCh萃取液，挥去碱液中的乙

酸，碱液在搅拌下慢慢滴加6NHC1调PH=2,稍放置，抽滤，沉淀水洗至中性,

干燥，称重。沉淀物用20ml环己烷.丙酮（7:3）溶解后，经硅胶柱层析（15g）,

环己烷-丙酮（7:3）洗脱，流速约4〜5ml/min,洗脱至橙色色带洗下即可，收集

洗脱液，回收溶剂至干，残留物加少量乙醇溶解，得大黄素乙醇液。

（2）大黄素-6-甲醛的分离

以上用Na2co3萃取过的乙醛溶液再用2%NaOH水溶液萃取4〜5次，每次

10ml,合并NaOH液，干燥、挥去碱液中的乙酸，碱液在搅拌下慢慢滴加6NHC1

调PH=2,稍放置，抽滤，沉淀水洗至中性，干燥，称重，得大黄素-6-甲醛粗油。

（3）中性脂溶性成分的分离

上述NaOH萃取过的乙醛液，用水洗至中性，再用无水Na2s04脱水，回收

乙醛得残留物，即得中性脂溶性成分。

4.白藜芦醇昔的分离：

取“2”中乙暇萃取过的水层，挥去乙醒，置烧杯中加水至150ml,搅拌混

合后，加热lOmin,放冷过滤，滤液加活性炭2g,煮沸20分钟，趁热过滤，滤

液放冷后置分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取5〜7次（40X2〜3,30X3〜4）,合并

乙酸乙酯萃取液回收溶剂，残留物用适量80%乙醇溶解，经AbO3柱层析（中性

AI2O3IOO〜200目，装柱15cm,柱径2cm,干法装柱）净化，80%乙醇洗脱（约

100ml）,洗脱液回收至干，加1ml水及5ml乙醇,加热溶解（需要过滤时须趁

热过滤）。滤液放置，析晶，鉴识。

5.鉴识

A.层析法鉴定：

（1）游离慈醍的硅胶GTLC

对照品：大黄素、大黄素甲醛

样品：自制大黄素、大黄素甲醛乙醇液

展开剂：石油酸（bp30〜60℃）一甲酸乙酯一甲酸（15:5:1）,上层。

显色剂：a.紫外灯下观察荧光

b.5%KOH甲醇溶液

（2）白藜芦醇苜的硅胶GTLC

对照品：白藜芦醵昔

样品：自制白整芦醇甘乙醇液

展开剂：CHCh-MeOH（9:2）

显色剂：a.紫外灯（365nm）下观察荧光

b.5%KOH甲醇溶液

B.定性反应一游离蒸醒的反应

分别取大黄素、大黄素甲醛少许，乙醇2ml溶解，做如下反应：

a：Borntrager反应：取试液1mL滴加2%NaOH溶液，观察颜色。

b：Mg（Ac）2试剂：取试液1mL滴加5%Mg（Ac”溶液2—3滴，观察颜色。

七、实验安排

本试验共分4.5次完成。

第一次：乙醇总提取物的制备

第二次：总游离葱醍的提取：游离意配的分离

第三次：白藜芦醇昔的分离（开始至“残留物用适量80%乙醇溶解"）；大黄

素的重结晶

第四次：白藜芦醇甘的分离（残留物乙醇液经AI2O3柱净化至放置结析晶）；

大黄素结晶的过滤、洗涤、称重；定性反应；层析板的涂铺（2块）

第五次：游离葱配、白藜芦醇苗的层析鉴识；（实验二芦丁的提取）

八、思考题

1.pH梯度萃取法的原理是什么？适用于哪些中草药成分的分离？

2.根据薄层色谱结果分析各慈酿类成分的结构与Rf值的关系。

3.试说明各显色反应机制。

4.试总结萃取操作程序及注意事项。

5.结晶及重结晶操作的关键步骤是什么。

6.过滤方式有儿种？怎样选用？

7.活性碳脱色在叶么溶剂中效率最高？

8.本试验中，在水与亲脂性有机溶剂萃取前，为什麽水液必须浓缩至无醇

味。

实验二槐花米黄酮昔及昔元的提取和鉴定

槐花米系豆科槐属植物(Sophorajaponica.L)的花蕾。历来作为止血药物治

疗痔、子宫出血、吐血、鼻翅等。其所含主要成分为芦丁(Rutin,亦称芸香甘)，

其含量高达12〜16%。药理试验证明芦丁有调节毛细血管渗透作用，临床用于治

疗毛细血管性止血药，作为高血压症的辅助药物。

芦丁广泛存在于植物中，现已发现含芦丁的植物达70种以上。

一、主要黄酮类成分的物理性质

(1)芦丁(芸香甘，Rutin)

淡黄色针状结晶，喏点：含三分子结晶水物174C-178C；无水物为188C。

芦丁溶解度见下表：

水甲醇乙醇

冷0.00431.()0.368.5

,执、、、0.5511.23.5易溶

不溶于乙醛、氯仿、石油酸、乙酸乙脂、丙酮等溶剂。易溶于碱液且呈黄色,

酸化后复析出。可溶于浓硫酸和浓盐酸且呈棕黄色，加水稀释复又析出。

UV：—一nm(logs)259,266sh,299sh,359

(2)棚皮素(Quercetin)：

OH

黄色结晶，熔点：含两分子结晶水物313℃—314C,无水物316C。

溶解度：乙醇1:290,无水乙醇1:23(沸时)，可溶于甲醇、乙酸乙脂、冰醋

酸、毗咤、丙酮等溶剂，不溶于水、乙醛、苯、氯仿、石油酸。

UV：方Fnm(loge)255,269sh,301sh,370

二、实验目的

1.了解黄酮类化合物的一般性质。

2.学习聚酰胺TLC法在黄酮类化合物中的应用。

3.掌握由黄酮甘水解制取黄酮首元的方法及糖的检识方法。。

4.通过测定芦丁及榭皮素的紫外光谱，进一步了解如何利用紫外光谱对黄

酮类化合物进行结构测定。

三、实验原理

1.利用芦丁可溶于热水，难溶于冷水的性质进行提取、精致。

2.黄酮甘可通过酸水解得到昔元和糖，并可通过TLC、PC及乙酰化合物

制备进行检识。

3.不同黄酮类化合物对紫外光有特定吸收，可利用此对其进行结构测定。

四、提取精致流程

槐花米粗粉

加热水煎煮，趁热过淀

水溶液

放置过夜，过滤

沉淀(芦丁粗品)

水精致

白丁精制品

酸水解

II

糖甘元(榔皮素)粗品

重结晶

精致假皮素

乙酰化

榔皮素五乙酰化物

五、溶剂、试剂、展开剂及显色剂

1.原料：槐花米30g

2.试齐IJ：

1%H2so4100ml,BaCO3,甲醇50ml,醋配浓H2s。4,95%乙醇，层析纸，

聚酰胺薄膜(3X10cm),硅胶

3.标准品：

葡萄糖，鼠李糖，芦丁，榭皮素

4.展开剂：

(1)80%乙醇

(2)fi-BuOH-HAc_HjO(4:1;5)上层液15ml

(3)n-BuOH-HAc-Alc-H2O(4:1:1:0.25)

5.显色剂：

苯胺一邻苯二甲酸盐试剂，浓氨水，1%A1C13

6.定性试剂：

10%a-秦酚溶液，浓H2so4,浓HC1,镁粉，FeCb乙醇液，l%Mg(Ac)2

甲醇液，1%A1C13乙醵液，2%ZrOC12甲醇液，2%柠檬酸甲醇液。

六、实验方法

1.芦丁的提取

称取槐花米3（）g,研碎后，置烧杯中，加热水（50C以上）300ml,煮沸15

分钟，趁热过滤，滤渣再分别用200ml热水煮提两次，每次10分钟，趁热过滤，

放置过夜，可析出大量沉淀，等沉淀完全，滤取沉淀，放置自然干燥，即得芦丁

粗品。

2.芦丁的精制

上述沉淀称重后加入100倍量的热水溶解，趁热过滤，放冷析出结晶，结晶

自然干燥（或在红外灯下干燥），得芦丁水精制品。

3.芦丁的水解

称取芦丁水精制品0.5g,置250ml圆底烧瓶中加1%H2s04（V/V）50ml,

直火回流30分钟（注意观察现象），放冷过滤（滤液留作糖的鉴识），沉淀物为

芦丁甘元一榔皮素的粗品，水洗至中性用60%乙醇（70〜80倍量）重结晶，干

燥称重，得棚皮素精品。

4.糖的检识（PC和TLC）

取水解滤液20mL水浴上加热，加固体BaCCh中和至中性（不断搅拌下进

行），滤除白色BaSCM沉淀，滤液蒸干后加2〜3ml甲醇溶解，作层析检识样品

溶液。

对照品：葡萄糖，鼠李糖

TLC吸附剂：硅胶

展开剂：

PC：n-BuOH-HAu-H,O（4;1;5）上层液

TLC：n-Bu0H-HAc-Alc-H20（4:1:1:0.25）

显色剂：苯胺-邻苯二甲酸盐试剂，喷雾后，105℃加热5〜10分钟至显棕色

或棕红色斑点。

5.芦丁及棚皮素的聚酰胺TLC

吸附剂：聚酰胺-6薄膜

对照品：芦丁、棚皮素标准品的甲醇溶液

样品：1%芦丁、棚皮素的甲醇溶液

展开剂：8（）%乙醇

显色剂：1%A1C13乙醇液显色后，紫外光（365nm）下观察。

6.榭皮素乙酰化物的制备

称取精制棚皮素511g置10nli干燥三角瓶中，加5ml醋酊和一滴H2sCU振摇，

完全溶解后放置24h,倾入30ml冷水中，不断搅拌，则析出白色结晶。滤取沉

淀洗涤，以90〜95%乙醇重结晶，得涮皮素五乙酰化物的白色结晶。

7.芦丁及甘元的的定性反应

（1）样品制备：取芦丁及棚皮素精品约10mg（豆粒大）用5mlMeOH溶解。

（2）定性反应

A：Mclkh反应

加10%a-蔡酚溶液1ml,振摇后斜置试管，沿管壁滴加0.5ml浓H2so4,静

置观察液面交界处颜色变化。

B：盐酸镁粉反应

取芦丁（棚皮素）溶液少许，分别置于试管中，加浓盐酸，再各加入镁粉,

观察颜色变化。

C：FeCb反应

取芦丁（榔皮素）溶液少许，分别置于试管中，分别加FeCb乙醇溶液1〜2

滴，观察颜色变化。

D：Mg（Ac）2纸片反应

取2张滤纸片，分别滴2滴芦丁，榭皮素甲醇液，然后各加l%Mg（Ac）2

甲醇溶液2滴，于紫外灯下观察荧光变化。

E：A1C13纸片反应

取2张滤纸片，分别滴2滴芦丁，棚皮素甲醇液，然后各加1%A1C13乙醇溶

液2滴，于紫外灯下观察荧光变化。

F：错盐一柠檬酸反应

分别加入2%ZrOCb甲醇溶液3〜4滴，观察颜色。然后加入柠檬酸甲醇溶

液3〜4滴，观察颜色。

8.芦丁及棚皮素的的紫外光谱测定

（1）试液的配制

A.无水甲醇：用分析纯甲醇加入10%氧化钙放置24h。然后蒸镭，即得。

B.甲醇钠溶液：取0.25g金属钠切碎，小心加入10ml无水甲醇（此液置

玻璃瓶中，用橡皮塞密封）。

C.AlCb溶液：取1g无水A1C13小心加入甲醇20ml,放置24h,全溶即得。

D.醋酸钠：采用试剂级无水粉末醋酸钠。

E.硼酸饱和溶液：将试剂级无水硼酸加入适量无水甲醇制成饱和溶液，

（上述各溶液可贮存6个月）

（2）测定方法

精密称取芦丁、棚皮素各lOmg,分别用甲醇溶解，并稀释至100ml,从中

吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度（

A.样品甲醇溶液光谱

去样品液置石英杯中，在200〜400nm内扫描。重复操作一次，观察紫外光

谱。

B.甲醇钠光谱

取样品液置石英杯中，加入甲醇钠溶液3滴，立即测定。放置5min后再测

一次。

C.AlCh光谱

在盛有样品液的石英杯中滴加6滴AlCb溶液，放置Imin后测定，然后加

入3滴HC1溶液（HC1-H2O=1:1）,再进行测定。

D.醋酸钠光谱

取样品溶液3ml,加入过量的无水醋酸钠固体，摇匀（杯底剩有约2mm厚的

醋酸钠）。加入醋酸钠后2niin采用试剂级无水粉木醋酸钠。

E.NaAc/H?BO3

方法I.在测定用的盛有检品及NaAc液的石英杯中加入足够量的无水硼酸

粉末，使成饱和溶液进行测定（本法适用于在加入NaAc5min后无分解现象的样

品）

方法H.于样品液（约3ml）中加入5滴H3BO3溶液，然后迅速加入无水

NaAc粉末饱和，立即测定。

七、实验安排

本实验共分2.5次完成。

第一次：芦丁的提取；（实验一游离意醍、白藜芦醇甘的层析鉴识）

第二次：芦丁的精致；芦丁的水解，柳皮素乙酰化物的制备

第三次：糖的层析检识；芦丁及制皮素的聚酰胺TLC；芦丁及制皮素的定性

反应；芦丁及榭皮素的的紫外光谱测定

八、思考题

1.一般提取液需经过适当浓缩，分离净化才能得到化合物的粗品，为什么

芦丁不经过这些处理就能得到粗品？

2.酸水解常用什么酸，为什么用H2s04比用HC1水解后处理更方便？

3.当反应试剂组成是2个以上时，常需考虑试剂加入的顺序，试分析盐酸-

镁粉反应。

4.制备榭皮素的乙酰化物为何加浓H2SO4?

5.本实验中各种层析原理是什么？解释化合物结构与Rf值得关系。

6.黄酮类化合物有哪些提取方法？芦丁的提取还可以用什么方法？

7.试讨论首类成分的鉴定顺序，分析示教所做的紫外光谱图。

实验三粉防己生物碱的提取、分离和鉴识

粉防己亦称汉防己,为防己科植物汉防己(Stephaniatetrandra)的干燥根，

是临床常用中药「具有祛风湿、止痛、利水消肿、泻下焦湿热等功效.现代药理

实验研究表明，汉防己总生物碱具有镇痛、消炎、降压、肌肉松弛以及抗菌、抗

肿瘤作用，为主要有效成分。

粉防己中生物碱含量高达5%〜2.3%,其中主要为汉防己甲素(tetrandrine)

和汉防己乙素(fangchineline,又称防己诺林)，还含少量的轮环藤酚碱

(cyclanoline)o它们的物理性质如卜：

I.汉防已甲素和汉防己乙素均为双节基异哇咻衍生物，氮原子呈叔胺状态。

汉防己甲素

R=CH3

汉防己乙素R=H

汉防己甲素为无色针状结晶，丙酮中结晶有双熔点：126〜127C/217〜218℃。

即，在126〜127c先融化，继续加热至153c固化，温度上升至217〜218c全

熔。不溶于水，石油健，易溶于乙醺、乙醛、氯方等有机溶剂及稀酸水溶液。

UV：CT©280nm(£6887)

IR：u然(cnr1)3050,2800,1605,1580,1235,1215,840

汉防己乙素为细棒状结晶，同样有双熔点现象，丙酮中结晶mpl34〜

136℃/238〜240C,甲醇中结晶mpl77〜179C/238〜240C。

溶解度与汉防己甲素相似,，但极性稍大，故在冷苯中溶解度小于汉防己甲

素，而在乙醇中的溶解度大于汉防己甲素。具有隐性酚羟基，不溶于NaOH溶

液。

2.轮环藤酚碱

轮环藤酚碱

氯化物无色八面体状结晶，mp214〜216℃

碘化物无色绢丝状结晶，mpl85℃

苦味酸盐黄色结晶，叩154~156℃

轮环藤酚碱为水溶性季钱型生物碱，不溶于低级性有机溶剂.

UV：U廿1nm(logs)223(4.18),286(3.88)

IR：u鬻(cm1)3200,1610,1580,1500,1280,1245,885,800

一、实验目的

I.掌握生物碱的乙醇提取方法以及脂溶性生物碱与水溶性生物碱分离，脂

溶性碱中酚性碱与非酚性碱的分离，水溶性碱与水溶性杂质的分离。

2.学习用吸附柱层析法分离生物碱。

3.学习生物碱的鉴识方法如：色谱法，化学法等。

二、实验原理

根据大多数生物碱或生物碱盐能溶于乙醺的通性，用乙醇回流提取法提

取总碱，利用季铁型生物碱易溶丁水，不溶丁亲脂性有机溶剂的性质用溶剂

萃取法分离脂溶性生物碱和水溶性生物碱，利用汉防己甲素、乙素极性的差

别，用吸附柱层析法分离二者。利用季铁型生物碱可与雷氏铁盐产生沉淀的

性质使其与其它水溶性成份分离。

三、分离流程

防己粗粉

I乙醇回流提“父

乙醵提取液

I减压回收乙醉

浓缩物

I酸水溶解，过滤

酸水液

氨水碱化(PH9-10)

乙酸乙酯一环己烷萃取

碱水层有机层

过滤水洗至中性

酸化(PH3-4)回收溶剂

酸水液抽松

加雷氏铁盐抽松物(称重)

过泗丙酮溶解

沉淀AhOs拌样

干滦样品

丙酮溶解AI2O3柱层析分离

过滤环己烷一丙酮洗脱

丙酮液11

A12O3柱层析净化汉防己甲素汉防口乙素

丙酮•水洗脱

洗脱液

回收丙酮

Ag2so4处理

BaCb沉淀，过滤

轮环藤酚碱盐酸盐

四、实验材料

1.原料：粉防己粗粉：100g

2.溶剂：9（）〜95%乙醇550ml；丙酮100ml；环己烷200ml：乙酸乙酯200mlo

3.试剂：盐酸；NaOH；浓NH3-H2O少许；雷氏镂盐饱和水溶液50ml；

0.5%Ag2so#10%BaCL;碱性AI2O3（100〜200目）20g；固体NHK1;无水硫酸

钠；碘甲烷0,5ml；pH试纸少许；硅胶G。

4.显色剂：改良Dragendroff试剂

5.定性试剂：碘一碘化钾试剂；苦味酸饱和液；硅鸨酸试剂；碘化钿钾试剂

五、实验方法

（一）总生物碱的提取

称取粉防己粗粉100g置500ml圆底烧瓶中，加90-95%EtOH回流提取

二次（300ml,1小时；250mL45分钟），过滤，二次提取液合并，减压回收乙

醇至无醇味，得提取物。

（二）分离

I.亲脂性生物碱与水溶性生物碱的分离

在（一）所得提取物中加入I%的盐酸约100ml充分搅拌使生物碱溶解，放

置,过滤，滤渣用水洗涤一次后弃去。滤液合并后移至500ml分液漏斗中加70ml

乙酸乙酯-环己烷（3:1）混合溶剂，再滴加浓氨水调PH9〜10,（此时再向水层

滴加浓氨水至再无沉淀析出），振摇萃取,静置分层后放出乙酸乙酯-环己烷（3:1）

层，碱水层再以新的乙酸乙酯-环己烷（3:1）萃取4次（50mlXl,40mlX3次），

最后一次萃取的乙酸乙酯-环己烷（3:1）层中应基本没有生物碱时，认为乙酸乙

酯一环己烷（3:1）萃取基本完全（取乙酸乙酯-环己烷层液滴在滤纸上，

Dragendroff试剂显色不明显为止）。合并乙酸乙酯-环己烷液即为亲脂性生物碱

的提取液，碱水层则为水溶性生物碱提取液。乙酸乙酯-环己烷层用蒸储水洗至

中性，回收溶剂后，残留物抽松，称重，即得脂溶性总生物碱。

2.季钱型生物碱的分离纯化

“1”项中得到的碱水液过滤，滤液加6NHC1调PH3〜4,过滤，滤液加雷氏镀

盐的饱和水溶液至不再生成沉淀为止。滤取沉淀，少量水洗涤，抽干，自然干燥。

称重，用此沉淀的2（）倍量（CH3）2CO溶解，自然过滤，滤去不溶物，丙酮液通过

AI2O3柱除杂质（AbCh约l（）g干法装柱），并用稀丙酮（丙酮:水=5:1）洗至流

出液色极浅为止。再此洗脱液中加入（）.5%Ag2s溶液至不再生成沉淀（记录所

用Ag2s04的毫升数）。放置，自然过滤，弃去沉淀。滤液回收大部分丙酮，放冷

（如有沉淀物再过滤）小心加入与Ag2s04等mol的2%BaCb溶液，放置，自

然过渡，淀液转入蒸发皿中，水浴上浓缩至小体积（约2〜3ml）,趁热转入小三

角瓶中，放置析出无色结晶，得轮环藤酚碱盐酸盐。如有必要可用比0重结晶

一次。

分子量：Ag2so4311.8（）

RaCh203.25

3.汉防己甲素和乙素的分离纯化

吸附剂：碱性AI2O3IOO〜性0目,II〜III级,20g,层析柱：2.5X25cm

样品：拌样。取“1”中所得抽松物200mg用少量丙酮溶解,取0