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2025年食品微生物学基础考试题目及答案一、单项选择题(共20题,每题2分,共40分)1.以下关于革兰氏染色的描述,正确的是()A.革兰氏阳性菌细胞壁含大量脂多糖,脱色后保留结晶紫-碘复合物B.革兰氏阴性菌细胞壁肽聚糖层薄,脱色后被沙黄染成红色C.染色关键步骤是初染时结晶紫的浓度D.所有芽孢杆菌均为革兰氏阴性菌答案:B2.食品中常见的耐高渗透压微生物主要是()A.嗜热链球菌B.金黄色葡萄球菌C.鲁氏酵母D.产气荚膜梭菌答案:C3.微生物典型生长曲线中,代谢活跃但细胞数目无显著增加的阶段是()A.延迟期B.对数期C.稳定期D.衰亡期答案:A4.以下关于水分活度(Aw)的描述,错误的是()A.多数细菌生长需要Aw>0.90B.霉菌可在Aw=0.80左右生长C.金黄色葡萄球菌产肠毒素的最低Aw为0.86D.降低Aw只能通过干燥实现答案:D5.超高压杀菌(HPP)的主要作用机制是()A.破坏微生物细胞膜和蛋白质三维结构B.产生自由基损伤DNAC.升高温度导致蛋白质变性D.抑制微生物酶活性答案:A6.以下属于革兰氏阴性、兼性厌氧的食源性致病菌是()A.单核细胞增生李斯特菌B.沙门氏菌C.蜡样芽孢杆菌D.肉毒梭菌答案:B7.检测食品中大肠菌群时,多管发酵法的关键指标是()A.产酸不产气B.产酸产气C.不产酸产气D.产碱产气答案:B8.以下微生物中,属于食品发酵工业常用益生菌的是()A.黑曲霉B.植物乳杆菌C.黄曲霉D.铜绿假单胞菌答案:B9.巴氏杀菌的标准条件(针对牛奶)通常是()A.121℃,15秒B.72-75℃,15-30秒C.63℃,30分钟D.85℃,5分钟答案:B10.食品中霉菌毒素的产生与以下哪项无关?()A.温度B.氧气浓度C.微生物种类D.食品包装颜色答案:D11.以下关于微生物检测中无菌操作的描述,错误的是()A.接种环需灼烧至红热后立即使用B.超净工作台需提前30分钟开启紫外灯消毒C.样品稀释时需用无菌生理盐水D.培养基灭菌后需冷却至45℃左右倒平板答案:A12.引起罐头食品“平酸腐败”的主要微生物是()A.嗜热脂肪芽孢杆菌B.枯草芽孢杆菌C.酵母菌D.乳酸菌答案:A13.以下哪种微生物可产生具有生物防腐作用的细菌素?()A.大肠杆菌B.乳酸链球菌C.沙门氏菌D.变形杆菌答案:B14.食品中微生物数量的常用检测方法是()A.显微镜直接计数法(血球计数板)B.平板菌落计数法(PCA)C.比浊法测OD值D.PCR法检测基因答案:B15.以下关于肉毒梭菌的描述,正确的是()A.革兰氏阴性,严格好氧B.产生的神经毒素是已知最毒的生物毒素C.加热至100℃即可完全灭活其芽孢D.主要污染酸性罐头食品答案:B16.食品工业中常用的化学防腐剂山梨酸,其抑菌机制是()A.破坏细胞膜通透性B.抑制微生物呼吸链C.与巯基结合抑制酶活性D.干扰DNA复制答案:A17.以下属于食品中指示微生物的是()A.金黄色葡萄球菌B.副溶血性弧菌C.菌落总数D.黄曲霉毒素答案:C18.微生物在食品中生长的最适pH范围通常为()A.2-4(强酸性)B.4-6(弱酸性)C.6-8(中性附近)D.8-10(弱碱性)答案:C19.以下关于酵母菌的描述,错误的是()A.多数为单细胞,无性繁殖以出芽为主B.可用于面包发酵(产CO₂)和酒精发酵(产乙醇)C.耐高糖特性使其易导致果酱腐败D.所有酵母菌均为好氧微生物答案:D20.检测食品中沙门氏菌时,选择性增菌培养基常用()A.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)B.四硫磺酸钠亮绿肉汤(TTB)C.脑心浸出液肉汤(BHI)D.马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)答案:B二、填空题(共10题,每题2分,共20分)1.食品中常见的产黄曲霉毒素的霉菌主要是________和寄生曲霉。答案:黄曲霉2.大肠菌群是指一群在________条件下能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。答案:37℃(或36±1℃)3.微生物的热致死时间(TDT)是指在特定温度下,杀死某一样品中微生物所需的________。答案:最短时间4.乳酸菌发酵产生的________可降低食品pH,抑制腐败菌生长。答案:乳酸5.食品中常见的产组胺的微生物主要是________,如摩根氏菌、克雷伯氏菌。答案:肠杆菌科细菌6.超高温灭菌(UHT)的典型条件是________℃,2-4秒。答案:135-1407.食品微生物检测中,菌落总数的报告单位通常为________。答案:CFU/g(或CFU/mL)8.肉毒梭菌A、B型毒素主要污染________类食品,E型毒素多见于水产品。答案:肉类(或低酸性罐头)9.霉菌的繁殖方式包括无性繁殖(产生孢子)和________繁殖(形成子囊孢子等)。答案:有性10.食品工业中常用的生物防腐剂“纳他霉素”主要用于抑制________的生长。答案:霉菌和酵母菌三、简答题(共5题,每题8分,共40分)1.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的细胞壁结构差异,并说明其在食品加工中的意义。答案:革兰氏阳性菌(G+)细胞壁较厚(20-80nm),主要成分为肽聚糖(占80-90%),含磷壁酸;革兰氏阴性菌(G-)细胞壁较薄(10-15nm),肽聚糖层仅占5-10%,外层有脂多糖(LPS)、脂蛋白和外膜。意义:①抗逆性差异:G+菌细胞壁厚,对干燥、高温的耐受性更强(如芽孢杆菌多为G+);G-菌外膜含脂多糖,可能释放内毒素(如沙门氏菌),需重点控制。②药物敏感性:G-菌外膜阻碍抗生素进入,更难杀灭,食品加工中需更高杀菌强度。③染色鉴别:通过革兰氏染色可快速区分两类菌,辅助检测(如检测大肠杆菌等G-致病菌)。2.分析水分活度(Aw)与pH对微生物生长的协同作用,并举例说明。答案:Aw和pH通过影响微生物细胞渗透压、酶活性及膜通透性协同作用。低Aw(如Aw<0.90)可抑制多数细菌生长,但某些耐渗微生物(如霉菌、部分酵母)仍可在低Aw下存活;低pH(如pH<4.5)通过质子化作用破坏细胞内酸碱平衡,抑制中性环境微生物。协同作用示例:果酱(高糖,Aw≈0.80;含果酸,pH≈3.5)中,低Aw抑制细菌,低pH抑制多数霉菌,仅耐高糖酵母(如鲁氏酵母)可能导致腐败;若果酱pH升高(如加工时糖添加不足),即使Aw相同,霉菌也可能大量繁殖。3.解释超高压杀菌(HPP)的原理及其在食品中的应用优势。答案:原理:超高压(100-1000MPa)通过破坏微生物细胞膜(导致内容物泄漏)、蛋白质三维结构(变性失活)及核酸氢键(断裂)实现杀菌,对小分子(如风味物质、维生素)无影响。优势:①非热杀菌:保留食品原有营养(如维生素C、花色苷)和风味(如果汁的新鲜口感);②均匀杀菌:压力传递无死角,适合块状、黏稠食品(如果泥、即食海鲜);③能耗低:仅需加压和卸压,无需持续加热;④延长货架期:有效杀灭致病菌(如李斯特菌)和腐败菌,保持食品新鲜度。4.简述食品中霉菌毒素的主要种类及控制措施。答案:主要种类:①黄曲霉毒素(AFB1、AFB2等):由黄曲霉、寄生曲霉产生,强致癌性,多见于花生、玉米;②赭曲霉毒素A(OTA):由赭曲霉、纯绿青霉产生,肾毒性,污染谷物、咖啡;③玉米赤霉烯酮(ZEN):由镰刀菌产生,类雌激素效应,污染小麦、玉米;④展青霉素(Pat):由扩展青霉产生,神经毒性,污染腐烂水果(如果汁)。控制措施:①原料控制:收获时避免机械损伤,干燥至安全水分(如玉米<14%);②储存管理:低温(<10℃)、低湿(Aw<0.70)、充CO₂或N₂气调;③加工处理:筛选剔除霉变颗粒(如色选机),碱处理(如玉米加工时用石灰水破坏黄曲霉毒素);④检测监控:定期用HPLC或免疫层析法检测毒素含量,符合国家标准(如我国规定花生及其制品中AFB1≤20μg/kg)。5.简述乳酸菌在发酵食品中的功能及作用机制。答案:功能:①改善风味:产生乳酸、乙酸、双乙酰等风味物质(如酸奶的酸香);②提升营养:合成维生素(如B族维生素)、分解乳糖(缓解乳糖不耐受);③生物防腐:产有机酸(降低pH)、细菌素(如乳酸链球菌素Nisin)抑制腐败菌(如沙门氏菌)和致病菌;④益生作用:调节肠道菌群平衡(如双歧杆菌),增强免疫。作用机制:①糖代谢:通过同型发酵(葡萄糖→乳酸)或异型发酵(葡萄糖→乳酸+乙醇+CO₂)产生有机酸,降低环境pH;②抗菌物质分泌:产生细菌素(如Nisin)破坏敏感菌细胞膜(形成孔道导致内容物泄漏);③竞争排斥:通过黏附肠道上皮细胞,占据生态位,抑制有害菌定植。四、论述题(共2题,每题20分,共40分)1.从微生物代谢角度论述食品腐败的过程及控制策略。答案:食品腐败是微生物利用食品中的营养物质(碳水化合物、蛋白质、脂肪)进行代谢活动,产生腐败产物(酸、胺、硫化氢等)的过程,可分为三个阶段:(1)初期(延迟期):微生物适应环境,代谢活动弱,主要通过诱导酶合成(如分解乳糖的β-半乳糖苷酶)准备利用底物。此时食品感官无明显变化,但微生物数量开始缓慢增加。(2)中期(对数期):微生物代谢活跃,根据底物不同表现为:①碳水化合物分解:好氧菌(如枯草芽孢杆菌)进行有氧呼吸,葡萄糖→CO₂+H₂O;厌氧菌(如乳酸菌)进行发酵,葡萄糖→乳酸(产酸)或乙醇+CO₂(产气,如面包“胀袋”)。②蛋白质分解:腐败菌(如变形杆菌、假单胞菌)分泌蛋白酶(如酪蛋白酶)水解蛋白质为氨基酸,进一步通过脱氨基(产生氨、吲哚)、脱羧基(产生尸胺、腐胺)反应,生成具有恶臭的胺类物质(如三甲胺导致鱼类“腥臭味”)。③脂肪分解:嗜冷菌(如荧光假单胞菌)分泌脂肪酶,水解甘油三酯为游离脂肪酸(如油酸)和甘油,脂肪酸氧化产生酸败味(如“哈喇味”)。(3)后期(稳定期至衰亡期):营养耗尽,代谢产物积累(如乳酸浓度>1.5%),微生物死亡,腐败产物(如组胺、生物胺)达到峰值,食品出现明显变质(如肉类发黏、液体浑浊)。控制策略需针对代谢关键环节:①抑制微生物生长:通过降低Aw(干燥、腌制)、调节pH(添加有机酸)、控制温度(冷藏/冷冻)或使用气调包装(降低O₂,升高CO₂抑制好氧菌);②阻断代谢底物:通过加热(灭酶)或添加酶抑制剂(如抗坏血酸抑制多酚氧化酶)减少营养物质分解;③利用有益代谢:接种发酵剂(如乳酸菌)优先利用底物,快速产酸降低pH,抑制腐败菌(如泡菜发酵);④杀灭微生物:采用热力杀菌(巴氏杀菌、高压蒸汽灭菌)、非热杀菌(超高压、辐照)破坏微生物结构,终止代谢活动。2.结合具体案例分析食源性致病菌的污染途径、危害及防控技术。答案:以“即食熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌(Lm)污染”为例:(1)污染途径:①原料污染:生猪、牛等携带Lm(粪便带菌率5-10%),屠宰时肉品接触带菌粪便或水;②加工环节:设备(如切片机)、工器具(如刀具)清洁不彻底,形成生物被膜(Lm在不锈钢表面可存活数月);③人员携带:操作人员手部或鼻腔带菌(健康人群带菌率3-5%),接触食品造成污染;④储存销售:即食产品冷藏(4℃)时Lm仍可缓慢生长(最低生长温度-0.4℃),若储存时间过长(>7天),菌量可从10²CFU/g增至10⁶CFU/g。(2)危害:Lm是胞内致病菌,通过摄入污染食品(如冷盘火腿)进入人体,侵袭肠道上皮细胞,经淋巴系统进入血液,引发李斯特菌病。典型症状为发热、脑膜炎(死亡率20-30%),对孕妇(可致流产)、婴幼儿、免疫力低下者危害极大(我国规定即食食品中Lm不得检出)。(3)防控技术:①原料控制:收购前检测原料肉中Lm(PCR快速检测),拒收阳性批次;②加工控制:-清洁消毒:使用200ppm次氯酸钠或过氧乙酸(0.2%)对设备表面消毒,破坏生物被膜;-分区管理:生熟分开(物理隔离),避免交叉污染;-工艺优化:采用高压蒸汽灭菌(121℃,15分钟)或超高压杀菌(600MPa,5分钟)杀灭Lm;③人员管理:操作人员定期体检(咽拭子检测Lm),工作时戴手套、口罩,严格执行洗手消毒(含醇洗手液);④储存销售:即食产品采用气调包装(CO₂浓度>30%抑制Lm),冷藏温度控制在0-4℃,保质期不超过5天;⑤追溯监测:建立HACCP体系,关键控制点(CCP)包括原料验收、杀菌工序、储存温度,定期抽样检测(ISO11290标准),确保终产品Lm未检出。五、案例分析题(共1题,30分)某食品企业生产的即食泡菜(pH3.8,Aw0.92)在保质期(30天,4℃冷藏)内出现胀袋(包装膨胀)和酸臭异味,经检测微生物总数为10⁷CFU/g(标准≤10⁵CFU/g)。请分析:(1)可能导致胀袋和异味的微生物种类及代谢特征;(2)微生物污染的可能途径;(3)提出3项针对性的控制措施。答案:(1)可能的微生物及代谢特征:①耐酸乳酸菌(如肠膜明串珠菌):泡菜pH3.8(酸性环境),多数细菌被抑制,但耐酸乳酸菌可生长。其进行异型发酵(葡萄糖→乳酸+乙醇+CO₂),代谢产生CO₂(导致胀袋)和乙酸(酸臭味)。②酵母菌(如酿酒酵母):Aw0.92
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