江苏高考生物一轮复习选择性必修3　阶段28　基因工程学生用

阶段28基因工程【滚动判断】1.DNA聚合酶的作用机制是催化以DNA为模板的子链延伸。（）2.启动子是基因编码区中RNA聚合酶识别并结合的部位。（）3.神经细胞兴奋后恢复为静息状态的过程消耗ATP。（）4.小鼠体内血糖浓度对胰高血糖素的分泌存在反馈调节。（）5.受到光刺激后光敏色素的结构会发生变化，进而影响特定基因的表达。（）6.脱分化和再分化的本质都是基因的选择性表达。（）7.悬浮生长的动物细胞传代培养和原代培养都需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，必须控制好酶的用量和处理时间。（）8.动物细胞培养时添加适量抗生素有助于实现“无毒”。（）9.动物细胞融合和植物细胞融合操作步骤相同，但诱导融合的手段不完全相同。（）10.单克隆抗体制备时多次注射同种抗原蛋白，主要目的是大量获得免疫过的B细胞。（）11.单克隆抗体制备过程中，克隆化培养后再用选择培养基筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。（）12.耐高温的DNA聚合酶浓度过低会引起非特异性扩增产物增多。（）13.与传统的抗生素抗性基因相比，用GFP(绿色荧光蛋白基因)作为标记基因具有可定性、定量和定位分析的显著优点。（）14.Mg2＋浓度过高或引物太短会引起非特异性扩增产物增多。（）15.某PCR的一对引物的退火温度差异不能太大，否则影响扩增效果。（）16.引物设计时可在引物的3′端添加合适的酶切位点或同源序列，便于基因表达载体的构建。（）【基础填空】1.基因工程的原理是，优点是定向改造生物的、克服远缘杂交不亲和障碍。2.重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(简称：限制酶)，主要是从生物中分离纯化出来的。可以识别的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的键，产生。(2)DNA连接酶连接两个，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的键。按来源可分为E.coliDNA连接酶和_，两者都能连接，但是E.coliDNA连接酶连接平末端的效率比后者很多。目的基因和载体能避免自身环化和反向连接，提高连接的有效性。(3)载体①种类：、λ噬菌体的衍生物或噬菌体、动植物病毒等。②特点：具有一个或多个；在受体细胞中能进行，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制；具有，便于筛选。③载体上的基因一般是一些抗生素的抗性基因，作用是。天然的质粒必须经过才能作为载体。3.基因工程中获取目的基因的方法有：、、人工合成等。4.PCR技术的三个步骤为：第一步，加热至90℃以上，DNA解链为单链；第二步，冷却至50℃左右，引物结合到互补DNA链；第三步，加热至72℃左右，耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。如此重复循环多次。5.基因表达载体的组成：等。启动子是识别和结合的部位，驱动转录。6.农杆菌转化法用于将目的基因导入细胞；将目的基因导入动物细胞的方法常用；将目的基因导入微生物细胞的方法：一般先用处理细胞使其处于一种能吸收周围环境中分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。还可利用病毒的实现对相应宿主细胞的特异性导入。7.检查转基因抗虫棉是否培育成功(1)分子水平的检测，包括通过等技术检测棉花的染色体DNA上是否插入了Bt基因(DNA分子杂交技术)或检测Bt基因是否转录出了mRNA(分子杂交技术)；从转基因棉花中提取蛋白质，用相应的抗体进行杂交，检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白等。(2)需要进行水平的鉴定。8.蛋白质工程通过对基因操作来实现对天然蛋白质的改造的主要原因是：①；②。9.DNA在_和中溶解度低，而在_中溶解度较高。DNA鉴定的主要流程是“溶”(DNA粗提物溶解在2mol·L－1NaCl溶液中)→“加”()→“沸”()→“冷”(冷却后观察蓝色的出现)。10.高中阶段不选择猪血作为粗提取DNA材料的原因是。11.变性温度主要取决于的长度和G、C的比例；退火温度主要取决于的长度和，延伸温度主要取决于耐高温的DNA聚合酶的最适温度，延伸时间主要取决于。【情境填空】1.将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切割处，同时产生个黏性末端或平末端。而切割质粒则只需要限制酶切割1次，因为。2.ATP、GTP、CTP和UTP是细胞内的四种高能磷酸化合物，它们彻底水解的产物中只有不同。推测GTP参与RNA合成时的作用可能是提供和。3.基因工程选择合适的受体细胞非常重要(1)人类第一个转基因药物选择大肠杆菌作为受体细胞的主要原因是。(2)如要利用基因工程获取糖蛋白、有生物活性的胰岛素，应采用真核生物酵母菌，而不能用大肠杆菌作为受体细胞，理由是。(3)选择受精卵作为获得乳腺生物反应器的原因主要是。(4)检验某乳腺生物反应器的基因表达载体构建是否成功，宜选择(填“受精卵”或“乳腺上皮细胞”)，其主要原因是。4.检测棉花中导入的抗虫基因是否表达的最简便的方法是。5.电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带。下图是从甜菜细胞基因组中提取到的总DNA凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象。(1)只出现一条带的原因是。(2)出现“拖尾”现象的原因是。6.传统基因表达载体的构建需要酶，与传统PCR产物克隆不同，无缝克隆的载体末端