肠杆菌科11章弧菌属复习课程

肠杆菌科11章弧菌属第一节埃希菌属（Escherichia）一、生物学性状（一）形态与染色G-短杆菌，周鞭毛、有菌毛（二）培养特性1.兼型厌氧，营养要求不高2.普通琼脂平板

圆形凸起、边缘整齐、灰白色、光滑型菌落3.SS平板菌落呈粉红色4.液体培养基混浊生长大肠埃希菌于普通营养平板培养生长的菌落

血平板MAC平板大肠埃希菌菌落大肠埃希菌IMViC（++--）右侧对照（三）生化反应1.发酵多种糖类，产酸产气2.IMViC试验结果++--3.KIA：斜面、底层均产酸、产气、硫化氢-、4.动力+KIA：克氏双塘铁-高层斜面乳糖、葡萄糖、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、酚红细菌在双糖铁培养基中的生长现象1.利用葡萄糖底层变黄2.利用乳糖斜面和底层同时变黄3.产生硫化氢变黑4.产生气体培养基断裂或有气泡变黄用A表示，变红用K表示（四）抗原构造三种：O、H、K抗原O：特异性多糖、170种、IgMH：鞭毛上、56种、IgG（五）抵抗力较强，易产生耐药性二、所致疾病肠道外感染泌尿道感染最多见

化脓性感染肠道内感染—腹泻引起腹泻的大肠埃希菌肠产毒型大肠埃希菌enterotoxigenic

E.coli

ETEC肠侵袭型大肠埃希菌enteroinvasiveE.coli

EIEC肠致病型大肠埃希菌enteropathogenicEPECE.coli

肠出血型大肠埃希菌enterohemorrhagicEHECE.coli

肠集聚型大肠埃希菌enteroaggregativeEAggECE.coli

肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）致病物质肠毒素菌毛粘附素内毒素K抗原所致疾病5岁以下婴幼儿腹泻旅游者腹泻肠致病型大肠埃希菌（EPEC

）致病物质不产生肠毒素及其他外毒素无侵袭力所致疾病婴幼儿腹泻（2）肠致病型大肠埃希菌(EPEC)

致病物质粘附因子：质粒介导粘附类型

局限性粘附病菌呈块状粘附弥散型粘附病菌单个分散附机制

粘附和破坏肠粘膜微绒毛上皮细胞排列紊乱，功能受损，导致腹泻所致疾病婴幼儿腹泻肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）致病物质不产肠毒素，侵袭结肠粘膜上皮细胞所致疾病主要侵犯较大儿童和成人腹泻呈脓血便，有里急后重表现EIEC无动力、生化反应和抗原结构类似志贺菌（3）肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)

较少见致病物质外膜蛋白质粒编码机制侵袭结肠粘膜上皮并繁殖细菌死亡后释放内毒素，引起炎症所致疾病类似菌痢

肠出血型大肠埃希菌（EHEC）亦称为vero毒素大肠埃希菌致病物质菌毛：粘附作用毒素：vero毒素所致疾病出血性结肠炎溶血性尿毒综合征（HUS）Vero毒素(志贺样毒素)(溶原性噬菌体)引起上皮细胞微绒毛破坏。Vero毒素Ⅰ:与志贺毒素基本相同;Vero毒素Ⅱ:与志贺毒素60%同源性。1A-5B:B亚单位--特异糖脂受体结合A亚单位—裂解60S核糖体的28SrRNA,阻止与tRNA结合,终止蛋白合成。Vero毒素Ⅱ：破坏肾小球内皮细胞IntimateAdherenceofEHECtoEpithelialCellsThe“lifecycle”ofE.coliO157:H7

5-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms

肠集聚型大肠埃希菌EAggEC致病物质

毒素肠集聚耐热毒素（EAST）聚集黏附菌毛所致疾病婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便

四、微生物检验（一）肠道外感染标本1.检验程序2.标本采集血液、痰、尿液、脑脊液、脓等3.直接涂片镜检

4.分离培养粪便、脓汁：选择培养基

无菌部位：增菌、血平板

尿路感染：计数细菌数鉴定生化反应和血清学鉴定（1）初步鉴定KIA、MIU、IMViC、触酶、氧化酶、硝酸盐还原试验（2）最后鉴定肠杆菌科鉴定试剂盒（3）血清学试验鉴定肠内感染大肠埃希菌ETEC、EPEC、EIEC、EHEC三、微生物学检查（一）临床标本的检查肠道内感染涂片染色检查分离培养鉴定肠道外感染接种于选择培养基大肠菌群：指在37℃24h内发酵乳糖产酸产气的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属。在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标≤3个大肠菌群/1L饮水≤100个细菌总数/1ml饮水（二）卫生细菌学检查大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准：细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数第二节志贺菌属（shigella）一、生物学性状（一）形态与染色G-小杆菌，由菌毛，无芽胞、鞭毛、荚膜（二）培养特性1、营养要求不高，兼性厌氧2、普通琼脂平板：中等大小、半透明的光滑菌落（宋内：扁平、粗糙型菌落）3、选择培养基不发酵乳糖（三）生化反应分解葡萄糖，产酸不产气；不发酵乳糖；无动力（四）抗原构造只有O、K抗原根据O抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌A1~10福氏志贺菌B1~6，X，Y变种鲍氏志贺菌C1~18宋内志贺菌D1（五）抵抗力较弱，对酸敏感，易产生耐药性（六）变异性1、SR变异2、耐药性变异二、致病性与免疫性（一）致病物质1、侵袭力菌毛粘附于回肠末端和结肠粘膜上皮细胞2、内毒素肠粘膜通透性→毒素吸收→发热、神志障碍、休克破坏肠粘膜→炎症、溃疡、脓血粘液便肠壁植物神经→肠蠕动失调、痉挛→腹痛、里急后重内毒素血症3、外毒素志贺毒素（ST）质粒编码有3种毒性:细胞毒性→细胞坏死

神经毒性→损伤神经系统

肠毒素毒性→水样腹泻蛋白质合成中断：上皮细胞损伤、肾小球内皮损伤—溶血性尿毒综合症大质粒：粘附、侵袭、胞内繁殖、细胞间扩散（二）所致疾病细菌性痢疾

致病机理：1、急性菌痢细菌粘附肠粘膜LPS、细胞因子2、中毒性痢疾释放大量LPS3、慢性痢疾4、带菌者（三）免疫性以粘膜免疫为主，易反复感染三、微生物学检查及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）最后诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验四、防治原则1、控制传染源，切断传播途径2、Sd活疫苗：链霉素依赖株，是一种变异株，环境中存在链霉素时能生长繁殖。3、治疗：易引起耐药性，联合用药第三节沙门菌属（Salmonella）一大群人与动物肠道中的寄生菌，菌群菌型甚多，仅少数对人致病，其中许多为人畜共患病。伤寒表现持续高热伤寒病容玫瑰疹肝脾肿大相对缓脉伤寒玛丽一、生物学性状（一）形态与染色G-细长、直杆菌，周身鞭毛、菌毛（二）生化反应与培养特性培养特性1.营养要求不高，兼性厌氧2.普通琼脂上中等大小、无色半透明的S型菌落3.选择培养基上小至中等，透明或半透明菌落，不发酵乳糖4.SS琼脂上中心黑色的菌落生化反应1.不发酵乳糖和蔗糖2.发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌外）3.IMViC-+-+4.产硫化氢，不分解尿素伤寒沙门菌IMViC-+-+（三）抗原构造有O、H两种抗原，少数有Vi抗原H抗原：分第1相和第2相第1相：特异性高，又称特异相，刺激机体产生IgG，以小写的英文字母表示第2相：沙门菌所共有，称非特异相，以阿拉伯数字表示双相菌：同时具备H抗原两相的细菌单相菌：仅有一相的细菌二、致病性与免疫性（一）致病物质1.侵袭力M（microfold）细胞:微皱褶细胞，位于回肠粘膜细菌粘附M细胞粘膜固有层巨噬细胞内2.内毒素：体温升高、白细胞数↓、中毒性休克。3.肠毒素：如鼠伤寒沙门菌（二）所致疾病及致病机理1.肠热症伤寒、副伤寒伤寒：伤寒沙门菌副伤寒：甲型副伤寒沙门菌、肖沙门菌、希沙门菌（1）初期：淋巴结-血流-骨髓、肝、脾、胆、肾吞噬细胞胆囊-----肠道-------粪排菌皮肤----血栓出血--玫瑰疹肾-----尿肝脾-----肿大骨髓伤寒沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结

固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症伤寒和副伤寒的致病机理2.胃肠炎（食物中毒）3.败血症4.无症状带菌者重要传染源（三）免疫性细胞免疫，免疫力牢固三、微生物学检查标本伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症第1周取静脉血 可疑食物 血第2周起取粪、尿 粪、呕吐物 全程取骨髓液 SS平板生化反应血清学鉴定双糖发酵等玻片凝集试验血清学诊断肥达反应原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒，副伤寒结果判断一般是O凝集价≥1:80，H凝集价≥1:160OIgM,出现早，维持时间短，特异性差

HIgG,出现迟，维持时间长，特异性强O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患过伤寒动态观察：恢复期效价增加≥4倍第11章弧菌属

第一节霍乱弧菌（V.cholerae）一、生物学性状（一）形态染色

G-弧形或逗点形菌单鞭毛、无芽胞、荚膜鱼群样排列、运动活泼（二）培养特性与生化反应1、兼性厌氧，营养要求不高2、耐碱不耐酸3、碱性蛋白胨水和碱性琼脂平板生长良好4、碱性琼脂平板圆形、较大、扁平、无色透明或半透明的露滴样菌落5、TCBS黄色菌落6、亚碲酸钾灰褐色菌落（三）抗原结构与分型O抗原O-1群霍乱弧菌：

非O-1群霍乱弧菌O139血清群不典型O-1群霍乱弧菌O-1群3个血清型：稻叶型、小川型、彦岛型（3个抗原因子A、B、C）

两个生物型：古典生物型ElTor生物型（四）抵抗力不耐酸霍乱弧菌两个生物型的鉴别二、致病性与免疫性（一）致病物质1、霍乱肠毒素（choleraenterotoxinCE）B亚单位结合GM1A亚单位活化cAMP米泔水样便2、侵袭力鞭毛、菌毛、溶血-溶细胞蛋白血凝素/蛋白酶（二）所致疾病霍乱甲类传染病典型表现分为4个期前驱期吐泻期脱水虚脱期恢复期（三）免疫性免疫力牢固，体液免疫为主三、微生物检查1.标本采集2.直接镜检悬滴法-观察动力革兰染色-观察形态3.分离培养碱性蛋白胨水或平板TCBS四、防治原则加强卫生管理接种疫苗治疗：及时补充液体和电解质应用抗生素第五节副溶血弧菌一、生物学性状（一）形态染色G-直或微弯的杆菌，无芽胞、荚膜，单鞭毛（二）培养特性1、嗜盐性，营养要求不高2、无盐培养基不生长3、液体培养基混浊生长，形成菌膜（三）生化反应1、耐盐试验不含NaCl和100g/LNaCl不生长30g/LNaCl和70g/LNaCl生长2、神奈川现象（KP）副溶血弧菌在一种特殊培养基上能使人或兔红细胞溶血，而对马红细胞不溶血的现象。Wagatsumaagar培养基3、氧化酶阳性、蔗糖阴性、脲酶阴性二、致病性1、菌毛2、KP阳性菌株耐热直接溶血素溶血作用（TDH）细胞致死活性肠毒素作用心脏毒性（致死活性）耐热相关溶血素（TRH）三、诊断与防治1、微生物检查2、防治：抗生素第六节幽门螺杆菌一、生物学性状1、形态染色G-弯曲杆菌，单端或双端2~6根鞭毛，无芽胞2、培养特性（1）为需氧菌，营养要求高（2）选择培养基改良的Skirrow琼脂3、生化反应不活泼，氧化酶和过氧化氢酶阳性尿素酶试验强阳性（鉴定依据）4、抵抗力较弱二、致病性1、致病物质

侵袭因子：脲素酶、鞭毛、菌毛毒素：外毒素空泡毒素A(VacA)细胞毒素相关蛋白A(CagA)胞外酶和蛋白：触酶、磷脂酶、趋化蛋白2、所致疾病慢性胃炎、消化性溃疡，诱发胃癌三、微生物学检查1、标本采集