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文档简介

附件1

ICS编号

CCS编号

团体标准

T/CTESGSXXX—20XX

长江流域河流水生态监测技术规程

Technicalregulationforaquaticecologicalmonitoringofriverinthe

ChangjiangRiverBasin

(征求意见稿)

20XX-XX-XX发布20XX-XX-XX实施

长江技术经济学会发布

目次

前言.......................................................................................................................................1

1适用范围...........................................................................................................................2

2规范性引用文件...............................................................................................................2

3术语和定义.......................................................................................................................2

4总体技术规定...................................................................................................................2

4.1监测内容...................................................................................................................3

4.2监测样点...................................................................................................................3

4.3监测频次与时间.......................................................................................................5

5水生生境监测...................................................................................................................5

5.1基础信息...................................................................................................................5

5.2水质特征...................................................................................................................6

5.3水文水动力特征.......................................................................................................6

5.4河道形态特征...........................................................................................................6

5.5底质特征...................................................................................................................7

5.6河岸带特征...............................................................................................................7

6水生生物监测...................................................................................................................8

6.1浮游植物...................................................................................................................8

6.2浮游动物.................................................................................................................10

6.3底栖硅藻.................................................................................................................11

6.4大型底栖无脊椎动物.............................................................................................12

6.5水生维管束植物.....................................................................................................14

6.6鱼类.........................................................................................................................15

6.7鱼类早期资源.........................................................................................................19

6.8专项监测.................................................................................................................22

7监测质量保证与控制.....................................................................................................25

7.1人员培训.................................................................................................................25

7.2野外质量保证与控制.............................................................................................25

7.3实验室质量保证与控制.........................................................................................25

8数据整理与保存.............................................................................................................26

8.1资料的整理.............................................................................................................26

8.2资料保存与要求.....................................................................................................26

附录A(资料性附录)河流水生态监测设备及试剂........................................................27

附录B(资料性附录)河流水生态监测记录表.................................................................28

附录C(资料性附录)浮游植物检测记录表.....................................................................30

附录D(资料性附录)浮游动物检测记录表....................................................................30

附录E(资料性附录)底栖硅藻鉴定计数记录表.............................................................30

附录F(资料性附录)大型底栖无脊椎动物鉴定计数记录表.........................................31

i

附录G(资料性附录)水生维管束植物标本记录标签....................................................31

附录H(资料性附录)鱼类现场调查记录表....................................................................32

附录I(资料性附录)鱼类早期资源调查—卵苗采集记录表..........................................33

附录J(资料性附录)中华鲟食卵鱼监测记录表..............................................................33

附录K(资料性附录)长江江豚目视监测记录表............................................................34

ii

长江流域河流水生态监测技术规程

1适用范围

本规程规定了长江流域河流水生态监测的内容和技术要求,适用于长江流域(不包括

长江河口)以河流水生态保护与管理为目的,服务于河流水生态状况评估、趋势分析、问题

诊断以及管理措施制定等需求的水生生境和水生生物的监测。

2规范性引用文件

下列文件中的条文通过在本规程中引用而成为本规程的条文,与本规程同效。当上述

标准和规范被修订时,应使用其最新版本。

GB3838地表水环境质量标准

GB50179河流流量测验规范

HJ493水质样品的保存和管理技术规定

HJ710.7生物多样性观测技术导则内陆水域鱼类

HJ710.8生物多样性观测技术导则大型底栖无脊椎动物

SC/T9402淡水浮游生物调查技术规范

SL219水环境监测规范

SL733内陆水域浮游植物监测技术规程

3术语和定义

3.1水生态监测aquaticecologicalmonitoring

指利用物理、化学和生物学等技术手段监视、测定反映特定水生态系统质量及其变化趋

势的各种标志数据,这些标志数据包含水生生物和水生生境两类。

3.2水生生境aquatichabitats

指水生生物个体、种群或群落赖以生存的物理、化学和生物因素,包括必需的生存条

件和其他对水生生物起作用的因素。

3.3底栖硅藻benthicdiatom

指在水体底部的自然或人工基质上,而不是悬浮在水中生长的硅藻。

3.4鱼类早期资源fishesofearlylifehistorystage

指处在早期生活史阶段的鱼类资源,鱼类早期生活史阶段指鱼类个体从受精开始,经

过胚胎(卵)和仔鱼期,到稚鱼期的早期阶段。

4总体技术规定

2

4.1监测内容

河流水生态监测内容按河流水生生境和水生生物两类要素进行划分,其中水生生境要

素包括河流基础信息、水质特征、水文水动力学特征、河道形态特征、底质特征和河岸带特

征等内容,水生生物要素包括浮游植物、浮游动物、底栖硅藻、大型底栖无脊椎动物、水生

维管束植物、鱼类、鱼类早期资源、中华鲟自然繁殖和江豚等内容。

4.2监测样点

4.2.1一般原则

4.2.1.1连续性原则:尽可能沿用历史监测样点,并与其他监测(水文或水质)站点相衔接,

保持监测数据的连续性和可比性。

4.2.1.2一致性原则:水生生物监测样点尽可能与水生生境样点一致,以获取足够信息,用

于解释观测到的水生态质量状况。

4.2.1.3代表性原则:监测样点应具有足够的代表性;如果监测目的是大范围、全面的流域

水生态质量监测,样点需覆盖整个流域范围;如果监测目的是评估人类活动(采砂、筑坝、

建设水电站等)或者污染事故的影响,则需在受影响及可能受影响区域设置样点。

4.2.1.4可行性原则:在确保达到监测目的、保证必要的采样精度和样本量前提下,要兼顾

监测采样的可实施性,以期用最少的样点和人力、物力、时间投入,获得最有效的数据。

4.2.2前期调研

选择监测样点前,需要对研究区域进行前期调查,全面了解研究区域河流水文地貌特

征、生境状况、水环境质量、生物群落特征等相关信息。

a)调查水文气候、地质地貌资料,如水位、水量、流速、降水量、蒸发量及水情变化;

b)调查水体周围城市和人口分布、工业布局、污染源及其排污情况、城市给排水情况、

农业灌溉排水情况和农药、化肥的使用种类、数量及时间,掌握河流污染的时空分布;

c)调查水利工程的概况,如水电站、闸坝等断点或节点障碍物规模和分布情况;

d)调查水体沿岸土地利用和资源(包括森林、矿产、土壤、耕地、水资源)现状,特

别是植被破坏和水土流失,以及河流堤防建设及硬化情况;

e)调查涉水保护区(自然保护区、种质资源保护区等)的类型和分布,特别要关注重

要水生生物产卵场、索饵场、越冬场和洄游通道等关键生境;

f)实地调查采样点的河宽、水深、河床结构、河岸带形态、交通状况和可达性等。

4.2.3工作单元

根据河流空间尺度特点及其对水生态监测要求的不同将要开展监测和评价的河流划分

为评价河段、监测河段、监测断面和监测样点(样方、样带、垂线)四个层次的工作单元(见

图1),它们的布设应符合以下要求:

a)评价河段:开展4.2.2调研后,根据河流水文地貌、沿岸带形态、水质状况、生物

群落、流域社发展特征或相关管理要求等,将河流划分为相对均质的若干河段作为评价河段;

每条河流设置的评价河段数量不宜低于3个,每个评价河段长度不宜大于100km;长江干流

3

及一级支流建议每50~100km设置1个评价河段,二级及以上支流按每20~50km设置1个

评价河段;

b)监测河段:在每个评价河段内至少设置1个监测河段,评价河段上下游差异较大时

应增设监测河段,监测河段长度按40倍河宽确定,但最短不小于150m,最长不大于1km;

c)监测断面:监测断面按等距离设置于监测河段内,按4倍河宽等分距离布设11个

监测断面;监测断面设置除考虑代表性外,还应兼顾监测便利性和取样安全性;

d)监测样点(样方、样带、垂线):在监测河段或监测断面上布设的监测样点(样方、

样带、垂线)。

监测与评价河流

山区评价河段丘陵评价河段评价河段

113

42

1076

9851

水质监

测垂线

中泓线

监测断面

底栖硅藻水生维管束植物监测

监测样点样方

监测河段

水流方向采样方向

图1河流水生态监测工作单元

4.2.4工作要求

4.2.4.1水质样品采集,监测断面和监测垂线设置应符合以下要求:

a)河宽小于50m的,在监测河段正中间的6号监测断面与中泓线的交汇处设置1条监

测垂线;河宽在50~100m的,设置左右2条监测垂线;河宽在100~1000m的,设置左、中、

右3条监测垂线;河宽大于1000m的,应相应增加监测垂线.

b)水深小于5m,监测垂线仅采集表层0.5m水样;水深在5~10m的,采集水面下0.5m

和水底上0.5m处的混合水样;水深大于10m的,采集水面下0.5m、水底上0.5m和中层1/2

水深处的混合水样。

4.2.4.2水文水动力学特征在1、6和11号监测断面开展,并尽量避开回水湾和沉水植物。

4.2.4.3河道形态和河岸带特征,沿监测河段纵向设置3~5个50m代表样带开展监测。

4.2.4.4底质特征监测样点设置与底栖硅藻和大型底栖无脊椎动物保持一致。

4.2.4.5浮游植物和浮游动物监测断面和监测垂线设置与4.2.4.1同。

4

4.2.4.6底栖硅藻和大型底栖无脊椎动物监测断面和监测样点设置应符合以下要求:

a)可涉水河流:从下游往上游,在监测河段的1号到11号监测断面,依次按左、中、

右交替设置共11个监测样点;

b)不可涉水河流:从下游往上游,在监测河段的1号到11号监测断面,分别在左岸

和右岸设置11个监测样点。

4.2.4.7水生维管束植物应根据其在监测河段的分布情况进行断面设置,并符合以下要求:

a)可涉水河流:从下游往上游,垂直于河岸在监测河段依次设置1~3个监测样带,

在样带中均匀布设1~3个样方;

b)不可涉水河流:从下游往上游,平行于河岸在监测河段依次设置1~3个监测样带。

4.2.4.8鱼类可开展区域性监测,也可根据监测目的确定评价河段;根据评价河段的长度,

设置一定数量的监测河段,监测河段累计长度不低于评价河段的10%。

4.2.4.9鱼类早期资源监测断面设置在目标鱼类产卵场。漂流性鱼卵监测断面设置在近岸流

速0.3~1.0m/s间的水域;黏性鱼卵监测断面设置在有植物覆盖的河床的近岸区域。

4.2.4.10保护鱼类资源监测需依据在该保护鱼类历史上出现过的江段进行监测断面设置;中

华鲟自然繁殖监测的断面依据其监测方式而有所区别。

4.2.4.11江豚资源监测应覆盖长江中下游干流及其主要支流。

4.3监测频次与时间

4.3.1一般原则

充分考虑水生生境条件、水生生物类群的时空分布特点,监测目的及人力、费用投入,

确定监测频次和监测时间。

4.3.1.1生物监测应考虑生物的生命周期、生活史特征、季节变化特征、调查目的等因素确

定监测频次,避开雨水集中时期,选择合适的采样时间。

4.3.1.2确保监测结果在时间上的统一性,应同一时期内开展监测,尽量缩短不同监测位点

的时间跨度。

4.3.2频次与时间

每年至少2次,时间安排在枯水期或平水期。

水生生境监测应与水生生物监测应尽可能同时开展。

鱼类早期资源监测主要在鱼类繁殖季节进行。

中华鲟自然繁殖监测主要在中华鲟产卵季节进行,监测频次依据监测方式具体安排。

江豚资源监测主要在枯水期或平水期进行。

5水生生境监测

5.1基础信息

5.1.1信息要素

5

包括基础地理信息和现场状况信息调查。基础地理信息调查项目包括经纬度和海拔。

现场状况信息调查项目包括调查时间、气温和天气情况。

5.1.2监测方法

经纬度和海拔由全球卫星导航或定位系统测量;调查时间由计时工具获取;天气情况

由调查人员观测后记录;气温由温度计测量。填写附录B。

5.2水质特征

5.2.1监测项目

水质现场监测项目包括水温、溶解氧、pH、电导率、浊度和透明度。水质实验室监测

项目包括高锰酸盐指数、磷酸盐、总磷、氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、总氮、二氧化硅和

叶绿素a。根据监测的具体要求,以及监测河流、河段的特殊情况,可增加其他水质指标。

5.2.2样品采集

参照SL219,并填写附录B。

5.2.3样品保存与管理

参照HJ493。

5.2.4检测与分析

水质现场监测项目水温、溶解氧、pH、电导率和浊度采用便携式水质分析仪测量;透

明度采用塞氏盘法测量。

水质实验室监测项目的检测与分析参照GB3838、《水和废水监测分析方法(第四版)》

以及其他全国性业务归口部门组织编写的方法。

5.3水文水动力特征

5.3.1监测项目

河流水面宽度、水深和流速。

5.3.2监测方法

5.3.2.1河流水面宽度

采用卷尺或激光测距仪测量,填写附录B。

5.3.2.2水深

采用超声波测深仪、铅鱼、测深杆或测深锤测量,参照SL58-2014,填写附录B。

5.3.2.3流速

采用流速仪法、浮标法或声学多普勒剖面流速仪法,参照GB50179-2015,填写附录B。

5.4河道形态特征

6

5.4.1监测项目

包括河道蜿蜒程度、河岸坡度和河岸类型。

5.4.2监测方法

5.4.2.1河道蜿蜒程度

河道蜿蜒程度监测指标包括河道弯道数量、蜿蜒河段长度和直线河段长度。通过现场

观测,结合无人机航拍、遥感识别,记录监测河段内河道弯道数量,在地图上测量获取监测

河段的蜿蜒河段长度,以及上游与下游河道边界间的直线河段长度,并填写附录B。

5.4.2.2河岸坡度

通过现场观察估算或利用角度测量仪现场测量左右河岸坡度,填写附录B。

5.4.2.3河岸类型

现场观察左右河岸类型,明确监测河段中天然河岸、石笼护岸、混凝土护岸等主要河

岸类型,填写附录B。

5.5底质特征

5.5.1监测项目

包括底质类型和感官指标。

5.5.2监测方法

5.5.2.1底质类型

通过直接观察或采用彼得森采泥器采集表层5~10cm的底质样品后观察,判别底质的

主要类别,填写附录B。

5.5.2.2感官指标

通过直接观察或采用水下成像设备观察底质颜色,搅起河流表层底质或采用彼得森采

泥器采集表层5~10cm的底质样品辨别气味,填写附录B。

5.6河岸带特征

5.6.1监测项目

包括植被覆盖情况、土地利用类型和人类干扰活动。

5.6.2监测方法

5.6.2.1植被覆盖情况

通过现场观察、无人机航拍、遥感解译等方式,估算或测量监测河段沿岸带乔木、灌

木、草本植被覆盖比例,填写附录B。

5.6.2.2土地利用类型

通过资料调研、现场观察、无人机航拍、遥感解译等方式,调查监测河段沿岸带周围

土地利用类型,明确监测河段中森林、农田、草地等主要土地利用类型,填写附录B。

7

5.6.2.3人类干扰活动

通过资料调研结合现场观察,明确监测河段河岸带周边是否存在排污、耕种、砍伐等

人类干扰活动,填写附录B。

6水生生物监测

6.1浮游植物

6.1.1监测项目

包括浮游植物的物种组成、密度和生物量。

6.1.2设备及材料

见附录A。

6.1.3样品采集

定性样品采用25#(孔径64μm)浮游生物网,在水下0~0.3m处呈“∞”形缓慢拖曳采

集。定量样品采用采水器采集,水深≤5m且混合均匀的河流在表层0.5m处采集水样1000

或2000mL,缓流或静水状态时需在表层0.5m和底层上0.5m处采集等体积水样混合后取

1000或2000mL;水深>5m的河流需增加中层采集。采集样品后填写附录B。

6.1.4样品固定和保存

样品应立即加入鲁哥氏液摇匀,用量为水样体积的1~1.5%。如需较长时间保存,则

应再加入福尔马林,用量为水样体积4%。在样品瓶外贴好标签,标明采样点信息、采样日

期、样品类型以及样品体积等。用透明胶带粘贴于外层以防脱落。

6.1.5沉淀和浓缩

6.1.5.1基于分级沉淀技术的样品浓缩

摇匀水样,倒入1000mL的沉淀器中(采集2000mL水样时需前期沉淀48h后用虹吸法

抽滤至1000mL以内),2h后旋转沉淀器使附壁的浮游植物下沉,再静置48h。用虹吸法吸

去上清液(保留50mL)。保留含沉淀物的水样25~35mL,放入100mL样品瓶中。用保留

的上清液冲洗沉淀器2~3次,一并放入样品瓶中,再沉淀24h后定容到30mL(或50mL)。

沉淀和虹吸过程应避免摇动和吸出浮游植物。样品贴好标签置于品柜中避光保存。

6.1.5.2基于微沉降器技术的样品浓缩

交替水平滚动、垂直翻转三十次,充分混合水样;迅速吸取水样小心注满沉降通道,

避免气泡产生;沉降时间不小于3–4h/cm×微沉降器高度;小心将沉降通道平移,并用盖玻

片覆盖沉降腔室,注意避免气泡产生。沉积过程微沉降器应避光、恒温、水平放置。

8

图2基于微沉降器技术的水样浓缩流程方法

6.1.6样品鉴定

优势种类应鉴定到种,其它种类至少应鉴定到属。种类鉴定除用定性样品进行观察外,

还可吸取定量样品进行观察,也可将微沉降器的沉淀腔室放置在倒置显微镜下观察。

6.1.7样品计数

a)摇匀定量样品,迅速吸取0.1mL,置于0.1mL计数框内,盖上盖玻片,计数框内应

无气泡、无水样溢出;也可将微沉降器的沉淀腔室放置在倒置显微镜下;

b)用视野法计数,一般计数100个视野,浮游植物总数不能少于300个,如果少于300

个,则再增加100个视野,以此类推进行分门别类计数。用行格法计数,参见SL733;

c)每瓶样计数2次,取均值,每次结果与均值之差应不大于±15%,否则计数第3次;

d)计数单位用细胞个数表示,对不易计数的群体或丝状体,可求出平均细胞数。

6.1.8密度和生物量计算

6.1.8.1密度计算

a)用视野法计数的浮游植物密度可按下式计算:

퐶푉

푁=푃

퐹퐹푉푣

式中:

N——1L水样中浮游植物的数量,cells/L;

2

Cs——计数框面积,mm;

2

Fs——视野面积,mm;

Fn——每片计数过的视野数;

V——采集的水样体积,mL;

9

Vs——水样经浓缩后体积,mL;

v——计数框容积,mL;

Pn——计数所获得的细胞个数,个。

b)用行格法计数的浮游植物数量计算,参见SL733。

6.1.8.2生物量计算

采用体积换算为生物量(湿重)方法。具体参见SL733。

6.2浮游动物

6.2.1监测项目

包括浮游动物的物种组成、密度和生物量。

6.2.2设备及材料

见附录A。

6.2.3样品采集

浮游动物中原生动物和轮虫定性样品采用25#浮游生物网,在表层0~0.3m处呈“∞”形

缓慢拖曳采集两份样品,保留一份供活体观察;定量样品采集同浮游植物。浮游动物中枝角

类和桡足类定性样品采用13#(孔径112μm)浮游生物网在表层呈“∞”形缓慢拖曳采集;定

量样品采用采水器采集,水深≤5m且混合均匀的河流在表层0.5m处采集水样20L,缓流或

静水河流则在表层0.5m和底层上0.5m处各采集10L水样,然后用25#浮游生物网过滤浓缩

装入100mL样品瓶;水深>5m的河流需增加中层采集。采集样品后填写附录B。

6.2.4样品固定和保存

除供活体观察的样品外,其余样品应立即用福尔马林固定,用量为水样体积的4%。如

需较长时间保存,则应每年夏季前再加入福尔马林,用量为水样体积2%~3%。

6.2.5沉淀和浓缩

原生动物和轮虫定量样品沉淀和浓缩同浮游植物,见6.1.5。

6.2.6样品鉴定

优势种类应鉴定到种,其它种类至少应鉴定到属。种类鉴定除用定性样品进行观察外,

还可吸取定量样品进行观察,也可将微沉降器的沉淀腔室放置在倒置显微镜下观察。枝角类

鉴定时应压片露出分类特征。桡足类鉴定时应选择成体,加甘油在解剖镜下解剖第五胸足、

第四胸足和第一触角,将解剖下来的结构放置载玻片上,盖上盖玻片后在显微镜下鉴定。

6.2.7样品计数

计数前,充分摇匀定量样品,迅速、准确吸取规定体积的样品置于计数框内盖上盖玻

10

片后,计数框内应无气泡,也不应有水样溢出。同一样品计数两片的,取均值,每片结果与

均数之差应不大于±15%,否则应计数第3片;填写附录D。

a)原生动物:吸取0.1mL样品,置于0.1mL计数框内,盖上盖玻片,用20倍物镜显

微镜下全片计数,每瓶样品计数2次,每次结果与均值之差应≤±15%,否则计数第3次;

b)轮虫:吸取1mL样品,置于1mL计数框内,用10倍物镜显微镜下全片计数,每瓶

样品计数2次,每次结果与均值之差应≤±15%,否则计数第3次;

c)枝角类和桡足类:用5mL计数框将样品分若干次全部计数。如样品中个体数量太多,

可将样品稀释至30mL或50mL,吸取5mL样品,置于5mL计数框用4倍物镜显微镜下全

片计数。每瓶样品计数2片;

d)无节幼体:如样瓶中个体数量少,则在甲壳动物样品中同时全部计数;如数量多,

则在轮虫样品中同轮虫一起计数。

6.2.8密度和生物量计算

6.2.8.1密度计算

可按下式计算:

푣푛

푁=

푉퐶

式中:

N——1L水样中浮游动物的数量,个/L;

V——采样体积,L;

v——样品浓缩后的体积,mL;

C——计数样品体积,mL;

n——计数所获得的个体数,个。

6.2.8.2生物量计算

a)原生动物、轮虫:可用体积法求得生物体积,相对密度取1,再根据体积换算为重

量和生物量;

b)甲壳动物:可用体长-体重回归方程,由体长求得体重(湿重);

c)无节幼体:一个个体可按0.003mg湿重计算。

6.3底栖硅藻

6.3.1监测项目

包括底栖硅藻的物种组成和相对丰度。

6.3.2设备及材料

见附录A。

6.3.3样品采集

6.3.3.1天然基质法

11

a)按4.6.5.2在监测河段设置11个断面;

b)对于可涉水河流,依次从在11个断面的左岸、中间和右岸选择水深为0.3~0.5m的

位点,如河流中间深度超过0.5m则只选择左右岸;

c)对于不可涉水河流,分别在11个断面的同一侧河岸选择水深为0.3~0.5m的位点;

d)在每一个位点,按优先次序选择可移动的硬质表面(如卵石、倒木或砖块)、不可

移动的硬质表面(如硬化堤岸)、沉水植物及挺水植物的水下茎段,以及软质基质;

e)小心冲洗去除基质表面松散附着物,用圆形塑料片(直径约6cm)覆盖在基质上,将

覆盖区域意外的附着物刷去或刮去;再将塑料片覆盖下的附着物刷取或刮取采集,装入样品

瓶中。将11个断面的11份样品混合,记录总体积,填写附录B。

6.3.3.2人工基质法

a)在监测河段避开急流和漩涡,放置好硅藻计,可以与大型底栖无脊椎动物的篮式采

样器相连,通过调节绳子的长短,保证硅藻计距离水面5~10cm,使之得到合适的光照;

b)每个河段设置3个重复,并尽可能避开洪水,2~4周后,回收硅藻计,采集样品。

6.3.4样品固定与保存

样品加入福尔马林固定,用量为样品体积的4%。

6.3.5硅藻封片制作

6.3.5.1样品预处理

在通风橱中,将1~2mL样品加到厚壁玻璃试管,再加入等体积浓硫酸,置90°C水浴

0.5h;沿管壁多次缓慢滴加1~2滴浓硝酸,待反应缓和不再产生棕色气体,加入样品等

体积浓硝酸,水浴8h以上;小心吸去上层酸液,加入0.5~1mL重铬酸钾饱和溶液,摇匀后

静置12h;转至2mL离心管,蒸馏水定容后,3000转每分钟离心5min,去上清,再加入蒸

馏水摇匀离心,重复4~5次,去上清,加入适量体积95%乙醇溶液。

6.3.5.2封片制作

将处理好的硅藻样品摇匀,用100μL移液器迅速吸取40μL,垂直滴在盖玻片中心,样

品均匀扩散至盖玻片表面后,放置在加热板上加热5min;将40μL树胶溶液滴在干净的载玻

片中心,用平口镊子将上述布满样品的盖玻片翻转覆盖在树胶上,如有气泡产生,可置加热

板上去除。贴上标签置通风处干燥2~3天,封片制作完成。每一样品至少制作2个封片。

6.3.6鉴定与计数

6.3.6.1鉴定

硅藻封片在相差或微分干涉显微镜下尽可能鉴定到种,至少鉴定到属。

6.3.6.2计数

对视野中硅藻壳瓣(一个细胞由上下两个壳瓣组成)计数,鉴定和计数不少于300个壳瓣,

确保观察到10个以上物种或最低分类阶元,并对重要种类进行拍照;计数到300个壳瓣,

仍少于10物种或最低分类阶元时,额外鉴定100个硅藻壳瓣,填写附录E。

6.4大型底栖无脊椎动物

12

6.4.1监测项目

包括大型底栖无脊椎动物的物种组成、密度和生物量。

6.4.2设备及材料

见附录A。

6.4.3样品采集

6.4.3.1定量采集

a)按4.6.5.2在监测河段中设置11个断面。采样时,原则上从下游至上游依次采集;

b)对于不可涉水、淤泥底质或沉积物较多的河段,采用改良彼得森采泥器进行采集,

每个采样点取2个平行样;如泥样过少,需重新采集;

c)对于不可涉水、卵石、砾石或沙质底质的河段,在河流的浅水带或岸边带采用长柄

矩形踢网采集,采集时间5分钟,记下网口扫过的距离;

d)对于可涉水河段,采集样品时应涵盖各种生境类型。采样工具可选用长柄矩形踢网

索伯网;每个采集点采集4次,如目测样品过少,适当增加次数;

e)用人工基质篮式采样器采样时,每个采集点放置两个采样器,篮筐用绳固定后做好

浮漂标记,放置14天后取出进行淘洗和分拣。

6.4.3.2定性采集

除可用定量采样方法采集定性样品外,还可用长柄矩形踢网、手抄网等在岸边及浅水

区采集定性样品。采集时采样断面周边各种小生境均应采集。记录采样器具和底质类型,填

写附录B。

6.4.4样品洗涤和分捡

a)用采泥器采集的样品,应全部倒入塑料桶中,经60目筛绢布过筛后挑出肉眼可见的

种类,剩余样品倒入白瓷盘进行分捡,装入样品瓶。记录采样面积、采样器具和底质类型,

填写附录B。如不能及时分捡,样品筛洗后装入封口袋,带回室内分捡。如采样到分捡过程

超过2小时,应在袋中加入适量福尔马林。

b)用长柄矩形踢网或索伯网采集的样品,淘洗干净后放入白瓷盘挑拣。用人工基质采

集的样品,可直接捡出卵石及筛绢上的全部样品。填写附录B。

6.4.5样品的固定和保存

a)将所有采集点所采集的样品合并成一个大样后,采用亚样筛获取1~3个亚样进行分

析以降低工作量,剩余样品留存备用;

b)固定液的体积应为所固定动物体积的10倍以上,否则应在2~3天后更换一次。

c)样品长期保存时,软体动物用用75%乙醇溶液保存;水生昆虫用5%的福尔马林溶

液固定数小时后再用75%乙醇保存;寡毛类先放入培养皿的清水中,并缓缓加入数滴75%

乙醇麻醉,待其身体完全舒展后再用5%的福尔马林溶液固定数小时后再用75%乙醇保存;

d)原则上样品至少保留2~3年,有条件的实验室可长期保存。

13

6.4.6鉴定与分析

6.4.6.1鉴定

软体动物应鉴定到种;水生昆虫(除摇蚊科幼虫)应至少鉴定到科;水栖寡毛类和摇蚊

科幼虫应鉴定到属。鉴定水栖寡毛类和摇蚊科幼虫时,在解剖镜下解剖分类特征后制片在显

微镜下进行鉴定,宜用甘油做透明剂。如需保留制片,则可用普氏胶封片。

6.4.6.2计数

应按不同种类或分类单元进行计数。标本不完整时,只计头部,不计零散腹部、附肢等。

6.4.6.3称重

应按不同种类或分类单元进行称重。软体动物可用普通天平称重;水生昆虫和水栖寡毛

类采用万分之一电子天平称重。称重的样品应固定10天以上且吸干表面水分。

6.4.6.4记录

鉴定过程中,有条件的情况下将每一个分类单元或物种进行拍照并进行归类整理,记录

每一个物种或分类单元的个数和重量,填写附录E。

6.5水生维管束植物

6.5.1监测项目

包括水生维管束植物物种组成和生物量。

6.5.2设备及材料

见附录A。

6.5.3样品采集

6.5.3.1样带/样方法

a)对于可涉水河流,垂直于河岸在监测河段设置监测样带。固定标杆设置1m宽样带,

样带中均匀布设1m×1m样方(植株密度较大时可选择0.5m×0.5m样方)。用手或采草夹采

集样方内全部植物(包括地下根茎)放入样品袋中。记录样方内植物种类、株数、生活型、

物候期;目测法估算盖度等级,填写附录B。

b)对于不可涉水河流,平行于河岸在监测河段设置监测样带。用采草夹采集样品放入

样品袋中。记录采集的植物种类、株数、生活型、物候期,填写附录B。

6.5.3.2直接采集法

a)对于可涉水河流,在监测河段垂直于河岸从一侧走到另一侧,记录沿途出现的植物,

填写附录B。用手或采草夹采集植物样品,尽量采集完整的植株(包括根、茎、叶、花、果);

b)对于不可涉水河流,在监测河段平行于河岸,记录沿途出现的植物,填写附录B。

用采草夹采集植物样品,尽量采集完整的植株。

6.5.4样品处理

6.5.4.1前处理

14

将样品袋中的水生维管束植物洗净,用吸水纸蘸干水分后,按照种类分开待检;鉴定、

测量完后的植物按照种类分开保存于信封中,置于干燥箱中烘干。

6.5.4.2标本制作

根据种类鉴定或其他需要,制作植物标本;标本应尽量采集全株,洗净后用吸水纸蘸

干水分,平放于标本夹中,填写记录号牌,拍照后用吸水纸、瓦楞纸板压制;压制过程中更

换吸水纸,干燥成形后,用纸条将标本粘在卡纸上,并填写标本标签信息(附录G)。

6.5.5鉴定与分析

6.5.5.1鉴定

野外通过观察水生维管束植物的形态特征进行种类鉴定;难以鉴定的植物种类制成标

本后,利用显微镜等工具及植物志、植物图鉴等工具书,采用形态学分类方法进行鉴定。

6.5.5.2分析

a)生物量:指单位面积上所有植物的总质量。将样品袋中的水生维管束植物蘸干水分

后,按照种类称量植物鲜重;然后烘干至恒重后,称量植物干重。根据样方或采草夹面积,

将同一个样方或采草夹中所有植物鲜重或干重换算成单位面积的植物质量;

b)盖度:采用Braun-Blanquet盖度等级。采用目测法估计一个植物种的个体在群落中

的多少及单位面积内植物的覆盖程度。通常将植物盖度划分为5个等级:5(不论个体多少,

盖度≥75%);4(不论个体多少,75%>盖度≥50%);3(不论个体多少,50%>盖度≥25%);

2(不论个体多少,25%>盖度≥5%,或者盖度虽然<5%,但个体数很多);1(个体数量较

多,盖度<5%,或者虽然盖度≥5%,但个体数稀少);

c)频度:指某种水生维管束植物在全部调查样方中出现的百分率;

d)重要值:重要值=(相对生物量+相对盖度+相对频度)/3。其中,相对生物量=某种

植物的生物量/群落中所有种植物的总生物量;相对盖度=某种植物的盖度/群落中所有种植

物的总盖度;相对频度=某种植物的频度/群落中所有种植物的总频度。

6.6鱼类

6.6.1监测方式及选择

鱼类监测包括鱼类资源主动捕捞监测、声呐水声学监测和环境DNA监测三种方式。

优先选择鱼类资源主动捕捞监测方式,在条件允许时可选择声呐水声学监测方式和环

境DNA监测方式,其中声呐水声学监测适用于水面宽阔,无或少障碍水体内鱼类空间分布

的监测以及鱼类密度评估,环境DNA监测更适用于特定物种分布的监测。

6.6.2鱼类资源捕捞监测

6.6.2.1监测项目

包括鱼类的种类、不同种类的数量、全长、体长、体重和年龄、不同种类的性成熟及

健康状况。

6.6.2.2设备及材料

见附录A。

15

6.6.2.3样品采集

a)鱼类样本采集:经科研捕捞许可申请并被批复许可捕捞后,根据样本采集区域的生

境特征,使用以下类型网具进行鱼类样本采集:

刺网:(长×高:50米×2米,网眼2a=2.0厘米)+(长×高:50米×2米,网眼2a=6.0

厘米)+(长×高:50米×2米,网眼2a=10.0厘米)+(长×高:50米×2米,网眼2a=14.0

厘米)。网眼规格不可更改,网长和网高可根据实际情况调整,网具由4个规格网片串联拼

接而成。单一定置刺网在某一采样点持续放置的时间约12小时,适用于流速缓慢的湾沱;

流刺网在某一采样点持续作业3-4次,每次持续时间为30-40分钟,适用于开阔的流水江段。

底置笼网(虾笼):长×高×宽:18米×0.33米×0.45米,网眼2a=0.8厘米,网眼

规格不可更改,网长、网高和网宽可根据实际情况调整。适宜于在静水或微流水区域持续捕

捞,每天早晚定时取渔获物1-2次。

插网:长×高:75米×5米,拦网网眼2a=3.5厘米,囊网网眼2a=1cm。网眼规格不可

更改,网长、网高可根据实际情况调整。适宜于静水或微流水区域持续捕捞,每天早晚定时

取渔获物1~2次。

单船底拖网:网口周长50米,囊网网眼2a=2.5cm。每站拖曳30分钟。适宜河流水库

水域监测。

现场对采集的样本进行种类鉴定。在种类鉴定过程中,观测鱼类个体是否存在畸形、

鳍损伤、鱼体受损、肿瘤、疾病和寄生虫等情况,对出现上述情况的个体进行记录。捕捞中

死亡的个体,优先作为采集生物学样品的对象。所有渔具上或内的鱼类样品采集完成后,优

先选择在捕捞船上直接进行种类鉴定、基础生物学测量、生物学样品的采集、处理与保存;

对于活的非生物学采集样本,在完成种类鉴定、基础生物学测量后直接放回自然水体。生物

学取样的样本以及其它在样本采集中死亡的样本,在样品采集完成后运至户外掩埋,并做无

害化处理。

b)生物学样品采集:对采自某一采样区域的鱼类样本,每种鱼类随机抽取30尾进行

生物学样品采集(单一种类样本数量小于30尾时,则对全部样本进行采集),其中取鳞片、

鳍条、脊椎骨、鳃盖骨、耳石等1~2种(根据不同鱼类种类钙质组织取样的可行性)作为年

龄材料;取精巢或卵巢作为性腺材料;取鳍条或肌肉作为分子材料。填写鱼类现场调查记录

表H.1

6.6.2.4样品处理与保存

生物学采集样品的室外或现场处理与保存要求如下:

a)从鱼体左右两侧的背鳍下方、侧线上方部位各取5~10枚鳞片,夹入两张纸片之间,

然后放入鳞片袋中置于干燥阴凉处保存;用直接剔除或煮沸等方法去除鳍条、脊椎骨以及鳃

盖骨上的附着物后晾干鳍条、脊椎骨和鳃盖骨,然后放入小的封口袋中置于干燥阴凉处保存;

解剖样本头部,取出微耳石和矢耳石,经95%乙醇清洗、晾干后,放入离心管中置于干燥

阴凉处保存;各个样本需标明样品的组织名称、所属鱼类的种类名称、编号、采集地、采集

时间;

b)性腺材料样品放入塑料封口瓶中后,采用波恩氏液固定保存,封口瓶上标明样品的

组织名称、所属鱼类的种类名称、编号、采集地、采集时间;

16

c)分子材料样品放入塑料封口瓶中后,用无水乙醇溶液固定后置于冰箱中冷藏保存,

封口瓶上标明样品的组织名称、所属鱼类的种类名称、编号、采集地、采集时间。

室外或现场获取的生物学采集样品运回室内需进一步进行的处理,要求如下:

a)年龄材料样品:鳞片材料用温水(或弱碱性水)浸泡12-24小时后,用软刷(如牙

刷)洗掉鳞片表面的黏液、皮肤、色素等,吸干水分后,夹入两个载玻片中间进行封片保存;

耳石材料用环氧树脂粘在载玻片上,自然风干后,打磨、水洗、抛光至两面轮纹清晰,洗净

风干即可用环氧树脂封片保存;用小钢锯在距鳍条基部的三分之一处锯4-5片,并用细油石

把鳍条切片的表面磨光,然后在鳍条切片上滴少量二甲苯以增加切片的透明度,最后用普氏

胶将切片粘在载玻片上;脊椎骨以及鳃盖骨切片的制备方法与鳍条切片的制备方法相类似;

b)性腺材料样品:将性腺从保存液中取出后,经不同浓度酒精的逐级脱水、二甲苯透

明、石蜡包埋、切片、摊片、贴片、伊红染色法染色、中性树胶封片后保存;

c)分子材料样品:选取2g的肌肉或鳍条组织放入2mL的离心管中,待乙醇挥发后

用无菌剪刀将其剪碎备用。

6.6.2.5鉴定

a)鱼类样本种类的鉴定:样本采集后,现场逐尾进行种类鉴定,并按照附录H表格记

录对应信息;采用专业照相机对每种鱼类代表性个体的整体及具有明显分类学特征的局部进

行拍照,保留图片资料,并编号存档;

b)基础生物学的测量与解剖:现场种类鉴定时,采用电子天平(或电子秤)和量鱼板

逐尾测量鱼类样本的全长、体长和体重,全长和体长精确到1mm,体重精确到0.1g或1g。

对采集生物学样品的标本进行逐尾解剖,采用肉眼法观测其性别;

c)年龄材料鉴定:在解剖镜或显微镜下,对不同年龄材料封片或切片,根据不同年龄

材料的年轮出现特征,观察、鉴定其年龄;每一个年龄材料经3人进行年轮观测及年龄判别,

当判别结果一致时,将该结果确定为该样本的年龄,否则经讨论或邀请专家进一步判别后确

定该样本的年龄;

d)性腺材料鉴定:根据性腺材料在不同性腺发育阶段的组织学特征,采用显微镜鉴定

各性腺材料的性腺发育期;

e)分子材料鉴定:利用DNA提取试剂盒提取鳍条或肌肉中的DNA,再采用通用引物

扩增获得目的片段,在核酸序列数据库中检索比对,确定物种。

6.6.2.6分析

a)物种组成、数量:根据逐尾种类鉴定结果,确定鱼类的物种组成及不同种类个体被

捕获的数量;

b)不同种类的全长、体长、体重和年龄:根据每种鱼类被捕获个体的全长、体长、体

重和年龄数据,确定不同种类的全长、体长、体重和年龄的分布情况;

d)不同种类的性成熟状况:采用性比和性成熟个体比例统计分析不同种类的性成熟状

况,其中性比=某种鱼类的雌性个体数量/某种鱼类的雄性个体数量;性成熟个体比例=性腺

发育期处于IV期及以上发育期的某种鱼类的数量/某种鱼类总解剖观测性腺发育期的个体

数量(%);

17

e)个体健康状况:统计某次采样中出现畸形、鳍损伤、鱼体受损、肿瘤、疾病和寄生

虫等个体数占该次采样总采样尾数的比例(%)。

6.6.3声呐水声学监测

6.6.3.1监测项目

鱼类的个体密度和空间分布。

6.6.3.2设备及材料

见附录A。

6.6.3.3监测方法

根据探测江段的长度、水深、河面宽等要求,在监测江段使用船只开展走航式调查,

走航路线轨迹为平行线或“Z”字形。

探测开始前,采用标准球进行回声强度校正。探测时,将声呐探测设备的分裂波束式

换能器固定在船体的一侧,确保换能器发射声波面垂直向下,换能器放于水面以下0.4m;

并探测过程中,利用手持或专业差分GPS记录渔业声学走航路线;使用装有渔业声学采集

软件的便携式电脑进行声学数据和GPS数据的同步存储。

6.6.3.4数据处理

基于Sonar系列分析软件,采用单回声检波与跟踪分析和图像分析方法进行回声映像的

分析,逐一提取目标信号的目标强度均值、分布位点水深等参数。

6.6.3.5数据分析

a)鱼类密度计算:

首先,将走航式探测获得的数据以合适的基本采样距离单元进行分割,获得若干河段单

元数据。

其次,基于回波信号在回波映像中呈现的分布形式分别进行计算。

针对聚群信号,采用回波积分法进行分析,方法如下:

퐵=(휌×퐴×(푊)

휌=×10

×.

휎=10

2

式中:퐴为i河段单元的水体面积,单位为

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