2025年大学大三（分子生物学）基因工程基础试题及解析

2025年大学大三（分子生物学）基因工程基础试题及解析

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题共30分）（总共10题，每题3分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填在题后的括号内）w1.基因工程中常用的工具酶不包括以下哪种？（）A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.淀粉酶w2.以下关于质粒的描述，错误的是（）A.是双链环状DNA分子B.能自主复制C.只能存在于细菌中D.可作为基因载体w3.限制性核酸内切酶切割DNA后产生的末端类型不包括（）A.平末端B.黏性末端C.5'突出末端D.3'凹陷末端w4.基因工程中构建重组DNA分子常用的载体是（）A.噬菌体B.动植物病毒C.质粒D.以上都是w5.以下哪种技术可用于检测基因的表达水平？（）A.PCRB.SouthernblottingC.NorthernblottingD.Westernblottingw6.基因工程中导入目的基因的方法不包括（）A.显微注射法B.氯化钙处理法C.电穿孔法D.研磨法w7.以下关于PCR技术的说法，错误的是（）A.以DNA为模板B.需要引物C.不需要DNA聚合酶D.可扩增特定DNA片段w8.基因文库是指（）A.包含某种生物全部基因的克隆群体B.包含某种生物部分基因的克隆群体C.包含多种生物全部基因的克隆群体D.包含多种生物部分基因的克隆群体w9.以下哪种方法可用于鉴定重组DNA分子？（）A.酶切分析B.PCR扩增C.核酸测序D.以上都是w10.基因工程在医药领域的应用不包括（）A.生产疫苗B.生产抗生素C.基因治疗D.培育新品种第II卷（非选择题共70分）w11.（10分）简述基因工程的基本操作流程。w12.（15分）请说明限制性核酸内切酶的作用原理及特点。w13.（15分）分析PCR技术的原理、反应体系及反应过程。有这样一个材料：在基因工程实验中，科研人员想要将一个特定的目的基因导入大肠杆菌细胞中，他们采用了氯化钙处理法。首先，将大肠杆菌细胞悬浮在氯化钙溶液中，然后加入重组质粒DNA分子，经过一定时间的处理后，再进行热休克处理，使细胞吸收重组质粒。之后，将处理后的细胞接种在含有抗生素的培养基上，观察细胞的生长情况。w14.（20分）根据上述材料，回答以下问题：（1）氯化钙处理法的作用是什么？（2）热休克处理的目的是什么？（3）为什么要将细胞接种在含有抗生素的培养基上？w15.（10分）阐述基因工程在农业领域的应用及可能带来的问题。答案：w1.Dw2.Cw3.Dw4.Dw5.Cw6.Dw7.Cw8.Aw9.Dw10.Dw11.基因工程基本操作流程：获取目的基因，可从生物基因组中分离、人工合成或PCR扩增等；构建基因表达载体，将目的基因与载体连接；导入目的基因到受体细胞，如细菌、动植物细胞等；筛选和鉴定含有目的基因的受体细胞，可通过抗生素筛选、PCR检测、核酸测序等方法；目的基因的表达与检测，检测目的基因是否转录和翻译。w12.限制性核酸内切酶作用原理：能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA。特点：具有特异性识别序列；切割产生特定末端类型，如平末端、黏性末端；可用于基因工程中切割目的基因和载体。w13.PCR技术原理：以DNA为模板，利用DNA聚合酶在引物引导下合成新的DNA链。反应体系包括模板DNA、引物、dNTP、DNA聚合酶、缓冲液等。反应过程：高温变性使模板DNA双链解开；低温退火使引物与模板结合；适温延伸合成新DNA链，如此循环多次扩增特定DNA片段。w14.（1）氯化钙处理法可使大肠杆菌细胞处于感受态，易于吸收重组质粒DNA分子。（2）热休克处理能进一步促进细胞吸收重组质粒。（3）将细胞接种在含有抗生素的培养基上，是因为重组质粒中含有抗生素抗性基因，能在该培养基上生长的细胞说明已成功导入重组质粒。w15.基因工程在农业领域