《药品生物检定技术》课件-第十四章 血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定

第十四章血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定第一节概述第二节白喉抗毒素效价检定法目录第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定第三节人凝血因子效价测定法学习目标掌握

白喉抗毒素效价的生物检定法中标准品和供试品溶液的制备，人凝血因子效价测定法中溶液的制备。

熟悉

白喉抗毒素效价的生物检定及其结果判定，人凝血因子效价测定法。了解

白喉抗毒素效价测定的相关计算，人凝血因子效价测定的相关计算。第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定概述第一节第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定第一节

概述

免疫血清系由特定抗原(包括细菌毒素或类毒素、动物毒液、病毒抗原或人体细胞等)免疫动物获得的血浆,经消化(或不消化)、纯化制成的抗毒素、抗血清或免疫球蛋白制剂，用于临床治疗或被动免疫预防。毒素系指特定细菌经液体培养后,将其外毒素经纯化、结晶后制成的注射剂,用于临床治疗。

1.

免疫血清第一节

概述

白喉抗毒素系由白喉类毒素免疫马匹获得的血浆，经胃酶消化后纯化制得的注射剂。本品含有特异性抗毒素球蛋白[包括特异性IgG及F(ab')2]，具有特异中和白喉毒素的作用，用于白喉杆菌感染的治疗和被动免疫预防。

2.

白喉抗毒素第一节

概述人凝血因子Ⅶ是“人凝血酶原复合物”制品中的一个重要成分。在凝血过程中，FⅦ被Ca2+及组织因子激活成FⅦa，FⅦa进而激活FⅩ及FⅨ，使FⅩ成为FⅩa，以完成血液凝固反应。维生素K缺乏可引起因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的缺乏；先天性FⅦ缺乏也有偶见，此类患者可给予凝血酶原复合物作补偿治疗。3.

人凝血因子白喉抗毒素效价测定法第二节第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定第二节

白喉抗毒素效价测定法

白喉是由白喉棒状杆菌引起的急性中毒性疾病，白喉抗毒素用于预防和治疗白喉。本品为无色或微黄色的澄明液体，其含适量防腐剂，久置可析出少量摇散的沉淀。1.

白喉抗毒素及其性质第二节

白喉抗毒素效价测定法2.

白喉抗毒素效价的检定方法（1）试验前准备●试剂、稀释液（硼酸盐缓冲盐水）●白喉抗毒素标准品溶液的制备●供试品溶液的制备第二节

白喉抗毒素效价测定法2.

白喉抗毒素效价的检定方法（2）测定法

选用体重2〜3kg的健康白皮肤家兔，试验前1天用适宜方法进行背部脱毛，凡皮肤发炎或出现大量斑点现象者不应使用。每份供试品溶液注射2只家兔，每只家兔不能超过4份供试品溶液。每稀释度注射0.1ml于家兔皮内（应在近背脊两侧）。每只家兔至少应包括3个不同注射部位（前、中、后）的对照试验。标准品溶液与供试品溶液不得用同一支注射器注射。

第二节

白喉抗毒素效价测定法2.

白喉抗毒素效价的检定方法（3）结果判定

试验家兔于注射后48小时及72小时各观察1次，并测量反应面积

以48〜72小时结果作最后判定。注射对照部位一般于48〜72小时内轻度发红，其直径应为10〜14mm。供试品的效价应以与多数对照的反应强度相同的最高稀释度判定之，但反应强度不得超过对照。人凝血因子效价测定法第三节第十四章

血液制品抗毒素抗血清制品的生物活性检定第三节

人凝血因子效价测定法

凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是，在血管出血时被激活，和血小板连在一起并且补塞血管上的漏口。整个凝血过程大致上可以分为两个阶段，凝血酶原的激活及凝胶状纤维蛋白的形成。

1.

人凝血因子及性质第三节

人凝血因子效价测定法（1）试剂●稀释液●含钙促凝血酶原激酶●人凝血因子Ⅶ缺乏血浆2.人凝血因子Ⅶ效价的检定方法第二节

白喉抗毒素效价测定法（2）人凝血因子VII标准品溶液的制备

用人凝血因子Ⅶ缺乏血浆或生理氯化钠溶液将标准品稀释成每1ml约含1IU凝血因子Ⅶ，再用稀释液分别做10倍、20倍、40倍和80倍稀释，置冰浴备用。2.人凝血因子Ⅶ效价的检定方法第二节

白喉抗毒素效价测定法（3）供试品溶液的制备

用人凝血因子Ⅶ缺乏血浆或生理氯化钠溶液将供试品稀释成每1ml约含1IU凝血因子Ⅶ，再用稀释液分别做10倍、20倍、40倍稀释，置冰浴备用。2.人凝血因子Ⅶ效价的检定方法第二节

白喉抗毒素效价测定法（4）测定法

量取供试品溶液0.1ml，加入凝血因子Ⅶ缺乏血浆0.1ml，混匀，置37℃水浴保温一定时间（一般3分钟），然后加入已预热至37℃的含钙促凝血酶原激酶溶液0.2ml，记录凝固时间。

用不同稀释度的人凝血因子Ⅶ标准品溶液0.1ml替代供试品溶液，同法操作。

以人凝血因子Ⅶ标准品溶液效价（IU/ml）的对数对其相应的凝固时间（秒）的对数作直线回归，求得直线回归方程，计算供试品溶液人凝血因子Ⅶ效价，再乘以稀释倍数，即为供试品人凝血因子Ⅶ效价（IU/ml）。2.人凝血因子Ⅶ效价的检定方法小结白喉抗毒素效价测定法系依据抗毒素能中和毒素的作用，将供试品与标准品进行对比试验，推算出1ml供试品中所含抗毒素的国际单位数（IU