2024届高三生物二轮复习练习：微生物的培养技术及应用

微生物的培养技术及应用练习

一、选择题

1.硝化细菌是化能自养菌，通过NH：-NO「一NO；的氧化过程获

取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。如表是

分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（）

(NH4)2s0.5g

NaCl0.3g

FeSO40.03g

MgSO,0.03g

K2HP040.75g

NaH2PO40.25g

Na2cO31g

琼脂5%

定容1000mL

A.（NHJSO,可作为硝化细菌的氮源和能源

B.培养基中的N&CO：,是硝化细菌的主要碳源

C.K2HPO4和NaH2P能维持培养基的pH

D.硝化细菌能清除水体中的镂态氮及亚硝态氮

2.防止杂菌污染，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的

前提。下列叙述错误的是（）

A.实验室里可用紫外线或化学药物对物体表面或空气进行消毒

B.实验室里不可吃东西，离开时一定要洗手以防被微生物感染

C.接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌

D.使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环

境

3.如图表示微生物的实验室培养的有关操作，下列相关叙述错

误的是（）

①把接种工具②将接种工具在

灼烧至变红火焰附近冷却

A.步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌

B.步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远

C.图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个

菌落

I）,接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生

物计数

4.物质W是一种含氮有机物，W在培养基中达到一定量时培养

基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌，结果

如图。下列说法错误的是（）

A.透明圈的形成是因为W物质被分解

B.所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源

C.甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源

D.乙菌落中的细菌都能降解W,不需要进一步纯化

5.聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，

它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用

于制造无污染的“绿色塑料。如图为科学家从某咸水湖中寻找生

产PHA菌种的流程图。下列说法错误的是（）

①--*②-->③--*④---*⑤---*⑥

取湖水接种在培养挑取单菌落检测的的数获得目

培养基上并分别扩大目和PHA的标菌株

培养产量

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量高的选择培养基上

B.步骤③需要将接种后的培养基放入恒温箱中倒置培养

C.步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯

化菌株

D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含

量

6.稀释涂布平板法是分离菌种常用的方法，下列相关叙述不恰

当的是（）

A.固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板

B.倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长

C.稀释涂布平板分离到的单菌落需进一步划线纯化

D.稀释涂布平板法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的

计数

7.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品

稀释示意图。据图分析正确的是（）

1K取,双’共1’

QQQQ

Qf168个菌落

个菌落

个落落

1（）g90mL

上样无菌水

A.3号试管中的菌液稀释倍数为10,倍

B.4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5

号的10倍

C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7X10,个

D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高

含抗生素

的纸片

抑菌圈中

的菌落

图1图2

A.为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①②③

B.图2中n形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏

C.图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素IV作用下产生了突变株

D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果

二、非选择题

11.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培

养结果如图所示。思考回答下列问题。

(1)应从区挑取单菌落，判断的依据是

(2)1区、II区没有出现单菌落，说明o

12.自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细

菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科

学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。

(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白陈和琼脂

等成分，其中蛋白陈主要为细菌提供和维生素等。

(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少

量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后,

薄层变浑浊(如图)，表明__________________________________

(3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此

应将含菌量较高的湖泊水样后，依次分别涂布于不同的浑

浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现

采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。

(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设

能用以下材料和设备加以验证(主要实验材料和设备：P菌、A菌、

培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱)

13.磷是植物生长的重要元素，施入土中的大多数与C『等离子

结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可将难溶性

或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图所示，请

回答下列问题。

振荡0.5mL0.5inLO.ImL

令-磐普明(强)爸

取果园90mL土壤4.5mL

土壤I。X无储水悬浮液无菌水

①②③④⑤

(1)步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)比

值较的菌落。继续进行步骤⑤的目的是

(2)初步筛选出一株解磷菌株用,为研究不同接种量对菌株他解

磷能力的影响。研究人员将不同量的W3接种到特定的培养基中，并

在28°C、200r・minT摇床培养7d后取上清液。测定溶液中可溶

性磷含量。得到如图所示曲线。

r

,

T

*

=

s

代

超

更

忙

E

①结果表明接种量为时解磷效果最好，解磷能力越强

溶液pH越

②接种量过大解磷能力反而下降的原因可能是

答案：

1.B解析：硝化细菌通过NII：-NO「fNO；的氧化过程获取能量，故

通过分析培养基成分可知（NHJ2s0,可作为硝化细菌的氮源和能源，A

正确；硝化细菌为自养型生物，能利用二氧化碳合成糖类，故硝化

细菌的主要碳源是二氧化碳，B错误；分析培养基成分，其中KJIPO,

和NaH2Poi可维持培养基的pH,C正确；硝化细菌能将NH：氧化成

Nor,进而将NOf氧化成N0；,故可用硝化细菌清除水体中的镂态氮

及亚硝态氮，D正确。

2.C解析：实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确；

实验室中，切记不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以

防止被微生物感染，B正确；接种环、接种针等金属用具应在酒精

灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，C错误；使用后的培养

基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境和感染操作者，D正

确。

3.D解析：步骤①中，接种前灼烧接种环至变红，目的是杀灭接

种环上可能引起污染的杂菌，A正确；步骤②中，将接种工具冷却

时不宜距酒精灯火焰太远，防止受到杂菌污染，B正确；图中所示

的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐渐稀释，经培养

后获得由单个细菌繁殖而来的菌落，C正确；题图所示为平板划线

法，不能用于微生物的计数，D错误。

4.D解析：W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明，因此

透明圈的形成是因为W物质被分解，A正确；要筛选出能降解W的

细菌，所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源，B正确；该

培养基以W物质为唯一氮源，而甲菌落周围未出现透明圈，因此甲

菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源，C正确；乙菌落

中的细菌不一定都能降解肌因此仍需要进一步纯化，D错误。

5.C解析：步骤④扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中不

应加入琼脂，C错误。

6.B解析：培养基灭菌后需要冷却至50c左右时才能用来倒平板,

避免温度过高，A正确；倒好的平板需要放置一段时间，用以观察

培养基是否被杂菌污染，B错误；稀释涂布平板法分离的单菌落需

要用平板划线法进行纯化培养，C正确；稀释涂布平板法可以用于

微生物的计数，也可观察菌落特征进行菌种的分离，D正确。

7.B解析：3号试管中的菌液稀释倍数为IO,倍，A错误；4号试管

中菌液的稀释倍数为IO,倍，5号试管中菌液的稀释倍数为106倍，

因此4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号

的10倍，B正确；5号试管中菌液的稀释倍数为106倍，每克土壤中

的菌株数为(168+175+167)+3+0.1X106=1.7X1()9个,c错误；

稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细胞连在一起长成一

个菌落的情况，使用该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌

数目要少，D错误。

8.D解析：此研究的目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中

角蛋白的嗜热菌，因此目标菌既要耐高温，又要能够高效降解角蛋

白，所以应在c点时取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养,

D正确。

9.A解析：根据菌落的生长状态可知，此结果是利用平板划线法

得到的，划线的顺序是①一③一②，②处可见单菌落，A正确，B错

误；除第一次划线外，每次划线前灼烧接种环的目的都是杀死上次

划线结束后接种环上残留的菌种，从而保证菌落来自上一次划线的

末端，C错误；培养基中的琼脂是凝固剂，不能为细菌提供碳源，D

错误。

10.D解析：为获得长满测试菌的琼脂平板，需要采用稀释涂布平

板法，该方法需要使用图1中①酒精灯(操作需要在酒精灯火焰旁

进行，对涂布器进行灼烧灭菌)、③培养基和④涂布器(接种工具),

②接种环是平板划线法接种时需要使用的接种工具，A错误；图2

中H处透明圈最小，说明此处微生物对该药物敏感度最低，B错误;

突变株的出现不是在抗生素的作用下产生的，抗生素只能起选择作

用，C错误；不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果

中抑菌圈的大小，D正确。

11.(1)III分析平板结果可知，采用的接种方法为平板划线法，且

划线顺序是I区、n区、in区，可以看到in区中出现了单菌落

(2)细菌数量太多

12.(1)氮源、碳源(2)A菌能在培养平板中生长繁殖⑶稀释