DB41∕T 2819-2025 托幼机构消毒技术规范

ICS11.080.01

CCSC59

41

河南省地方标准

DB41/T2819—2025

托幼机构消毒技术规范

2025-04-21发布2025-07-20实施

河南省市场监督管理局发布

DB41/T2819—2025

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4管理要求...........................................................................2

5消毒要求...........................................................................2

6卫生学指标.........................................................................4

7消毒方法...........................................................................4

8采样及检验方法.....................................................................4

附录A（资料性）托幼机构预防性消毒常用方法...........................................5

附录B（资料性）托幼机构常见传染病消毒方法...........................................8

附录C（规范性）采样及检验方法......................................................11

参考文献.............................................................................16

I

DB41/T2819—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由河南省卫生健康委员会提出。

本文件由河南省卫生健康标准化技术委员会（HN/TC24）归口。

本文件起草单位：河南省疾病预防控制中心、郑州市妇幼保健院、南阳市疾病预防控制中心、郑州

大学第三附属医院、郑州市疾病预防控制中心、濮阳市疾病预防控制中心、河南省实验幼儿园、开封市

疾病预防控制中心。

本文件主要起草人：刘吉起、高丽君、张叶、张玉勤、王香枝、崔士磊、陈社菊、炊慧霞、吕明洁、

曹春燕、梅雪、郭瑜。

II

DB41/T2819—2025

托幼机构消毒技术规范

1范围

本文件规定了托幼机构的管理要求、消毒要求、卫生学指标、消毒方法、采样及检验方法。

本文件适用于各级各类托幼机构。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验

GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验

GB/T5750.11生活饮用水标准检验方法第11部分：消毒剂指标

GB14934食品安全国家标准消毒餐（饮）具

GB15979一次性使用卫生用品卫生标准

GB/T18204.4公共场所卫生检验方法第4部分：公共用品用具微生物

GB/T18204.9游泳池水微生物检验方法细菌总数的测定

GB/T18204.10游泳池水微生物检验方法大肠菌群的测定

GB19193疫源地消毒总则

GB/T19258.1杀菌用紫外辐射源第1部分：低气压汞蒸气放电灯

GB27953疫源地消毒剂通用要求

WS10013公共场所集中空调通风系统卫生规范

WS10014学校及托幼机构饮水设施卫生规范

WS/T10005公共场所集中空调通风系统清洗消毒规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

托幼机构

招收0～6岁儿童的各级各类托育机构、幼儿园。

3.2

消毒

杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。

[来源：WS/T466—2014，3.38]

3.3

预防性消毒

在没有明确的传染源存在时，对可能受到病原微生物污染的场所和物品进行的消毒。

[来源：WS/T466—2014，4.49]

1

DB41/T2819—2025

3.4

疫源地消毒

对疫源地内污染的环境和物品的消毒。疫源地是传染源排出的病原微生物所能波及的范围。

[来源：WS/T466—2014，4.48]

3.5

随时消毒

有传染源存在时，对其排出的病原体可能污染的环境和物品及时进行的消毒。

[来源：WS/T466—2014，4.31]

3.6

终末消毒

传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。

[来源：WS/T466—2014，4.55]

4管理要求

4.1托幼机构应按照卫生健康部门、教育行政部门有关要求，结合本单位实际情况建立健全清洁消毒

等卫生制度，按照制度要求规范开展清洁消毒等工作，并做好记录，定期督查落实情况。

4.2托幼机构负责消毒的工作人员应定期接受相关专业知识的培训，掌握卫生消毒、传染病防控等知

识和技能，并负责对本单位其他工作人员进行培训和指导。

4.3使用的消毒剂和消毒器械应符合国家相关法规和标准规定。消毒剂应在有效期内按照产品说明书

正确使用；消毒器械应定期校准并能正常使用。

4.4消毒剂和消毒器械应专人保管、分区放置、安全存放、标识醒目。紫外线灯开关应设置在幼儿不

能触及的高度或增加安全防护措施，指定专人管理，防止误开误关。

4.5托幼机构应配备满足工作所需的个人防护用品，消毒人员在开展消毒工作时应做好个人防护。

5消毒要求

5.1日常清洁与预防性消毒

5.1.1室内空气

5.1.1.1室内应保持空气流通。每日至少开窗通风两次，每次不少于30min。

5.1.1.2通风不良的房间，宜使用机械通风设施进行通风换气。呼吸道传染病流行期间，可使用紫外

线灯或其他空气消毒设备对室内空气进行消毒。

5.1.1.3排风扇等装置应根据使用频率定期进行清洁消毒，使用期间宜每月1～2次。

5.1.1.4分体式空调、无新风的风机盘管系统或多联机系统换季开启前应用清水清洗空调室内机过滤

网，使用期间至少每月清洗一次，必要时可对空调散热器进行清洗消毒。集中空调通风系统的清洗消毒

应由具有资质的专业机构按照WS/T10005的规定进行，消毒效果应符合WS10013的要求。

5.1.1.5若使用紫外线灯进行空气消毒，参照A.1.2的规定进行管理和使用；紫外线灯应在无人状态

下使用。

5.1.2环境物体表面

5.1.2.1环境物体表面应保持清洁，定期消毒，受到污染后应及时清洁消毒。

2

DB41/T2819—2025

5.1.2.2日常清洁消毒重点为经常接触的环境物体表面，如桌椅、床围栏、门把手、水龙头、卫生间

冲水按钮、晨检卡、楼梯扶手等，应每日清洁消毒。其他物体表面可每周清洁消毒一次。

5.1.2.3玩教具应保持清洁，宜每周清洗消毒一次；纸质书籍宜每两周消毒一次。

5.1.2.4餐桌每餐使用前进行清洁消毒。

5.1.2.5重复使用的毛巾一人一巾，每日清洗消毒一次；被褥每月曝晒1～2次，床上用品一人一套，

每月清洗1～2次，脏污时及时更换。

5.1.2.6听诊器、体温计等直接接触人体的诊疗用品应保持清洁，一人一用一消毒。

5.1.3餐（饮）具

5.1.3.1餐（饮）具应一人一用一清洗消毒。消毒首选热力消毒等物理消毒方法。

5.1.3.2消毒后的餐（饮）具应符合GB14934的要求。

5.1.3.3清洗消毒后的餐（饮）具应保持干燥并妥善存放，防止使用前再次污染。

5.1.4饮水设施

5.1.4.1若使用开水保温桶（壶），宜每周清洗消毒一次；若使用饮水机，对饮水机内胆宜每周清洗

消毒一次；若使用直饮水设备，宜定期检测水质、按照厂家要求定期更换滤芯。饮水设施出水口宜每日

清洗消毒一次。

5.1.4.2保温桶（壶）内饮水宜每日清空；开封后桶装水饮用时间不宜超过一周；一周以上不使用的

出水口和终端储水箱，宜在使用前清洗消毒。

5.1.4.3各类饮水设施宜在开学前进行全面清洗消毒或冲洗（更换）滤芯后方可投入使用。

5.1.4.4饮水设施卫生要求应符合WS10014的规定。

5.1.5手

5.1.5.1加强工作人员及幼儿手卫生教育，明确洗手时机并确保正确洗手方法。

5.1.5.2保健人员在进行晨检过程中，接触传染病幼儿或疑似传染病幼儿后应及时进行手卫生。

5.1.5.3幼儿入园时、用餐前、如厕后、接触公共设施后、室外活动后和接触鼻涕唾液后，应及时洗

手。

5.1.5.4应采用流动水使用肥皂或洗手液等清洁去污用品彻底清洗双手，用毛巾或擦手纸擦干双手。

必要时，工作人员应在洗手后使用手消毒剂进行手消毒。

5.1.6卫生洁具

5.1.6.1洗手池、便器等应保持清洁，每日消毒；受到污染后应及时清洁消毒。

5.1.6.2盛装呕吐腹泻物的容器使用后应及时清洗消毒。

5.1.7清洁用具

5.1.7.1抹布、拖布等用具每日使用后应进行清洗消毒，放置于通风处，保持干燥。

5.1.7.2不同区域、不同对象的清洁用品宜用颜色区分并明确标识，卫生间清洁用具应专用。

5.1.8游泳池水、戏水池水

5.1.8.1使用中的水池宜每日补充新水，定期换水。

5.1.8.2池水应每日消毒，保证水质处于良好卫生状况。

5.2出现传染病疫情时的消毒

3

DB41/T2819—2025

当出现传染病疫情时，应按照GB19193的要求进行消毒；使用的消毒剂应符合GB27953的要求。

6卫生学指标

6.1卫生学指标应符合表1规定。

表1卫生学指标

对象项目指标

菌落总数

沉降法/（CFU/皿·5min）≤20

室内空气

撞击法/（CFU/m3）≤1500

致病菌（溶血性链球菌）不应检出

菌落总数/（CFU/cm2）≤10

物体表面大肠菌群（发酵法）不应检出

致病菌（金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌）不应检出

菌落总数/（CFU/cm2）≤10

工作人员手大肠菌群（发酵法）不应检出

致病菌（金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌）不应检出

大肠菌群（发酵法、纸片法）（/50cm2）不应检出

餐（饮）具

致病菌（沙门氏菌）不应检出

菌落总数/（CFU/mL）≤200

游泳池水大肠菌群/（CFU/100mL或MPN/100mL）不应检出

游离性余氯/（mg/L）0.3～0.5

菌落总数/（CFU/mL）≤1000

戏水池水大肠菌群/（CFU/100mL或MPN/100mL）不应检出

游离性余氯/（mg/L）0.3～0.5

菌落总数/（CFU/mL）

使用中的消毒液皮肤黏膜≤10

其他（非灭菌用）≤100

注1：大肠菌群、致病菌必要时进行检测。

注2：使用含氯消毒剂消毒时进行游离性余氯检测。

6.2托幼机构发生传染病疫情时，卫生学指标应符合GB19193的要求。

7消毒方法

7.1托幼机构预防性消毒方法参照附录A进行。

7.2出现附录B中所列传染病时，消毒方法参照附录B进行；出现其他传染病时，按照GB19193的

规定进行；卫生行政部门另有规定的，按照其规定进行。

8采样及检验方法

采样及检验方法按照附录C的规定进行。

4

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A

A

附录A

（资料性）

托幼机构预防性消毒常用方法

A.1室内空气

A.1.1通风换气

A.1.1.1首选开窗通风换气，每日上午下午至少各一次，每次不少于30min。在外界温度适宜、空气

质量较好、保障安全性的条件下，宜持续开窗通风。

A.1.1.2通风不良场所宜采用机械通风换气，也可使用空气净化设备。

A.1.2紫外线灯消毒

A.1.2.1使用悬挂式或移动式紫外线灯进行照射消毒。持续照射30min～60min。

A.1.2.2房间内紫外线灯数量应根据房间容积和灯管功率计算，不少于1.5W/m3；悬挂式紫外线灯

安装高度距地面1.8m～2.5m。

A.1.2.3应保持紫外线灯管清洁，每周用75%酒精擦拭一次；当发现灯管表面有灰尘时，应及时清洁。

A.1.2.4应定期测试使用中的紫外线灯管辐射强度。

A.1.2.5使用新型紫外线灯产品时，应按照产品说明书进行安装、使用和日常维护。

A.1.3空气消毒机消毒

A.1.3.1可使用静电吸附式空气消毒机、循环风紫外线空气消毒机等物理因子的空气消毒机，也可

使用臭氧消毒机、过氧化氢空气消毒机等化学因子的空气消毒机。

A.1.3.2按照空气消毒机说明书进行使用，注意是否能在有人情况下使用及适用体积，确保使用安

全及消毒效果。

A.1.3.3使用化学因子的空气消毒机消毒后，应开窗通风。

A.1.4机械通风设备、净化设备消毒

A.1.4.1机械通风设备应及时清洗挡板上的积尘，去除污垢。必要时使用含有效氯250mg/L～500mg/L

的含氯消毒液进行擦拭或浸泡消毒，作用15min～30min；或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒。

A.1.4.2净化设备的过滤网和过滤器应保持清洁，必要时使用含有效氯250mg/L～500mg/L的含氯消

毒液擦拭或浸泡消毒，作用15min～30min；或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒。集中净化系

统的清洗消毒应由具有资质的专业机构进行。

A.2环境物体表面

A.2.1地面

A.2.1.1一般进行湿式拖拭清洁，清除地面污迹。

A.2.1.2当受到呕吐腹泻物等污染时，应在消毒并清除污物后，对污染处及周围2m范围的地面使用

含有效氯1000mg/L的含氯消毒液或500mg/L二氧化氯消毒液进行拖拭、擦拭或喷洒消毒，作用30min；

或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒。

A.2.2物体表面

5

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A.2.2.1对于桌椅、床围栏、门把手、水龙头、卫生间冲水按钮、晨检卡、楼梯扶手等物体表面，可

使用含有效氯250mg/L～500mg/L的含氯消毒液、次氯酸消毒剂（按产品说明书使用）、100mg/L～

200mg/L二氧化氯消毒液、400mg/L～1200mg/L季铵盐消毒液或其他可用于物表消毒的消毒剂进行

擦拭或喷洒消毒，作用15min～30min；也可使用消毒湿巾进行擦拭消毒。

A.2.2.2餐桌和易腐蚀物品消毒后要用清水去除消毒剂残留。

A.2.3玩教具

A.2.3.1根据玩教具材质及可操作性选择适宜的消毒方法。

A.2.3.2耐湿耐热物品可使用流通蒸汽消毒或煮沸消毒15min～30min。煮沸时被煮物品应全部浸没

在水中，蒸汽消毒时被蒸物品应疏松放置。

A.2.3.3不耐热物品可使用次氯酸消毒剂（按产品说明书使用）、75%酒精或消毒湿巾擦拭消毒；也

可用含有效氯250mg/L的含氯消毒液或其他消毒剂浸泡消毒15min～30min，清洗晾干后存放。

A.2.3.4纸质类可曝晒4h以上，或使用消毒柜按说明书进行消毒。毛绒类可使用洗涤剂清洗晾干后

在阳光下曝晒4h以上。

A.2.4毛巾类织物

A.2.4.1首选物理消毒方法。可使用流通蒸汽消毒或煮沸消毒15min～30min，或使用洗涤剂清洗干

净后在阳光下曝晒4h以上。

A.2.4.2采用化学法消毒时，可使用含有效氯250mg/L的含氯消毒液浸泡消毒30min，或使用其他

消毒剂按产品说明书进行消毒，消毒后用清水冲洗干净，晾干存放。有色织物慎用有漂白性的消毒剂。

A.2.5便器、盛放呕吐腹泻物的容器等

可使用含有效氯500mg/L～1000mg/L的含氯消毒液或200mg/L～500mg/L二氧化氯消毒液浸泡消

毒30min，或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒。盛放呕吐腹泻物的容器消毒后用清水去除消毒剂

残留，晾干存放。

A.2.6清洁用具

可使用含有效氯250mg/L～500mg/L的含氯消毒液或100mg/L～200mg/L二氧化氯消毒液浸泡消毒

30min，或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒，清洗晾干后存放备用。

A.2.7诊疗用品

听诊器、直接接触人体的体温计可使用75%酒精或消毒湿巾擦拭消毒。

A.3餐（饮）具

使用流通蒸汽消毒或煮沸消毒15min～30min，或使用餐（饮）具消毒箱（柜）按说明书进行消毒。

A.4饮水设施

A.4.1开水保温桶（壶）可采用沸水灌入的方式消毒内壁和出水口，也可使用75%酒精擦拭消毒出水口。

A.4.2饮水机可使用75%酒精擦拭消毒内胆和出水口；直饮机可使用75%酒精擦拭消毒出水口。

A.5手

A.5.1幼儿日常以洗手为主。在流动水下使用肥皂或洗手液，按照六步洗手法充分搓洗双手。

A.5.2当手部接触污染物后，在洗手后使用手消毒剂进行手消毒。

6

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A.6呕吐腹泻物

A.6.1大量呕吐腹泻物可使用消毒粉或漂白粉完全覆盖，或能达到高水平消毒的消毒干巾完全覆盖，消

毒至作用时间后，小心清除干净。

A.6.2少量呕吐腹泻物可用一次性吸水材料（如纱布、抹布等）沾取含有效氯5000mg/L～10000mg/L

的含氯消毒液完全覆盖，作用30min以上，小心清除干净。

A.6.3清除过程中避免接触污染物，清除污染物后对污染的地面参照A.2.1.2进行消毒。

7

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B

B

附录B

（资料性）

托幼机构常见传染病消毒方法

B.1诺如病毒感染

B.1.1呕吐物、排泄物

B.1.1.1大量污染物应使用消毒粉或漂白粉完全覆盖，或使用能达到高水平消毒的消毒干巾完全覆

盖，消毒至作用时间后，小心清除干净；少量污染物可用一次性吸水材料（如纱布、抹布等）沾取含有

效氯5000mg/L～10000mg/L的含氯消毒液完全覆盖，作用30min以上，小心清除干净。清除过程中

避免接触污染物，清理的污染物按医疗废物集中处置或用含有效氯10000mg/L～20000mg/L的含氯消毒

液作用1h后丢入废物袋。清除污染物后，以污染物覆盖处为中心，从外围2m处，由外向内用含有效

氯1000mg/L的含氯消毒液擦（拖）拭或喷洒消毒两遍，作用30min后用清水擦（拖）拭干净。

B.1.1.2马桶或容器内的污染物，可用含有效氯10000mg/L～20000mg/L的含氯消毒液作用1h，

再排入污水处理系统。

B.1.1.3使用后的拖把、抹布等工具，盛放污染物的容器，应使用含有效氯5000mg/L的含氯消毒液

浸泡消毒30min，或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒，彻底冲洗后才可再次使用。卫生间的拖

把、抹布应专用。

B.1.2地面、墙壁及物体表面

B.1.2.1有肉眼可见污染物时，应先清除污染物再消毒。

B.1.2.2无肉眼可见污染物时，可使用含有效氯（溴）1000mg/L～2000mg/L的含氯（溴）消毒液、

500mg/L～1000mg/L二氧化氯消毒液、5000mg/L过氧乙酸消毒液、或3%过氧化氢消毒液擦（拖）

拭、喷洒或浸泡消毒，作用30min后用清水去除消毒剂残留。喷液量为100mL/m2～300mL/m2，以消

毒液均匀、透湿、不流水为宜。

B.1.3餐（饮）具

B.1.3.1对可能污染的餐（饮）具应先清除食物残渣再消毒。

B.1.3.2首选物理消毒方法，使用流通蒸汽或煮沸消毒15min～30min。也可使用餐（饮）具消毒箱

（柜），按照说明书进行消毒。

B.1.3.3采用化学消毒法时，可使用含有效氯（溴）500mg/L的含氯（溴）消毒液浸泡消毒，作用

30min后用清水冲洗去除消毒剂残留，或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒。

B.1.4衣服、被褥、毛巾等织物

B.1.4.1收拾被污染的衣物、被褥等织物时应避免产生气溶胶。有肉眼可见污染物时，应先将污染物

消毒处理并移除后，再对织物进行消毒。

B.1.4.2可使用流通蒸汽或煮沸消毒30min；也可使用含有效氯500mg/L的含氯消毒液浸泡消毒

30min，或使用其他消毒剂按产品说明书进行消毒，消毒后用清水冲洗干净，晾干存放。

B.1.4.3若不能即时消毒，应放置在密封袋内，并尽快处理。

B.1.5手、皮肤、粘膜

B.1.5.1手、皮肤、粘膜有污染物时，应先清除污染物再消毒。手和皮肤可用0.5%碘伏擦拭消毒作用

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3min以上；粘膜应使用0.1%碘伏冲洗消毒。

B.1.5.2诺如病毒对酒精不敏感，宜选用其他有效的消毒剂。

B.1.6室内空气

加强通风，保持室内空气流通。

B.2细菌性痢疾

B.2.1呕吐物、腹泻物

参照B.1.1。

B.2.2地面、墙壁、物体表面

B.2.2.1有肉眼可见污染物时，应先清除污染物再消毒。

B.2.2.2无肉眼可见污染物时，可使用含有效氯（溴）500mg/L～1000mg/L的含氯（溴）消毒液、

200mg/L～500mg/L二氧化氯消毒液、2000mg/L过氧乙酸消毒液、1000mg/L～2000mg/L季铵盐消

毒液或3%过氧化氢消毒液擦（拖）拭、喷洒消毒，作用30min后用清水去除消毒剂残留。喷液量为

100mL/m2～300mL/m2，以消毒液均匀、透湿、不流水为宜。

B.2.3餐（饮）具

参照B.1.3。

B.2.4衣服、被褥、毛巾等织物

参照B.1.4。

B.2.5手、皮肤、粘膜

B.2.5.1手、皮肤受到污染时，可用75%酒精、速干手消毒剂或0.5%碘伏消毒。

B.2.5.2粘膜受到污染时，可用大量无菌生理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。

B.3手足口病

参照B.1.1～B.1.6。

B.4急性出血性结膜炎

B.4.1物体表面

参照B.1.2。

B.4.2餐（饮）具

参照B.1.3。

B.4.3衣服、被褥、毛巾等织物

参照B.1.4。

B.4.4手、皮肤、粘膜

参照B.1.5。

9

DB41/T2819—2025

B.5水痘

B.5.1室内空气

B.5.1.1加强通风。室内空气化学消毒应在无人条件下开展，消毒前应关闭门窗，在达到消毒作用时

间后，开窗通风换气。

B.5.1.2气溶胶喷雾消毒。使用3%过氧化氢、500mg/L二氧化氯消毒液或5000mg/L过氧乙酸消毒

液，按照20mL/m3～30mL/m3用量，对室内空气进行喷雾消毒。过氧化氢、二氧化氯作用时间为30min～

60min，过氧乙酸作用时间为60min。也可使用其他可用于空气消毒的消毒剂如次氯酸消毒剂等按照

产品说明书要求进行空气消毒。

B.5.1.3熏蒸消毒。使用5000mg/L～10000mg/L的过氧乙酸消毒液（1g/m3）或其他可用于熏蒸消

毒的消毒剂，加热熏蒸2h。消毒剂用量、消毒时间、操作方法和注意事项等应遵循产品使用说明书。

B.5.1.4其他空气消毒方法，参照A.1.2或A.1.3。

B.5.2地面、墙壁、物体表面

参照B.2.2。

B.5.3餐（饮）具

参照B.1.3。

B.5.4衣服、被褥、毛巾等织物

参照B.1.4。

B.5.5手、皮肤、粘膜

参照B.1.5。

B.6猩红热

参照B.5。

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C

C

附录C

（规范性）

采样及检验方法

C.1采样及检验原则

在清洁或消毒处理后2h内进行采样。微生物指标的检验应在采样后4h内尽快进行，如不能在4h

内检验，样品应保存于0℃～4℃条件下，在24h内进行检验。

C.2室内空气微生物采样及检验方法

C.2.1沉降法

C.2.1.1样品采集

室内面积不足50m2，在一条对角线上设里、中、外（在四等分的3个等分点上）3点，里、外位置

距墙1m；室内面积50m2以上，设4角及中央5点，周围4点距墙1m；采样点应避开通风口、通风道。采

样时将普通营养琼脂平板（直径90mm）置于采样点与地面垂直高度60cm～100cm（幼儿呼吸带高度），

打开平板盖使平板在空气中暴露5min，盖上平板盖，同时设空白对照。

C.2.1.2细菌培养

将采样平板置于36℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落总数。

C.2.1.3结果计算

采样平板平均菌落数按式（C.1）进行计算：

∑퐶

푦=···········································································(C.1)

1퐴

式中：

y1——采样平板暴露5min平均菌落数，单位为菌落形成单位每皿•暴露时间（CFU/皿•5min）；

C——平板菌落数，单位为菌落形成单位（CFU）；

A——采样平板数。

C.2.2撞击法

C.2.2.1样品采集

选用六级撞击式空气采样器进行采样。房间内面积不足50m2的，设置1个采样点，50m2～200m2

的对称点上设置两个采样点；200m2以上的，设置3～5个采样点，布点方法按C.2.1.1；采样点应避开

通风口、通风道。将采样器置于采样点60cm～100cm高度，距墙1m处，采用无菌操作装入普通营养琼

脂平板（直径90mm），按使用说明操作采样器，采样流量为28.3L/min，采样时间为5min。同时设空

白对照。

C.2.2.2细菌培养

无菌操作取出采样平板，置于36℃±1℃培养48h，计数平板上细菌菌落总数。

C.2.2.3结果计算

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DB41/T2819—2025

空气中细菌菌落数按式（C.2）进行计算。

∑퐶

푦=×1000··································································(C.2)

2푄×푇

式中：

3

y2——空气中细菌菌落数，单位为菌落形成单位每立方米（CFU/m）；

Q——空气流量，单位为升每分钟（L/min）；

T——采样时间，单位为分钟（min）。

C.3物体表面、手微生物采样及检验方法

C.3.1样品采集

C.3.1.1物体表面

C.3.1.1.1将5cm×5cm的无菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）

或无菌生理盐水采样液的棉拭子在规格板内横竖往返各涂擦5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规

格板面积，共采集100cm2（被采样本表面积＜100cm2取全部表面），然后剪去或拗断手接触部分，将

棉拭子放入含10mL无菌采样液（若消毒因子为化学消毒剂，采样液中加入足量相应中和剂）的采样管

内送检。

C.3.1.1.2门把手等小型或不规则物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样，估算采样面积计算结

果。

C.3.1.2手

C.3.1.2.1被检人在清洁或消毒处理后采样。

C.3.1.2.2双手五指并拢，用浸湿无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或无菌生理盐水采样液的棉

拭子在双手指曲面，从指根到指端来回涂擦两次，然后剪去或拗断手接触部分，将棉拭子放入10mL

无菌采样液（若消毒因子为化学消毒剂，采样液中加入足量相应中和剂）的采样管内送检。

C.3.2细菌培养

将每支采样管振打80次或涡旋振荡混匀，取1.0mL样液接种于无菌平皿内，如预判污染严重，可适

当稀释后接种，每个样本平行接种两个平皿，倾注45℃～48℃的营养琼脂培养基，摇匀并冷却后置36℃

±1℃培养48h，计数平板上菌落总数。

C.3.3结果计算

C.3.3.1物体表面

物体表面菌落总数按式（C.3）进行计算。

푁×10×푘

푦=·······································································(C.3)

3푆

式中：

2

y3——物体表面菌落总数，单位为菌落形成单位每平方厘米（CFU/cm）；

N——平板平均菌落数，单位为菌落形成单位每皿（CFU/皿）；

k——稀释倍数；

S——采样面积，单位为平方厘米（cm2）。

C.3.3.2手表面

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DB41/T2819—2025

手表面菌落总数按式（C.4）进行计算。

푁×10×푘

푦=·······································································(C.4)

42×30

式中：

2

y4——手表面菌落总数，单位为菌落形成单位每平方厘米（CFU/cm）；

2——代表采2只手；

30——每只手采样面积按30cm2计。

C.3.4大肠菌群

按GB/T18204.4规定进行。

C.3.5致病菌

C.3.5.1金黄色葡萄球菌

按GB4789.10规定进行。

C.3.5.2铜绿假单胞菌

按GB15979中附录A规定进行。

C.3.5.3沙门氏菌

按GB4789.4规定进行。

C.4餐（饮）具微生物采样及检验方法

C.4.1样品采集

C.4.1.1大肠菌群

C.4.1.1.1发酵法

C.4.1.1.1.1筷子：以5根筷子为一件样品。将5根筷子的下段（进口端）5cm处（长5cm×周长

2cm×5根，50cm2），置10mL无菌生理盐水大试管中，充分振荡20次后，移出筷子。视具体情况，5

根筷子可分别振荡。或用无菌生理盐水湿润棉拭子，分别在5根筷子的下段（进口端）5cm处表面范

围均匀涂抹3次后，用灭菌剪刀剪去或拗断棉拭子与手接触的部分，将棉拭子置相应的液体培养基内。

C.4.1.1.1.2其他餐（饮）具：以1.0mL无菌生理盐水湿润10张2.0cm×2.5cm（5cm2）灭菌滤纸

片（总面积为50cm2）。选择餐（饮）具通常与食物接触的内壁表面或与口唇接触处，每件样品分别贴

上10张湿润的灭菌滤纸片。30s后取下，置相应的液体培养基内。或用无菌生理盐水湿润棉拭子，分

别在两个25cm2（5cm×5cm）面积范围来回均匀涂抹整个方格3次后，用灭菌剪刀剪去或拗断棉拭子

与手接触的部分，将棉拭子置相应的液体培养基内，4h内送检。

C.4.1.1.2纸片法

C.4.1.1.2.1筷子：以5根筷子为一件样品，用无菌生理盐水湿润餐具大肠菌群快速检验纸片后（5cm

×5cm），或者采用湿润型大肠菌群快速检验纸片，立即将筷子下段（进口端，约5cm）涂抹纸片，每

件样品涂抹两张快速检验纸片，置无菌塑料袋内。

C.4.1.1.2.2其他餐（饮）具：用无菌生理盐水湿润餐具大肠菌群快速检验纸片后，立即贴于餐（饮）

具通常与食物或口唇接触的内壁表面或与口唇接触处，每件贴两张快速检验纸片，30s后取下，置无菌