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文档简介
ICS65.020.01
CCSB16
15
内蒙古自治区地方标准
DB15/T4106—2025
马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程
Codeofpracticetechnicalforindoorevaluationofpotato
resistancetoblacklegdisease
2025-07-10发布2025-08-10实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
DB15/T4106—2025
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会(SAM/TC25)归口。
本文件起草单位:内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、准格尔旗农牧局。
本文件主要起草人:孙平平、李正男、张磊、席先梅、雷雪峰、黄秀梅、杨永青、廉勇、付崇毅、
霍宏丽、张溪、王金泉、牟英男、吴若晨。
I
DB15/T4106—2025
马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程
1范围
本文件规定了马铃薯黑胫病室内抗性鉴定的术语和定义、培养基制备、接种体制备、接种、病情调
查和抗病性评价等内容。
本文件适用于马铃薯品种在室内条件下对黑胫病抗性水平的鉴定。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4培养基制备
LBA培养基(病原细菌生长固体培养基):5g酵母提取物,10g胰蛋白胨,10g氯化钠,15g琼脂
粉,1000mL去离子水,121℃灭菌15min。
LB液体培养基(病原细菌生长液体培养基):不加琼脂粉,其余同LBA的制作方法。
5接种体制备
病原物分离
取马铃薯黑胫病感病植株,采用组织分离结合单孢分离法从发病部位分离病原物,柯赫氏法则确定
致病菌,形态学、生理生化特性和分子序列对致病菌株进行鉴定,确定为马铃薯黑胫病病原菌
Pectobacteriumatrosepticum,保存备用。
菌悬液的制备
取100μL在-80℃保存的分离病原菌涂抹于LBA培养基上,28℃培养48h。挑取菌落于100mLLB
液体培养基中,置于28℃、180r/min培养48h,用无菌水调节菌悬液浓度至106cfu/mL。
鉴定材料准备
选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯,种植在装有无菌的细沙与腐殖土等量混匀的盆中,出苗
后在温室环境下生长。采用随机排列盆栽,待马铃薯植株高约10cm用于接种。
6接种
1
DB15/T4106—2025
用无菌牙签在距土壤表面约5cm处戳伤植株的茎部,吸取10μL菌悬液,注射于马铃薯植株茎部伤
口中,以接种等量LB培养基的处理作为对照,每个品种处理10株,重复3次,将接种植株置于25℃~
28℃和90%以上湿度环境条件下培养。
7病情调查
接种7天后,以接种点为中心测定上下各5cm范围内的发病面积占调查面积的比率进行分级和抗性
评价。
8抗病性评价
计算抗病等级平均值,以抗病等级平均值评价抗病性:
——调查范围内无病状发生,抗病等级为高抗(HR);
——发病面积占调查面积25%以下,抗病等级为抗病(R);
——发病面积占调查面积25%~50%,抗病等级为中抗(MR);
——发病面积占调查面积50%~75%,抗病等级为中感(M
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