再生医学细胞培养技术员岗位考试试卷及答案

再生医学细胞培养技术员岗位考试试卷及答案一、单项选择题（每题2分，共10题20分）1.细胞培养常用的培养基是（）A.生理盐水B.PBSC.DMEMD.蒸馏水2.细胞培养的最佳温度是（）A.25℃B.37℃C.40℃D.42℃3.以下哪种是细胞培养常用的消化液（）A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.脂肪酶D.淀粉酶4.细胞传代时，一般细胞汇合度达到多少进行传代（）A.30%B.50%C.80%D.100%5.细胞培养过程中，CO₂的作用是（）A.提供营养B.维持pH值C.抑制细菌生长D.促进细胞贴壁6.常用的细胞冻存保护剂是（）A.DMSOB.酒精C.甘油D.丙酮7.细胞培养使用的超净工作台应定期用什么消毒（）A.清水B.75%酒精C.95%酒精D.碘伏8.细胞培养用水一般要求是（）A.自来水B.蒸馏水C.去离子水D.三蒸水9.细胞复苏时，应将冻存管迅速放入（）A.37℃水浴B.4℃冰箱C.室温D.液氮10.原代细胞培养是指（）A.从体内取出细胞第一次培养B.细胞传代10次以内培养C.细胞传代50次以内培养D.细胞无限传代培养答案：1.C2.B3.A4.C5.B6.A7.B8.D9.A10.A二、多项选择题（每题2分，共10题20分）1.细胞培养的基本条件包括（）A.合适的培养基B.适宜的温度C.无菌环境D.一定的气体成分2.细胞培养过程中可能出现的污染有（）A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染3.以下属于细胞培养常用设备的有（）A.培养箱B.显微镜C.离心机D.天平4.细胞计数的方法有（）A.血细胞计数板计数B.台盼蓝染色计数C.流式细胞仪计数D.比色法计数5.细胞冻存的步骤包括（）A.配制冻存液B.收集细胞C.梯度降温D.放入液氮6.细胞培养对血清的要求有（）A.无支原体B.无细菌C.低内毒素D.高活性7.细胞传代的方法有（）A.胰蛋白酶消化法B.机械吹打传代法C.酶消化结合机械吹打D.直接传代法8.影响细胞生长的因素有（）A.营养物质B.温度C.pH值D.细胞接种密度9.细胞培养常用的缓冲液有（）A.PBSB.Hanks液C.Tris缓冲液D.柠檬酸缓冲液10.细胞复苏的要点包括（）A.快速解冻B.无菌操作C.及时更换培养基D.低速离心答案：1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABCD9.AB10.ABC三、判断题（每题2分，共10题20分）1.细胞培养时，培养基中血清浓度越高越好。（）2.超净工作台只要开启紫外灯就可以保证无菌。（）3.细胞传代次数越多，细胞状态越好。（）4.冻存细胞时，冻存液中血清比例越高越好。（）5.细胞培养过程中，pH值越低对细胞生长越有利。（）6.细胞计数时，死细胞会被台盼蓝染成蓝色。（）7.新购买的细胞培养瓶可以直接使用。（）8.细胞培养箱中的湿度应保持在100%。（）9.细胞复苏后可以直接放入培养箱培养。（）10.原代细胞培养比传代细胞培养更容易操作。（）答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.×10.×四、简答题（每题5分，共4题20分）1.简述细胞培养过程中防止污染的措施。答案：保持操作环境无菌，如超净工作台定期消毒；使用无菌器材和试剂；操作人员严格遵守无菌操作规范，如戴口罩、手套，操作前消毒双手；定期检测细胞和培养基，及时发现并处理污染迹象。2.简述细胞冻存的意义。答案：可长期保存细胞，避免细胞因传代次数过多而发生特性改变或老化；方便不同时间、不同地点的研究使用同一细胞系；保存珍贵或难以获取的细胞资源，以备后续实验需求。3.简述细胞传代的操作步骤。答案：先吸去旧培养基，用PBS清洗细胞；加入适量胰蛋白酶消化液，消化至细胞变圆、松动；加入含血清培养基终止消化；用吸管轻轻吹打细胞，使其分散成单细胞悬液；按合适比例分装到新的培养瓶中，添加新鲜培养基，放入培养箱培养。4.简述细胞培养对水质的要求。答案：细胞培养用水要求纯度高，需去除各种杂质、离子、微生物等。一般采用三蒸水或超纯水，以减少水中有害物质对细胞生长的影响，保证细胞培养环境稳定，利于细胞正常生长和实验结果的准确性。五、讨论题（每题5分，共4题20分）1.讨论细胞培养过程中支原体污染的来源、危害及检测方法。答案：来源常是血清、细胞系本身及实验环境。危害包括改变细胞代谢、影响细胞生长和形态、干扰实验结果等。检测方法有培养法、PCR法、荧光染色法等。培养法耗时但准确；PCR法灵敏快速；荧光染色法直观简便。应重视支原体污染，及时检测处理。2.讨论如何优化细胞培养条件以提高细胞生长效率。答案：首先要选择合适培养基和血清，根据细胞类型调整其成分和比例。控制培养温度、pH和气体环境，如37℃、pH7.2-7.4、5%CO₂。优化细胞接种密度，避免过密或过稀。定期更换培养基，保证营养充足和代谢废物排出。此外，防止污染也至关重要，可提高细胞生长效率。3.讨论细胞培养在再生医学中的应用及面临的挑战。答案：应用于组织修复、器官再生等，可培养种子细胞构建组织工程产品。面临挑战有细胞来源有限、培养过程易污染、细胞分化调控困难，以及临床应用的安全性和有效性验证等问题，需要不断研究技术突破和完善监管。4.讨论细胞培养技术员应具备的技能和素质。答案：技能上要熟练