2025年大肠菌群试题及答案

2025年大肠菌群试题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.大肠菌群在伊红美蓝琼脂（EMB）平板上典型菌落的中心颜色为（）A.金属绿色光泽B.橙黄色C.无色透明D.粉红色答案：A2.GB4789.32016第一法（MPN计数法）初发酵所用培养基为（）A.月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤B.EC肉汤C.BGLB肉汤D.营养肉汤答案：A3.若10mL原液、1mL原液、0.1mL原液接种量对应的阳性管数分别为320，则MPN值为（）A.93B.150C.75D.43答案：A4.大肠菌群在44.5℃EC肉汤中产气，可初步判定为（）A.总大肠菌群B.耐热大肠菌群C.大肠杆菌D.柠檬酸杆菌答案：B5.下列哪项不是大肠菌群生化特征（）A.发酵乳糖产酸产气B.氧化酶阳性C.革兰阴性D.需氧或兼性厌氧答案：B6.在VRBA平板上，大肠菌群菌落直径通常大于（）A.0.1mmB.0.5mmC.1.0mmD.2.0mm答案：B7.GB4789.32016规定，复发酵证实试验培养温度为（）A.36℃±1℃B.30℃±1℃C.42℃±1℃D.44.5℃±0.2℃答案：A8.若样品为含抑菌剂的酸性饮料，前处理应加入（）A.无菌磷酸盐缓冲液B.无菌1%蛋白胨水C.无菌3%NaClD.无菌0.1%吐温80答案：B9.MPN结果报告单位为（）A.CFU/mLB.MPN/100mLC.MPN/gD.个/mL答案：C10.下列哪种情况可直接判定为“大肠菌群检出”而无需复发酵（）A.VRBA平板计数≥1CFU且典型菌落≥1B.LST产气但革兰染色阳性C.BGLB不产气D.EC不产气答案：A11.关于大肠菌群与粪链球菌比值（FC/FS）>4，可推测污染来源为（）A.温血动物粪便B.土壤C.植物表面D.工业废水答案：A12.若样品为冷冻熟制虾仁，检样前解冻条件为（）A.4℃18hB.25℃2hC.45℃30minD.60℃5min答案：A13.在LSTMUG法中，MUG被β葡萄糖醛酸酶分解产物在紫外灯下呈（）A.蓝色荧光B.绿色荧光C.黄色D.红色答案：A14.下列哪项不是VRBA培养基成分（）A.胆盐B.中性红C.结晶紫D.亚碲酸钾答案：D15.若1:10稀释液3管均产气，1:100稀释液3管均不产气，则结果报告为（）A.＞1100MPN/gB.430MPN/gC.75MPN/gD.＜30MPN/g答案：A16.关于大肠菌群平板计数法，下列说法正确的是（）A.每个稀释度接种0.1mL于2个无菌平皿B.倾注温度控制在55℃±1℃C.凝固后无需覆盖D.培养24h即可计数答案：B17.若样品为奶粉，检样制备需加入预热至（）的无菌稀释液A.45℃±1℃B.36℃±1℃C.25℃±1℃D.60℃±1℃答案：A18.下列哪项属于大肠菌群属水平鉴定靶基因（）A.lacZB.uidAC.phoDD.invA答案：A19.若VRBA平板菌落计数为85CFU，其中10个典型菌落复发酵8个阳性，则最终计数为（）A.68CFU/gB.85CFU/gC.8.5×10¹CFU/gD.6.8×10¹CFU/g答案：A20.关于最大可能数（MPN）的95%置信区间，下列说法正确的是（）A.随阳性管数增加而变窄B.与接种体积无关C.仅与稀释倍数有关D.无法计算答案：A21.若样品为即食生菜，采样后运输温度应控制在（）A.1–4℃B.6–8℃C.10–15℃D.室温答案：A22.下列哪项不是大肠菌群快速检测的免疫学方法（）A.胶体金层析B.酶联免疫吸附C.荧光偏振D.环介导等温扩增答案：D23.若实验室使用自动MPN仪，阳性判读依据为（）A.培养基颜色变化+荧光B.仅产气C.仅浑浊D.仅酸度答案：A24.关于VRBA培养基中胆盐作用，错误的是（）A.抑制革兰阳性菌B.促进大肠菌群生长C.提高选择性D.作为碳源答案：D25.若样品为酱油，需调节pH至（）后再检测A.6.8±0.2B.7.0±0.2C.7.4±0.2D.无需调节答案：B26.下列哪项属于大肠菌群生物膜形成相关基因（）A.csgAB.stx1C.eaeD.aggR答案：A27.若样品为熟制酱卤肉，检测前表面消毒采用（）A.75%酒精擦拭B.无菌水冲洗C.紫外线照射D.火焰灼烧答案：A28.关于大肠菌群质控菌株ATCC25922，下列说法正确的是（）A.属于大肠杆菌B.属于肺炎克雷伯菌C.属于阴沟肠杆菌D.属于弗劳地柠檬酸杆菌答案：A29.若样品为碳酸饮料，需经（）除气处理A.超声波5minB.45℃水浴30minC.冷冻1hD.过滤答案：A30.关于大肠菌群检测实验室质量控制，下列说法错误的是（）A.每批次需做空白对照B.每季度进行能力验证C.可使用过期培养基D.阳性对照需同步答案：C二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.下列哪些属于大肠菌群可能的生化反应（）A.乳糖发酵产酸产气B.吲哚阳性C.甲基红阳性D.VP阳性E.枸橼酸盐阳性答案：ABC32.关于GB4789.32016第二法（平板计数法），正确的是（）A.使用VRBA培养基B.覆盖一层培养基防蔓延C.培养18–24hD.选取15–150CFU平板E.需复发酵证实答案：ABCDE33.下列哪些因素会影响MPN结果准确性（）A.稀释液分布不均B.培养温度波动C.试管密封不严D.接种量误差E.培养基pH答案：ABCDE34.关于大肠菌群快速检测的分子生物学方法，正确的是（）A.可检测死菌B.需提取DNAC.可用uidA基因D.可用lacZ基因E.可用PMA抑制死菌信号答案：BCDE35.下列哪些样品需进行前处理去除抑菌活性（）A.泡菜B.酒精饮料C.酸性果汁D.高糖蜜饯E.冷冻生鱼答案：ABCD36.关于大肠菌群生物膜危害，正确的是（）A.增强抗消毒剂能力B.提高热耐受C.促进交叉污染D.降低营养需求E.增加设备腐蚀答案：ABCE37.下列哪些属于大肠菌群属（）A.EscherichiaB.KlebsiellaC.EnterobacterD.CitrobacterE.Salmonella答案：ABCD38.关于大肠菌群检测记录，必须包含（）A.样品编号B.培养基批号C.培养温度D.阳性管数E.检验员签名答案：ABCDE39.下列哪些情况需复检（）A.空白对照阳性B.阳性对照阴性C.菌落蔓延无法计数D.培养基干裂E.结果异常高答案：ABCDE40.关于大肠菌群检测废弃物处理，正确的是（）A.121℃高压灭菌30minB.使用含氯消毒剂浸泡C.直接丢弃D.分类收集E.记录处理台账答案：ABDE三、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.大肠菌群在EC肉汤中44.5℃产气即可判定为大肠杆菌。（）答案：×42.VRBA培养基中的中性红为酸碱指示剂，大肠菌群产酸使菌落呈红色。（）答案：√43.MPN法结果可报告为CFU/g。（）答案：×44.若样品为冰块，可直接取样检测无需解冻。（）答案：×45.使用微量生化鉴定系统时，接种菌悬液浓度应调至0.5McFarland。（）答案：√46.大肠菌群检测实验室洁净级别应不低于100000级。（）答案：√47.若VRBA平板无典型菌落，可直接报告“未检出”。（）答案：×48.使用袋装培养基时，需检查是否胀袋。（）答案：√49.大肠菌群检测可用无菌采样袋内置培养基直接培养。（）答案：√50.若样品为罐头，需先经55℃水浴30min后无菌开罐。（）答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.GB4789.32016中，LST肉汤发酵管倒立________管，以观察产气。答案：杜汉氏52.大肠菌群在VRBA上的典型菌落直径通常大于________mm。答案：0.553.MPN法接种量分别为1mL、0.1mL、0.01mL时，对应稀释度为________、________、________。答案：10⁻¹、10⁻²、10⁻³54.若样品为奶酪，需以无菌刀切取________g加入________mL稀释液。答案：25，22555.复发酵证实试验所用培养基为________肉汤。答案：BGLB56.大肠菌群革兰染色结果为________性，形态为________杆菌。答案：阴，短57.使用自动菌落计数仪时，需设置________阈值以区分菌落与气泡。答案：灰度58.若样品为速冻水饺，解冻后均质时间设定为________s。答案：60–12059.报告MPN结果时，若所有管均阴性，结果应表示为________MPN/g。答案：＜360.实验室内部质量控制频次为每月至少________次。答案：1五、简答题（每题6分，共30分）61.简述GB4789.32016第一法（MPN法）检测步骤。答案：（1）样品制备：无菌称取25g样品加入225mL无菌稀释液，均质；（2）初发酵：选取3个适宜稀释度，每个稀释度接种3管LST肉汤，36℃±1℃培养24h±2h，观察产气；（3）复发酵：将产气管接种至BGLB肉汤，36℃±1℃培养24h±2h，观察产气；（4）结果查表：根据阳性管数查MPN表，计算MPN值；（5）以MPN/g或MPN/mL报告结果。62.说明VRBA培养基中各主要成分的功能。答案：（1）胆盐：抑制革兰阳性菌，提高选择性；（2）结晶紫：抑制革兰阳性菌；（3）中性红：酸碱指示剂，大肠菌群产酸使菌落呈红色；（4）乳糖：可发酵碳源，用于鉴别；（5）蛋白胨：提供氮源及生长因子；（6）琼脂：凝固剂。63.列举造成MPN结果假阳性的常见原因及纠正措施。答案：原因：（1）培养基污染；（2）试管密封不严导致外界微生物进入；（3）产气误判，如溶解气体释放；（4）非目标菌利用乳糖产气。纠正：（1）空白对照同步；（2）使用新鲜培养基；（3）杜汉氏管排气彻底；（4）复发酵证实；（5）革兰染色镜检排除革兰阳性菌。64.说明大肠菌群平板计数法选取计数范围及计算方法。答案：选取菌落数在15–150CFU之间的平板，且典型菌落不少于1/5。计算：N=∑C/(n₁+0.1n₂)d其中∑C为两个连续稀释度典型菌落总数，n₁为第一稀释度平板数，n₂为第二稀释度平板数，d为第一稀释度。结果保留两位有效数字。65.简述分子生物学方法检测大肠菌群的优势与局限。答案：优势：（1）快速，24h内可报告；（2）特异性高，可区分属种；（3）可定量（qPCR）；（4）适合复杂样品。局限：（1）仪器成本高；（2）需专业操作；（3）不能区分活/死菌（除非用PMA等前处理）；（4）抑制物可能干扰PCR；（5）标准尚不统一。六、案例分析题（每题10分，共40分）66.某实验室对即食紫菜进行检测，取样25g，均质后按GB4789.32016第一法操作，10⁻¹、10⁻²、10⁻³稀释度各接种3管LST，结果如下：10⁻¹：3/3产气；10⁻²：2/3产气；10⁻³：0/3产气。复发酵：10⁻¹3管均阳性；10⁻²2管阳性；10⁻³0管阳性。计算MPN值并报告结果，同时分析可能污染环节。答案：查MPN表320，对应93MPN/100mL，换算为93MPN/g。93MPN/g。污染环节：紫菜可能受海水或加工用水污染；包装车间环境控制不足；员工手部卫生不良；设备清洗消毒不彻底。67.某品牌鲜榨橙汁250mL瓶装，实验室采用第二法（平板计数），10⁻¹平板85CFU，10⁻²平板12CFU，典型菌落比例80%，复发酵8/10阳性。计算最终结果并评价产品是否符合GB71012022对大肠菌