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文档简介

2026上半年医学(核酸检验技术士)答题技巧

(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题,共40分)答题要求:本卷共20题,每题2分。每题的备选项中,只有一个最符合题意。请将正确答案填涂在答题卡相应位置。1w.核酸检验技术中,用于提取病毒核酸的经典方法是A.煮沸法B.酚氯仿抽提法C.离子交换法D.亲和层析法2w.在核酸扩增反应体系中,TaqDNA聚合酶的作用是A.识别引物B.延伸DNA链C.解旋DNA模板D.合成引物3w.核酸电泳时,常用的核酸染料是A.考马斯亮蓝B.溴化乙锭C.二苯胺D.甲基绿4w.下列哪种核酸分子杂交技术常用于检测特定基因的表达水平A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.原位杂交5w.在核酸提取过程中,加入蛋白酶K的目的是A.破坏细胞膜B.降解蛋白质C.沉淀核酸D.抑制核酸酶活性6w.核酸测序技术中,Sanger测序法的原理是基于A.DNA合成的终止B.DNA片段的分离C.DNA的化学修饰D.DNA的杂交7w.用于核酸定量分析的仪器是A.电子天平B.紫外可见分光光度计C.气相色谱仪D.液相色谱仪8w.在核酸检验中,阳性对照的作用是A.验证试剂有效性B.检测样本是否污染C.确定实验操作是否正确D.以上都是9w.核酸检验结果的报告应包括A.检测方法B.检测结果C.报告日期D.以上都是10w.下列哪种病毒的核酸为RNAA.乙肝病毒B.丙肝病毒C.疱疹病毒D.腺病毒11w.核酸检验技术的质量控制包括A.室内质量控制B.室间质量评价C.人员培训D.以上都是12w.在核酸提取过程中,防止核酸降解的关键措施是A.低温操作B.加入核酸酶抑制剂C.避免剧烈振荡D.以上都是13w.核酸电泳图谱中,核酸条带的迁移速度与A.核酸分子大小有关B.核酸浓度有关C.电场强度有关D.以上都是14w.用于核酸扩增的引物设计原则不包括A.长度适中B.具有特异性C.富含GCD.避免形成二级结构15w.核酸检验结果出现假阳性的可能原因是A.样本污染B.试剂失效C.操作失误D.以上都是16w.在核酸杂交技术中,探针的标记方法不包括A.放射性标记B.荧光标记C.酶标记D.化学修饰标记17w.核酸检验技术中,实时荧光定量PCR的优点不包括A.灵敏度高B.特异性强C.操作简便D.可同时检测多个样本18w.用于核酸保存的常用缓冲液是A.TE缓冲液B.PBS缓冲液C.Tris缓冲液D.柠檬酸缓冲液19w.核酸检验技术的发展趋势不包括A.自动化B.高通量C.低成本D.低灵敏度20w.在核酸检验中,阴性对照的作用是A.验证试剂有效性B.检测样本是否污染C.确定实验操作是否正确D.以上都是第II卷(非选择题,共60分)(一)填空题(共10分)答题要求:请在每题的横线上填上正确答案。1.核酸包括______和______两大类。2.核酸提取的主要步骤包括______、______、______和______。3.核酸扩增反应的基本条件包括______、______、______、______和______。4.核酸电泳的支持介质有______、______和______等。5.核酸分子杂交技术主要包括______、______、______和______等。(二)简答题(共20分)答题要求:请简要回答下列问题。1.简述核酸检验技术的基本原理。2.核酸提取过程中应注意哪些问题?3.简述实时荧光定量PCR的原理及应用。4.核酸检验结果的准确性受哪些因素影响?(三)论述题(共15分)答题要求:请详细论述下列问题。1.结合实际工作,谈谈如何做好核酸检验技术的质量控制。(四)材料分析题(共10分)答题要求:请分析以下材料,并回答问题。材料:某实验室在进行核酸检验时,发现部分样本的检测结果出现异常。经过调查,发现实验过程中存在以下问题:一是核酸提取过程中未严格按照操作规程进行,导致样本核酸提取量不足;二是核酸扩增反应体系的配制不准确,影响了扩增效率;三是核酸电泳时电压设置过高,导致核酸条带变形。问题:1.请分析上述问题可能对核酸检验结果产生的影响。2.针对上述问题,应采取哪些改进措施?(五)案例分析题(共5分)答题要求:请分析以下案例,并回答问题。案例:某患者核酸检测结果为阳性,但临床症状不典型。经过进一步检查,发现该患者的核酸检测结果存在假阳性。经过调查,发现实验过程中存在以下问题:一是样本采集时未严格按照规范进行,导致样本被污染;二是核酸提取过程中使用的试剂已过期,影响了核酸提取效果;三是核酸扩增反应体系中引物浓度过高,导致非特异性扩增。问题:1.请分析上述问题可能导致核酸检测结果假阳性的原因。2.针对上述问题,应如何避免核酸检测结果出现假阳性?答案:1.B2.B3.B4.B5.B6.A7.B8.D9.D10.B11.D12.D13.A14.C15.D16.D17.D18.A19.D20.B1.DNA、RNA2.样本预处理、核酸提取、核酸纯化、核酸浓缩3.模板、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、缓冲液4.琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、毛细管5.Southern杂交、Northern杂交、Western杂交、原位杂交1.核酸检验技术是通过提取、扩增、检测等步骤,对样本中的核酸进行分析,以确定是否存在特定的病原体或基因变异等。2.注意样本的采集与保存,严格按照操作规程进行核酸提取,避免核酸降解,注意试剂的质量和有效期,防止污染等。3.原理:在PCR反应体系中加入荧光基团,通过监测荧光信号的变化实时监测PCR扩增过程。应用:病原体核酸定量检测、基因表达分析等。4.样本因素、试剂因素、操作因素、仪器因素等。1.质量控制包括室内质量控制和室间质量评价。室内质量控制应做好标准物质的使用、试剂的质量监控、操作过程的规范等。室间质量评价可通过参加外部质量评价活动,与其他实验室进行结果比对,及时发现问题并改进。2.问题1影响:核酸提取量不足可能导致检测灵敏度下降;扩增反应体系不准确影响扩增效率,可能出现假阴性或定量不准确;电泳电压过高导致条带变形,影响结果判断。问题2改进措施:严格按照操作规程进行核酸提取;准确配制扩增反应体系

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