急性肾炎实验室检验技术指南

急性肾炎实验室检验技术指南演讲人：日期:目录CATALOGUE02尿液检验技术03血液检验技术04免疫学检验方法05病理学检验技术06检验结果管理01急性肾炎概述01急性肾炎概述PART急性肾炎是由链球菌等感染后免疫复合物沉积于肾小球基底膜，激活补体系统引发的非化脓性炎症反应，病理表现为毛细血管内皮细胞增生、中性粒细胞浸润及基底膜断裂。疾病定义与病理特征免疫介导的肾小球炎症光镜下可见肾小球体积增大、细胞增多（增生性肾炎），电镜下可见上皮下“驼峰样”电子致密物沉积，免疫荧光显示IgG和C3颗粒状沉积。光镜与电镜特征中医认为本病属“阳水”范畴，因风邪外袭、肺失通调，或湿毒内蕴、脾失运化，导致水液潴留泛溢肌肤，与西医病理的体液潴留机制相呼应。中医“水肿”病机病因与风险因素分析感染诱因A组β-溶血性链球菌感染（如咽炎、皮肤脓疱疮）是最常见病因，占儿童病例的80%以上；其他病原体包括病毒（如乙肝病毒）、寄生虫等。遗传易感性HLA-DR、补体基因（如CFH、CFHR5）突变可增加发病风险，部分家族性病例与遗传性补体缺陷相关。环境与行为因素居住拥挤、卫生条件差促进链球菌传播；吸烟、肥胖及高血压可能加重肾小球损伤进程。典型三联征尿常规显示蛋白尿（+~）及镜下血尿；血补体C3一过性降低（8周内恢复）；ASO滴度升高提示链球菌感染史。实验室确诊依据鉴别诊断要点需排除IgA肾病（以发作性肉眼血尿为主）、急进性肾炎（肾功能急剧恶化）及系统性红斑狼疮肾炎（多系统受累+抗核抗体阳性）。突发的眼睑及下肢凹陷性水肿（晨起加重）、浓茶色或洗肉水样血尿（尿红细胞畸形率>80%）、少尿（<400ml/24h）伴一过性高血压（舒张压≥90mmHg）。临床表现与诊断标准02尿液检验技术PART尿常规操作流程样本采集与保存要求患者清洁外阴后留取中段尿，避免污染；尿液样本需在2小时内送检，否则需冷藏或添加防腐剂（如甲苯）以维持成分稳定性。检测指标分析结果判读与记录使用自动化尿液分析仪检测pH值、尿比重（SG）、尿蛋白（PRO）、隐血（BLD）、白细胞（WBC）等指标，重点关注尿蛋白定性结果（±至+）及红细胞/白细胞计数异常。结合患者临床症状（如水肿、高血压）综合评估，若尿蛋白定性阳性或隐血阳性，需进一步进行定量检测或镜检确认。123尿沉渣显微镜检查方法样本离心处理取10ml新鲜尿液以1500r/min离心5分钟，弃去上清液，保留0.2ml沉渣混匀后滴于载玻片，加盖玻片镜检。质量控制要求需严格区分病理性与非病理性成分（如尿酸盐结晶与细菌），记录每高倍视野（HPF）或低倍视野（LPF）的具体数量，避免主观误差。镜检观察要点在高倍镜（400×）下计数红细胞（RBC）、白细胞（WBC）、管型（如颗粒管型、透明管型）及结晶；低倍镜（100×）下观察整体沉渣分布，异常管型（如红细胞管型）提示肾小球病变。尿液蛋白定量技术要点24小时尿标本收集指导患者从清晨排尿后开始计时，收集24小时内全部尿液于专用容器，添加防腐剂（如硼酸）防止蛋白质降解，记录总尿量并混匀后取5ml送检。检测方法选择常用比色法（如磺基水杨酸法）或免疫比浊法，前者适用于筛查，后者特异性高且可区分微量白蛋白与球蛋白，需校准仪器并设置空白对照。临床意义解读成人尿蛋白定量＞150mg/24h为异常，肾炎患者常达1-3g/24h；大量蛋白尿（＞3.5g/24h）提示肾病综合征，需结合肾活检进一步明确病理类型。03血液检验技术PART肾功能指标测定程序血清肌酐检测采用酶法或苦味酸法测定血清肌酐浓度，评估肾小球滤过功能，需注意样本避免溶血和脂血干扰。通过脲酶-谷氨酸脱氢酶法或二乙酰一肟法分析血液中尿素氮水平，反映肾脏排泄功能及蛋白质代谢状态。利用免疫比浊法测定血清胱抑素C，其敏感性优于肌酐，可早期发现肾小球滤过率下降。采用放射免疫或酶联免疫法检测，用于评估肾小管重吸收功能及炎症活动程度。尿素氮测定胱抑素C检测β2-微球蛋白分析电解质平衡检测方法血钾测定使用离子选择性电极法或火焰光度法，精准检测血钾浓度，辅助判断是否存在高钾血症或低钾血症。02040301血钙与血磷动态监测结合偶氮胂Ⅲ比色法和钼蓝法，评估钙磷代谢异常风险，预防肾性骨病发生。血钠与血氯联合检测通过间接电位法同步测定，分析钠氯比例失衡情况，指导补液方案制定。血气分析采用动脉血样本检测pH值、碳酸氢根等参数，综合判断酸碱平衡状态及电解质紊乱程度。C反应蛋白（CRP）定量通过免疫散射比浊法测定，CRP升高提示急性炎症反应，需结合临床排除感染因素。降钙素原（PCT）检测采用化学发光免疫分析法，PCT水平可区分细菌感染与非感染性炎症，指导抗生素使用。白细胞介素-6（IL-6）分析利用ELISA技术检测血清IL-6浓度，其动态变化可反映炎症活动强度及预后评估。补体C3/C4测定通过速率散射比浊法评估补体消耗情况，辅助诊断免疫复合物介导的肾小球损伤。炎症标志物检测标准04免疫学检验方法PARTASO滴度测定操作采用静脉采血3-5mL，分离血清后需避免溶血和脂血干扰，样本在2-8℃保存不超过48小时，长期保存需-20℃冻存。检测前需恢复至室温并充分混匀。样本采集与处理使用标准化ASO检测试剂盒，严格按照说明书配制缓冲液和稀释液，同时需进行质控品（高、中、低浓度）校准，确保仪器光密度值在有效范围内。试剂准备与校准采用胶乳增强免疫比浊法，将样本与试剂按比例混合后37℃孵育10分钟，测定吸光度值。结果以IU/mL表示，成人正常参考值＜200IU/mL，儿童＜150IU/mL，滴度升高提示链球菌感染史。检测流程与结果判读通过绵羊红细胞致敏后与待测血清反应，补体系统激活导致红细胞裂解，分光光度计测定540nm处血红蛋白释放量，计算补体总活性（CH50）。需严格控制反应温度（37±0.5℃）和时间（30分钟）。补体活性检测步骤CH50溶血法原理血清样本需新鲜采集，避免反复冻融；脂血、黄疸或类风湿因子可能干扰结果，需通过高速离心或稀释预处理。正常参考范围为23-46U/mL，低于20U/mL提示补体消耗或遗传性缺陷。样本要求与干扰因素针对补体旁路激活途径，采用兔红细胞或脂多糖作为激活物，适用于诊断补体旁路异常相关疾病，如C3肾炎因子阳性膜增生性肾炎。替代途径检测（AP50）间接免疫荧光法（IIF）以HEp-2细胞或猴肝组织为底物，待测血清稀释后孵育，荧光标记二抗显色。需观察核型（均质型、斑点型等），抗核抗体（ANA）滴度≥1:80有临床意义，常见于狼疮性肾炎。酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测抗dsDNA抗体、抗GBM抗体等特异性自身抗体。抗dsDNA抗体＞100IU/mL高度提示SLE，抗GBM抗体阳性需结合临床排除Goodpasture综合征。线性免疫印迹技术同时检测15-20种靶抗原（如Sm、RNP、SSA等），适用于多抗体筛查。结果需结合免疫荧光和临床症状综合判断，避免假阳性（如感染或药物干扰）。自身抗体筛查技术05病理学检验技术PART需完善凝血功能、血常规、肾脏B超等检查，排除禁忌症；术前签署知情同意书，定位选取右肾下极皮质丰富区域，避免损伤大血管或集合系统。穿刺前评估与准备采用自动活检枪或手动穿刺针，在超声引导下快速进针，获取1.5-2cm肾组织条，至少含10个以上肾小球；若取材不足需重复穿刺，但不超过3次以降低出血风险。穿刺操作标准化立即将组织分割为3份，分别置于甲醛固定液（光镜）、戊二醛（电镜）及冷冻保存液（免疫荧光），确保后续病理检查完整性。标本分装与保存010203肾活检取材规范组织处理与染色技术甲醛固定后石蜡包埋，连续切片厚度2-3μm，常规采用HE染色观察组织结构，PAS染色突出基底膜病变，Masson三色染色识别纤维化及免疫复合物沉积。光镜标本处理流程戊二醛固定后环氧树脂包埋，超薄切片50-70nm，醋酸铀-枸橼酸铅双重染色，高倍镜下观察足细胞足突、基底膜电子致密物等超微结构改变。电镜标本制备要点冷冻切片直接法检测IgG、IgA、IgM、C3、C1q等沉积模式，荧光强度分级（0-3+）辅助鉴别原发性与继发性肾小球疾病。免疫荧光技术应用病理报告解读要点临床关联性分析病理报告需与实验室指标（如蛋白尿定量、血肌酐）及临床表现关联，提出治疗建议（如激素敏感性评估）及预后判断（如慢性化指标）。病变定位与描述明确肾小球、肾小管、间质及血管的病变范围，如系膜增生、毛细血管袢坏死、新月体形成等，需量化肾小球硬化比例及间质纤维化程度。病理分型与鉴别诊断结合光镜、电镜及免疫荧光结果，区分微小病变、膜性肾病、IgA肾病等类型；提示是否合并高血压或糖尿病等继发性损害。06检验结果管理PART结果综合分析方法参考区间分层解读根据年龄、性别等生理因素调整参考范围，避免单一标准导致的误判，尤其注意儿童与成人检验值的差异化管理。动态趋势监测对患者连续检测数据建立时间序列模型，观察关键指标（如尿红细胞计数、补体C3水平）的变化趋势，为临床干预提供依据。多指标关联性分析结合尿常规、血生化、免疫学检测等多项指标，通过统计学方法评估各参数间的相关性，识别潜在病理模式。例如，尿蛋白与血清肌酐的比值可辅助判断肾功能损伤程度。报告撰写与审核流程标准化报告模板采用结构化格式，包含患者基本信息、检测项目、结果数值、参考范围、异常值标注及临床建议，确保信息完整且易于解读。三级审核制度初级检验人员完成报告后，需经中级技师复核数据准确性，最终由高级职称专家对疑难病例或临界值结果进行临床相关性评估并签字确认。危急值通报机制对血钾>6.0mmol/L或eGFR<15mL/min等危及生命的指标，要求检验科在15分钟内通过电话或电子