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文档简介

2026届新疆喀什市深喀第一高级中学生物高三第一学期期末学业水平测试模拟试题请考生注意:1.请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上,请用0.5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2.答题前,认真阅读答题纸上的《注意事项》,按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.公司对即将上市的家蝇杀虫剂产品做预期调查,下表是对某市不同地区家蝇种群的敏感性和抗(杀虫剂)性基因型频率调查的结果。已知家蝇的敏感性和抗性由常染色体上的一对等位基因控制,且神经细胞膜上某通道蛋白中的一个亮氨酸替换为苯丙氨酸时出现抗药性。家蝇种群来源敏感型纯合子(%)抗性杂合子(%)甲地区7820乙地区6432丙地区8415根据以上信息,不能得出A.甲地区家蝇种群中抗性基因频率比丙地区高B.由于自然选择作用,丙地区敏感性基因的基因频率较高C.家蝇抗药性出现的根本原因可能是基因碱基对的替换D.乙地区抗性基因突变率最高,使用该产品预期效果不如其他两地2.一只杂合长翅雄果蝇(Aa)与一只残翅雌果蝇杂交,因一方减数分裂异常导致产生一只三体长翅雄果蝇。已知三体在减数分裂过程中,三条中随机两条配对,剩余一条随机分配至细胞一极。为确定该三体果蝇的基因组成(不考虑基因突变),让其与残翅雌果蝇测交,下列说法不正确的是()A.三体长翅雄果蝇可能是精原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的B.三体长翅雄果蝇可能是卵原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的C.如果测交后代长翅:残翅=3:1,则该三体果蝇的基因组成为AAaD.如果测交后代长翅:残翅=1:1,则该三体果蝇的基因组成为Aaa3.T细胞表面有两种特殊的蛋白质——CD28和CTLA-4,二者与癌细胞表面的B7蛋白结合后,细胞免疫或被“激活”或被“抑制”。科研人员制备接种了癌细胞的模型小鼠,并均分为三组。实验组分别注射抗CD28抗体和抗CTLA-4抗体,定时测定肿瘤面积得到如图所示结果。下列有关叙述错误的是()A.T细胞表面CTLA-4与B7蛋白结合后其免疫功能受到抑制B.T细胞表面CD28与B7蛋白结合后可激活细胞免疫C.CD28既是抗CD28抗体的抗原,又是B7蛋白的抗体D.注射抗CTLA-4抗体对抑制癌细胞增生具有积极意义4.胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病,制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如图所示,以下说法正确的是()A.单克隆抗体的制备过程中需加入血清或血浆B.将人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体C.在乙、丙及骨髓瘤细胞中,乙、丙经培养后,均可获得大量的抗胃癌单克隆抗体D.诱导骨髓瘤细胞与甲融合,可用的诱导因素是只有灭活的病毒5.“无细胞蛋白质合成系统”是以外源DNA或mRNA为模板,人工添加所需原料和能源物质以细胞提取物为条件合成蛋白质的体外基因表达系统。下列叙述错误的是()A.若以外源DNA为模板,该系统具备完成转录和翻译的能力B.该系统中添加的tRNA种类数多于组成目标蛋白的氨基酸种类数C.为了保证编码目标蛋白的mRNA的数量,应适当添加RNA酶D.与胞内蛋白质合成相比,该系统可表达对细胞有毒害作用的特殊蛋白质6.生物体利用的能源物质主要是糖类和油脂,油脂的氧原子含量较糖类中的少而氢的含量多。因此可用一定时间内生物产生CO2的摩尔数与消耗O2的摩尔数的比值来大致推测细胞呼吸底物的种类。下列叙述错误的是()A.将果蔬储藏于充满氮气的密闭容器中,呼吸作用的第二阶段没有ATP生成B.严重的糖尿病患者与其正常时相比,上述比值会降低C.富含油脂的植物种子在萌发初期,上述比值会低于1D.健康的成人在剧烈运动的过程中,上述的比值会大于17.哺乳动物肝细胞的代谢活动十分旺盛,下列细胞结构与对应功能表述错误的是A.细胞核:遗传物质储存与基因转录B.线粒体:丙酮酸氧化与ATP合成C.高尔基体:分泌蛋白的合成与加工D.溶酶体:降解失去功能的细胞组分8.(10分)一种感染螨虫的新型病毒,研究人员利用放射性同位素标记的方法,以体外培养的螨虫细胞等为材料,设计可相互印证的甲、乙两组实验,以确定该病毒的核酸类型。下列有关实验设计思路的叙述错误的是A.应选用35S、32P分别标记该病毒如蛋白质和核酸B.先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中C.再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中D.一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性,以确定病毒的类型二、非选择题9.(10分)请回答基因工程相关问题:(1)限制酶切割DNA分子时,断裂的是___________键。为了保证目的基因与载体的正确连接,通常用两种_________________________________不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体。(2)若要通过反转录得到胰岛素基因,可从人体的___________细胞中提取mRNA。提取mRNA时,在提取液中一般要加入RNA酶抑制剂,其目的是______________________。若要在体外得到大量胰岛素基因,可采用______________________技术,该技术过程中设计引物时______________________(填“需要”或“不需要”)知道胰岛素基因的全部序列。(3)将重组质粒转化大肠杆菌时,大肠杆菌本身___________(填“含有”或“不含有”)质粒。一般情况下不能用未经处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是______________________。10.(14分)科学家通过基因工程,成功利用非转基因棉A植株培育出抗虫转基因棉B植株,其过程如下图所示。回答下列问题:(1)获取抗虫转基因棉B植株的操作程序主要包括四个步骤,其中核心步骤是____。启动子是一段特殊结构的DNA片段,它是____识别和结合的部位。(2)研究人员发明了一种新的基因转化法——农杆菌介导喷花转基因法,即将农杆菌悬浮液用微型喷壶均匀喷洒于棉花柱头和花药等器官上,该方法集合了农杆菌转化法和___两种转化法的优点。结合上图,分析其与农杆菌转化法相比,具有的优势是________。(3)通过对Bt蛋白质三维结构图及氨基酸序列进行分析,发现若将该蛋白质结构中一段由14个氨基酸组成的螺旋结构缺失,结构变化后的Bt蛋白质能使棉铃虫具有更高的致死率。若要根据蛋白质工程的原理设计实验对Bt蛋白进行改造,以提高其致死率,实验设计思路是____。(4)若要确认该改造的Bt基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的____,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的____是否得到提高。11.(14分)我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到水稻细胞内,获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题:(1)获取目的基因的方法很多。若已知TaNHX2基因序列,可以用________扩增该基因。首先根据序列设计、合成________并投入反应体系,同时,还需要放入dNTP、目的基因、Taq酶等。还可以人工合成TaNHX2基因,如图1表示人工合成的两条若干个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种________酶。(2)图2是3种限制酶的识别与酶切位点示意图,构建基因表达载体的时候,经BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被________酶切后的产物连接,理由是____________________________。连接后的重组质粒________(填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。(3)基因表达载体通过农杆菌转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其____________________,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(4)小麦与水稻差异很大,但却通过基因重组后,水稻能够合成小麦的蛋白质,这是因为_______________________________________________________。12.某农业科学工作者探究温室中茄子在晴天和阴雨天一天中光合速率的变化,结果如下图所示。请据图回答问题:(1)晴天一天中茄子在11:00时光合速率低于10:00,原因是________________________________________________,此时光合速率_____(填“大于”、“等于”、“小于”)呼吸速率。(2)阴雨天温度变化较小,接近20℃,但光合速率较小,此时限制因素是_____________________。此时欲提高茄子产量,可采取的措施是____________________________________________________。(3)晴天中午14:00时突然降低光照强度,茄子叶绿体中C3_______、C5含量________。(4)某农民结合该研究成果栽种茄子,结果长势不良,分析原因发现是短期施肥过量所致,请分析原因__________________________________________________________________________________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

根据题意可知,抗性果蝇是杂合子,因此抗杀虫剂是显性性状,不抗杀虫剂是隐性性状,设抗性基因是A,其等位基因为a,根据题意可知,甲地区aa=78%,Aa=20%,AA=2%,因此,甲地区的A基因频率=2%+20%×1/2=12%,a基因频率=1-12%=88%;乙地区aa=64%,Aa=32%,AA=4%,因此,乙地区A基因频率=4%+32%×1/2=20%,a基因频率=1-20%=80%;丙地区aa=84%,Aa=12%,AA=1%,因此,丙地区A基因频率=1%+15%×1/2=8.5%,a基因频率=1-8.5%=91.5%。【详解】甲地区抗性基因频率=2%+20%×1/2=12%,丙地区抗性基因频率=1%+15%×1/2=8.5%,因此,甲地区家蝇种群中抗性基因频率比丙地区高,A正确;乙地区抗性基因频率=4%+32%×1/2=20%,因此,丙地区抗性基因频率最低,则敏感性基因频率最高,这是自然选择的结果,B正确;亮氨酸替换为苯丙氨酸,氨基酸数目没改变,氨基酸的改变应该是由碱基对替换引起的,C正确;乙地区抗性基因频率最高,但不代表突变率最高,D错误;因此,本题答案选D。【点睛】解答本题的关键是:明确基因频率的计算方法,根据表格中数据推测出抗性纯合子的基因型概率,再根据题意作答。2、C【解析】

一只杂合长翅雄果蝇(Aa)与一只残翅雌果蝇(aa)杂交,因一方减数分裂异常导致产生一只三体长翅雄果蝇基因型可能为AAa或Aaa。基因型为AAa的三体产生的原因可能为父本减数第二次分裂A、A所在姐妹染色单体没分开,产生AA的精子再与a卵细胞结合而成。基因型为Aaa的三体产生的原因可能有两种:①父本减数第一次分裂时含有A、a基因的同源染色体没有分离(减数第二次分裂正常)产生Aa的精子再与a的卵细胞结合而成,②母本减数第一次分裂时含a、a基因的同源染色体没有分开,或是减数第二次分裂时姐妹染色单体没有分开产生aa的卵细胞再与A的精子结合而成。【详解】AB、据上分析可知,该三体长翅雄果蝇基因型可能为AAa或Aaa,产生的原因可能是精原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的,也可能是卵原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的,AB正确;C、如果该三体果蝇的基因组成为AAa,产生的配子类型及比例是AA:a:Aa:A=1:1:2:2,与残翅雌果蝇(aa)测交,后代的基因型及比例为AAa:aa:Aaa:Aa=1:1:2:2,则长翅:残翅=5:1,C错误;D、如果该三体果蝇的基因组成为Aaa,产生的配子类型及比例是A:aa:Aa:a=1:1:2:2,与残翅雌果蝇(aa)测交,后代的基因型及比例为Aa:aaa:Aaa:aa=1:1:2:2,则长翅:残翅=1:1,D正确。故选C。3、C【解析】

据图示结果可推测,注射抗CD28抗体的一组与对照组结果相近——癌细胞大量增殖,说明CD28在“激活”细胞免疫中具有重要作用,同样道理注射抗CTLA-4抗体的一组癌细胞被清除掉了,说明CTLA-4具有“抑制”细胞免疫的作用。【详解】A、抗体与相应的抗原结合后,会使抗原失去原有作用。注射抗CTLA-4抗体的一组癌细胞被清除掉了,说明CTLA-4具有“抑制”细胞免疫的作用,A正确;B、注射抗CD28抗体的一组与对照组结果相近——癌细胞大量增殖,说明CD28在“激活”细胞免疫中具有重要作用,B正确;C、CD28是抗CD28抗体的抗原,但不是B7蛋白的抗体,C错误;D、注射抗CTLA-4抗体的一组癌细胞被清除掉了,说明CTLA-4具有“抑制”细胞免疫的作用,因此注射抗CTLA-4抗体对抑制癌细胞增生具有积极意义,D正确。故选C4、A【解析】

1、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。2、据图分析,甲表示B淋巴细胞,乙为杂种细胞,表示杂交瘤细胞,丙表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。【详解】A、单克隆抗体的制备过程中需加入血清或血浆,A正确;B、将人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体不是单克隆抗体,B错误;C、在乙、丙及骨髓瘤细胞中,乙、丙经培养后,由于基因的选择性表达,不一定获得大量的抗胃癌单克隆抗体,C错误;D、诱导骨髓瘤细胞与甲B淋巴细胞融合,可用的诱导因素处理灭活的病毒,还有聚乙二醇等,D错误。故选A。5、C【解析】

基因控制蛋白质的合成包括转录和翻译两个过程,其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,翻译是以RNA为模板合成蛋白质的过程。【详解】A、该系统能合成蛋白质,而蛋白质的合成包括转录和翻译两个过程,因此其具备完成转录和翻译的能力,A正确;B、氨基酸种类数共20种,tRNA种类数有61种,该系统中添加的tRNA种类数多于组成目标蛋白的氨基酸种类数,B正确;C、为保证编码目标蛋白的mRNA数量应适当添加RNA聚合酶,而不是RNA酶,C错误;D、与胞内蛋白质合成相比,无细胞蛋白质合成系统由于不受细胞限制,可表达对细胞有毒害作用的特殊蛋白质,D正确。故选C。【点睛】根据基因控制蛋白质的合成过程分析选项。6、D【解析】

1、有氧呼吸的过程:

第一阶段:在细胞质的基质中。

反应式:1C6H12O6(葡萄糖)2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)

第二阶段:在线粒体基质中进行。

反应式:2C3H4O3(丙酮酸)+6H2O20[H]+6CO2+少量能量(2ATP)

第三阶段:在线粒体的内膜上,这一阶段需要氧的参与,是在线粒体内膜上进行的。

反应式:24[H]+6O212H2O+大量能量(34ATP)

2、无氧呼吸的过程:

第一阶段:在细胞质的基质中。

反应式:1C6H12O6(葡萄糖)2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)

第二阶段:在细胞质基质

反应式:2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]2C2H5OH(酒精)+2CO2

或2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]2C3H6O3(乳酸)

无论是分解成酒精和二氧化碳,或者是转化成乳酸无氧呼吸,都只在第一阶段释放出少量的能量,生成少量ATP。【详解】A、将果蔬储藏于充满氮气的密闭容器中,细胞基本进行无氧呼吸,绝大多数果蔬无氧呼吸的产物是酒精和CO2,第二阶段没有ATP生成,A正确;B、严重的糖尿病患者其细胞利用糖类的能力减弱,细胞会以油脂作为能源物质,所以产生的CO2摩尔数与消耗O2的摩尔数的比值相比正常时会降低,B正确;C、富含油脂的种子在萌发初期主要利用油脂为能源物质,所以产生的CO2摩尔数与消耗O2的摩尔数的比值低于1,C正确;D、健康的成人在剧烈运动的过程中,会通过无氧呼吸补充能量,但仍以有氧呼吸为主,人体无氧呼吸产生的是乳酸,并不产生二氧化碳,故上述比值等于1,D错误。故选D。7、C【解析】

细胞器的功能名称功能双层膜细胞器线粒体有氧呼吸的主要场所叶绿体光合作用的场所单层膜细胞器内质网内质网是蛋白质合成和加工的场所;也是脂质合成的车间高尔基体对来自内质网的蛋白质进行加工、分类、包装和发送;在动物细胞中,高尔基体与分泌物的形成有关;在植物细胞中,高尔基体与有丝分裂中细胞壁的形成有关液泡液泡内含有细胞液,可以调节植物细胞内的环境;充盈的液泡还可以使植物坚挺溶酶体溶酶体内含多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器,吞噬并杀死入侵细胞的病毒或病菌无膜细胞器核糖体蛋白质的合成场所中心体一般认为中心体与细胞分裂时纺锤体的形成有关【详解】A、肝细胞中DNA主要存在于细胞核中的染色体上,而基因是有遗传效应的DNA片段,因此细胞核是遗传物质储存、DNA复制和基因转录的场所,A正确;

B、丙酮酸氧化属于有氧呼吸的第二阶段,该过程伴随着ATP的合成,在线粒体中进行,B正确;

C、核糖体是合成蛋白质的场所,高尔基体主要对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装,不具有合成蛋白质的功能,C错误;

D、溶酶体内含多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器,即能够降解失去功能的细胞组分,D正确。

故选C。8、A【解析】根据题干信息分析,本实验的目的是确定病毒核酸的类型是DNA还是RNA,因此应该分别标记DNA和RNA特有的碱基,即分别用放射性同位素标记尿嘧啶和胸腺嘧啶,A错误;由于病毒是没有细胞结构的,必须寄生于活细胞中,因此先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中,B正确;再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中,C正确;一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性,以确定病毒的类型,D正确。二、非选择题9、磷酸二酯识别序列和切割位点胰岛B防止mRNA(RNA)被降解PCR不需要不含有未经处理的大肠杆菌吸收外源DNA的能力较弱【解析】

1、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。2、PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。PCR技术的原理是DNA复制,需要的条件有:模板DNA(目的基因所在的DNA片段)、原料(四种脱氧核苷酸)、一对引物(单链的脱氧核苷酸序列)、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。【详解】(1)根据限制酶的作用可知,限制酶切割DNA分子时,断裂的是磷酸二酯键。由于同种限制酶切割得到的目的基因或质粒的两端黏性末端相同,会出现自体相连的现象,所以为了保证目的基因与载体的正确连接,通常用两种识别序列和切割位点不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体。(2)由于胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达,所以若要通过反转录得到胰岛素基因,可从人体的胰岛B细胞中提取mRNA。提取mRNA时,在提取液中一般要加入RNA酶抑制剂,其目的是防止mRNA(RNA)被降解。可采用PCR技术在体外扩增目的基因。在利用PCR技术扩增目的基因时,只需要一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物,而不需要知道胰岛素基因的全部序列。(3)质粒上的抗性基因一般用作标记基因,为了便于筛选导入了重组质粒的大肠杆菌,在将重组质粒转化大肠杆菌时,所选的大肠杆菌本身一般不含有质粒。若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱,常用Ca2+处理使之成为易于吸收外源DNA的感受态细胞。【点睛】本题考查基因工程的有关知识,意在考查考生对知识点的识记、理解和掌握程度,要求考生具有扎实的基础知识和一定的判断能力,能构建一定的知识网络。10、基因表达载体的构建RNA聚合酶花粉管通道法不需要经过植物组织培养,转化成功后可直接获得种子参照密码子表,找到合成该14个氨基酸的碱基对序列所在的某因位置,将这些碱某对序列进行缺失处理表达产物(mRNA和蛋白质)抗虫性【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)获取抗虫转基因棉B植株需要采用基因工程技术,该技术的核心步骤是基因表达载体的构建;启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位。(2)农杆菌介导喷花转基因法是指将农杆菌悬浮液用微型喷壶均匀喷洒于棉花柱头和花药等器官上,可以使目的基因顺着花粉管进入胚囊中,所以该方法集合了农杆菌转化法和花粉管通道法两种转化法的优点。该方法可以直接形成受精卵,所以具有的优势是不需要经过植物组织培养,转化成功后可直接获得种子。(3)蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。再根据题干信息“将该蛋白质结构中一段由14个氨基酸组成的螺旋结构缺失,结构变化后的Bt蛋白质能使棉铃虫具有更高的致死率”可知,要根据蛋白质工程的原理对Bt蛋白进行改造,以提高其致死率,可参照密码子表,找到合成该14个氨基酸的碱基对序列所在的基因位置,将这些碱基对序列进行缺失处理。(4)若要确认该改造的Bt基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的表达产物,如果检测结果呈阳性,说明该基因已经成功表达,还可再从个体水平上进行鉴定,即在田间试验中检测植株的抗虫性是否得到提高。【点睛】本题结合图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节;识记蛋白质工程的基本途径,能结合所学的知识准确答题。11、PCR技术引物DNA聚合Sau3AⅠBamHⅠ和Sau3AⅠ两种酶切割片段产生的黏性末端互补不一定能插入到植物细胞的染色体DNA上水稻和小麦共用一套遗传密码【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③

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