2025年学校实验室显微镜使用安全试题及答案

2025年学校实验室显微镜使用安全试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填在括号内）1.首次使用显微镜前，必须首先完成的操作是（）A.调节粗准焦螺旋使镜筒降到最低B.用擦镜纸蘸无水乙醇擦拭物镜与目镜C.确认电源电压与灯泡额定电压一致并接地D.将高倍物镜旋入光路答案：C2.关于“先低倍后高倍”的观察顺序，下列说法错误的是（）A.低倍镜视野大，易找到目标B.高倍镜工作距离短，易与载玻片碰撞C.低倍镜下可直接滴加香柏油D.高倍镜下微调细准焦螺旋即可聚焦答案：C3.使用油镜后，清除香柏油的正确步骤是（）A.镜头纸干擦→二甲苯润洗→镜头纸干擦B.脱脂棉蘸水→镜头纸干擦→电吹风吹干C.擦镜纸蘸95%乙醇→擦镜纸干擦D.擦镜纸蘸乙醚→擦镜纸干擦→无水乙醇二次擦拭答案：A4.显微镜灯泡突然熄灭，最先应检查的项目是（）A.保险丝B.光源开关C.电源插头与插座接触D.亮度旋钮是否归零答案：C5.下列哪种行为最可能导致目镜内部真菌污染（）A.观察完毕立刻盖上防尘罩B.在湿度70%以上的环境中长期存放C.使用一次性手套更换切片D.用紫外灯照射镜体30分钟答案：B6.当高倍镜下视野出现“月牙形”暗影时，最可能的原因是（）A.聚光器顶透镜未旋入光路B.目镜筒未插到底C.物镜螺纹未旋紧D.视场光阑收缩过度答案：A7.关于汞灯荧光光源，下列操作正确的是（）A.点燃不足15分钟即关闭以节能B.更换汞灯时用金属镊夹取灯泡C.关闭后立刻搬动灯箱D.点燃前确认灯箱排风扇已启动答案：D8.搬运台式显微镜时，正确握持部位是（）A.镜臂与镜座同时固定B.单手握镜臂，另一手托底座前端C.单手拎镜臂，镜体自然下垂D.双手抱镜筒答案：B9.若发生香柏油滴入聚光器前透镜，应立即（）A.用擦镜纸干擦B.用二甲苯润洗后干擦C.用无水乙醇冲洗D.送厂家拆解清洗答案：B10.学生观察自己口腔上皮细胞后，载玻片与盖玻片应放入（）A.普通生活垃圾袋B.5%84消毒液浸泡桶C.锐器盒D.75%乙醇回收缸答案：B11.使用CCD摄像头时，防止芯片灼伤的正确做法是（）A.曝光前关闭护眼滤片B.长时间曝光时移出视场光阑C.强光下使用ND滤光片D.增益调至最大答案：C12.镜检结核痰涂片时，必须佩戴的防护装备是（）A.医用外科口罩B.N95及以上等级口罩C.一次性无纺布帽D.护膝答案：B13.关于相差观察，下列说法正确的是（）A.相差物镜可与普通聚光器配套B.绿色滤光片可提高相差效果C.相差观察无需调节孔径光阑D.相差环板可用擦镜纸蘸水清洗答案：B14.显微镜出厂编号被磨损时，实验室管理员应（）A.自行刻写相同编号B.用记号笔写在底座C.拍照存档并报告资产处D.忽略答案：C15.若镜头表面出现“彩虹”状油膜，最可能使用了（）A.纯二甲苯B.含润滑脂的劣质擦镜纸C.无水乙醇D.乙醚与无水乙醇混合液答案：B16.关于荧光激发块，下列操作错误的是（）A.徒手更换激发块B.标记激发块对应染料C.每月检查激发块固定螺丝D.关闭汞灯后等待30分钟再搬动答案：A17.使用100×油镜时，视野模糊且亮度忽高忽低，最先排查（）A.香柏油内有气泡B.目镜筒长度不标准C.粗准焦螺旋松动D.电压不稳答案：A18.实验室实行“双人确认”制度，下列哪项必须双人签字（）A.每日湿度记录B.汞灯使用累计小时数C.高致病性微生物镜检结束后的消毒确认D.擦镜纸领用数量答案：C19.显微镜镜筒自然下滑，排除镜筒固定螺丝松动后，应检查（）A.粗准焦螺旋阻尼油脂干涸B.载物台水平C.聚光器高度D.目镜倍率答案：A20.关于COVID19病毒假阳性污染，下列措施无效的是（）A.镜检前紫外照射切片30分钟B.使用独立通风橱内显微镜C.镜检后用含氯消毒剂擦拭载物台D.在普通实验台上重复利用切片答案：D二、判断题（每题1分，共15分。正确打“√”，错误打“×”）21.可以用脱脂棉代替擦镜纸清洁物镜前透镜。（）答案：×22.显微镜灯泡寿命与开关次数无关，只与累计点亮时间有关。（）答案：×23.使用高倍镜时，必须将聚光器顶透镜旋出光路以提高亮度。（）答案：×24.香柏油折射率与玻璃接近，故可填充空气间隙提高分辨率。（）答案：√25.荧光汞灯关闭后，再次启动需等待至少15分钟。（）答案：√26.相差环板对中一旦调好，可永久使用，无需再检查。（）答案：×27.实验室湿度控制在45%–55%可有效抑制真菌侵蚀镜片。（）答案：√28.可以用75%乙醇代替二甲苯清除香柏油，但需延长浸泡时间。（）答案：×29.显微镜接地线脱落仍可使用，只要电源插头两极完好。（）答案：×30.镜检完毕，必须将高倍物镜旋离光路以防压碎切片。（）答案：√31.使用CCD时，增益越高，噪点越少。（）答案：×32.镜检炭疽杆菌涂片，应在生物安全三级实验室内进行。（）答案：√33.显微镜搬运后无需重新校准柯勒照明。（）答案：×34.可以用真空泵油代替香柏油进行油镜观察。（）答案：×35.目镜测微尺需与物镜测微尺配套校准后才能测量细胞大小。（）答案：√三、填空题（每空1分，共20分）36.柯勒照明四要素：________、________、________、________。答案：光源聚焦在聚光器孔径光阑平面；聚光器孔径光阑成像在物镜后焦面；视场光阑成像在标本面；灯丝成像在聚光器前焦面37.国家标准规定，实验室通用显微镜接地电阻应小于________Ω。答案：0.538.荧光汞灯首次点亮需连续稳定________分钟以上才能进行定量拍摄。答案：1539.清除香柏油的溶剂顺序为：________→________→________。答案：二甲苯；无水乙醇；擦镜纸干擦40.使用100×油镜时，工作距离约为________mm。答案：0.13–0.1741.相差观察时，绿色滤光片波长为________nm左右。答案：54642.显微镜出厂校准的目镜筒长度为________mm。答案：16043.当视场亮度不均，应调节________光阑而非________光阑。答案：视场；孔径44.镜检高致病性微生物后，载物台需用含有效氯________mg/L的消毒液擦拭。答案：100045.荧光激发块上的“BP450–490”表示________带通滤光片，中心波长为________nm。答案：激发；470四、简答题（每题8分，共40分）46.简述“先低倍后高倍”观察顺序的三条安全理由。答案：（1）低倍镜视野大，可快速定位目标，减少高倍镜空扫时间，降低镜头与切片碰撞风险；（2）低倍镜工作距离长，误操作不易压碎盖玻片与切片；（3）低倍镜下可预先确认切片有无气泡、裂痕或异物，避免高倍镜下因亮度突变导致眼睛瞬间不适或误调粗准焦螺旋造成损坏。47.显微镜灯泡突然爆裂，学生应如何应急处置？答案：①立即关闭电源总闸，防止汞蒸汽电离；②佩戴一次性手套与N95口罩，用硬纸板收集大块玻璃，避免直接手触；③用硫磺粉或硫代硫酸钠覆盖汞珠，静置30分钟；④用注射器吸取汞珠装入含水的密封瓶；⑤开窗通风，开启汞蒸汽吸附器；⑥填写《危险化学品泄漏记录表》，报告实验室安全员与资产处；⑦48小时内由具备资质的公司回收残留汞。48.描述相差环板对中的完整步骤。答案：（1）将相差物镜旋入光路，绿色滤光片就位；（2）放置相差对中目镜或取出目镜直接看物镜后焦面；（3）开启光源，调焦至看清相差环板亮环；（4）用聚光器中心调节螺丝移动聚光器，使亮环与物镜暗环完全重合；（5）调节聚光器高度，使两环宽度一致；（6）反复微调至环像无断裂、无偏移；（7）锁紧聚光器定位螺丝，记录调节参数；（8）更换不同倍数相差物镜时重复上述步骤。49.说明荧光观察时如何防止CCD芯片灼伤。答案：（1）强光下使用中性密度（ND）滤光片，将光强衰减至10%以下；（2）缩短曝光时间，提高增益而非延长积分时间；（3）使用软件ROI模式，仅对目标区域曝光；（4）长时间预览时开启“自动关闭快门”功能；（5）关闭汞灯前先关闭摄像头快门，避免余热聚焦；（6）定期用标准灰度板校准，发现饱和像素立即降低激发光强度；（7）安装红外截止滤光片，防止热辐射累积。50.实验室新购一台倒置荧光显微镜，开箱验收应检查哪些安全相关项目？答案：（1）检查外包装有无“易碎”“向上”标识破损；（2）核对装箱单与序列号，确认汞灯、激发块、CCD为原厂封装；（3）检查电源线三脚插头接地脚无断裂，额定电压220V±10%；（4）确认汞灯灯箱防爆膜完好，无汞泄漏痕迹；（5）检查主机、灯箱、CCD外接地端子，用万用表测接地电阻＜0.5Ω；（6）通电前用兆欧表测绝缘电阻＞2MΩ；（7）空载点亮汞灯，确认排风扇无异常噪音，风速＞0.5m/s；（8）检查随机提供的防汞泄漏应急包是否齐全；（9）记录验收照片与视频，存档三年。五、综合案例分析（共25分）51.案例：某高校细胞培养室，研究生A在倒置荧光显微镜下观察GFP转染的HEK293细胞，使用汞灯激发，40×物镜，ND25%滤光片，曝光时间500ms。观察结束后，A未关闭汞灯即离开，2小时后返回发现显微镜载物台温度高达45℃，CCD热噪点严重，培养皿内细胞出现明显凋亡。请回答：（1）指出A的三项违规操作；（6分）（2）说明高温对荧光通道与细胞的可能损害机制；（6分）（3）给出实验室应采取的纠正与预防措施。（13分）答案：（1）①未在离开前关闭汞灯；②未使用自动快门或定时关闭功能；③未设置温度报警与断电保护。（2）高温使汞灯石英管内壁汞齐再蒸发，导致激发光强度漂移；CCD芯片暗电流呈指数上升，热噪点永久增加；培养皿局部高温激活细胞热休克反应，GFP折叠受损，荧光量子产率下降