2025年病理技术面试题及答案

2025年病理技术面试题及答案专业知识类1.请简述组织脱水的原理及常用脱水剂。答案：组织脱水的原理是利用脱水剂能够与水相溶，并且可以置换出组织内的水分，使组织达到一定的脱水程度，便于后续透明剂的浸入和石蜡的渗透。脱水过程是一个逐步进行的过程，因为如果直接将组织放入高浓度的脱水剂中，会导致组织表面迅速脱水而形成一层硬壳，阻碍内部水分的进一步脱出，同时还可能引起组织收缩、变形。常用的脱水剂有以下几种：乙醇：这是最常用的脱水剂，它具有与水和多种有机溶剂相溶的特性。乙醇脱水能力强，能使组织硬化，对组织的收缩作用相对较小。一般从低浓度到高浓度梯度脱水，如从70%、80%、90%到无水乙醇，不同浓度乙醇的作用时间根据组织大小和性质而定。丙酮：脱水速度比乙醇快，但对组织的收缩作用较大，会使组织变脆，一般较少单独使用，常与乙醇混合使用，或者用于一些紧急标本的快速脱水。正丁醇：脱水效果好，对组织的收缩和硬化作用较小，能与水、乙醇和石蜡相溶，可作为脱水剂和透明剂之间的过渡剂，但脱水时间较长。叔丁醇：可与水、乙醇、石蜡相溶，脱水效果好，对组织的损伤小，脱水后组织柔软，切片效果佳，但价格相对较高。2.简述免疫组织化学技术的基本原理和主要步骤。答案：免疫组织化学技术的基本原理是基于抗原与抗体特异性结合的特性，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。主要步骤如下：标本制备：常用的标本有组织切片（包括石蜡切片和冰冻切片）和细胞涂片等。石蜡切片能较好地保存组织形态结构，但抗原可能会有一定程度的破坏，需要进行抗原修复；冰冻切片能较好地保留抗原活性，但组织形态保存不如石蜡切片。抗原修复：由于在标本固定过程中，抗原可能会被封闭或变性，影响抗体与抗原的结合，因此需要进行抗原修复。常用的方法有加热法（如微波修复、高压修复等）和酶消化法。加热法是通过高温使抗原决定簇暴露，酶消化法是利用酶的消化作用去除与抗原结合的蛋白质，使抗原表位暴露。封闭非特异性结合位点：为了减少非特异性染色，需要用封闭剂封闭组织切片上的非特异性结合位点。常用的封闭剂有正常血清、牛血清白蛋白等，封闭时间一般为1530分钟。加一抗：将特异性的一抗滴加在组织切片上，在一定温度和时间条件下孵育，使一抗与组织内的抗原特异性结合。孵育条件根据不同的抗体和标本而定，一般在37℃孵育12小时或4℃过夜。加二抗：一抗孵育后，用缓冲液冲洗去除未结合的一抗，然后加入与一抗种属特异性结合的二抗。二抗通常标记有显色剂（如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等），通过二抗与一抗的结合，将显色剂引入到抗原抗体复合物上。显色：根据二抗标记的显色剂选择合适的显色底物进行显色反应。如辣根过氧化物酶常用的显色底物是二氨基联苯胺（DAB），显色后呈现棕色；碱性磷酸酶常用的显色底物是快红或坚牢蓝等。显色时间需要根据具体情况进行控制，避免显色过深或过浅。复染：显色完成后，用苏木精等染料对细胞核进行复染，以显示细胞的形态结构，便于观察和定位。脱水、透明和封片：复染后，将切片依次经过梯度乙醇脱水，再用透明剂透明，最后用封片剂封片，在显微镜下观察结果。3.请说明苏木精伊红（HE）染色的原理和操作要点。答案：苏木精伊红（HE）染色的原理：苏木精是一种碱性染料，它可以与细胞核内的酸性物质（如核酸）结合，使其染成蓝色；伊红是一种酸性染料，它可以与细胞质和细胞外基质中的碱性物质（如蛋白质）结合，使其染成粉红色。通过HE染色，可以清晰地显示细胞和组织的形态结构。操作要点如下：标本脱蜡：对于石蜡切片，首先要将切片放入二甲苯中脱蜡，一般需要更换23次二甲苯，每次510分钟，以确保石蜡完全去除。水化：脱蜡后的切片需要经过梯度乙醇水化，从高浓度到低浓度，如100%、95%、80%、70%乙醇，每个浓度浸泡23分钟，最后用蒸馏水冲洗。苏木精染色：将切片放入苏木精染液中染色，染色时间根据苏木精的浓度和组织类型而定，一般为515分钟。染色后用蒸馏水冲洗，然后用1%盐酸乙醇分化，分化时间要适当，以去除细胞核内过多的苏木精，使细胞核染色清晰，分化后立即用自来水冲洗返蓝。伊红染色：将分化返蓝后的切片放入伊红染液中染色，染色时间一般为15分钟，染色后用蒸馏水冲洗。脱水、透明和封片：染色后的切片依次经过梯度乙醇脱水，从低浓度到高浓度，如70%、80%、95%、100%乙醇，每个浓度浸泡23分钟。然后用二甲苯透明，最后用中性树胶或其他封片剂封片。仪器设备操作类1.简述石蜡切片机的操作方法和注意事项。答案：操作方法：准备工作：检查切片机是否正常运转，安装好切片刀，调整刀架的角度，一般为5°15°。将组织块固定在标本夹上，调整标本的位置，使其与刀刃平行。粗修切片：启动切片机，进行粗修切片，去除组织块表面多余的石蜡，使组织暴露出来。粗修时切片厚度可设置为1020μm。调整切片厚度：根据组织类型和观察要求，调整切片厚度，一般病理切片厚度为46μm。正式切片：缓慢转动切片机的手轮，使组织块匀速前进，进行切片。切片过程中要保持切片的连续性和完整性，避免切片破碎或折叠。贴片：将切好的切片放入温水中，使其展平，然后用载玻片捞取切片，将切片贴在载玻片上，放在烤片机上烤干，使切片牢固地附着在载玻片上。注意事项：安全操作：切片刀非常锋利，操作时要避免手指接触刀刃，防止割伤。在安装和拆卸切片刀时，要小心操作。切片质量：切片过程中要注意切片的厚度均匀性和连续性，避免出现切片厚度不一致、切片破碎、折叠等问题。如果切片出现问题，要及时调整切片机的参数或检查切片刀是否锋利。维护保养：切片机使用完毕后，要及时清理切片机上的石蜡和组织碎片，保持切片机的清洁。定期对切片机进行润滑和调试，以保证其正常运转。环境要求：切片操作应在清洁、干燥、通风良好的环境中进行，避免灰尘和杂物进入切片机，影响切片质量。2.如何正确使用和维护冰冻切片机？答案：正确使用方法：开机准备：接通电源，打开冰冻切片机的开关，预冷切片机至所需温度，一般为20℃-30℃。根据标本的大小和形状，选择合适的标本头，将标本固定在标本头上。调整切片厚度：根据组织类型和观察要求，调整切片厚度，一般为510μm。切片操作：将固定好标本的标本头安装在切片机的标本台上，调整标本的位置，使其与刀刃平行。启动切片机，缓慢转动手轮进行切片。切片过程中要保持切片的连续性和完整性，避免切片破碎或折叠。贴片：将切好的切片用毛笔轻轻转移到载玻片上，或使用专用的贴片装置将切片贴在载玻片上。维护要点：清洁：每次使用完毕后，要及时清理切片机的刀片、标本台和冷冻室，去除残留的组织和冰晶。可以用专用的清洁剂或75%乙醇擦拭，但要避免液体进入电器元件。刀片保养：切片刀要保持锋利，使用后要及时清洁和干燥，避免生锈。如果刀片变钝，要及时更换。定期检查：定期检查切片机的制冷系统、传动系统等部件，确保其正常运转。检查切片机的温度传感器是否准确，如有问题要及时校准或更换。存放环境：冰冻切片机应存放在干燥、通风良好的环境中，避免阳光直射和潮湿。长时间不使用时，要将切片机内的水分擦干，并用防尘罩覆盖。质量控制与安全管理类1.简述病理技术质量控制的重要性和主要内容。答案：病理技术质量控制的重要性：病理诊断是临床诊断的“金标准”，准确的病理诊断对于疾病的治疗和预后判断至关重要。而病理技术质量直接影响病理切片的质量和病理诊断的准确性。通过有效的质量控制，可以保证病理标本的处理、染色、制片等各个环节的质量稳定，减少误差和人为因素的影响，提高病理诊断的可靠性和重复性。主要内容包括：标本采集和处理的质量控制：标本采集要规范，避免标本的挤压、损伤和污染。标本固定要及时、充分，固定液的种类、浓度和固定时间要合适，以保证组织的形态结构和抗原活性。切片质量控制：切片的厚度要均匀，一般为46μm，切片要完整、无刀痕、无折叠。切片的平整度和光洁度要好，便于显微镜观察。染色质量控制：HE染色要达到细胞核和细胞质染色清晰，对比明显的效果。免疫组织化学染色要控制好一抗和二抗的浓度、孵育时间和温度，避免非特异性染色，确保染色结果的准确性和可靠性。试剂和耗材的质量控制：要选择质量可靠的试剂和耗材，对试剂的质量进行定期检查和验证。试剂的保存和使用要符合要求，避免试剂的变质和污染。仪器设备的质量控制：定期对切片机、脱水机、包埋机、显微镜等仪器设备进行维护和校准，确保其性能稳定。建立仪器设备的使用记录和档案，及时发现和解决仪器设备出现的问题。2.在病理技术工作中，如何保障生物安全？答案：在病理技术工作中，保障生物安全需要从以下几个方面入手：个人防护：工作人员要穿戴合适的个人防护装备，如工作服、手套、口罩、护目镜等。在处理标本和使用化学试剂时，要严格遵守操作规程，避免直接接触标本和试剂。操作结束后，要及时洗手，更换工作服。标本管理：标本的采集、运输和储存要符合生物安全要求。标本要密封包装，避免泄漏和污染。对于传染性标本，要按照相关规定进行特殊处理。实验室环境管理：实验室要保持清洁、干燥、通风良好，定期进行消毒和清洁。实验室的地面、桌面、仪器设备等要定期用消毒剂擦拭。实验室的废弃物要分类收集、处理，对于生物性废弃物要进