2025年大学生物技术（细胞培养应用）试题及答案

2025年大学生物技术（细胞培养应用）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题共40分）答题要求：每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共20题，每题2分)1.细胞培养中，最常用的基础培养基是（）A.DMEMB.RPMI-1640C.MEMD.F122.细胞培养时，血清的主要作用不包括（）A.提供营养物质B.促进细胞贴壁C.调节细胞代谢D.抑制细胞生长3.细胞培养的环境条件不包括（）A.温度B.湿度C.光照D.pH值4.细胞冻存时，常用的保护剂是（）A.DMSOB.甘油C.乙醇D.丙二醇5.细胞复苏时，正确的操作顺序是（）A.37℃水浴快速解冻→离心弃上清→加培养液重悬接种B.37℃水浴缓慢解冻→离心弃上清→加培养液重悬接种C.4℃水浴快速解冻→离心弃上清→加培养液重悬接种D.4℃水浴缓慢解冻→离心弃上清→加培养液重悬接种6.细胞传代培养时，一般选择细胞处于（）时进行A.对数生长期B.平台期C.衰退期D.静止期7.细胞计数时，常用的染色剂是（）A.台盼蓝B.结晶紫C.苏木精D.伊红8.细胞培养过程中，防止微生物污染的措施不包括（）A.严格无菌操作B.定期更换培养液C.使用抗生素D.增加血清浓度9.用于细胞培养的器皿，常用的消毒方法是（）A.紫外线照射B.高压蒸汽灭菌C.化学消毒剂浸泡D.干热灭菌10.细胞培养中，细胞的生长特性不包括（）A.贴壁生长B.悬浮生长C.半贴壁生长D.无规则生长11.细胞培养时，二氧化碳培养箱的作用是（）A.调节温度B.调节湿度C.调节pH值D.提供光照12.细胞培养中，常用的消化液是（）A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.胶原酶D.链霉蛋白酶13.细胞培养时，血清的质量标准不包括（）A.无支原体污染B.无病毒污染C.无内毒素污染D.无色素污染14.细胞培养过程中，细胞出现老化的表现不包括（）A.细胞形态变大B.细胞增殖速度减慢C.细胞内颗粒增多D.细胞贴壁能力增强15.细胞培养时，常用的缓冲液是（）A.PBSB.Tris-HClC.HEPESD.以上都是16.细胞培养中，细胞的代谢产物不包括（）A.乳酸B.丙酮酸C.二氧化碳D.氧气17.细胞培养时，常用的抗生素不包括（）A.青霉素B.链霉素C.卡那霉素D.庆大霉素18.细胞培养过程中，细胞出现凋亡的特征不包括（）A.细胞核固缩B.细胞膜破裂C.染色质凝集D.凋亡小体形成19.细胞培养时，常用的血清来源不包括（）A.小牛血清B.胎牛血清C.马血清D.人血清20.细胞培养中，细胞的传代比例一般为（）A.1:2B.1:3C.1:4D.1:5第II卷（非选择题共60分）21.（10分）简述细胞培养的基本流程。22.（10分）细胞培养过程中，如何进行细胞的冻存与复苏？23.（10分）分析细胞培养过程中微生物污染的来源及预防措施。第四大题（材料分析题共15分）答题要求：阅读材料，回答问题。(总共3题，每题5分)材料：在细胞培养实验中，研究人员将某细胞株接种到含有不同浓度生长因子的培养液中进行培养。一段时间后，观察细胞的生长情况，发现随着生长因子浓度的增加，细胞的增殖速度加快，但当生长因子浓度超过一定值后，细胞增殖速度反而下降。24.请分析细胞增殖速度先升后降的原因。25.该实验结果对细胞培养有何启示？26.若要进一步研究该生长因子对细胞的作用机制，可采取哪些实验方法？第五大题（综合应用题共15分）答题要求：根据题目要求，结合所学知识进行综合分析与解答。(总共3题，每题5分)材料：某生物技术公司计划利用细胞培养技术生产一种生物活性蛋白。该蛋白在人体疾病治疗方面具有潜在的应用价值。27.请设计一个细胞培养生产该生物活性蛋白的方案。28.在细胞培养生产过程中，如何保证产品的质量和产量？29.若该生物活性蛋白生产成功，如何进行产品的纯化和鉴定？答案：1.A2.D3.C4.A5.A6.A7.A8.D9.B10.D11.C12.A13.D14.D15.D16.D17.C18.B19.D20.A21.细胞培养基本流程：准备细胞培养所需的器皿、培养液（含血清、缓冲液等）、消化液等。选取合适的细胞株，复苏细胞。将复苏后的细胞接种到合适的培养液中，置于适宜的环境条件（温度、湿度、pH值、二氧化碳浓度等）下培养。定期观察细胞生长情况，进行传代培养，当细胞长满或达到一定密度时，进行传代，传代时需用消化液消化细胞，然后接种到新的培养器皿中继续培养。22.细胞冻存：选择对数生长期的细胞，用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液，离心弃上清。加入含保护剂（如DMSO）的冻存液，重悬细胞，分装到冻存管中。先置于4℃冰箱1-2小时，再放入-20℃冰箱2小时，最后转移至-80℃冰箱过夜或长期保存于液氮中。细胞复苏：从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中快速解冻，取出后用75%酒精消毒冻存管外壁。将细胞悬液转移至离心管中，加入适量培养液，离心弃上清，再用培养液重悬细胞，接种到培养器皿中，置于适宜环境培养。23.微生物污染来源：空气（如细菌、真菌孢子等）、实验操作人员（如手上细菌、未严格消毒等）、培养液及血清（本身污染）、培养器皿（消毒不彻底）等。预防措施：严格无菌操作，实验前操作人员洗手消毒，穿戴无菌工作服、口罩等；培养器皿严格消毒灭菌；培养液和血清进行质量检测，选择优质无污染产品；在超净工作台或无菌环境中进行操作；定期对培养环境进行消毒监测等。24.生长因子浓度较低时，其与细胞表面受体结合，激活细胞内相关信号通路，促进细胞增殖，所以细胞增殖速度加快。当生长因子浓度超过一定值后，可能导致受体过度激活，引发细胞内信号通路紊乱，或者生长因子与其他物质结合形成不利于细胞增殖的复合物，从而使细胞增殖速度下降。25.启示：在细胞培养中，生长因子的添加浓度并非越高越好，要找到合适的浓度范围以促进细胞最佳生长。在进行细胞培养实验时，需对生长因子等添加物的浓度进行优化，避免因浓度不当对细胞生长产生不利影响。26.可采取蛋白质免疫印迹法检测细胞内相关信号蛋白的表达变化；进行基因芯片分析，了解生长因子作用下细胞基因表达谱的改变；运用RNA干扰技术沉默相关基因，观察对细胞增殖的影响等实验方法来研究生长因子对细胞的作用机制。27.方案：选择合适的细胞株，如CHO细胞等，复苏细胞后接种到含适量血清、生长因子等添加剂的培养液中，置于二氧化碳培养箱中，在37℃、适宜pH值条件下培养。定期传代，当细胞达到一定密度时，增加培养液体积，同时适当提高生长因子浓度，以促进细胞生长。通过优化培养条件，如调整搅拌速度、溶氧水平等，提高细胞密度。待细胞生长至高密度时，诱导细胞表达目的生物活性蛋白，可通过基因工程手段导入相关表达载体。最后收集培养液，进行后续处理。28.保证质量和产量：严格控制培养环境条件，包括温度、pH值、二氧化碳浓度等，确保细胞生长在适宜环境。定期检测培养液成分，及时补充营养物质和调整添加剂浓度。对细胞进行定期检测，如细胞活力、形态等，确保细胞健康生长。优化培养工艺，如采用合适的培养方式（分批培养、连续培养等），提高细胞密度和蛋白表达量。建立质量控制体系，对产品进行严格的质量检测，包括蛋白含量、纯度、活性等指标检测。29.产品纯化：采用超滤、离子交换色