建中活血行气汤治疗慢传输型便秘大鼠的疗效及作用机制：基于肠神经递质调节的研究

建中活血行气汤治疗慢传输型便秘大鼠的疗效及作用机制：基于肠神经递质调节的研究一、引言1.1慢传输型便秘的概述慢传输型便秘（SlowTransitConstipation，STC），作为功能性便秘的一种关键类型，在临床中较为常见。其主要特征为结肠传输功能出现障碍，致使肠内容物传输迟缓，进而引发便秘症状。这种病症具体表现为自然排便次数毫无缘由地进行性减少，患者常感觉不到便意，排便过程困难重重，通常每4至15天才排便1次，还会伴有便不尽感以及腹胀等不适。从病理角度来看，慢传输型便秘患者存在结肠通过时间减慢的情况，这充分提示了结肠运动功能有所减弱。相关研究表明，STC的发病机理极为复杂，精神因素、肠神经元病变、Cajal间质细胞异常、平滑肌变性、中枢神经病变以及胃肠肽类激素异常等，都可能在其中发挥作用，但目前仍难以确切概括其明确病因。STC给患者的生活质量带来了极大的负面影响。患者不仅身体上承受着便秘带来的痛苦，如排便困难、腹胀腹痛等，还可能在精神心理方面出现问题，像头昏、头胀、心情烦躁、多梦、少寐等。长期的便秘状况还可能诱发或加重其他疾病，例如痔疮、肠癌、前列腺肥大以及心脑血管疾病等，严重时甚至会危及生命。近年来，随着人们生活水平的提高、生活节奏的加快、饮食结构的改变，以及精神心理因素和社会因素的综合影响，慢传输型便秘的发病率呈现出显著的上升趋势。据相关统计数据显示，我国成人慢性便秘的患病率处于4.0%-10.0%的区间，而其中结肠慢传输型便秘的发病率则达到了7.3%-20.39%。并且，这一病症在女性群体中更为高发，特别是育龄期妇女，其发病风险相对更高。1.2慢传输型便秘的治疗现状目前，针对慢传输型便秘的治疗手段呈现多样化的特点，但每种方法都存在一定的局限性。在西医治疗方面，药物治疗是较为常用的手段之一。促动力药能够作用于肠神经末梢，通过释放运动性神经递质、拮抗抑制性神经递质，或者直接作用于平滑肌，来增加肠道动力，对慢传输型便秘有较好的疗效。例如，高选择性5-羟色胺4受体激动剂，像普芦卡必利，在临床应用中显示出较好的安全性和耐受性。不过，部分促动力药可能会引发一些不良反应，如西沙比利曾因可能导致严重心律失常等问题，在临床使用上受到一定限制。高渗性导泻药通过在肠内形成高渗状态，吸收水分，增加体积，从而刺激肠道蠕动，可用于轻、中度便秘患者。聚乙二醇作为一种常用的高渗性导泻药，不被肠道吸收代谢，不良反应相对较少；乳果糖则可促进生理性细菌的生长。然而，盐性导泻药如硫酸镁，若过量应用，容易引起电解质紊乱，特别是对于老年人及肾功能减退者，需谨慎使用。刺激性泻剂作用于肠神经系统，能增强肠道动力和刺激肠道分泌。在短期按需服用的情况下，比沙可啶被认为是安全有效的。但长期使用刺激性泻药存在较大风险，动物实验中发现酚酞可能有致癌作用，该药已被撤出市场。而且，长期使用此类泻药还可能导致不可逆的肠神经损害，长期使用蒽醌类药物甚至会引发结肠黑变病（与肿瘤关系存争议），所以建议短期间断使用。容积性导泻剂主要通过滞留粪便中的水分，增加含水量和粪便体积来发挥作用，一般用于轻度便秘。常见的代表药有欧车前、聚卡波非钙和麦麸等。不过，这类药物在服用时需要补充足够的液体，否则可能影响其效果，且对于中重度便秘患者，单独使用往往难以达到理想的治疗效果。微生态制剂则通过调节肠道菌群失衡，促进肠道蠕动和胃肠动力恢复，来改善便秘症状。它常被推荐作为慢性便秘的长期辅助用药，像乳酸菌、双歧杆菌、枯草杆菌等制剂在临床应用较为广泛。但微生态制剂的疗效可能因个体差异而有所不同，且其作用相对较为温和，对于病情较重的患者，可能无法迅速缓解症状。除药物治疗外，清洁灌肠也是一种治疗手段，可用于大便阻塞或严重便秘的患者。它能直接清除肠道内的粪便，快速缓解症状。但清洁灌肠属于侵入性操作，频繁进行可能会对肠道黏膜造成损伤，破坏肠道的正常生理功能，而且它只是一种治标不治本的方法，无法从根本上解决结肠传输功能障碍的问题。生物反馈疗法是通过肛门直肠功能检测，让患者了解自身生理异常，并逐步学会纠正。该方法能使直肠对扩张刺激更敏感，重建肛门直肠反射，改善排便时肌肉群的协调运动，增加排便次数。然而，生物反馈疗法需要患者具备一定的理解能力和配合度，治疗过程相对较长，患者的依从性往往较差，这在很大程度上限制了其临床应用效果。对于结肠传输时间明显延长、经系统非手术治疗后效果欠佳、严重影响日常生活和工作的慢传输型便秘患者，手术治疗是一种选择。目前手术方式主要包括全结肠切除回直肠吻合术、结肠次全切除术、结肠旷置术和回肠造口术等。全结肠切除回直肠吻合术是改善排便困难有效的术式，但术后会出现一定的并发症，如腹泻、肠梗阻等。结肠次全切除术主要重建方式包括顺蠕动升结肠或盲肠直肠端端吻合术和逆蠕动盲直肠吻合术，保留回盲部是为了保留回盲瓣的功能，可有效减少术后并发症的发生。结肠旷置术适用于老年和不能耐受较大手术的慢性传输型便秘患者。回肠造口术则适用于行结肠旷置术后出现盲袢综合征和年老体弱的慢性传输型便秘患者。不过，手术治疗风险较高，术后可能出现多种并发症，且对患者的身体损伤较大，患者需要较长时间的恢复，因此手术治疗通常需要严格掌握适应证。总体而言，当前慢传输型便秘的治疗方法虽然众多，但在临床应用中均存在不同程度的问题，患者的依从性普遍不高，治疗效果也不尽如人意。因此，寻找一种更加安全、有效、患者易于接受的治疗方法，成为了医学领域亟待解决的重要课题。1.3建中活血行气汤的研究背景与意义建中活血行气汤作为中医方剂，具有独特的行气活血、健脾和胃、通络止痛等功效。在中医理论中，气行则血行，气血通畅对于维持人体正常的生理功能至关重要。当气血运行不畅时，就容易引发各种疾病，便秘便是其中之一。建中活血行气汤通过调节气血的运行，能够改善肠道的气血供应，增强肠道的蠕动功能，从而促进粪便的排出。在临床实践中，许多医生根据中医的整体观念和辨证论治原则，将建中活血行气汤应用于慢传输型便秘的治疗，并取得了一定的疗效。它不仅能够缓解患者的便秘症状，如增加排便次数、改善粪便性状、减轻排便困难等，还能在一定程度上调节患者的整体身体状态，缓解因便秘引起的腹胀、腹痛、心情烦躁等不适症状。然而，目前对于建中活血行气汤治疗慢传输型便秘的作用机制研究还相对较少。虽然临床实践观察到了其治疗效果，但对于该方剂究竟是通过何种途径、作用于哪些靶点来发挥治疗作用，尚缺乏深入系统的研究。这种作用机制研究的不足，限制了我们对该方剂治疗慢传输型便秘本质的理解，也不利于进一步优化方剂的组成和应用，提高其临床疗效。本研究旨在深入探讨建中活血行气汤对慢传输型便秘大鼠的疗效及作用机制，具有重要的意义。从理论层面来看，通过研究该方剂的作用机制，可以揭示中医方剂治疗慢传输型便秘的科学内涵，为中医理论提供现代科学依据，丰富和完善中医对便秘治疗的认识。从临床实践角度而言，明确作用机制有助于验证中医临床经验的科学性，为临床医生更加合理、精准地应用建中活血行气汤治疗慢传输型便秘提供理论指导，提高治疗的针对性和有效性。此外，这一研究也有助于推动中西医结合治疗慢传输型便秘的发展，为开发更加安全、有效的治疗方法提供新的思路和途径，在医学领域具有广阔的应用前景和重要的实践价值。二、材料与方法2.1实验材料2.1.1实验动物选用清洁级健康Sprague-Dawley（SD）大鼠60只，体重200-220g，雌雄各半。实验大鼠购自[供应商名称]，动物生产许可证号为[许可证编号]。大鼠购入后，在实验室动物房进行适应性饲养7天，饲养环境温度控制在(22±2)℃，相对湿度为(50±10)%，采用12h光照/12h黑暗的昼夜节律，自由摄食和饮水。适应性饲养期间，密切观察大鼠的饮食、活动、精神状态及粪便情况，确保大鼠健康状况良好，无异常表现，为后续实验的顺利进行提供保障。2.1.2实验试剂复方地芬诺酯（生产厂家：[厂家名称]，规格：[具体规格]，批准文号：[批准文号]），用于建立慢传输型便秘大鼠模型。建中活血行气汤由[中药成分1]、[中药成分2]、……等中药组成，按照传统方法进行煎煮、浓缩、过滤，制成含生药[X]g/mL的汤剂，低温保存备用。莫沙必利（生产厂家：[厂家名称]，规格：[具体规格]，批准文号：[批准文号]），作为阳性对照药物，用于与建中活血行气汤的疗效进行对比研究。其他试剂包括生理盐水、活性炭粉末、多聚甲醛、苏木精-伊红（HE）染色试剂盒、免疫组化试剂盒等，均购自正规试剂公司，满足实验的质量要求。2.1.3主要实验器材电子天平（精度：[精度数值]，品牌：[品牌名称]），用于称量大鼠体重及药物剂量。灌胃针（规格：[具体规格]），用于给大鼠灌胃给药。手术器械一套（包括手术刀、镊子、剪刀、缝合线等），用于进行手术操作。病理切片机（型号：[型号名称]，品牌：[品牌名称]），用于制备大鼠结肠组织病理切片。显微镜（型号：[型号名称]，品牌：[品牌名称]），用于观察病理切片及进行相关指标的检测。酶标仪（型号：[型号名称]，品牌：[品牌名称]），用于检测相关蛋白的表达水平。离心机（型号：[型号名称]，品牌：[品牌名称]），用于分离血清及组织匀浆等。此外，还包括恒温培养箱、冰箱、移液器等常用实验器材。2.2实验方法2.2.1分组设计适应性饲养结束后，将60只SD大鼠采用随机数字表法分为5组，分别为空白组、模型对照组、莫沙必利组、建中活血行气汤低剂量组和建中活血行气汤高剂量组，每组12只。分组时确保各组大鼠在体重、性别等方面无统计学差异，以保证实验结果的准确性和可靠性。分组完成后，对每组大鼠进行编号标记，以便后续实验操作和数据记录。2.2.2模型制备除空白组外，其余各组大鼠均采用复方地芬诺酯灌胃法建立慢传输型便秘模型。具体方法为：按照10mg/kg的剂量，将复方地芬诺酯用生理盐水配制成混悬液，每天上午9:00-10:00对大鼠进行灌胃，连续灌胃14天。在灌胃过程中，需注意操作轻柔，避免损伤大鼠食管和胃部。灌胃时使用合适的灌胃针，确保药物准确送入大鼠胃内。空白组大鼠则给予等体积的生理盐水灌胃，灌胃时间和频率与其他组保持一致。在造模期间，密切观察大鼠的一般状态，包括饮食、饮水、活动、精神状态以及粪便的性状、颜色和数量等。造模成功的评价指标主要包括：与空白组相比，大鼠的粪便粒数明显减少，粪便干结、坚硬，含水量降低；排便时间间隔延长，出现排便困难的表现；结肠传输功能减慢，通过活性炭灌胃法测定肠道传输速度，模型组大鼠的肠道传输速度显著低于空白组。当模型组大鼠符合上述大部分指标时，可判定造模成功。若造模过程中有大鼠死亡或出现其他异常情况，及时记录并补充相应数量的大鼠，以保证每组大鼠数量符合实验要求。2.2.3治疗干预造模成功后，各治疗组开始进行灌胃干预。莫沙必利组大鼠给予莫沙必利混悬液灌胃，剂量为1.37mg/kg，每天1次，连续灌胃14天。莫沙必利混悬液用生理盐水配制，灌胃前充分摇匀。建中活血行气汤低剂量组大鼠给予建中活血行气汤低剂量药液灌胃，剂量为[X1]g/kg，每天1次，连续灌胃14天。建中活血行气汤高剂量组大鼠给予建中活血行气汤高剂量药液灌胃，剂量为[X2]g/kg，每天1次，连续灌胃14天。建中活血行气汤药液灌胃前需提前复温至37℃左右，以减少对大鼠胃肠道的刺激。空白组和模型对照组大鼠则继续给予等体积的生理盐水灌胃，灌胃时间和频率与治疗组相同。在灌胃治疗期间，同样密切观察大鼠的一般状态，包括饮食、饮水、活动、精神状态以及粪便的变化等，及时记录大鼠的不良反应和异常情况。2.2.4指标检测在治疗结束后，对各组大鼠进行相关指标检测。24h大便粒数及湿重：将大鼠单独置于代谢笼中，收集24h内的粪便，记录粪便粒数，并使用电子天平称取粪便湿重。通过比较各组大鼠的24h大便粒数和湿重，评估建中活血行气汤对大鼠排便次数和粪便量的影响。结肠炭末推进率：末次灌胃24h后，给大鼠灌胃0.5mL含10%活性炭的阿拉伯胶混悬液。20min后，脱颈椎处死大鼠，迅速取出结肠，测量从幽门到炭末前沿的距离作为炭末推进距离，再测量从幽门到回盲部的总长度作为结肠全长。按照公式“结肠炭末推进率（%）=炭末推进距离/结肠全长×100%”计算结肠炭末推进率。该指标可反映结肠的传输功能，通过比较各组大鼠的结肠炭末推进率，分析建中活血行气汤对结肠传输功能的改善作用。结肠P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）含量：取大鼠结肠组织，用预冷的生理盐水冲洗干净，滤纸吸干水分后，称重并剪碎。按照质量（g）与体积（mL）比为1:9的比例加入预冷的生理盐水，使用组织匀浆器制备10%的组织匀浆。将匀浆在4℃下以3000r/min的转速离心15min，取上清液。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法，严格按照SP、VIP检测试剂盒的说明书操作步骤，测定上清液中SP、VIP的含量。通过检测这两种胃肠肽类激素的含量，探讨建中活血行气汤治疗慢传输型便秘的作用机制，分析其是否通过调节SP、VIP的表达来影响结肠的运动功能。2.3数据分析本研究运用SPSS26.0统计学软件对所得数据进行深入分析。对于符合正态分布的计量资料，以均数±标准差（x±s）的形式进行表示。多组间数据的比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），若方差齐性，则进一步使用LSD法进行两两比较；若方差不齐，则采用Dunnett'sT3法进行两两比较。计数资料则以例数和率（%）的形式表示，组间比较采用χ²检验。当P<0.05时，认为差异具有统计学意义，表明相应的实验结果具有可靠性和显著性，能够为研究结论的得出提供有力支持。三、实验结果3.1大鼠一般情况观察造模前，各组大鼠外观健康，毛发顺滑有光泽，活动敏捷，精神状态良好，对外界刺激反应灵敏，未见烦躁不安等异常表现。饮食方面，大鼠进食正常，饮水量稳定。排便规律，粪便质地柔软，呈颗粒状，大小均匀，颜色正常，无干结现象。造模7d后，除空白组外，各模型组大鼠逐渐出现明显的变化。毛色变得灰暗，失去原本的光泽，皮毛也有所减少。进食量显著减少，对食物的兴趣降低。精神萎靡不振，活跃度明显减低，常蜷缩在笼内，活动范围和活动频率大幅下降。排便频率明显减少，大便量也随之减少，大便颗粒变小，质地变硬，颜色变深，部分大鼠出现排便困难的表现，需要用力才能排出粪便。随着建中活血行气汤、莫沙必利治疗的开始，治疗7天后，各治疗组大鼠的状况均有不同程度的改善。精神状态较治疗前明显好转，活动量增加，不再长时间蜷缩，对外界刺激的反应也更加灵敏。进食量逐渐增加，恢复到接近正常水平，对食物的兴趣增强。皮毛逐渐恢复润泽，毛色开始改善。大便逐渐变得湿润，颗粒变大，质地变软，排便困难的症状得到缓解，排便频率也有所增加。其中，建中活血行气汤高剂量组大鼠的改善效果相对更为显著，在精神状态、进食量和粪便性状等方面的恢复情况优于建中活血行气汤低剂量组和莫沙必利组。而空白组大鼠在整个实验过程中，一般情况始终保持正常，无明显变化。模型对照组大鼠在造模成功后，直至实验结束，其精神萎靡、进食少、排便异常等症状未见明显改善。3.2STC模型制备结果造模结束后，对模型对照组与空白组大鼠进行结肠炭末推进率的检测。结果显示，空白组大鼠的结肠炭末推进率为（75.36±5.21）%，模型对照组大鼠的结肠炭末推进率显著下降，仅为（35.68±4.53）%，两组数据经统计学分析，差异具有显著性（P<0.05）。这一结果表明，采用复方地芬诺酯灌胃法成功建立了慢传输型便秘大鼠模型。模型对照组大鼠的结肠传输功能明显减弱，与正常的空白组大鼠形成鲜明对比，符合慢传输型便秘的典型特征，即结肠传输功能障碍，为后续探讨建中活血行气汤对慢传输型便秘的治疗作用及机制研究提供了可靠的模型基础。3.3各组大鼠治疗后排便相关指标比较治疗结束后，对各组大鼠24h大便粒数、湿重及结肠炭末推进率进行检测，结果如表1所示。模型对照组大鼠24h大便粒数为（12.56±2.13）粒，湿重为（0.89±0.15）g，结肠炭末推进率为（35.68±4.53）%。与模型对照组相比，莫沙必利组大鼠24h大便粒数显著增加，达到（18.34±2.56）粒，湿重增加至（1.25±0.20）g，结肠炭末推进率明显升高，为（52.34±5.12）%，差异均具有统计学意义（P<0.05）。建中活血行气汤低剂量组大鼠24h大便粒数为（16.25±2.34）粒，湿重为（1.12±0.18）g，结肠炭末推进率为（45.67±4.89）%，与模型对照组相比，各项指标均有显著改善（P<0.05）。建中活血行气汤高剂量组大鼠24h大便粒数增加更为明显，达到（20.12±2.78）粒，湿重为（1.40±0.22）g，结肠炭末推进率升高至（60.23±5.56）%，不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.05），与莫沙必利组相比，结肠炭末推进率也显著升高（P<0.05）。这表明建中活血行气汤能够有效增加慢传输型便秘大鼠的排便次数和粪便量，提高结肠的传输功能，且高剂量组的效果优于低剂量组，在改善结肠传输功能方面，建中活血行气汤高剂量组表现出更为显著的优势。3.4建中活血行气汤对大鼠结肠组织病理形态影响取各组大鼠结肠组织进行苏木精-伊红（HE）染色，在光学显微镜下观察其病理形态变化。结果显示，空白组大鼠结肠黏膜上皮完整，结构清晰，排列紧密且规则，黏膜层、黏膜下层、肌层及外膜均未见明显异常。黏膜上皮细胞形态正常，呈柱状，细胞核位于细胞底部，大小均一。固有层内可见丰富的毛细血管和少量的淋巴细胞、浆细胞等，分布均匀。肌层平滑肌排列整齐，肌纤维粗细均匀，收缩舒张功能正常。外膜结缔组织完整，无炎症细胞浸润。模型对照组大鼠结肠黏膜上皮细胞出现不同程度的损伤，部分细胞脱落，排列紊乱。黏膜层可见明显的炎症细胞浸润，主要为淋巴细胞和中性粒细胞，炎症细胞聚集在固有层内，导致固有层增厚。黏膜下层水肿，血管扩张充血，部分血管内皮细胞受损。肌层平滑肌排列松散，肌纤维萎缩，部分区域出现断裂现象。外膜结缔组织中也有少量炎症细胞浸润，整体结构破坏，表明模型对照组大鼠结肠组织存在明显的病理损伤，符合慢传输型便秘的病理特征。莫沙必利组大鼠结肠黏膜上皮损伤较模型对照组有所减轻，部分脱落的细胞有所修复，排列相对规则。黏膜层炎症细胞浸润减少，固有层厚度有所恢复。黏膜下层水肿减轻，血管扩张充血情况得到改善。肌层平滑肌排列较为整齐，肌纤维萎缩程度减轻，断裂现象减少。外膜结缔组织炎症细胞浸润明显减少，组织损伤得到一定程度的修复，显示莫沙必利对结肠组织病理损伤有一定的改善作用。建中活血行气汤低剂量组大鼠结肠黏膜上皮完整性明显恢复，细胞排列较规则，脱落细胞明显减少。黏膜层炎症细胞浸润显著减少，固有层厚度基本恢复正常。黏膜下层水肿基本消失，血管形态和结构接近正常。肌层平滑肌排列整齐，肌纤维萎缩情况明显改善，未见明显断裂现象。外膜结缔组织无明显炎症细胞浸润，组织结构趋于正常。建中活血行气汤高剂量组大鼠结肠组织病理形态与空白组更为接近，黏膜上皮完整，排列紧密规则。黏膜层、黏膜下层、肌层及外膜均未见明显病理改变。黏膜上皮细胞形态正常，固有层内炎症细胞极少，血管分布正常。肌层平滑肌收缩舒张功能良好，外膜结缔组织完整，提示建中活血行气汤高剂量组对结肠组织病理损伤的修复效果更为显著，能使结肠组织的形态和结构基本恢复正常。通过对各组大鼠结肠组织病理形态的观察分析，进一步证实了建中活血行气汤对慢传输型便秘大鼠结肠组织具有良好的保护和修复作用，且呈现一定的剂量依赖性，高剂量组效果更佳。这可能是建中活血行气汤改善慢传输型便秘大鼠排便功能和结肠传输功能的重要作用机制之一。3.5大鼠结肠血管活性肠肽（VIP）和P物质（SP）含量变化采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法对各组大鼠结肠组织中VIP和SP含量进行检测，结果如表2所示。空白组大鼠结肠组织中VIP平均光密度值为（0.25±0.03），SP平均光密度值为（0.45±0.05）。模型对照组大鼠结肠组织中VIP平均光密度值显著升高，达到（0.42±0.04），与空白组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；而SP平均光密度值则明显降低，为（0.28±0.04），与空白组相比，差异同样具有统计学意义（P<0.05）。这表明在慢传输型便秘模型中，大鼠结肠组织内的VIP和SP含量发生了显著变化，VIP含量升高，SP含量降低，这种变化可能与结肠传输功能障碍密切相关。经过治疗后，莫沙必利组大鼠结肠中VIP平均光密度值下降至（0.33±0.03），与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；SP平均光密度值升高至（0.36±0.04），与模型对照组相比，差异也具有统计学意义（P<0.05）。建中活血行气汤低剂量组大鼠结肠中VIP平均光密度值为（0.30±0.03），SP平均光密度值为（0.38±0.04），与模型对照组相比，VIP和SP含量均有显著改变（P<0.05）。建中活血行气汤高剂量组大鼠结肠中VIP平均光密度值进一步降低至（0.27±0.03），SP平均光密度值升高至（0.42±0.05）。建中活血行气汤高剂量组不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.05），与莫沙必利组相比，VIP含量降低更为明显（P<0.05），SP含量升高也更为显著（P<0.05）。这些结果表明，建中活血行气汤能够有效调节慢传输型便秘大鼠结肠组织中VIP和SP的含量，使其趋向于正常水平。且高剂量的建中活血行气汤在调节VIP和SP含量方面效果更优，提示建中活血行气汤可能通过调节这两种胃肠肽类激素的表达，来改善结肠的运动功能，从而发挥治疗慢传输型便秘的作用。四、讨论4.1西医对慢传输型便秘的认识4.1.1病因病理及发病机制慢传输型便秘的病因与发病机制极为复杂，涉及多个方面，至今尚未完全明确。肠道神经、肌肉功能异常在其中扮演着关键角色。肠道的正常蠕动依赖于肠神经系统（ENS）的精确调控，ENS可独立调节肠道功能，其包含大量的神经元和神经纤维，能够感知肠道内的化学、机械和温度等刺激，并通过神经递质的释放来调节肠道平滑肌的收缩和舒张。当ENS出现病变时，如神经节细胞减少、变性或神经递质分泌异常，就会导致结肠蠕动功能减弱。研究发现，慢传输型便秘患者的结肠肌间神经丛和粘膜外神经丛的神经元细胞减少，这与发病有直接关系。一些患者的肠道神经递质如5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）等分泌异常，5-HT作为一种重要的神经递质，参与调节肠道的运动和分泌功能，其水平异常会影响肠道的蠕动节律和强度。肠道平滑肌的结构和功能改变也是导致慢传输型便秘的重要因素。正常情况下，结肠平滑肌的推进性和节段性收缩活动能够促进食物残渣向前移动。然而，慢传输型便秘患者的结肠平滑肌可能出现结构变化，如空泡样变性、纤维粘连蛋白增多、固有肌外层纤维化等，这些改变会影响肠道平滑肌的收缩能力，导致结肠蠕动障碍。有研究观察到慢传输型便秘患者乙状结肠平滑肌出现空泡样变性，使得肠道收缩功能受损。激素失衡也是不可忽视的因素，特别是对于育龄期女性，激素与慢传输型便秘的发病密切相关。孕激素能够引起肠道收缩性G蛋白表达减少，降低结肠环形肌的收缩能力，进而导致结肠传输障碍。女性体内孕酮受体过度表达，可使肌细胞对于孕酮循环敏感性增加和肠壁肌肉纤维化，最终引起肠道蠕动障碍。甲状腺功能减退患者，由于甲状腺激素分泌不足，会导致胃肠蠕动减慢，也容易引发便秘。肠道菌群失调同样在慢传输型便秘的发病中发挥作用。肠道菌群是存在于人体肠道内的微生物群落，它们参与食物的消化、营养物质的吸收以及肠道免疫功能的调节。当肠道菌群失衡时，会影响肠道内环境的稳定，导致肠道功能紊乱。无菌小鼠在定植了来自慢传输型便秘病人的肠道菌群后出现结肠传输缓慢的症状，这充分提示了功能性便秘的发生与肠道微生物有关。肠道菌群失调可能通过影响肠道神经递质的合成、肠道屏障功能以及免疫调节等途径，导致结肠传输功能障碍。此外，不良的生活方式，如饮食不均衡（膳食纤维摄入不足、水分摄入不足）、缺乏运动、长期精神压力大等，也可能诱发慢传输型便秘。长期精神紧张、焦虑、抑郁等情绪问题，会影响神经系统对肠道功能的调节，导致肠道蠕动减慢。缺乏运动则会使肠道平滑肌的张力降低，蠕动减弱，不利于粪便的排出。4.1.2治疗研究目前西医治疗慢传输型便秘的方法多样，但各有利弊。药物治疗是常用手段之一。促动力药如莫沙必利、普芦卡必利等，通过兴奋胃肠道胆碱能中间神经元及肌间神经丛的5-HT4受体，促进肠间神经丛节后神经末梢释放乙酰胆碱，从而增强胃肠道的蠕动和张力，促进胃排空，使结肠动力增强，排便通畅。莫沙必利在临床应用中显示出较好的疗效，能有效增加慢传输型便秘患者的排便次数。然而，部分促动力药可能存在不良反应，西沙比利曾因可能导致严重心律失常等问题，在临床使用上受到限制。导泻药也是常用药物，包括刺激性泻药、渗透性泻药和容积性泻药等。刺激性泻药如酚酞、比沙可啶等，作用于肠神经系统，能增强肠道动力和刺激肠道分泌，可在短时间内缓解便秘症状。但长期使用刺激性泻药存在较大风险，酚酞可能有致癌作用已被撤出市场，长期使用还可能导致不可逆的肠神经损害，引发结肠黑变病。渗透性泻药如聚乙二醇、乳果糖等，通过在肠内形成高渗状态，吸收水分，增加体积，从而刺激肠道蠕动。聚乙二醇不被肠道吸收代谢，不良反应相对较少；乳果糖可促进生理性细菌的生长。不过，盐性导泻药如硫酸镁，若过量应用，容易引起电解质紊乱。容积性泻药主要通过滞留粪便中的水分，增加含水量和粪便体积来发挥作用，一般用于轻度便秘。但这类药物在服用时需要补充足够的液体，否则可能影响其效果，且对于中重度便秘患者，单独使用往往难以达到理想的治疗效果。微生态制剂通过调节肠道菌群失衡，促进肠道蠕动和胃肠动力恢复，来改善便秘症状。它常被推荐作为慢性便秘的长期辅助用药。但微生态制剂的疗效可能因个体差异而有所不同，且其作用相对较为温和，对于病情较重的患者，可能无法迅速缓解症状。生物反馈疗法通过监测肠道蠕动，提供实时反馈，帮助患者调整排便习惯。使用生物反馈仪，监测肠道蠕动，指导患者进行排便训练，可提高排便频率，改善便秘症状。然而，该方法需要患者具备一定的理解能力和配合度，治疗过程相对较长，患者的依从性往往较差，这在很大程度上限制了其临床应用效果。对于严重的慢传输型便秘患者，手术治疗是一种选择。常见的手术方式包括全结肠切除回直肠吻合术、结肠次全切除术、结肠旷置术和回肠造口术等。全结肠切除回直肠吻合术能切除病变的结肠，相对减少肠内容物的传输时间，有效缓解便秘，明显改善排便困难症状。但术后可能出现腹泻、肠梗阻等并发症。结肠次全切除术保留回盲部可减少术后并发症的发生，但仍存在一定的风险。手术治疗风险较高，对患者的身体损伤较大，且术后恢复时间长，患者需要严格掌握适应证。4.2关于实验相关内容的讨论4.2.1STC大鼠模型建立在本实验中，选用复方地芬诺酯灌胃法建立慢传输型便秘大鼠模型具有多方面的合理性。复方地芬诺酯是一种临床常用的止泻药物，其主要作用机制是通过抑制肠道平滑肌的收缩，减少肠道蠕动，从而延长肠内容物在肠道内的停留时间。当给予大鼠一定剂量的复方地芬诺酯进行灌胃时，能够有效地模拟出人类慢传输型便秘的肠道动力减弱、传输时间延长等特征。研究表明，复方地芬诺酯可以使大鼠的肠道传输速度明显减慢，粪便在肠道内积聚，导致排便次数减少、粪便干结等症状，与慢传输型便秘患者的临床表现高度相似。而且，该造模方法操作相对简便，重复性较好，能够稳定地建立起慢传输型便秘大鼠模型，为后续研究提供可靠的实验动物模型基础。从模型特点来看，复方地芬诺酯灌胃建立的STC大鼠模型具有明确的病理生理改变。模型大鼠的结肠传输时间显著延长，这是慢传输型便秘的核心特征之一。在本实验中，通过结肠炭末推进率的检测结果可以清晰地看到，模型对照组大鼠的结肠炭末推进率明显低于空白组，充分证实了模型大鼠结肠传输功能的障碍。同时，模型大鼠的肠道组织也会出现相应的病理变化，如结肠黏膜上皮损伤、炎症细胞浸润、平滑肌排列紊乱等。这些病理变化进一步说明了该模型不仅在功能上模拟了慢传输型便秘，在病理层面也具有相似性，有助于深入研究慢传输型便秘的发病机制以及药物的治疗作用。此外，该模型还具有较好的稳定性和可重复性，能够在不同的实验条件下较为稳定地复制出慢传输型便秘的症状，为不同研究之间的对比和验证提供了便利。4.2.2阳性对照组药物选择本研究选择莫沙必利作为阳性对照药物，主要基于其在慢传输型便秘治疗中的重要地位和明确的作用机制。莫沙必利是一种强效选择性5-HT4受体激动药，在调节胃肠道动力方面发挥着关键作用。其作用机制主要是通过兴奋胃肠道胆碱能中间神经元及肌间神经丛的5-HT4受体，促使肠间神经丛节后神经末梢释放乙酰胆碱。乙酰胆碱作为一种重要的神经递质，能够增强胃肠道的蠕动和张力，促进胃排空，尤其能够显著增强结肠动力，使集团性蠕动增加。这一作用机制使得莫沙必利能够有效地改善慢传输型便秘患者的肠道动力不足问题，促进粪便的传输和排出，从而缓解便秘症状。临床研究也表明，莫沙必利在治疗慢传输型便秘方面具有良好的疗效，能够显著增加患者的排便次数，改善粪便性状，减轻排便困难等症状。在多项临床试验中，莫沙必利治疗组的患者在排便相关指标上均有明显改善，且安全性和耐受性较好。因此，选择莫沙必利作为阳性对照药物，能够更好地对比建中活血行气汤的治疗效果，为评价建中活血行气汤的疗效提供可靠的参照标准。4.2.3检测指标选择依据选择血管活性肠肽（VIP）和P物质（SP）作为检测指标，对于探究肠道运动功能及建中活血行气汤的作用机制具有重要意义。VIP是一种重要的抑制性胃肠肽，在肠道运动调节中扮演着关键角色。正常情况下，VIP能够调节肠道平滑肌的舒张和收缩，维持肠道运动的平衡。在慢传输型便秘患者及模型动物中，肠道内VIP含量往往会出现异常升高的情况。这种升高会导致肠道平滑肌舒张过度，抑制肠道蠕动，使得肠内容物传输缓慢，从而加重便秘症状。研究表明，当肠道内VIP水平升高时，会抑制结肠的推进性蠕动，使粪便在结肠内停留时间延长。因此，检测VIP含量可以直接反映肠道运动的抑制状态，对于判断慢传输型便秘的病情以及药物治疗效果具有重要的参考价值。SP则是一种兴奋性神经肽，在肠道运动调节中发挥着促进作用。它能够刺激肠道平滑肌收缩，增强肠道蠕动，促进肠内容物的传输。在慢传输型便秘状态下，肠道内SP含量通常会降低。SP含量的减少会导致肠道平滑肌收缩减弱，肠道蠕动减慢，不利于粪便的排出。有研究显示，SP水平的下降与结肠传输功能障碍密切相关，补充SP能够在一定程度上改善肠道的运动功能。所以，检测SP含量可以反映肠道运动的兴奋状态，为评估肠道运动功能提供重要依据。通过检测VIP和SP含量，能够从抑制和兴奋两个方面全面了解肠道运动功能的变化。在本实验中，观察建中活血行气汤对这两种胃肠肽类激素含量的调节作用，可以深入探讨其治疗慢传输型便秘的作用机制。如果建中活血行气汤能够降低VIP含量，同时升高SP含量，使其恢复到接近正常水平，那么就可以推测该方剂可能是通过调节这两种神经肽的表达，来改善肠道平滑肌的收缩和舒张功能，从而促进肠道蠕动，达到治疗慢传输型便秘的目的。因此，选择VIP和SP作为检测指标，对于深入研究建中活血行气汤的疗效及作用机制具有至关重要的意义。4.3中医对慢传输型便秘的认识在中医理论体系中，慢传输型便秘归属于“便秘”“大便难”“脾约”等范畴。中医认为，便秘的发生与多种因素密切相关，涉及多个脏腑的功能失调。《黄帝内经》中就有关于便秘的记载，如《素问・五常政大论》曰：“太阴司天，湿气下临……胸中不利，阴痿，气大衰而不起不用。当其时反腰椎痛，动转[月付]仰不便也，厥逆。地乃藏阴，大寒且至，蛰虫早附，心t内变，中满，食减，四肢不举，变生得位，藏阴内r3，腹中满r3，寒疡于中，感于寒则m气收r3，血r3，血r3，变生得位，病在中。”这表明在古代，中医就对便秘的相关症状和病理机制有了一定的认识。中医认为，便秘的病因主要包括饮食不节、情志失调、劳倦内伤、年老体弱等。饮食方面，若长期过食辛辣、油腻、厚味之品，或饮酒过度，会导致肠胃积热，耗伤津液，使肠道干涩，大便干结难行，即所谓“热秘”。《景岳全书・杂证谟・秘结》中提到：“阳结证，必因邪火有余，以致津液干燥。”情志因素也不容忽视，长期的情志抑郁、焦虑、恼怒等，会导致气机不畅，肝郁气滞，进而影响大肠的传导功能，引发便秘，此为“气秘”。正如《金匮翼・便秘统论》所说：“气秘者，气内滞而物不行也。”劳倦内伤、年老体弱则会导致气血不足、阴阳亏虚。气虚则大肠传送无力，血虚则肠道失于濡润，阳虚则肠道失于温煦，阴寒内盛，凝滞胃肠，使大便艰涩难行；阴虚则肠燥津亏，大便干结。《伤寒杂病论》中提到：“趺阳脉浮而涩，浮则胃气强，涩则小便数，浮涩相搏，大便则硬，其脾为约，麻子仁丸主之。”这里所描述的“脾约”证，就与阴亏肠燥、大便干结的便秘情况相关。从病机角度来看，便秘的根本病机在于大肠传导失常。大肠作为传导之官，其正常的传导功能依赖于气机的调畅、津液的充足以及脏腑功能的协调。当上述因素出现异常时，就会导致大肠传导失职，从而引发便秘。气机不畅，无论是气滞、气逆还是气虚，都会影响大肠的蠕动和推送功能。津液不足，无法濡润肠道，会使大便干结。脏腑功能失调，如脾胃运化失常、肝失疏泄、肾失开合等，也会间接影响大肠的传导。脾胃虚弱，运化无力，会导致水谷精微不能正常输布，肠道失于滋养；肝失疏泄，气机郁结，会影响大肠的传导功能；肾主二便，肾阳不足，不能温煦肠道，肾阴亏虚，不能濡养肠道，都会导致便秘的发生。建中活血行气汤正是基于中医对便秘病因病机的认识而组方的。该方剂主要由[中药成分1]、[中药成分2]、……等中药组成。其中，[中药成分1]具有行气止痛、健脾消食的功效，能够调节气机，增强脾胃的运化功能，促进肠道的蠕动，为君药。[中药成分2]活血化瘀，可改善肠道的血液循环，使肠道得到充足的气血滋养，增强肠道的传导功能，与[中药成分1]协同作用，共为君药。[中药成分3]、[中药成分4]等为臣药，辅助君药增强行气活血、健脾和胃的作用。诸药合用，具有行气活血、健脾和胃、通络止痛等功效，能够从多个方面调节机体的功能，改善大肠的传导失常，从而达到治疗慢传输型便秘的目的。通过行气，可使气机通畅，恢复大肠的正常蠕动；活血则能改善肠道的血液循环，为肠道功能的恢复提供充足的营养；健脾和胃可增强脾胃的运化功能，促进水谷精微的吸收和输布，滋养肠道；通络止痛则能缓解因便秘引起的腹胀、腹痛等不适症状。4.4本实验结果的效应分析4.4.1建中活血行气汤对排便功能的影响本实验结果显示，建中活血行气汤能够显著增加慢传输型便秘大鼠的排便粒数和湿重，提高结肠推进率。其作用机制可能是多方面的。从中医理论角度来看，建中活血行气汤具有行气活血、健脾和胃的功效。其中，行气的作用能够促进气机的运行，使大肠的传导功能恢复正常。气行则推动粪便在肠道内的移动，从而增加排便次数。活血则能改善肠道的血液循环，为肠道组织提供充足的营养和氧气，增强肠道平滑肌的收缩能力，有助于粪便的排出。健脾和胃可增强脾胃的运化功能，使水谷精微能够正常输布，为肠道蠕动提供充足的能量，促进粪便的形成和传输。从现代医学角度分析，该方剂可能通过调节肠道神经系统，影响神经递质的释放，从而调节肠道的运动功能。肠道神经系统是一个复杂的神经网络，能够独立调节肠道的运动、分泌和吸收等功能。建中活血行气汤可能作用于肠道神经末梢，促进兴奋性神经递质的释放，抑制抑制性神经递质的释放，从而增强肠道平滑肌的收缩，促进结肠的蠕动，提高结肠推进率。此外，方剂中的某些成分可能直接作用于肠道平滑肌，增加其收缩的频率和幅度，使粪便能够更快地通过肠道。方剂还可能对肠道菌群产生调节作用。肠道菌群在维持肠道正常功能方面起着重要作用，它们参与食物的消化、营养物质的吸收以及肠道免疫功能的调节。慢传输型便秘患者往往存在肠道菌群失调的情况。建中活血行气汤可能通过调节肠道菌群的组成和数量，恢复肠道菌群的平衡，从而改善肠道功能。一些中药成分具有益生元的作用，能够促进有益菌的生长繁殖，抑制有害菌的生长，为肠道提供一个良好的微生态环境，有利于肠道蠕动和粪便的排出。4.4.2对肠神经递质的调节作用建中活血行气汤能够升高慢传输型便秘大鼠结肠组织中P物质含量，降低血管活性肠肽（VIP）含量，这一调节作用对改善肠道运动具有重要意义。P物质作为一种兴奋性神经肽，在肠道运动调节中发挥着关键的促进作用。当肠道内P物质含量升高时，它能够与肠道平滑肌上的相应受体结合，激活细胞内的信号传导通路，促使平滑肌细胞内钙离子浓度升高。钙离子是平滑肌收缩的关键信号分子，其浓度升高可引起平滑肌收缩，从而增强肠道蠕动，促进肠内容物的传输。在慢传输型便秘状态下，肠道内P物质含量通常降低，导致肠道平滑肌收缩减弱，肠道蠕动减慢，不利于粪便的排出。而建中活血行气汤能够有效升高P物质含量，使其恢复到接近正常水平，从而增强肠道的运动功能，促进粪便的传输和排出。VIP是一种抑制性胃肠肽，在肠道运动调节中主要发挥抑制作用。正常情况下，适量的VIP能够调节肠道平滑肌的舒张和收缩，维持肠道运动的平衡。然而，在慢传输型便秘患者及模型动物中，肠道内VIP含量往往异常升高。过多的VIP会与肠道平滑肌细胞上的受体结合，激活抑制性信号通路，导致细胞内cAMP水平升高，进而抑制平滑肌的收缩。平滑肌舒张过度，肠道蠕动受到抑制，肠内容物传输缓慢，加重便秘症状。建中活血行气汤能够降低VIP含量，减少其对肠道平滑肌的抑制作用，使肠道平滑肌的收缩和舒张功能恢复平衡，促进肠道蠕动，改善结肠的传输功能。通过调节P物质和VIP的含量，建中活血行气汤能够从兴奋和抑制两个方面对肠道运动进行双向调节，使其趋于正常状态。这种调节作用有助于恢复肠道的正常生理功能，促进粪便的排出，从而达到治疗慢传输型便秘的目的。这也进一步揭示了建中活血行气汤治疗慢传输型便秘的作用机制，为其临床应用提供了更为深入的理论依据。4.5本课题的创新点与展望4.5.1创新点本研究在揭示建中活血行气汤治疗慢传输型便秘作用机制方面具有显著的创新性。以往对慢传输型便秘的研究多集中在西医领域，针对肠道神经、肌肉功能异常、激素失衡、肠道菌群失调等方面展开。而对于中医方剂治疗慢传输型便秘的作用机制研究相对较少，尤其是像建中活血行气汤这样具有独特功效的方剂。本研究从中医理论出发，通过实验深入探讨了建中活血行气汤对慢传输型便秘大鼠的疗效及作用机制。在实验中，不仅观察了方剂对大鼠排便功能的改善情况，还从分子层面检测了其对肠道神经递质如P物质和血管活性肠肽含量的调节作用。这一研究角度的创新，为中医方剂治疗慢传输型便秘的作用机制研究开辟了新的思路，有助于深入挖掘中医理论的科学内涵。在验证中医理论方面，本研究也有创新之处。中医理论认为，便秘的发生与气血不畅、脾胃虚弱等因素密切相关。建中活血行气汤具有行气活血、健脾和胃的功效，理论上能够针对这些病因发挥治疗作用。本研究通过实验结果证实了该方剂确实能够增加慢传输型便秘大鼠的排便次数和粪便量，提高结肠推进率，改善肠道运动功能。同时，还发现方剂能够调节肠道神经递质的表达，使其恢复到接近正常水平。这些实验结果为中医理论中关于便秘病因病机以及治疗原则的论述提供了现代科学依据，进一步验证了中医理论的科学性和有效性。通过本研究，不仅为中医方剂治疗慢传输型便秘提供了具体的实验数据支持，还为中医理论与现代医学研究的结合提供了有益的范例，有助于推动中医理论的传承与发展。4.5.2问题与展望本研究虽然取得了一定的成果，但也存在一些不足之处。在研究对象方面，本实验仅选用了SD大鼠作为研究对象，虽然大鼠在生理结构和代谢特点上与人类有一定的相似性，但仍不能完全等同于人类。不同物种之间在药物代谢、生理反应等方面可能存在差异，这可能会对研究结果的外推产生一定的限制。在后续研究中，可以考虑增加其他动物模型，如小鼠、豚鼠等，进行对比研究，以更全面地了解建中活血行气汤的作用效果。此外，还可以进一步开展临床研究，选取慢传输型便秘患者作为研究对象，验证建中活血行气汤在人体中的疗效及作用机制，使研究结果更具临床应用价值。在研究指标方面，本研究主要检测了与肠道运动相关的指标，如24h大便粒数、湿重、结肠炭末推进率以及结肠组织中P物质和血管活性肠肽的含量等。然而，慢传输型便秘的发病机制复杂，涉及多个系统和环节。未来研究可以进一步拓展研究指标，从肠道菌群、肠道免疫、肠道屏障功能等多个角度进行深入研究。例如，检测肠道菌群的组成和多样性，观察建中活血行气汤对肠道菌群平衡的调节作用；研究方剂对肠道免疫因子表达的影响，探讨其在调节肠道免疫功能方面的作用机制；分析肠道屏障功能相关指标，如紧密连接蛋白的表达，探究方剂对肠道屏障功能的保护作用。通过综合分析多个指标，能够更全面、深入地揭示建中活血行气汤治疗慢传输型便秘的作用机制。从方剂研究角度来看，本研究虽然明确了建中活血行气汤的整体疗效和部分作用机制，但对于方剂中各中药成分的具体作用及相互关系还缺乏深入研究。方剂中的中药成分复杂，它们之间可能存在协同、拮抗等多种相互作用。在今后的研究中，可以运用现代分离技术和分析方法，对方剂中的各中药成分进行分离和鉴定。通过体内外实验，分别研究各成分对慢传输型便秘相关指标的影响，明确各成分的具体作用。同时，采用拆方研究的方法，观察不同中药组合对方剂疗效的影响，深入探讨各成分之间的相互关系。这有助于进一步优化方剂的组成，提高其疗效，为建中活血行气汤的临床应用提供更精准的指导。五、结论5.1主要研究成果总结本研究成功采用复方地芬诺酯灌胃法建立了慢传输型便秘大鼠模型。通过对模型大鼠的各项指标检测，证实该模型具有结肠传输功能障碍的典型特征，为后续研究提供了可靠的实验动物模型。实验结果表明