输血科质量手册

年4月19日输血科质量手册文档仅供参考，不当之处，请联系改正。第一人民医院输血科质量手册目录第一部分输血相关法律法规一、中华人民共和国《献血法》1998二、《医疗机构临床用血管理办法》1999三、《临床输血技术规范》四、《山东省输血科基本标准》第二部分医院输血管理委员会职责一、医院输血管理委员会成员二、医院输血管理委员会职责第三部分输血科功能与任务第四部分输血科管理文件第一章输血科管理制度1.输血科工作制度2.人员培训和技术考核制度3.实验记录及核对制度4.血液保存、发放、临床输血和血液报废制度5.输血反应、输血感染登记记录制度6.试剂的认购、入库和领用制度7.输血科医院感染管理制度8.仪器设备认购、验收、使用、管理、保养维修和报废制度9.计量管理制度10.输血前检查制度11.疑难血型病例讨论制度12.输血不良反应登记及回报制度13.科务会议制度14.临床输血会诊制度15.值班与交接班制度16.标本管理制度17.输血审批与考核制度18.临床输血应急措施19.临床用血申请、审批制度20.积极推行成份输血措施21.临床用血核查、登记制度22.临床输血管理制度23.临床输血管理实施细则24.急诊输血管理制度25.输血前告知制度26.信息反馈制度27.消毒管理制度28.控制输血感染方案29.临床用血计划制度30.成份输血考核办法第二章输血科工作职责第三章输血科操作规程第四章输血科质量控制附表第二部分医院输血管理委员会职责1.医院输血管理委员会成员主任委员张小的副主任委员丁绍平陈卫文包丽芬2.医院输血管理委员会职责2.1按照卫生行政部门要求宣传贯彻执行《中华人民共和国献血法》卫生部《临床输血技术规范》和《医疗机构临床用血管理办法》文件精神推动、促进、完善医院临床输血的发展和管理。2.2制定专业技术人员培训计划采取多中形式进行院内输血知识继续医学教育不断提高医院临床医护人员输血知识和管理水平每年进行1-2次全院医护人员输血知识讲座和专业人员技术培训。2.3监督指导临床科学、安全、合理用血确保输血安全。2.4积极推广成分输血推广临床输血新技术、新材料、新方法成分输血要达到省级要求95%以上。2.5积极参与临床抢救大失血病人及器官移植患者大剂量输血的指导和协调工作。2.6承担医院输血反应及差错事故的讨论鉴定并提出处理意见。2.7制定工作计划每半年召开一次输血质量管理委员会会议年底汇报本年度工作执行情况结合医院实际情况制定奖罚制度将检查执行情况向院领导汇报。成绩好的给予适当奖励。成分输血达不到标准者科室不能参加年终评奖科主任及护士长不能评为先进个人。2.8协调处理临床输血工作中的重大问题。第三部分输血科功能与任务1.认真执行《医疗机构临床用血管理办法》和《临床输血技术规范》有关规定。2.在院长和医院输血管理委员会领导小组的指导、监督下负责对临床用血技术指导和技术实施。3.根据医疗需要定期向辖区供血单位申报用血计划。4.储备必要的血液保证临床医疗正常见血储存量一般不少于3天急救用血量。5.为临床输血开展血型鉴定、交叉配血、抗体筛查及输血相关的实验诊断。6.配合临床开展输血及血液治疗指导临床合理用血推广成分输血自身输血和输血新技术、宣传现代输血专业知识和进行临床输血技术指导。7.对输血工作进行全面质量管理。8.配合医院所在地供血单位做好用血管理工作。9.接受上级卫生行政部门和上级输血机构的专业技术指导和监督。第四部分输血科管理文件第一章输血科管理制度1.输血科工作制度1.1输血科全体工作人员在科主任的带领下坚持24小时值班制。1.2各班人员坚守工作岗位以高度认真细心负责的态度做好收、发血工作。1.3常规用血与急症用血分开处理无特殊情况20分钟内将血液发出。1.4要保质保量地完成医院临床急救用血或治疗性供血任务。1.5以医院医德规范为准则严格遵守医院劳动纪律不迟到早退不随意离开工作岗位。有事严格履行请假制度。1.6常规用血每天上午按规定时间由护士连同受血者血样4~5毫升送交输血科。交接时严格执行“三查七对”制度无误时双方签字后待检。1.7冰箱内储存至少3天的常规用血量根据用血情况及时调整库存发现异常者要及时报告妥善处理同时做好记录。1.8严格血库专用储血冰箱管理制度每日4次检查冰箱血液储存量和冰箱温度并记录。冰箱内不得存放非血液物品。1.9工作室保持清洁安静上班衣帽整齐佩带胸牌。1.10血液发出后无质量问题原则不得退回。2.人员培训和技术考核制度2.1在科主任的带领下有计划的开展科研教学工作。2.2科室每年至少要有独立或合作课题1项主管技师以上职称至少撰写论文1篇。2.3积极鼓励科室人员参与课题的开题、实验、总结工作。2.4每年每人有重点的进行学习参与全省的输血培训提高专业技术水平。2.5严格按照教学大纲要求对实习进修人员作好带教工作。2.6争取每年有人员外出学习进修返回写出学习体会向科室汇报开展新业务。2.7严格遵守医院劳动记律不迟到早退不随意离开工作岗位。2.8每半年对工作量成分输血比例情况进行考核总结。2.9对工作缺陷、失误、差错者除进行批评教育外给予必要的行政处罚。2.10将文明用语、礼貌待人服务态度纳入考核的内容。2.11每年科室人员进行年终考核并记入个人档案。3.实验记录及核对制度3.1实验室内保持清洁、整齐有序。3.2输血科所有实验标本必须有标签标示实验结果要登记存按时发送报告。3.3试剂配置计量要准确、清亮不容许有沉淀的试剂不得出现沉淀物。3.4严格执行各项实验操作规程。3.5血型鉴定和交叉配血实验两人工作时要一人配血她人复核一人工作时要重做一次。3.6发血时要与取血人共同核对患者科别、病房、床号、姓名、性别、住院号血型交叉配血实验结果、血液编号、采血日期、血液外观质量等。3.7配血前、后认真核对血样与配血申请单信息应准确无误。3.8收血样时认真核对并检查血样有无脂血、溶血、等质量问题。4.血液保存、发放、临床输血和血液报废制度4.1血液保存制度4.1.1贮血冰箱室内环境必须控制在22-26℃4.1.2贮存的血液制品必须按A、B、O、AB血型与品种、规格、日期分别贮存于血库专用冰箱不同层内或不同专用冰箱内并有明显的标识。4.1.3保存血液制品贮血专用冰箱必须具有温度报警装置。4.1.44℃贮血专用冰箱应每周擦拭后消毒1次低温贮血专用冰箱每月化霜1用冰箱内空气培养每月一次并记录。消毒、空气培养记录结果保存2年备查。4.1.5工作人员每6小时准确地记录贮血冰箱温度。4.2血液制品提取与发放4.2.1专职人员携带血液制品保温器材与取血单取血提取储存式自身输血的血液时须再携带病历记录以便双方人员确认。4.2.2取血者与发血者双方必须共同查对病人相关信息准确无误双方共同全名签字后方可取发。4.2.3血液制品发出后一律不得退回。4.2.4血液制品发出后病人和供血者的血样保存于26°C冰箱至少4.3临床输血制度4.3.1融化后未能及时输注的新鲜冰冻血浆、冷沉淀应立即输注。不宜在室温与4℃用冰箱保存更不宜再冷冻。4.3.2血液制品从输血科贮血专用冰箱取出后应在30分钟以内输注遇特殊情况时如患者发热等暂时不能输注时可送输血科暂时保存。4.3.3输血开始前由两名注册护士核对交叉配血报告单及血袋标签各项内容检查血袋有无破损渗漏血液制品颜色是否正常准确无误方可输血。4.3.4输注血液制品应严密观察患者有无输血反应。4.3.5输注前将血袋内的血液成分轻轻混匀血液制品内不得加入任何药物。4.3.6连续输注不同供血者的血液制品时前一袋血输尽后用静脉注射生理盐水冲洗输血器再接下一袋血液制品继续输注。4.3.7输血时需记录输血开始时间、结束时间、输注制品的种类和容量。如怀疑输血不良反应与相关性疾病需及时处理并详细记录。记录结果一式两份一份随病历保存备查、一份送输血科追踪调查输血反应原因。4.4血液制品报废制度4.4.1由相关人员填写血液制品报废申请单包括血液制品种类、数量、血袋编号、采血日期、报废日期、报废原因等。4.4.2由输血科主任分析原因、科会讨论后提出申请做好登记并签字然后报医院医务处审批。4.4.3凡由供血机构所致均有供血机构负责由本科室人员造成的报废要追查个人的责任。4.4.4报废血液制品应按三废要求消毒处理。5.输血反应、输血感染登记记录制度5.1凡接到临床报告患者有输血反应时输血科医师应及时深入临床科室妥善处理并报告科领导。5.2记录发生输血反应患者的姓名、血型、住院号、科室、所输血液制品的名称、献血员姓名、血液编码、输入量、反应症状、处理方法、结果等。5.3及时收回因输血反应未输完的血液重复交叉配血和正反定型必要时进行抗体检测以及其它相关检测。5.4将检测结果及时反馈给临床科室以利临床医师对症治疗。5.5输血科医师应经常深入临床了解输血治疗情况及时发现输血反应并宣传教育输血反应防治知识提高临床诊断输血反应的能力。5.6严重的输血反应在处理的同时应及时上报医务科。5.7减慢或停止输血用静脉注射生理盐水维持静脉通路5.8及时报告值班医师及上级医师、输血科血库值班人员与医院相关部门及时做相关试验检查、对患者及时治疗和抢救并查找原因做好记录6.试剂的认购、入库和领用制度6.1输血科所使用的体外诊断试剂必须有国家认可的三证产品注册证、销售许可证或生产许可证应符合国家有关规定。经过医院招标委员会入围的产品6.2需要试剂要经输血科人员讨论决定向医院物资招标办公室申请有其统一购入医院帐户。科室根据工作量每月向采购中心预定由其按时配送到科室。6.3输血科人员不得参与产品的定价不允许与供销商有经济上的联系有产品问题及时上报物资采购中心由其与供销商解决。6.4科室与配送中心当面清点试剂数量、外观、批号、生产日期、失效期。无误时在送货单签字。6.5输血科值班人员将试剂数量、规格、批号等登记后按要求存放并随机抽取试剂做质控做凝集强度、效价与亲和力检测结果登记保存。6.6每批试剂使用前应进行确认并记录。6.7试剂储存温度和库存量要进行监控试剂应在有效期内使用。7.输血科医院感染管理制度7.1布局7.1.1布局合理应有三区即清洁区、半清洁区和污染区。7.1.2血液储存区、发放区和输血治疗室设在清洁区7.1.3血液检验和处理室设在污染区7.1.4办公室设在半清洁区。7.2感染管理制度7.2.1进入输血科的血液及试剂必须有国家卫生行政部门和国家药品监督管理部门颁发的许可证。7.2.2必须严格按卫生部颁发的《医疗机构临床用血管理办法》和《临床输血技术规范》规定的程序进行管理和操作。7.3各清洁区净度的要求7.3.1采集患者自体血、储存、发放血液应分室并在Ⅱ级环境中进行并配备相应的隔离设施和净化装置。7.3.2保持环境清洁每日清洁桌面、地面被血液污染的台面用健之素含有效氯㎎/L进行消毒处理。7.3.3储血冰箱应专门储存血液及血液成分定期清洁和消毒防止污染。每月对冰箱的内壁进行生物学检测空气细菌总数在正常范围不得检出致病性微生物和霉菌。7.3.4感染病人自体采集的血液应隔离储存并设明显标志。7.3.5工作人员上岗前应注射已肝疫苗定期检查已型肝炎病毒抗体水平。接触血液必须戴手套脱手套后洗手。一旦发生体表污物或锐器刺伤后应及时按医务人员职业暴露处理。7.3.6废弃的一次性使用医疗用品、废血和血液污染物必须分类收集装入双层黄色垃圾袋内送医疗废物暂存地统一无害化处理严格交接登记资料保存3年。7.3.7严格执行标准预防、手卫生规范。7.3.8正确使用个人防护用具。科室必须配备足量供医务人员使用一次性防护用品。8.仪器设备认购、验收、使用、管理、保养维修和报废制度8.1输血科仪器设备认购严格执行医院统一申请上报制度由医院仪器设备科购入。8.2新购仪器由设备科、医院仪器维修工程师、厂方代表、输血科四方人员一起装机调试合格者同时签字并登记入库。8.3严格按照仪器设备说明书操作规程使用输血科设专人负责管理定时维护保养有异常情况请医院维修工程师处理任何人不得私自拆卸或外借。8.4仪器报废要严格执行医院报废程序由输血科写报告报废原因医院维修中心验收同意上级领导批准由医院国有资产办公室收回。任何人无权私自处理。8.5各种冷冻冷藏及其它实验室关键设备应进行确认定期效正和维护。9.计量管理制度9.1凡使用的普通离心机、细胞洗涤离心机必须达到操作规定要求。9.2酶标仪按频率使用的高低定期效正至少2年一次。9.3有效准的原始数据有正规的效准合格报告或标签。9.4加样器移液器每年至少效正1次并记录。9.5计算机数据应有备份防止数据丢失。10.输血前检查制度输血前的血清学检测结果可有效的证明输血与新发疾病感染是否有因果关系为临床医疗提供客观依据避免输血所致医疗纠纷的发生有助于医护人员的自我保护防止医源性感染。凡接受输血或血液制品的患者输血前一律按制度做以下指标检查10.1传染性指标检测检查项目10.1.1已型肝炎病毒表面抗原HBsAg10.1.2丙型肝炎病毒抗体HCV10.1.3抗人类免疫缺陷病毒抗体抗HIV1/210.1.4梅毒感染血清标志物其它实验呈阳性反应时建议用TPPA法进行确认。10.1.5丙氨酸氨基移换酶ALT。10.2相关检验项目10.2.1血常规HB、HCT、PLT、WBC、。10.2.2ABO血型及反定型、RHD血型。10.2.3有输血史、妊娠史、输血反应史的患者应做不规则抗体筛查。10.2.4凡接受输血及血液制品前均应告知患者及家属输血不良反应及经血传播疾病的可能性征得患者及其直系亲属同意后双方在《临床输血治疗同意书》签字并入病历永久保存。11.疑难血型病例讨论制度11.1建立疑难血型鉴定、配血困难讨论登记制度。11.2遇到疑难血型鉴定或配血困难者科室要组织人员进行讨论分析。11.3分析原因了解病情提出共同的用血及实验方案。11.4在本院试剂、设备或技术问题不能解决时可将标本送到血液中心或上级医院鉴定。11.5记录鉴定结果及实验过程及时向临床反馈。11.6有价值的血样标本冰冻保存备用。12.输血不良反应登记及回报制度12.1在输血过程中出现不良反应由临床医师填写输血反应反馈表。12.2对有输血反应病人输血科要进行随访。12.3对输血反应病人进行原始标本验证、同时通知主管医师再次抽取标本同时做ABO及RH血型复检并做不规则抗体等相关实验查找原因并向临床医师汇报检查结果详情要记录。12.4对疑难血型的测定必要时可送外院或上级医院会诊。13.科务会议制度13.1科室每周二早8点定期召开科务会议。13.2要求全体人员按时参加。13.3总结科室本周内重要事项及工作情况布置下周医院任务。13.4转达医院周会内容使职工及时了解医院发展动态和工作要求。13.5每月召开一次总结会议总结上月工作情况。13.6每半年召开一次总结会议并提出下半年计划。13.7年终召开总结会议个人述职总结科室考评及提出来年计划。13.8记录每次科务会议内容。14.临床输血会诊制度14.1输血科参与临床输血会诊。14.2主管技师以上人员可参加临床会诊工作。14.3接到临床会诊通知、相关人员应按时参加不得延误。14.4对会诊病例要详细了解患者病情进展提出自己的意见。14.5会诊病例及处理意见要登记。14.6根据病情掌握输血适应证指导临床输血。15.值班与交接班制度15.1各班次按必须按时交接班不迟到早退。15.2必须坚守工作岗位要求作好份内工作不得擅自离开工作室。15.3值班时必须仪表端正衣帽整齐、佩带胸牌。15.4对病人态度和蔼解释耐心礼貌待人。15.5负责及时准确的完成各项常规及急症输血工作。15.6遇有疑难问题应请上级协助解决。15.7如有特殊重大事情应立即上报科主任及相关领导并记入值班日志。15.8负责做好规定的准备工作。15.9负责科室的安全注意防止水、电、火隐患保持清洁卫生。15.10审查核对当日患者输血明细工作。15.11遗留问题要交代清楚并记录交班。16.标本管理制度16.1配血标本送到输血科后要有专人接受标本并检查血量、标本号、姓名、性别、年龄、血型、病房、床号、日期、采血者签名如有遗漏应拒收。16.2初检和复检标本送到实验室后要有专人接收手续并要检查留样试管标签患者信息是否齐全检查合格双方签字做好登记注意标本份数、来源和日期等。16.3检查血标本血量并观察是否有溶血、脂血如有此现象应重新留取标本并做好记录。16.4受血者配血标本和供血者复检标本试验后要放冰箱4-6℃保留7-10天以便病人用血后发生问题时查找原因。特殊情况供血者血清标本应放在-20℃以备患者输血后发生输血反应和输血传染疾病时复查。17.输血审批与考核制度17.1严格掌握输血适应症对于手术用血应事先做好计划。对输血量及所需各种成分(红细胞、白细胞、血小板、血浆等)要严格掌握。17.2患者需要输血时医生应向家属讲清输血的利弊与患者共同签定《输血治疗同意书》方可输血。17.3输血申请单由经治医师填写严格执行审批制度经上级医师申签后同血样本一起提前呈交输血科17.4为做到有计划地供血除急诊外凡需输血者均应提前申请。17.5临床输血一次用血、备血量超过1600毫升时要履行报批手续需经输血科血库医师会诊由科室主任签名后报医务处科批准急诊用血除外。急诊用血事后应当按照以上要求补办手续。17.6.医院医务部门每月考核临床用血科室是否有不合理输血。18.临床输血应急措施18.1为了确保临床患者的急救用血和治疗性输血保证储血冰箱及仪器设备的正常运转保证与血液中心的正常联系在特殊及突发事件下可启动应急措施1正常情况下输血科储备足够的血液及血液成分一般情况下A、B、O、三种血型悬浮红细胞各12单位以上�.AB型4-6单位血浆库存量每种血型3000-5000毫升在血液中心保障供应的前提下。2输血科设至少两部电话有内、外专用线路24小时随时保持与血液中心、手术室及临床科室的联系。中心血站电话32212223输血科备有两套供电线路如遇线路问题立即启动备用线路保障临床及时用血。如遇其它情况可与以下有关人员联系电工室3326679维修中心3320319后勤科长（李忠）18.2遇有急救失血、烧伤、车祸或自然灾害、无名患者等无交款能力者要及时接诊同时向医院行政值班室领导汇报由其通知有关科室开通急救绿色通道所有费用先挂帐保证血液的供应。任何人不得以任何理由延误治疗及抢救。医院行政值班电话331676518.3输血科主任24小时开机听班。离开本市要向医院医务处及分管业务院长请假并指定专人代替管理。科主任手机18.4凡输血科人员接到值班人员或科主任应急电话要立即到岗不得延误。19.临床用血申请、审批制度19.1输血一申请单一律由主管医生填写由上级主管医生核准输血量800ml-1600ml须科主任签名，超过1600ml须报医务处审核批准，急诊于输血后2天内补办手续。19.2严格掌握输血适应症19.2.1术后hb>100g/L,hct>30%,请不要输血。如低于此标准时可考虑成份输血用悬浮红细胞+晶体液或血浆代用品。19.2.3申请输血量>3000ml者要经主管医疗院长批准并经过医务处上报市卫生局批准。19.2.4申请浓缩血小板有病房主管医生与输血科联系输血科根据用血管理办法通知血液中心在严格掌握输血适应征的前提下再申请{外科手术病人<80³10/9/L,内科病人<50³10/9/L)平时提前1天,节假日提前3-5天联系。19.2.5急诊用血也要进行成份输血严格掌握输血症19.3临床输血治疗时主管医师应向病人或病人家属说明输血不良反应和感染经血传播疾病的可能性取得患者或家属的理解和同意建立输血同意书签字制度并在病历中记录。20.积极推行成份输血措施20.1严格掌握输血适应征贫血hb<70g/L输红细胞缺乏凝血因子PT/PTT>1.5倍输新鲜冰冻血浆缺少血小板<50³10/9/L输血小板缺乏纤维蛋白原<80ml/L输冷沉淀物。20.2根据患者病情需要选择适宜的成份决不可千篇一律都输全血对可输可不输的疾病坚决不输禁止输安慰血。20.3适合输成份血的病人坚决不给全血临床80%的输血病人是需要某种血液成份而不适合输全血。20.4各种成份血的输注剂量要符合标准治疗剂量一次要给足才能达到预期疗效。20.5成份输血使用情况作为评价医生个人工作业绩的重要内容。20.6按卫生部要求“三级医院”成份输血率>90%21.临床用血核查、登记制度21.1输血科收领临床用血除检查血袋有无破损渗漏、血液颜色是否正常外还要认真清点数量核查供血者血型、编号、品种、采血日期、采供血机构名称、采供血许可证号等。21.2输血科对验收合格的血液认真作好入库登记按不同品种、血型、规格和采血日期分别存放于血库专用冰箱内并做好温度监测及记录。21.3输血科对血液包装不符合国家规定的卫生标准和要求或者标签项目不全、不清不符的应拒领拒收禁止接受不合格血液入库禁止将已出库血液重新回收入库储存或转借她人使用。21.4申请输血应由主管医生填写输血申请单连同患者血标本一并送输血科各项填写齐全无误字迹必须清楚易认否则拒收。21.5输血超过3天再次输血时应更换血标本方可配血无配血禁忌才能输出。21.6发血时取血者与发血者共同查对患者姓名、住院号、血型、献血源编号等并核查血袋标签、配血报告单两者须相符。检查血外观质量确无异常填写登记并签字。取血者必须系医护人员否则不发血。22.临床输血管理制度22.1科学合理地选择血液制品22.2正确填写《临床输血申请单》22.3输血前告知谈话并签定《输血治疗同意书》22.4受血者必须在输血前做ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV1/2、梅毒等检查结果贴病历中22.5低血容量患者应选用晶体液或胶体液补充血容量Hb>100g/L能够不输红细胞22.6申请用血由经治医师逐项填写《临床输血申请单》由主治医师签名连同血标本于预定输血日期前送血库22.7输血前应由经治医师向患者或家属说明同种异体输血有可能引起输血不良反应和经血传播疾病征得同意后在《输血治疗同意书》上签名入病历22.8临床上一次用血或备血超过1600ml时要履行报批手续22.9发热患者需要输血时应将体温降至38℃22.10术前自身贮血亲友互助献血等执行《临床输血技术规范》有关规定23.临床输血管理实施细则一、总则血液资源必须加以保护、合理科学用血避免浪费杜绝不必要的输血。临床医师和输血医护人员应严格掌握输血适应症凡患者血红蛋白低于100g/L、血球压积低于30%的属输血适应症正确应用成熟的临床输血技术和血液保护技术包括成分输血和自体输血。二、输血申请.�•申请输血应由临床经治医师逐项填写《临床输血申请单》由主治医师核准全名签字连同病人血样于预定输血日期前送交输血科血库备血。•临床输血一次用血、备用量超过1600毫升时履行报批手续须经输血科医师会诊由科室主任签名后报医务处批准急症除外。急诊用血事后应当按照以上要求补办手续。•决定输血治疗前经治医师应向病人或其直系亲属说明输注同种异体血的不良反应和经血液传播相关性疾病的可能性征得病人或其直系亲属的同意并在《临床输血治疗同意书》上全名签字。《临床输血治疗同意书》入病历保存。无直系亲属签字的无自主意识患者的紧急输血应报医院职能部门或主管领导同意、备案并记入病历保存。•4、术前自身输血由输血科血库负责采血和贮存经治医师负责输血过程的医疗监护。手术室内的自身输血包括急性等容性血液稀释、术野自身血回输及术中控制性低血压等医疗技术由麻醉科医师负责实施。•亲友互相献血由经治医师等对患者家属进行动员在输血科填写登记表到血站或卫生行政部门批准的采血点无偿献血由血站进行血液的初检、复检并负责调配血液。•患者治疗性血液细胞去除、血浆置换等由经治医师申请输血科或有关科室参加制定治疗方案并负责实施由输血科和经治医师负责治疗过程和监护。•对于RHD阴性和其它稀有血型患者应采用自身输血、同型输血和配合型输血。•新生儿溶血病如需换血疗法由经治医师申请主治医师核准患儿家属或监护人签字同意由血站和医院输血科血库人员共同实施。•输血科建立血浆置换、病理细胞采集等治疗性输血记录本并有实施操作人员、临床监护医师签字记录患者治疗同意书等。•输血科建立稀有血型患者登记并有配血、用血登记。•新生儿溶血病换血治疗要有患儿家属或监护人签字同意并签定《临床输血治疗同意书》。输血科有新生儿溶血病换血治疗登记记录和配血实验结果登记。三受血者血样采集与送检•确定病人输血后医护人员持《临床输血申请单》和贴好标签的试管当面核对患者姓名、性别、年龄、病案号、病室/门诊、床号、血型和诊断采集血样。•采集血标本须使用有批文的一次性注射器和输血器材并在有效期内使用用后消毒灭菌、毁型处理。•由医护人员或专门人员将受血者血样与《临床输血申请单》送交输血科血库双方进行逐项核对。四、交叉配血•受血者交叉配血试验的血标本必须是输血前3天之内的。•输血科血库要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样常规复查受血者和供血者ABO血型正、反定型并检查患者RhD血型正确无误时可进行交叉配血。•凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板应ABO血型同型输注。•两人值班时交叉配血试验由两人互相核对一人值班时操作完毕后自己复合并填写配血试验报告。•血型鉴定•对病人红细胞ABO血型鉴定必须包括正定型(即用抗A、抗B作红细胞定型)和反定型即用A、B、O标准红细胞与患者血清做反定型以及红细胞RhD血型鉴定。出生3个月内的婴儿红细胞ABO血型鉴定只做正定型可不做反定型。•血型鉴定结果报告应复核后必须由输血科血库两人核对全名签字节假日或夜间一人值班时血型鉴定后自己复核全名签字。•血型鉴定结果须记录在登记本上并保存十年。•交叉配血试验前进行相关检查•应用交叉配血试验的血样作抗体筛选试验急诊输血除外。如病人48小时内多次输血应重新做抗体筛选试验。抗体筛选试验结果阳性应进行抗体的特异性鉴定。•应用交叉配血试验的血样作HBsAg、、Anti-HCV、Anti-HIV1/2、梅毒项目检测。•复查病人ABO血型正、反定型和RhD血型。•复查供血者ABO血型和RhD血型交叉配血•交叉配合试验保证病人血液制品输注为相容性输注包括•交叉配合试验应包括主次侧•病人血清与供血者红细胞之间反应为主侧病人红细胞与供血者血浆之间反应为次侧。•交叉配血试验必须在盐水相试验基础上加做检查IgG血型抗体非盐水相试验如间接抗人球蛋白法、酶法、聚凝胺法、玻璃珠法和凝胶法等。•交叉配血试验应由输血科血库两名互相核对全名签字一名操作并查对病人与血液制品相关信息另一名再次复核病人与血液制品相关信息节假日或夜间一人值班时操作完毕后由操作者填写配血试验试验结果自己复核后全名签字。•交叉配合试验结果必须记录在专用登记本上并保存十年。五、发血•配血合格后由医护人员持输血处方单到输血科血库取血。•末办理用血申请手续的不得发血。•取血与发血的双方必须共同查对患者姓名、性别、病案号、门急诊/病室、床号、血型有效期及配血试验结果以及保存血的外观等准确无误时双方共同签字后方可发出。六、凡血袋有下列情形之一的一律不得发出•标签破损、漏血•血袋有破损、漏血•血液中有明显凝块•血浆呈乳糜状或暗灰色•血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒•未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血•红细胞层呈紫红色•过期或其它须查证的情况。•血液发出后受血者和供血者的血样保存于2—6℃冰箱,至少7天,查原因。•血液发出后不得退回。七、输血•输血前由两名医护人员核对交叉配血报告单及血袋标签各项内容检查血袋有无破损渗漏血液颜色是否正常。准确无误方可输血。•输血时由两名医护人员带病历共同到患者床旁核对患者姓名、性别、年龄、病案号、门急诊/病室、床号、血型等确认与配血报告相符再次核对血液后用符合标准的输血器进行输血。•取回的血应尽快输用不得自行贮血。输用前将血袋内的成分轻轻混匀避免剧烈震荡。血液内不得加入其它药物。•输血前后用静脉注射生理盐水冲洗输血管道。连续输用不同供血者的血液时前一袋血输尽后用静脉注射生理盐水冲洗输血器再接下一袋血继续输注。•输血过程中应先慢后快再根据病情和年龄调整输注速度并严密察受血者有无输血不良反应如出现异常情况应及时处理减慢或停止输血用静脉注射生理盐水维持静脉通路立即通知值班医师和输血科值班人员及时检查、治疗和抢救并查找原因做好记录。•疑为溶血性或细菌污染性输血反应应立即停止输血用静脉注射生理盐水维护静脉通路及时报告上级医师在积极治疗抢救的同时做以下核对检查1)、核对用血申请单、血袋标签、交叉配血记录2)、核对受血者及供血者ABO血型、RhD血型。用保存于冰箱中的受血者与供血者血样、新采集的受血者血样、血袋中血样重测ABO血型、RhD血型、不规则抗体筛选及交叉配血试验包括盐水相和非盐水相试验3)、立即抽取受血者血液加肝素抗凝剂分离血浆观察血浆颜色测定血浆游离血红蛋白含量4)、立即抽取受血者血液检测血清胆红素含量、血浆游血红蛋白含量、血浆结合珠蛋白测定、直接抗人球蛋白试验并检测相关抗体效价如发现特殊抗体应作进一步鉴定5)、如怀疑细菌污染性输血反应抽取血袋中血液做细菌学检验6)、尽早检测血常规、尿常规及尿血红蛋白7)、必要时溶血反应发生后5-7小时测血清胆红素含量。•输血完毕医护人员对有输血反应的应逐项填写患者输血反应回报单并返还输血科血库保存。输血科血库每月统计上报医务处科。•输血完毕后医护人员将输血记录单交叉配血报告单贴在病历中�.并将血袋送回输血科血库至少保存一天。八其它•对平诊患者和择期手术患者经治医师应当动员患者自身储血、自体输血、或者动员患者亲友献血。医疗机构要把上述工作情况作为评价医生个人工作业绩的重要考核内容。自身储血、自体输血由在治医疗机构采集血液。患者亲友献血由血站采集血液和初、复检并负责调配合格血液。•医疗机构应针对医疗实际需要积极推行血液成分输血逐步提高成分血的临床应用比例至少应当达到卫生部规定的要求。•提高红细胞使用率减少新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆的使用率。•医疗机构科研用血由省级人民政府卫生行政部门负责审批。•医疗机构因应急用血需要临时采集血液的必须符合以下情况1边远地区的医疗机构和所在地无血站或中心血库2危及病人生命急需输血而其它医疗措施所不能替代3具备交叉配血及快速诊断方法检验乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、艾滋病病毒抗体的条件。医疗机构应当在临时采集血液后十日内将情况报告当地县级以上人民政府卫生行政主管部门。•医疗机构临床用血的医学文书资料随病历保存临床用血的医学文书种类和格式由各省、自治区、直辖市人民政府卫生行政部门制定。24.急诊输血管理制度1、急诊输血是指为挽救患者生命赢得手术及其它治疗时间而必须施行的紧急输血2、急诊输血应尽快建立静脉通路最好静脉插管同时采集配血用的血标本3、有多名医护人员处理一批创伤患者时应指定1名医生负责血液申请并与血库联络。每位患者的血标本及申请单应有唯一性编号4、在短时间内发出了另外1份针对同一名患者的输血申请单应使用与第一份申请单和血标本上相同的标识编号5、急性失血患者应首先用液体复苏先晶后胶补液扩容后收缩压如能维持在10.66KPa80mmHg左右可暂时不输血6、对于那些低血压急需手术的患者应尽快送手术室手术室是给创伤患者输血的理想场所7、急诊输血时应尽快将《输血申请单》及血标本送血库并在申请单右上方标明“紧急”或“火急”字样禁止口头医嘱申请用血8、在未知患者Rh(D)血型的情况下对于有生育能力的女性包括女童不轻易发给Rh(D)阳性O型红细胞9、如同型血液及其成分的贮存量不能满足紧急输血的需要建议进行相容性输血紧急情况发血⑴血液申请者在输血申请单上注明临床要求如同型血不需要配血等并有上级医师签字。⑵快速检测受血者ABO和RhD血型选择同型血液发出。发血单注明"未经配血"。⑶保留血袋及与血袋相连的小管以便事后核对血型和配血。⑷如果没有血标本或没有时间做血型鉴定应尽可能发O型Rh阴性血液。⑸如果有时间应尽可能做完整的输血前免疫学检查。25.输血前告知制度25.1输血前经治医生应与病人或病人家属谈话说明输血的必要性并告知输血可能面临的风险25.2告知病人同种异体输血有可能引起输血不良反应或经血传播的疾病25.3征得病人或其家属同意后签订《输血治疗同意书》然后填写完整的《临床输血申请单》经治医生/上级医师签字方可实施输血治疗。25.4《输血治疗同意书》入病历保存。26.信息反馈制度26.1输血科要定期向临床各科室发送输血信息反馈单同时备有反馈登记本。26.2科主任指定专人负责定期收回已由临床医生填写好的信息反馈单逐项审阅登记处理对重要问题的处理要及时与临床科室联系、商议。26.3要耐心听取病人的意见并做好病人意见登记、处理。26.4全科人员要重视信息反馈工作虚心听取临床医生、病人的意见与要求重要意见及时登记认真改进。26.5对临床科室因疾病诊治需要的特殊输血要求应结合实际尽力配合。26.6建立并不断完善电脑信息网络。27.消毒管理制度27.1贮血冰箱内严禁存放其它物品每周用75%酒精擦拭消毒一次冰箱内空气培养每月一次无霉菌生长或培养皿90mm细菌生长菌落<8CFU/10分钟或<200CFU/m3为合格并做好记录。27.2贮血专用冰箱每月化霜、消毒一次。27.3室内空气、操作台面、地面消毒每日早晚两次用含有效氯mg/L的消毒液擦拭操作台面、地面进行消毒紫外线灯每日照射一次。27.4玻片和试管血样废气标本试管、一次性使用的输血用品、血袋、血制品残留物按数量回收可放入专用收集袋直接焚烧不能采用焚烧方法的必须先用含有效氯mg/L的消毒液浸泡60min针筒要打开后方可毁形处理。27.5操作人员需戴一次性口罩与帽子、一次性手套进行操作。27.6一次性用品使用后应装入专用医用垃圾袋分类收集生活垃圾和医用垃圾要严格分开。28.控制输血感染方案28.1积极配合市献血办施行无偿献血制度。无偿献血是保证安全输血的前提和基础。28.2严格执行消毒管理制度及输血前相关传染病检查制度。28.3积极推广科学合理用血其是安全输血的重要组成部分。28.4严格掌握输血适应征——避免不必要的输血。28.5大力提倡成分输血有助于提高输血的安全性。28.6努力为临床提供更安全的病毒灭活的血浆。28.7积极开展自体输血新技术杜绝输血感染疾病的发生。28.8严格执行查对制度保证血液质量。29.临床用血计划制度29.1根据《献血法》第十六条及《临床用血管理办法》第四条规定临床用血应当遵照合理、科学的原则制定用血计划。29.2输血科根据以往临床用血统计数字合理制定贮血计划保持一定库存量一般不少于三天的急救用血量。29.3经常进行数据分析以数据说明贮血计划的合理性克服随意性与盲目性。29.4做好用血计划库存血量是上一年同期全月用血总量的1/4~1/8血型按O、A、B、AB大约3:3:3:1比例贮血库存量。30.成份输血考核办法30.1临床医生要严格执行《临床输血技术规范》掌握成份输血指征和各种成份血的作用和适应证。30.2严格按照以下规定执行贫血hb<70g/L输红细胞缺乏凝血因子PT/PTT>1.5倍输新鲜冰冻血浆缺少血小板<50³10/9/L输血小板缺乏纤维蛋白原<80ml/L输冷沉淀物。30.3根据患者病情需要选择适宜的成份决不可千篇一律都输全血对可输可不输的疾病坚决不输禁止输安慰血。30.4适合输成份血的病人坚决不给全血临床80%的输血病人是需要某种血液成份而不适合输全血。30.5各种成份血的输注剂量要符合标准治疗剂量一次要给足才能达到预期疗效。30.6成份输血使用情况作为评价医生个人工作业绩的重要内容。30.7医院定期对成份输血工作进行监督检查对滥用全血造成血液浪费的行为进行批评教育对成份输血做得好的科室和个人给予表彰30.8按山东省要求“三级医院”成份输血率>90%“二级医院”成份输血率>70%。第二章输血科工作职责第三章输血科操作规程1、血液入库检查规程医疗机构对血站核查内容如下1血站的名称及其许可证号2献血者的姓名或条形码、血型3血液品种4采血日期及时期5有效期及时间6血袋编号或条形码7储存条件。*检查血液外观颜色血浆分层血袋有无破碎标签有无破损。*有无溶血、凝块。*送血时严格双方核对制度不合格血液退回血站。*复查供血员血型1%抽检供血者感染指标。*对输血反应及有血液质量问题及时反馈供血单位。*科室成立血液质量监督小组。2、血液的发放操作规程发血者须凭临床科提血单或病历发血。取血者必须为用血科室的医务人员病人亲属和卫生员不得取血。(2)发血顺序一般按先采先用的原则(特殊用血例外)。(3)发血时必须与取血者共同查对受血者姓名、性别、年龄、血型、住院号、交叉配血结果及血液种类确保准确无误后方可发出。(4)从冰箱内取出全血和血液成份需轻拿轻放对光检查上层血浆或悬液外观须澄明、无溶血、分界线清晰血袋完整无污损袋签清楚。(5)用手轻轻挤压血袋检查导管热合是否严密血袋有无渗漏。如有问题不得发出。(6)逐项填写发血登记卡要求字迹清楚。和取血者共同查对后双方签字。(7)新鲜冰冻血浆从低温冰柜取出时要轻取轻放以免碰破浆袋。置37℃水浴融化化好后及时取出检查血型、标签、澄明度、日期、包装登记后交取血者立即输注。(8)血液发出后须将血标本保留至少3天以上在患者无不良反应后方可弃去。(9)血液及血液成份发出后不得退回输血科。(10)输血后病区应将输血器具连同反应卡于24h内送回输血科袋内余血应保留3天以备发生输血反应时检查3、疑诊病人输血不良反应的检查处理规程。1ABO与RhD血型溶血性输血反应*二人或以上医护人员共同核对病人《临床输血申请单》、血袋标签、交叉配血试验记录及病史各项内容*输血科两名工作人员共同核对病人及供血者ABO血型、RhD血型。各自单独应用保存于冰箱中的病人与供血者血样、新采集的病人血样、血袋中血样重新检测ABO血型、RhD血型、不规则抗体筛选及交叉配血试验包括盐水和聚凝胺配血试验*立即抽取病人血液加肝素抗凝剂分离血浆观察血浆颜色测定血浆游离血红蛋白含量*立即抽取病人血液检测血清间接胆红素含量、血浆结合珠蛋白含量、直接抗人球蛋白试验并检测相关抗体效价如发现特殊抗体应作进一步鉴定严密观察直接抗人球蛋白试验变化情况。*记录病人出入量严密观察尿色变化尽早检测血常规、尿常规及尿血红蛋白*必要时溶血反应发生后57小时测血清间接胆红素含量。2疑似细菌污染性输血反应*每半小时一次共2次抽取病人血液做细菌学检测*由输血科血库通知供血机构*在病人或/和直系亲属、医院、供血机构三方共同在场的情况下抽取血袋中血液做细菌学检验并封存血袋备检。4、临床输血检测技术操作规程1、基本操作技术11血样标本采集与处理、受血者血样的采集与送检(1)患者确定输血后医护人员持输血申请单和贴好标签的试管当面核对患者姓名、性别、年龄、病案号、病室/门急诊、床号、血型和诊断采集血样。准确无误后抽取受血病人静脉血3ml分别由患者及抽血者签字危重病人或签字不便者可有陪护代签。并将输血申请单上有病人姓名、床号、联号、抽血者的标签粘贴于采血试管。(2)输血科工作人员接收血标本时应与申请单核对若发现血标本标记与申请单不符或血标本有严重溶血应退回科室建议重采(3)血标本最多保存三天若继续输血需重新采集(4)血标本防止细菌繁殖以免给血型鉴定和配血带来困难12血清取静脉血沿管壁缓缓注入干燥试管内待血液自然凝固后用玻棒轻轻拨动血块使之与管壁分离(或置37℃水浴中保温1h使血块收缩或置4℃冰箱中过夜定型的患者血清在定型完毕后予以贴有病人姓名、床号、血型标记的标签低温保存一个月以备查用。13红细胞悬液制备取受检者血液于试管内加入8—10倍生理盐水轻轻混匀使红细胞完全悬浮于生理盐水中以rmin离心2—3min弃去上清液即成压积红细胞。用于鉴定血型的红细胞在使用前应用生理盐水洗涤1—3次以除掉附着于细胞表面的血型物质、血浆蛋白等成份在抗人球蛋白试验中被抗体致敏的红细胞一般至少洗涤3次压积红细胞用生理盐水稀释配成3—5红细胞悬液2、红细胞血型鉴定21ABO血型鉴定ABO血型鉴定必须包括用已知抗体型特异性的试剂血清检查红细胞的抗原(正向定型红细胞定型)以及用已知血型的红细胞检查血清中的抗体(反向定型血清定型)。血型分类血型红细胞上抗原血清中抗体AA抗BBB抗AO—抗A、抗BABA、B—(1)材料小试管数支平板(玻板、白磁板)、离心机、显微镜、生理盐水、玻棒、记号笔I经鉴定合格的两套试剂血清每套有。“抗A”、“抗B”、“抗AB”三种试剂血清和已知血型的“A”、“B”、“O”三种红细胞。(2)操作方法:【试管法】检查前整理台面核对标签试管架上只放特检血取6支小试管3支用于正向定型分别注明抗A、抗B、抗AB;另外3支用于反向定型分别注明A细胞、B细胞和O细胞正向定型试管分别加入相应试剂血清2清再加待检者5红细胞悬液2滴,混匀置室温5min反向定型试管中分别加入待检者血清2滴再加相应5红细胞悬液2滴混匀置室温5min将6支试管以3000rmin离心15s取出试管轻轻摆动先用肉眼观察红细胞有无凝集再用显微镜观察结果再次核对后填写登记本及报告单或输入计算机试剂血清、红细胞血型鉴定正向定型反向定型待检者血型抗A抗B抗A，BA细胞B细胞Ｏ细胞－——+—+－+++++++——+—+—————OABAB【平板法】取洁净平板(白磁板或玻板等)用记号笔划出反应小格于正向定型侧注明抗A、抗B、抗AB反向定型侧注明A细胞、B细胞、O细胞。在正向定型侧小格中加入相应试剂血清1滴再加入待检者5红细胞悬液1滴在反向定型侧加入待检者血清1滴再加入5试剂红细胞悬液1滴。摇动平板数次3—5min后先用肉眼观察凝集现象再以显微镜观察15min报告结果。如有怀疑须作试管法对照(3)注意事项。操作者必须认真细致严格查对准确报告血型结果。鉴定血型时室温宜在20—24℃以免产生假阳性可疑有冷凝集时必须放置水浴加温加温时间酌情而定。抗A、抗B、抗AB试剂血清效价>64亲和力在15s内出现凝集3min时凝块>lmm3冷凝集素效价<4应另备有一套合格的试剂血清作对照所有待检血型均应做正、反向定型防止误定血型22ABO亚型鉴定在A抗原中主要亚型为A1和A2B亚型一般比A亚型更少。可根据以下原则区分ABO亚型红细胞与抗A、抗A1、抗B及抗AB的凝集程度;红细胞上H物质活性的强弱;血清中是否存在抗A1;分泌型人的唾液中A、B和H物质吸收放散试验亚型吸收弱放散强A1、A2亚型鉴定举例如下(1)材料抗A1抗H试剂血清待检者5红细胞悬液已知5A1、A2红细胞悬液56℃其它材料同ABO血型鉴定(3)操作方法取洁净平板一块用记号笔划3小格分别注明待检者、A1和A2对照按标记分别加相应的5%红细胞悬液1滴3格中各加入抗A1血清1滴混匀摇动平板数次。置室温15min后观察结果(4)结果判读对照A1红细胞应凝集A2红细胞不凝集待检者凝集为A1型不凝集为A2型。23Rh血型鉴定与临床密切相关的主要有D、C、E、c、e抗原以及相应的特异性抗体。红细胞上有D抗原者临床统称为Rh阳性反之为Rh阴性。常规先做D抗原检测必要时再做C、E、c、e检测。(1)材料Rh试剂血清抗D、抗C、抗E、抗c、抗e;pH55磷酸盐缓冲液;蛋白水解酶(如菠萝酶);37℃水浴箱待检者红细胞阴性、阳性对照红细胞其它材料同ABO血型鉴定(2)操作方法【蛋白水解酶法】(包括菠萝酶、木瓜酶、无花果酶、胰蛋白酶等)1)以菠萝酶介质法为例取菠萝酶1g加pH55磷酸盐缓冲液100ml充分振摇混匀置37℃水浴30min心沉淀后取上清液即为1的菠萝酶液。放置4℃将待检者红细胞及对照红细胞用生理盐水洗涤1次(有溶血的红细胞除外)配成5的红细胞悬液。取小试管15支分3排每排试管按D、C、c、E、e顺序标记每排第1、2、3、4、5管分别加入抗D、抗C、抗c、抗E、抗e血清各1滴。第1、2、3排各管分别加入待检者红细胞悬液、阳性对照、阴性对照红细胞悬液各1滴。每排各管加1菠萝酶液1滴。混匀置37℃水浴箱中1h观察结果若无凝集2)结果判读。倾斜试管肉眼观察如肉眼观察有疑问者再作镜检。阳性对照管凝集阴性对照管不凝集待检者试管有凝集者为阳性无凝集者为阴性分别记录阳性或阴性。抗Rh(D)阴性者应作间接抗人球蛋白试验以免遗漏Du型。3)附注凡查出体内有Rh抗体者应发给阴性血型卡。需要时一方面动员捐出血液另一方面须提高警惕以免接受不相合的血液而发生意外。【盐水介质法】1)试管法取小试管3支分别注明抗D、阳性和阴性对照于各管中加入室温盐水反应活性的抗D血清1滴于抗D、阳性对照及阴性对照试管中分别加入相应的5待检者红细胞(盐水、血清)悬液、阳性红细胞及阴性红细胞悬液各1滴轻轻混匀于3000rmin离心15s;取出轻轻摆动观察有无凝集结果判读阳性:抗D试管凝集。阴性对照凝集阳性对照凝集阴性抗D试管不凝集阴性对照不凝集阳性对照凝集。2)平板法取洁净平板1块用记号笔划出反应小格分别于左、中、右注明抗D、阴性对照和阳性对照;分别加入将室温盐水反应的抗D血清各1滴;于抗D、阳性对照和阴性对照小格内分别加入待检者5红细胞悬液、阳性红细胞和阴性对照红细胞悬液各1滴用干净玻棒将二者充分混合连续轻轻倾斜转动平板一般在2min内观察结果或按试剂说明书规定的时间观察结果。结果判读同试管法。24Du型鉴定某些Rh(D)抗原很弱对某些抗Rh(D)血清显阳性对另一些抗Rh(D)血清则显阴性。而显阳性反应的抗体血清效价并不很高。这种抗原称为Du常被误定为Rh阴性。Du型常在抗人球蛋白间接试验中显阳性因此凡初步检查为Rh阴性者均应作此试验予以证实。(1)酶介质凝集试验法用三份来自不同个体或不同批号的抗血清重新鉴定疑为Rh阴性的受检者红细胞。具体方法同Rh(D)鉴定法。同时作阴、阳性对照结果均符合而受检红细胞与数种抗血清的作用结果不一致阴、阳性均有则受检者为Du型。(2)抗人球蛋白试验法同时将受检红细胞与抗D血清作抗人球蛋白间接试验结果若为阳性也证明受检者是Du型。25MN血型鉴定免疫抗M和抗N抗体能引起早产、死胎、新生儿溶血病及配血不合等。遇有异常有条件时可考虑作此检查。(1)材料抗M和抗N试剂血清待检者5红细胞悬液已知M和N阴、阳性对照5红细胞悬液。(2)操作方法取干净平板一块用记号笔划出3排反应小格每排2小格。3排分别标明待检者、阳性对照、阴性对照每排左侧标明M右侧标明N。每排左侧加抗M血清1滴右侧加抗N血清1滴。按标记各加待检者、已知M阳性及阴性和N阳性及阴性5红细胞悬液1滴。用玻棒分别混匀。转动平板数次室温下准确放置15min后观察结果。(3)结果判读。对照阴、阳对照正确凝集待检者左侧凝集为M型右侧凝集为N型两侧均凝集为MN型。(4)注意事项因大多数抗M及抗N血清系动物免疫制备所得故应严格遵守反应时间否则易出现假阳性。由于抗M和抗N血清系动物免疫所得因此阴性对照常显示弱阳性反应如果阴性对照的结果比弱反应强则试验结果无效。26P血型鉴定抗Pl几乎都是IgM免疫球蛋白抗体不能经过胎盘故不会引起新生儿溶血病。抗P1也很少引起体内溶血。但可引起配血不合。如需要时可作此项检查。(1)材料抗P1试剂血清待检者5红细胞悬液已知P1和P25红细胞悬液(2)操作方法取洁净平板一块划出反应小格分别标明待检者、P1及P2对照}于小格内分别加入抗P1血清1滴然后按标记各加待检者、P1及P2的5红细胞悬液1滴用玻棒分别混匀转动平板数次放置室温15min观察凝集反应。(3)结果判读对照P1对照凝集P2对照不凝集待检者凝集为P1型反之为P2型(罕见型例外)。(4)注意事项严格掌握反应时间否则易出现假阳性。贮存的红细胞反应能力减弱使红细胞定型造成困难因此作P血型定型时,要求血样本较新鲜。27Lewis血型鉴定Lewis血型系统是一个可溶性抗原存在于唾液和血浆中血型系统由红细胞吸附血浆中的Lewis物质而获得。Lewis抗体常见于从未接受过输血或任何已知抗原刺激的人因此认为是天然产生的。Lewis抗体主要为IgM因此引起溶血性输血反应极为罕见也未见引起新生儿溶血病。(1)材料抗Lea、抗Leb试剂血清待检者5红细胞悬液已知Le(a+b-)Le(a-b+)的5红细胞悬液其它材料同ABO血型鉴定(2)操作方法取6支小试管排成2排每排试管分别标明待检者、Lea和Leb对照于第1、2排试管中分别加入抗Lea血清和抗Leb血清各l滴。按标记各加待检者、已知Lea+b-和Le(a+b+)的5红细胞悬液各1滴。混匀3000rmin离心15s。斜持试管轻轻晃动观察红细胞有无凝集。(3)结果判读。Lea对照1排试管凝集2排试管不凝Leb对照1排试管不凝集2排试管凝。待检者1排试管凝集为Le(a+b-)型2排试管凝集为Le(a-b+)型1、2排试管均凝集为Le(a+b+)型1、2排试管均不凝集者Le(a-b-)型若出现弱反应应作间接抗人球蛋白试验。(4)注意事项血清中存在丰富的Lewis物质在人体外可在定型时被中和故须洗涤红细胞方可定型。Lewis抗体在盐水中凝集红细胞时凝集块易碎取出试管不宜摇动以免出现假阴性。采用高效价单克隆抗Lea、抗Leb血清试剂定型以免遗漏血型。28血型物质检测A、B、H抗原不但存在于人的红细胞上而且广泛分布在组织及体液中Lewis血型抗原存在亍唾液和血浆中这些物质称为血型物质它们为多糖类一半抗原。唾液中的血型物质能特异地与相应抗体结合从而抑制该抗体与相应红细胞发生凝集因此将待检者唾液与抗血清混合静置一段时间后再加入相应红细胞观察红细胞凝集与否如不凝集待检者为分泌型反之为非分泌型。因此检测唾液中各种血型物质可作为判定血型的一个辅助证据。(1)材料5A、B、O和Le(a+b-)红细胞悬液与待检者相同标化的抗A、抗B、抗H、抗Lea血清已知的分泌型和非分泌型唾液其A、B、O型与待检者相同烧杯或粗口试管、煮锅等其它材料同A、B、O血型鉴定。(2)操作方法1)唾液的留取将自然流出的唾液5—10ml盛入干燥清洁的容器(小烧杯、三角瓶或粗口试管等)内在水浴中煮沸10min(以灭活能使血型物质不活化的唾液酶同时也破坏常见存在于唾液中的抗A及抗B)。以3000rmin离心10min留取上清液备用弃去透明的半固态物质。2)试剂血清修正液的制备取小试管分成4排每排5管第1排分别标明A1一A5第2排B1-B5第3排H1-H5第4排Lea1—Leb5。各排从第2管开始每管加生理盐水O1ml。第1—4排的第1和第2管分别加抗A、抗B、抗H、及抗Lea血清01ml从第2管开始倍量稀释。于第1、2、3、4排各管分别加5的A型、B型、O型和Le(a+b-)型红细胞盐水悬液01ml。振摇试管架使之混匀置室温1h后观察结果。每排以出现“4+”凝集的最高稀释度为最适稀释度。3)唾液中血型物质的检测准备唾液做阳性或阴性对照。对ABH分泌者使用已知Se(分泌型)和Sese(非分泌型)人的唾液。对Lewis分泌者使用Lea阳性和Lea阴性人的唾液。能够用对红细胞试验的结果来选择这些对照。阳性对照应该有Le(a+b-)的红细胞阴性对照应该有Le(a-b-)的红细胞试剂对照用生理盐水。取4支试管对ABH试验分别标明待检者、分泌型、非分泌型和生理盐水。对Lewis试验分别标明待检者、Lewis阳性、Lewis阴性和生理盐水。按标记分别加入最适稀释度抗血清1滴。在相应的试管中加入唾液1滴在对照管中加入生理盐水1滴。混合后在室温孵育30min中和抗体。各加入5洗涤并与抗体相对应的红细胞悬液1滴。混合后置室温孵育1h或15min后以3000rmin离心15s观察结果。结果判读对照分泌型不凝集非分泌型凝集待检者不凝集为分泌型凝集为非分泌型Lewis试验对照阳性不凝集阴性凝集待检者不凝集为Lea阳性凝集者为Lea阴性4)血型物质效价测定:取小试管10支依次编号。第2—10管分别加入生理盐水01ml。第1、2管各加入待检者唾液01ml自第2管起作倍量稀释第10管为对照管。每管加相应的经修正过的试剂血清(待检者为A型则用抗AB型用抗BO型用抗HAB型用抗A和抗BLea+用抗Lea)0、1ml。混匀后置室温(20℃)30min每管再加入与待检者同型的5红细胞悬液1滴。混合后放置室温(20℃)lh结果判读先看对照的第10管然后依次看1—9管以抑制红细胞凝集的最后一管的稀释倍数为该唾液中血型物质的效价。(3)注意事项漱口后留取唾液以免食物残渣混入为增加唾液分泌待检者可嚼蜡、石蜡膜或橡皮条但不能嚼口香糖或其它含糖或蛋白质的食品如果当日试验用血型物质可置4℃冰箱保存若暂时不用可置低温冰箱保存可保留其活性几年每次试验最好备有分泌型和非分泌型唾液作对照。3、交叉配合试验31盐水交叉配合试验(1)操作方法【试管法】取小试管2支主管标明受血者血清(PS)+供血者红细胞(DC)次管标明供血者血清(DS)+受血者红细胞(PC)字样。分离受血者和供血者血清配置5红细胞悬液。于主管中加入受血者血清(PS)2滴和供血者5红细胞悬液(DC)2滴。亍次管中加入供血者血清(DS)2滴和受血者5红细胞悬液(PC)2滴混匀作交叉配合。以3000rmin离心15s条件允许时试管可置入37℃水浴30min取出先用肉眼观察再以镜检判断结果a凡主测有凝集现象时不能输用。b如主测不凝集但次测有凝集或异型输血(指O型输给其它型A或B型输给AB型时)如果供血者血清中抗体是免疫性抗体也不可输入。c如果是天然凝集素其效价高凝集力强也最好不输以防破坏受血者的红细胞。复核标本管填写检验报告单及交叉配合试验登记。【玻片法】(无离心机的情况下可采用)取玻片1块主测标明PS+DC次侧标明DS+PC。主侧加受血者血清2滴和供血者5红细胞1滴;次侧加供血者血清2滴和受血者5红细胞1滴。③分别混匀室温(22—25℃)放置15min④摇动玻片观察凝集结果(2)注意事项长期重复多次输血的患者不但交叉配合困难且易发生输血反应。宜选择没有输用过的供血者的血液加用酶法配血。若还有反应用吸收抑制试验、吸收放散试验明确抗体后输血若为白细胞、血小板抗体可试输除去白细胞、血小板的血液。32低离子溶液(LISS)法交叉配合试验在交叉配血规程中使用LISS有两种方法是直接悬浮红细胞于LISS中是把LISS加到血清和生理盐水悬浮的细胞混合物中在交叉配合过程中必须严格遵守LISS使用说明LISS‘‘悬浮’’的交叉配血步骤如下(1)用等渗盐水将受血者、供血者红细胞洗涤2次。(2)用LISS将受血者、供血者红细胞洗涤1次。(3)将上清液全部倾出再用LISS将受血者、供血者的红细胞配成5的悬液。(4)主管加受血者血清2滴供血者红细胞LISS悬液2滴。(5)次管加供血者血清2滴受血者红细胞LISS悬液2滴。(6)混匀即刻离心以3000rmin离心15s。(7)观察结果并检查上清液有无溶血松动细胞有无凝集记录观察结果。(8)置于37℃孵育15—30min即刻离心观察有无凝集(9)生理盐水洗涤3次倾掉上清液加抗人球蛋白试剂2滴混合离心观察记录凝集结果。(10)阴性试验加1滴IgG致敏的红细胞离心并观察有无凝集如果没有凝集重做试验全过程。(11)交叉配血的任何步骤中没有溶血或凝集则认为交叉配血相合。33蛋白水解酶法交叉配合试验蛋白水解酶包括木瓜酶、菠萝酶、无花果酶、胰蛋白酶等。有些不完全抗体只能用蛋白水解酶方法才能检测出来因此必要时要加用此法。(1)操作方法取试管4支分别标明主、次管和阴性、阳性对照。主管加受血者血清、供血者5的洗涤红细胞盐水悬液及酶液各1滴混合次管加供血者血清、受血者5的洗涤红细胞盐水悬液及酶液各1滴混合。置37℃水浴中30-60min后以AB型血清加O型Rho(D)阳性红细胞作阴性对照;以抗Rho(D)试剂加O型Rho(D)阳性红细胞作阳性对照。(2)结果判读对照阴性无凝聚阳性有凝集主次管先眼观后镜检同Rh血型鉴定酶介质法。34抗人球蛋白法交叉配合试验(1)材料受血者与供血者血清和洗涤3次的5红细胞悬液。抗人球蛋白试剂、抗D试剂、AB型血清洗涤3次的标准Rho(D)阳性5红细胞悬液。(2)操作方法取小试管5支分别标明PS+DC、DS+PC、阳性、阴性及自身对照并按下表加入反应物。抗人球蛋白交叉配合试验反应物(滴数)PS+DCPC+DS阳性对照阴性对照自身对照受血者血清2———2供血者血清—2———抗D试剂——2——AB型血清———2—受血者5红细胞—1——1供血者5红细胞1————RhD阳性5红细胞——11—将试管置于37℃水浴中致敏1h离心弃去上清液再用生理盐水洗涤红细胞3次次吸干上清液各加生理盐水1滴。各试管加入抗人球蛋白试剂1滴。混匀后以3000rmin离心15s观察结果。结果判读先看阴性、阳性对照是否符合再看PS+DC、PC+DS管是否凝集无凝集的能够输用。必要时作显微镜检查。(3)注意事项抗人球蛋白交叉配合试验用受血者血清不用血浆。如遇受血者血清具有某种抗体时根据抗体的特异性选择适合的献血者。自身免疫性溶血性贫血者有时血清中有非特异性抗体则对供血者均可出现凝集须参照自身对照管若PS+DC管反应较弱受血者急需输血能够试输。35血型鉴定和交叉配合试验中的假阴性和假阳性除因工作人员将样本弄错、结果误判(未在显微镜下观察结果)及报告单错写外尚有下述几点必须注意。【假阴性】1诊断试剂放置室温或使用过久凝集效价降低以致误将A2型定为O型A2B型定为B型。2血清与红细胞比例不当血清太少或红细胞悬液过淡。3严重贫血、老人、小儿患者凝集效价较低。保存过久的红细胞其凝集力减弱易致假阴性宜用标准红细胞将血型校对准确。4观察时间不够15min。5当血清中有与红细胞相合的抗体同时又有补体存在可导致溶血误认为不凝集因此必须注意观察交叉试管中的溶血现象。【假阳性】1室内温度过高、过低样本干燥均可影响结果室温低于15℃以下凝集。2红细胞悬液过浓或诊断试剂被污染出现全凝集现象遇此情况时须另取新鲜样本更换合格的诊断试剂。3多凝集少数人的红细胞可被部分正常人的血清凝集�.但又非属配合禁忌�.可用吸收抑制试验或吸收放散试验明确血型后�.再做交叉配合�.4红细胞悬液过浓或形成缗钱状。5某些疾病(如球蛋白增高性疾病或慢性炎症等)可致假阳性。6胎盘血内含有的华通胶、输过右旋糖酐、试验时所用的器皿不洁均易产生假阳性可洗涤红细胞后配血。36交叉配血注意事项(1)配血方法繁简不一各有利弊可根据检查抗体的性质选择不同的方法。(2)一般天然抗体选用盐水介质配血方法简单时间短。免疫抗体可选用木瓜酶或抗人球蛋白配血。(3)紧急用血来不及查血型和配血可复查库存“O”型血的血型确为“O”型可不配血直接发给临床抢救用留有时间查清病人血型交叉配血后继续输血。(4)配血人员要注意临床诊断、输血史、妊娠史以便判断可能为冷凝集、假凝集、自家凝集、免疫性抗体的存在。(5)冷凝集造成的假凝集可把配血管放入37℃水浴箱3分钟(6)假凝集可把配血混液取1滴于玻片上并立即加1滴生理盐水混匀放显微镜下观察轻度假凝集可因滴加盐水而散开。(7)若献血者血液造成的假凝集可用生理盐水洗涤红细胞三次。(8)自家凝集配血较困难时可定准血型临床观察输入。(9)配血人员精力要高度集中严防出现差错配血标本、标准血清用完及时放入冰箱内保存以防细菌繁殖。4、抗体检测机体因受输血或妊娠刺激而产生免疫抗体遇相应抗原可致溶血性输血反应或新生儿溶血症以A、B、O免疫性抗体多见应引起重视。41完全抗体检查法(1)材料受检者血清及5红细胞生理盐水悬液对象(供血者或孕妇的丈夫)5红细胞生理盐水悬液(2)操作方法取小试管4支分成2排每排2管分别标明“受血者”和。自身对照”。按下表进行操作同时做两份一份放置37℃水浴一份放置20℃室温完全抗体检查反应物(滴数)受检者自身对照受检者血清22供血者或孕妇丈夫红细胞1—受检者红细胞—1(3)结果判读若自身对照阴性受检者凝集表示受检者有抗体若自身对照凝集必须用受检者红细胞吸收受检者血清至不凝集以排除自身抗体。42不完全抗体检测【抗人球蛋白试验(Coombs试验)】(1)抗人球蛋白直接试验用于新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血、药物诱导性溶血及输血而导致的同种免疫。方法如下被检者细胞悬液取被检者红细胞用生理盐水洗涤3次末次洗涤后弃尽上清液配成5红细胞悬液。对照细胞悬液取O型Rho(D)阳性红细胞洗涤3次末次洗涤后弃尽上清液加等体积抗D血清37℃水浴30—60min然后洗涤3次末次洗涤后弃尽上清液配成5胞悬液。取试管3支分别标明被检者、阴性及阳性对照。被检管、阴性和阳性对照管分别加入被检者、阴性及阳性对照5细胞悬液1滴。被检管及阳性对照管各加最适稀释度抗人球蛋白试剂1滴阴性对照管加生理盐水1滴。混匀以3000rmin离心15s后观察结果。结果判断阴性阴性不凝集阳性凝集被检者不凝集阳性阴性不凝集阳性凝集被检者凝集如被检者为阴性再加对照细胞悬液l滴混匀离心后观察结果。如凝集表明操作无误如不凝集则表明被检者红细胞洗涤不充分应重新制备被检者红细胞悬液再试验(2)抗人球蛋白间接试验主要用于检测细胞与致敏抗体在体外反应的状况可用在人抗体检查、血型鉴定和配合性试验及特殊研究等如抗人球蛋白消耗试验、混合凝集反应、白细胞和血小板抗体检测试验等配组谱细胞的选择抗人球蛋白间接试验是检查患者血清中有无游离的不完全抗体故需选择含相应抗原的红细胞作试剂红细胞被检血清中含抗e抗原所选配组谱细胞若无e抗原则会漏检。现在配组谱细胞由试剂供应单位成套供应取试管若干支分别标明被检者自身对照、阴、阳性对照及配组谱细胞编号(根据供应单位说明书)被检者自身对照管、配组谱细胞管各加待检者血清2滴阴性及阳性对照管各加抗D血清2滴被检自身对照管加5的自身红细胞2滴配组谱细胞管按编号加入相应的配组谱细胞各2滴阳性对照管加Rho(D)阳性的配组谱红细胞2滴阴性对照管加Rho(D)阴性的配组谱红细胞2滴。试管内反应物混匀置于37℃水浴1h然后以生理盐水洗涤3次末次洗涤后弃尽上清液加最适稀释度抗人球蛋白试剂2滴以3000rmin离心15s后观察结果根据配组谱细胞抗原谱(供应单位提供)得出结论。【蛋白水解酶法】蛋白水解酶包括木瓜酶、菠萝酶、胰蛋白酶、无花果酶等一般酶的一步法使用木瓜酶或菠萝酶I酶