牡荆子油胶丸祛痰作用的研究

牡荆子油胶丸祛痰作用的研究[摘要]目的：通过实验证明牡荆子油胶丸具有祛痰作用。方法：采用水提取法提取牡荆子油，通过比较牡荆子与水的二种不同比例的提取结果，确定牡荆子油的最佳提取方法；通过老鼠等动物实验探究牡荆子的祛痰作用。结果：正式试验中成功制备牡荆子油胶丸并探索得到牡荆子具有祛痰作用。结论：成功提取出牡荆子挥发油，制备出牡荆子油胶丸，并通过动物实验得出牡荆子油胶丸可能具有祛痰作用的论断。[关键词]牡荆子油胶丸；油胶丸；祛痰作用；小鼠酚红实验。牡荆子味道味苦、辛，性平，为马鞭草科植物牡荆的成熟果实；在我国分布广泛，资源丰富。牡荆子为传统药用植物，民间用其茎、叶、花来清暑、止咳、利尿等。许多药理实验已经证明从牡荆子、叶提取出的挥发油具有祛痰、镇咳及平喘作用,且对漫性气管炎有较好的疗效,黄荆子根煎剂有扩张支气管作用和抑菌作用；此外牡荆制剂可以应用于小儿咳喘、治疗肠炎，并且细菌性痢疾、脚癣等亦有报导。本研究旨在通过牡荆子果实，利用相关的现代药学技术与设备制备牡荆子油胶丸并通过简单的动物实验对牡荆子油胶丸的祛痰作用进行探讨。1原理小鼠酚红实验。指示剂酚红，经小鼠腹腔注射给药后，经腹腔吸收，可部分地由支气管粘液腺分泌进入气道，有祛痰作用的药物会使支气管的分泌液增加，同时经呼吸道粘膜排出的酚红也随之增加。因而可以通过观察呼吸道排出的酚红的量而探究药物的祛痰作用。酚红在碱性环境下呈现红色，通过一定的方法将呼吸道中分泌的液体洗出，并测出酚红的量，从而确定在碱祛痰药物的作用强弱及其剂量关系。2器材实验动物实验小白鼠（由南华大学实验动物中心提供）。试剂蒸馏水、酚红试剂、碳酸氢钠试剂、氢氧化钠、酚红试剂等。实验仪器烧杯、棉花、天平、玻璃棒、剪刀、注射器、试管、试管架等。3方法（1）分别取牡荆子油胶丸3、6、9、12粒，分离出内容物于试管中，并分别用食用油稀释至10ml，分成对应的四组a、b、c、d；另取10ml食用油做为空白对照组e。（3）每组取小鼠6只，随机分成五组，禁食不禁水10小时，以0.2ml10/g，给A、B、C、D四个小组的小白鼠灌胃给药，E组给以相应剂量的食用油。灌胃给药1小时后,腹腔注射0.5%酚红溶液0.5ml/只，在30min后脱颈椎处死动物，固定于蛙板上手术分离气管。用注射器吸5%的碳酸氢钠溶液o.5ml注入气管,反复抽吸3次，最后用注射器将灌洗液抽出并注入试管中。合并洗出液，对洗出液进行离心或沉淀，然后用分光光度计测酚红的浓度，分析祛痰作用，进行统计学的t检验，与对照组进行比较。4注意事项4.1小鼠呼吸道冲洗：实验动物分组和给药方法相对应，腹腔注射0.5ml酚红后30分钟，将小鼠脱颈椎处死或者用湿布闷死亦可，仰位固定于蛙板上；固定牢固后，剪开颈前皮肤，分离出气管。将8号针头插入位于喉头的气管内，大概0.3cm；用丝线将气管下端结扎并且固定（防止灌洗液流入肺部），用注射器吸取5%NaHCO31ml，并用针头来回灌洗呼吸道3次，最后一次将灌洗液抽出注入试管中，得到灌洗液。按上述方法连续操作3次，冲洗共9次，收得灌洗液约3ml，置于试管中，静置或离心后取上清液，用分光光度计检测浓度，进行统计学处理，并与对照组相比较。4.2酚红标准液的配制：用分析天平准确称取50毫克的酚红，以5%NaHCO3溶解，使每1ml含酚红1000μg。然后稀释两次，配成毫升含酚红10.0、5.0、2.5、1.0、0.5μg每毫升，用722型分光光度计测定不同浓度酚红的吸光度值，并建立吸光度和浓度的方程。4.3给药后到处死动物的时间应该尽可能的准确：解剖时，须将气管周围组织去除干净，气管段周围如果粘附有血液应立即用滤纸等吸收干净，否则会造成污染。在呼吸道冲洗的过程中，碳酸氢钠的用量要准确，灌洗过程中动作要轻，以免针头穿破气管和肺脏，注射器的抽推速度也必须尽可能相同（保证各次灌洗液的抽吸的平行），并尽可能将洗液抽尽。5结果取30只20至30克的小白鼠，随机分成五组，分别灌胃给予0.06、0.12、0.18、0.24mg/L的药液，并用食用油做空白对照，进行小鼠酚红实验。得出每组小鼠呼吸道酚红的平均浓度，通过小鼠酚红实验得到了一些相关数据，并对这些数据进行了统计学分析。将牡荆子油胶丸配成一定的浓度梯度，并对小鼠进行灌胃给药、腹腔注射酚红试剂；根据数据可以看出，在一定范围内，呼吸道酚红的浓度随着生药的浓度增大而增加，所以灌胃给药有增强小鼠气管排泌酚红的作用，牡荆子油胶丸具有促进呼吸道的分泌作用其作用，且随剂量而增强。所以牡荆子油胶丸可能具有祛痰作用。6讨论牡荆为马鞭草科牡荆属植物，牡荆以果实、根茎和叶入药。牡荆与同届械物黄荆，相似，互为药用,而无严格区别。民间早已广泛地应用，并主要用于治疗痢疾肠炎、预防中署、咳嗽哮喘、风寒感冒、腹痛吐泻、关节风湿痛、脚癣及治疗预防疟疾等。近来对牡荆的化学成份,药理作用及临床应用已有许多报导。从不同种的牡荆属植物中提出黄酮、假靛谷母、挥发油、牡荆三萜等类成份。药理实验已经证明牡荆子、叶所含的挥发油具有镇咳、祛痰及平喘作用,且对漫性气管炎有较好的疗效,黄荆子根煎剂有扩张支气管作用和抑菌作用；此外牡荆制剂可以应用于小儿咳喘、治疗肠炎，并且细菌性痢疾、脚癣等亦有报导。7结论通过动物实验，将动物分组，进行组间和组内相对照；利用小鼠酚红实验，对小白鼠给予不同浓度的牡荆油和相同浓度的酚红试剂，并分析小鼠气管中酚红的浓度差异，以此探究牡荆子的祛痰作用。取适量的牡荆子油胶丸进行动物实验，将30只小白鼠分成5组，并得出牡荆子油胶丸可能具有祛痰作用；但是由于实验动物数量较少，还有笔者的理论水平和实验操作水平有限，实验结果的可靠性有待进一步考察。[参考文献][1]田代华.实用中药辞典[M].人民卫生出版社.2013，1455-1457.[2]徐淑云,卞如廉,陈修.药理实验方法学[M].第三版，人民卫生出版社，2013:1311.[3]孙绍美,宋玉梅,刘新民.祛痰宁对大、小鼠的祛痰作用[J].中国实验动物学杂志，2013，4（1）：6-8.[4]邱腾颖，谢振家，刘诗洪，邓元