CAR-T 细胞制备设备无菌操作技师（中级）考试试卷及答案

CAR-T细胞制备设备无菌操作技师（中级）考试试卷及答案CAR-T细胞制备设备无菌操作技师（中级）考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分，共10分）1.CAR-T细胞制备的无菌操作局部区域需达到______级洁净度。2.细胞培养基过滤除菌常用滤膜孔径为______μm。3.超净工作台操作时，物品应放置在台面______区域（靠近/远离风口）。4.细胞培养箱内CO₂浓度通常维持在______%。5.无菌操作前手部消毒常用______（消毒剂名称）。6.CAR-T制备中分离单个核细胞常用______离心机。7.无菌物品开启后未污染的有效使用时间一般为______小时。8.细胞冻存常用冷冻保护剂是______（缩写）。9.超净工作台HEPA过滤器更换周期通常为______年。10.无菌操作避免交叉污染的核心原则是______（如“不同区域物品不混用”）。二、单项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.下列不属于CAR-T制备核心设备的是？A.流式细胞仪B.生物安全柜C.冰箱D.打印机2.无菌操作时手套污染后应立即？A.酒精擦拭继续用B.更换新手套C.无菌水冲洗D.继续操作3.细胞培养基灭菌优先采用？A.高压蒸汽B.过滤除菌C.干热灭菌D.紫外线4.细胞复苏正确步骤是？A.37℃水浴快速解冻B.室温缓慢解冻C.-80℃解冻D.液氮解冻5.超净工作台开启后需运行多久可操作？A.5-10分钟B.15-20分钟C.30分钟D.1小时6.细胞污染的典型表现是？A.细胞贴壁B.培养基浑浊C.形态规则D.颜色不变7.超净台内物品摆放应？A.随意放置B.靠近风口C.远离风口D.堆满台面8.病毒转导常用设备是？A.离心机B.培养箱C.转导仪D.显微镜9.细胞培养箱湿度维持在？A.50%B.70%C.90%D.100%10.无菌物品包装要求是？A.密封完好B.破损可用C.无标签D.潮湿可用三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.无菌操作前准备包括？A.洗手消毒B.换无菌服C.开超净台D.整理台面2.CAR-T制备常见污染类型有？A.细菌B.真菌C.支原体D.病毒3.超净台日常维护要点？A.清洁台面B.换HEPA滤器C.检气流速度D.紫外线消毒4.细胞冻存注意事项？A.缓慢降温B.加冷冻保护剂C.快速解冻D.标记细胞信息5.CAR-T核心制备步骤？A.单个核细胞分离B.T细胞激活C.病毒转导D.细胞扩增6.无菌操作防污染措施？A.减少走动B.关超净台侧门C.不交谈D.定期消毒7.培养箱日常检查项目？A.CO₂浓度B.温度C.湿度D.水质8.需定期校准的设备？A.离心机转速B.培养箱温度C.流式细胞仪D.冰箱温度9.无菌物品储存要求？A.阴凉干燥B.远离污染源C.有效期内用D.随意堆放10.CAR-T常用耗材？A.无菌培养瓶B.移液管C.离心管D.注射器四、判断题（共10题，每题2分，共20分）1.超净台开启后可立即操作。（）2.细胞培养基可用高压蒸汽灭菌。（）3.手套被酒精浸湿无需更换。（）4.冻存管直接放入液氮保存。（）5.无菌物品开启后可无限期使用。（）6.超净台气流方向从外向内。（）7.培养箱温度维持37℃。（）8.支原体污染肉眼可见。（）9.超净台内可放私人物品。（）10.T细胞激活需添加细胞因子。（）五、简答题（共4题，每题5分，共20分）1.简述CAR-T制备中无菌操作的核心原则。2.说明超净工作台日常维护的关键步骤。3.简述细胞复苏的操作要点及注意事项。4.说明CAR-T病毒转导的无菌操作要求。六、讨论题（共2题，每题5分，共10分）1.讨论CAR-T制备中常见无菌污染风险及防控措施。2.分析CAR-T设备校准对细胞质量的影响及关键校准要点。---答案部分一、填空题答案1.A级2.0.223.靠近4.55.75%酒精6.低速大容量7.48.DMSO9.1-210.不同操作区物品不混用二、单项选择题答案1.D2.B3.B4.A5.A6.B7.B8.C9.C10.A三、多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABD5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABC10.ABCD四、判断题答案1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.√五、简答题答案1.核心原则：①环境：保持A级洁净度，超净台气流稳定；②人员：穿无菌服、戴双层手套，减少走动交谈；③物品：耗材/试剂灭菌，开启后4小时内使用；④操作：动作轻柔，物品靠近风口，避免交叉接触；⑤应急：污染后立即隔离，更换耗材并消毒。2.维护步骤：①每日清洁：75%酒精擦拭台面/内壁；②消毒：操作前后紫外线照射30分钟；③气流检测：每周用烟雾测试方向（从内向外）；④滤器更换：1-2年换HEPA滤器，记录更换时间；⑤校准：每月校准风速、温度，确保符合标准。3.操作要点：①快速解冻：37℃水浴摇晃1-2分钟至剩少量冰渣；②稀释：加预热培养基，1500rpm离心5分钟去冻存液；③计数：台盼蓝染色测活细胞率；注意：避免反复冻融，冻存管提前标记，解冻后1小时内处理。4.无菌要求：①环境：在生物安全柜A级区操作，防气溶胶扩散；②人员：戴双层手套、隔离衣，不交谈；③耗材：用病毒转导专用无菌耗材；④操作：轻柔移液防气泡，转导后密封培养瓶；⑤消毒：用含氯消毒剂处理台面及废弃物。六、讨论题答案1.污染风险及防控：①风险：人员手套破损、超净台气流失效、耗材过期、试剂支原体污染；②防控：人员定期培训，操作前消毒；每日清洁超净台，每周测洁净度；耗材检查有效期，开启后限时用；试剂过滤除菌，定