2026年生物医学实验技术操作规范试题

2026年生物医学实验技术操作规范试题一、单选题（每题2分，共20题）说明：下列每题只有一个正确答案。1.在进行细胞培养时，若培养基pH值持续偏高（>7.4），可能的原因是？A.CO₂浓度过高B.培养基中碳酸氢钠含量不足C.温度过低D.细胞代谢过快2.高效液相色谱（HPLC）分析中，若检测到基线漂移，最可能的原因是？A.色谱柱老化B.流动相pH值不稳定C.检测器未校准D.进样器堵塞3.实验室中处理含氯废液时，应使用的化学试剂是？A.硫代硫酸钠（Na₂S₂O₃）B.氢氧化钠（NaOH）C.硫酸（H₂SO₄）D.乙酸（CH₃COOH）4.电镜样品制备过程中，干燥处理的目的是？A.减少样品变形B.增加样品导电性C.杀灭微生物D.提高样品透明度5.实验室冰箱应定期清洁消毒，主要目的是？A.防止温度波动B.消除细菌污染C.延长压缩机寿命D.降低能耗6.WesternBlot实验中，若条带模糊，可能的原因是？A.抗体浓度过高B.转膜不充分C.电泳电压过低D.激光强度过大7.实验室中使用移液器时，若吸取不准确，可能的原因是？A.移液器未归零B.吸头未完全密封C.吸取速度过快D.空气湿度影响8.PCR实验中，若扩增效率低，可能的原因是？A.引物二聚体形成B.DNA模板浓度过高C.循环数设置过多D.退火温度过低9.实验室中储存液氮的钢瓶应放置在？A.阳光直射处B.通风良好的阴凉处C.金属容器内D.低温冷冻柜中10.血液样本采集后，若未立即处理，应置于？A.室温台面B.4℃冰箱C.沸水中D.37℃水浴中二、多选题（每题3分，共10题）说明：下列每题有多个正确答案。1.实验室生物安全柜的使用规范包括？A.操作前检查紫外灯是否正常B.禁止在柜内进行明火操作C.定期更换HEPA滤网D.手部消毒后才能接触样品2.电镜样品固定液的主要成分有？A.甲醇B.丙酮C.戊二醛D.甲醛3.实验室废弃物分类应包括？A.化学废液B.生物医疗废物C.废弃玻璃器皿D.废弃移液器吸头4.实验室中使用电子天平时，需注意？A.称量前调零B.防止气流干扰C.快速称量以节省时间D.保持干燥清洁5.WesternBlot实验中，若条带出现拖尾，可能的原因是？A.蛋白质降解B.抗体浓度过高C.电泳缓冲液pH值不当D.蛋白质过载6.实验室中储存试剂的原则包括？A.密闭保存B.远离热源C.按有效期先后使用D.标签清晰7.电镜样品制备中，脱水处理的目的是？A.替代细胞内水分B.防止样品收缩C.提高导电性D.增强样品硬度8.实验室中处理锐器废弃物应使用？A.防刺穿容器B.消毒液浸泡C.直接丢弃D.压实后焚烧9.PCR实验中，若出现非特异性扩增，可能的原因是？A.引物设计不合理B.DNA模板纯度低C.循环数设置过高D.退火温度过高10.实验室中储存血清应避免？A.重复冻融B.直接接触金属容器C.长期暴露于室温D.使用未消毒的吸管三、判断题（每题2分，共15题）说明：下列每题判断对错。1.实验室中使用酒精灯时，可以用另一只酒精灯点燃。（×）2.高效液相色谱（HPLC）分析中，流动相需每天脱气。（√）3.电镜样品制备中，干燥处理只能使用自然风干。（×）4.实验室中含氯废液可直接倒入下水道。（×）5.WesternBlot实验中，封闭时间过长会导致背景增强。（√）6.移液器吸取液体时，应缓慢推拉活塞。（√）7.PCR实验中，DNA模板浓度越高越好。（×）8.实验室中储存液氮的钢瓶盖应拧紧。（√）9.血液样本采集后，若未立即处理，会导致凝血反应加速。（√）10.电镜样品制备中，固定液浓度越高越好。（×）11.实验室废弃物可随意混放。（×）12.实验室中使用电子天平时，需佩戴防静电手套。（√）13.WesternBlot实验中，抗体浓度越高越好。（×）14.PCR实验中，引物二聚体形成会导致扩增效率降低。（√）15.实验室中储存血清可重复冻融多次。（×）四、简答题（每题5分，共5题）说明：根据要求简要回答问题。1.简述高效液相色谱（HPLC）分析中，流动相pH值选择的原则。2.解释电镜样品制备中，脱水处理的必要性。3.列举WesternBlot实验中，提高条带亮度的3种方法。4.说明实验室中处理锐器废弃物时，需遵循的3项安全原则。5.描述PCR实验中，引物设计的关键要点。五、论述题（每题10分，共2题）说明：根据要求详细回答问题。1.结合实际案例，论述实验室生物安全柜的正确使用步骤及常见错误操作。2.分析电镜样品制备过程中，每个步骤对最终成像质量的影响，并提出优化建议。答案与解析一、单选题答案1.B2.B3.A4.B5.B6.B7.B8.D9.B10.B解析：1.培养基pH值偏高通常因碳酸氢钠含量不足，无法有效缓冲CO₂影响。8.PCR扩增效率低常因退火温度过低导致非特异性结合。二、多选题答案1.B,C,D2.C,D3.A,B,C,D4.A,B,D5.A,B,C6.A,B,C,D7.A,B,D8.A,B,D9.A,B,D10.A,B,C,D解析：3.实验室废弃物需分类处理，包括化学、生物、玻璃、塑料等。10.血清储存应避免反复冻融、金属污染、高温及直接接触吸管。三、判断题答案1.×2.√3.×4.×5.√6.√7.×8.√9.√10.×11.×12.√13.×14.√15.×解析：3.干燥处理可使用临界点干燥或乙醇梯度法，非仅自然风干。15.血清反复冻融会导致蛋白质变性，应尽量避免。四、简答题答案1.HPLC流动相pH值选择原则：-应与待测物及色谱柱兼容（如酸性物质用pH<7的缓冲液，碱性物质用pH>7的缓冲液）。-避免pH值过高导致柱效下降或检测器漂移。-使用适当缓冲液（如磷酸盐、醋酸盐）维持稳定。2.电镜样品脱水必要性：-替代细胞内水分，防止样品收缩变形。-提高样品导电性，利于电子束穿透。-防止有机溶剂腐蚀样品。3.提高WesternBlot条带亮度的方法：-优化抗体浓度（1-2μg/mL为宜）。-延长孵育时间（抗体孵育1-2h）。-使用增强型ECL底物。4.处理锐器安全原则：-使用防刺穿容器（如利器盒）。-避免用手直接接触锐器。-定期检查容器是否满载。5.PCR引物设计要点：-Tm值（退火温度）在55-65℃为宜。-避免引物内部互补或形成二聚体。-针对特异性靶序列设计。五、论述题答案1.生物安全柜使用及错误操作：-正确步骤：开机预冷→打开前/后窗（单向流）→放置无菌耗材→操作→关闭窗口→紫外灭菌（30min）→排气。-常见错误：操作时关闭前窗、在