2025年兽医化验员专项考核试卷及答案

2025年兽医化验员专项考核试卷及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.兽医实验室进行犬瘟热病毒RT-PCR检测时，若样本RNA提取后A260/A280比值为1.6，最可能的原因是（）A.RNA降解B.蛋白质污染C.盐离子残留D.多糖污染2.革兰氏染色过程中，若脱色时间过长，革兰氏阳性菌会被误判为（）A.阳性B.阴性C.无染色D.紫色3.牛布鲁氏菌血清学检测中，虎红平板凝集试验的反应温度要求是（）A.4℃B.25℃C.37℃D.56℃4.用于鸡新城疫抗体检测的血凝抑制试验（HI）中，红细胞悬液的常用浓度是（）A.0.5%B.1%C.2%D.5%5.实验室处理疑似高致病性禽流感病毒样本时，必须在（）级生物安全柜中操作A.ⅠB.ⅡC.ⅢD.Ⅳ6.犬细小病毒快速检测试纸条的检测原理是（）A.酶联免疫吸附试验（ELISA）B.胶体金免疫层析技术C.免疫荧光法D.聚合酶链式反应（PCR）7.血涂片制作时，推片与载玻片的夹角应为（）A.15°-20°B.25°-30°C.35°-40°D.45°-50°8.奶牛隐性乳房炎检测常用的试剂是（）A.甲苯胺蓝B.溴甲酚紫C.酚酞D.亚甲蓝9.实验室高压蒸汽灭菌的标准参数是（）A.100℃，15分钟B.121℃，15-20分钟C.135℃，5分钟D.160℃，2小时10.猪伪狂犬病gE抗体检测的主要目的是（）A.区分野毒感染与疫苗免疫B.评估疫苗免疫效果C.检测病毒载量D.诊断急性感染11.犬C反应蛋白（CRP）检测常用于评估（）A.贫血程度B.炎症反应C.肾功能D.肝功能12.细菌分离培养时，若样本中杂菌较多，应选择（）培养基A.营养琼脂B.麦康凯琼脂C.血琼脂D.巧克力琼脂13.马传染性贫血琼脂扩散试验中，判定阳性的标准是（）A.抗原孔与抗体孔间出现清晰沉淀线B.抗原孔周围出现云雾状沉淀C.抗体孔颜色变深D.两孔间无沉淀线14.实验室检测犬瘟热病毒时，最常用的样本是（）A.尿液B.粪便C.眼鼻分泌物D.唾液15.鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）检测中，琼脂扩散试验的反应时间通常为（）A.2-4小时B.6-8小时C.12-24小时D.48小时以上16.实验室配制0.9%生理盐水时，需称取NaCl的量为（）A.0.9g溶于100mL水B.9g溶于100mL水C.0.9g溶于1000mL水D.9g溶于1000mL水17.犬弓形虫IgM抗体阳性提示（）A.既往感染B.急性感染C.疫苗免疫D.隐性感染18.牛结核菌素皮内试验的注射部位是（）A.颈部上1/3处B.尾部皮褶C.耳根部D.肩胛部19.实验室检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）时，RT-PCR的引物设计应针对（）A.核衣壳蛋白（N蛋白）基因B.囊膜糖蛋白（GP5）基因C.RNA聚合酶基因D.膜蛋白（M蛋白）基因20.血球计数板计数白细胞时，通常计数（）个大方格A.1B.4C.5D.9二、判断题（每题1分，共10分）1.采集动物血液样本时，抗凝剂EDTA会影响血小板形态，因此不适合用于血常规检测。（）2.革兰氏染色中，结晶紫是复染剂，沙黄是初染剂。（）3.鸡白痢全血平板凝集试验中，阳性反应表现为均匀的蓝紫色凝块。（）4.实验室废弃的病原体培养物需先高压灭菌，再按医疗废物处理。（）5.犬瘟热病毒属于副黏病毒科，对乙醚敏感。（）6.检测牛结核时，皮内试验结果判定需测量注射部位的皮厚差，而非红肿面积。（）7.猪瘟荧光抗体检测中，阳性细胞会发出绿色荧光，阴性细胞无荧光。（）8.血涂片染色时，瑞氏染液与缓冲液的比例应为1:1，染色时间5-10分钟。（）9.布鲁氏菌血清学检测中，虎红平板试验阳性即可确诊感染，无需进一步验证。（）10.实验室使用的移液枪需定期校准，校准周期一般不超过12个月。（）三、简答题（每题8分，共40分）1.简述兽医实验室样本采集的基本原则。2.列举5种常用的细菌染色方法，并说明其适用场景。3.简述ELISA检测抗体的操作步骤（以间接法为例）。4.牛传染性胸膜肺炎（牛肺疫）补体结合试验中，如何判断试验结果是否有效？5.实验室检测犬瘟热病毒时，若RT-PCR结果为假阴性，可能的原因有哪些？四、案例分析题（每题15分，共30分）案例1：某宠物医院送检1份犬血液样本，主诉犬精神沉郁、呕吐、腹泻3天。实验室进行血常规检测，结果显示：白细胞计数2.1×10⁹/L（参考值6-17×10⁹/L），淋巴细胞比例12%（参考值12-30%），中性粒细胞比例85%（参考值60-77%），血小板计数50×10⁹/L（参考值175-500×10⁹/L）。同时进行犬细小病毒快速检测试纸条检测，结果显示C线和T线均显色。问题：（1）血常规结果提示犬可能存在哪些异常？（2）结合试纸条检测结果，初步诊断为何种疾病？（3）为进一步确认，可建议进行哪些检测？案例2：某猪场送检5份猪血清样本，要求检测猪伪狂犬病（PR）gE抗体。实验室采用ELISA方法检测，结果显示：样本1OD值0.12（临界值0.2），样本2OD值0.35，样本3OD值0.08，样本4OD值0.42，样本5OD值0.19。问题：（1）ELISA检测PRgE抗体的原理是什么？（2）根据检测结果，判断各样本的阳性/阴性状态。（3）若样本2的OD值为0.35（临界值0.2），但实验室质控品（阳性对照）OD值为0.15（预期应≥0.3），此时检测结果是否可信？为什么？答案一、单项选择题1.B2.B3.C4.B5.B6.B7.B8.B9.B10.A11.B12.B13.A14.C15.C16.D17.B18.A19.A20.B二、判断题1.×（EDTA适合血常规，肝素影响白细胞形态）2.×（结晶紫是初染剂，沙黄是复染剂）3.×（阳性表现为蓝紫色凝块，阴性为均匀混悬液）4.√5.√6.√7.√8.×（瑞氏染液与缓冲液比例1:2-1:3，染色时间8-15分钟）9.×（需结合其他试验（如试管凝集）确认）10.√三、简答题1.基本原则：①无菌操作：避免外源性污染；②适时采集：根据疾病发展阶段（如急性期采集病原，恢复期采集抗体）；③正确部位：选择目标病原富集的组织或体液（如呼吸道疾病采鼻拭子，肠道疾病采粪便）；④足够量：满足检测需求；⑤标记清晰：记录动物信息、采集时间、样本类型；⑥规范保存：按检测要求选择冷藏、冷冻或添加保护剂。2.常用细菌染色方法及适用场景：①革兰氏染色：区分革兰氏阳性菌（紫色）与阴性菌（红色），是细菌分类的基础；②抗酸染色（齐-尼染色）：检测分枝杆菌（如结核杆菌），阳性菌呈红色，背景蓝色；③美蓝染色：快速观察细菌形态（如巴氏杆菌）；④特殊结构染色（如荚膜染色、芽胞染色）：观察细菌荚膜（如链球菌）或芽胞（如炭疽杆菌）；⑤鞭毛染色：观察细菌鞭毛（如沙门氏菌），用于运动性判断。3.间接法ELISA检测抗体步骤：①包被：将纯化的抗原（如病毒蛋白）包被于酶标板孔，4℃过夜；②封闭：加入牛血清白蛋白（BSA）或脱脂奶粉，37℃孵育1小时，阻断非特异性结合位点；③加样本：加入待检血清（1:100稀释），37℃孵育1小时，洗涤3次；④加二抗：加入酶标记的抗宿主IgG抗体（如HRP标记的兔抗犬IgG），37℃孵育1小时，洗涤3次；⑤显色：加入底物（如TMB），37℃避光反应15分钟；⑥终止：加入终止液（2MH2SO4），酶标仪读取OD450nm值；⑦判读：样本OD值≥2.1倍阴性对照OD值为阳性。4.牛肺疫补体结合试验结果有效性判断：①溶血对照（补体+溶血素+红细胞）应完全溶血（无沉淀）；②抗原对照（抗原+补体+红细胞）应无溶血（沉淀）；③阳性血清对照（阳性血清+抗原+补体+红细胞）应无溶血；④阴性血清对照（阴性血清+抗原+补体+红细胞）应完全溶血；若上述对照均符合预期，试验有效；若任一对照不符合，需重新试验。5.RT-PCR假阴性可能原因：①样本采集不当：未在病毒血症期采样（如犬瘟热后期病毒量低）；②样本保存不当：RNA降解（未及时冷冻或反复冻融）；③核酸提取失败：裂解不充分或污染抑制剂（如血红蛋白、肝素）；④引物/探针设计不合理：与病毒变异株序列不匹配；⑤反应体系问题：Taq酶失活、dNTP浓度不足；⑥扩增条件错误：退火温度过高或循环次数不足；⑦操作污染：交叉污染导致目标核酸被稀释。四、案例分析题案例1：（1）血常规异常：白细胞总数显著降低（中性粒细胞比例升高，淋巴细胞比例正常），血小板减少（提示凝血功能异常）。（2）初步诊断：犬细小病毒感染（试纸条C、T线均显色为阳性，结合白细胞减少、血小板减少符合细小病毒病特征）。（3）进一步检测：①RT-PCR检测病毒核酸（确认病毒存在）；②粪便电镜观察病毒颗粒（形态学验证）；③生化检测（评估肝肾功能损伤）；④血气分析（判断酸碱平衡）。案例2：（1）原理：包被PRVgE蛋白抗原，待检血清中的gE抗体与抗原结合，加入酶标二抗（抗宿主IgG）后，