2025年大学生物技术（生物技术技巧）试题及答案

2025年大学生物技术（生物技术技巧）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题共30分）（总共10题，每题3分，每题只有一个选项符合题意，请将正确选项填在题后的括号内）1.以下哪种生物技术常用于基因的体外扩增？（）A.细胞融合技术B.聚合酶链式反应技术C.蛋白质印迹技术D.核酸分子杂交技术2.在蛋白质纯化过程中，能根据蛋白质电荷差异进行分离的方法是（）A.凝胶过滤层析B.离子交换层析C.亲和层析D.疏水层析3.下列关于限制性内切酶的说法，正确的是（）A.只能识别一种特定的核苷酸序列B.其作用是将DNA连接起来C.不作用于自身细胞的DNAD.广泛存在于各种生物中4.用于检测细胞内特定蛋白质表达水平的常用技术是（）A.RT-PCRB.WesternblotC.NorthernblotD.Southernblot5.以下哪种生物技术可用于改造生物体的遗传性状？（）A.细胞培养技术B.基因编辑技术C.蛋白质结晶技术D.酶活性测定技术6.质粒作为基因工程载体，其特点不包括（）A.能自我复制B.含有多个限制酶切割位点C.具有抗生素抗性基因D.是染色体外的细胞器7.在细胞融合实验中，常用的诱导细胞融合的方法是（）A.紫外线照射B.电场诱导C.高温处理D.酸碱处理8.以下哪种生物技术可用于大规模生产生物制品？（）A.单克隆抗体制备技术B.植物组织培养技术C.发酵工程技术D.基因克隆技术9.蛋白质的一级结构是指（）A.氨基酸的种类和排列顺序B.多肽链的折叠方式C.亚基的聚合方式D.蛋白质的空间构象10.基因工程中，构建重组DNA分子常用的工具酶是（）A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.限制性内切酶D.逆转录酶第II卷（非选择题共70分）11.（10分）简述PCR技术的基本原理和反应过程。12.（15分）阐述蛋白质分离纯化的主要方法及其原理。13.（15分）请说明基因工程的基本操作步骤及其关键技术。（15分）阅读以下材料，回答问题材料：在一项生物技术实验中，研究人员将某种外源基因导入小鼠细胞中，试图观察该基因对小鼠生理功能的影响。实验过程中，采用了脂质体介导的基因转染方法。经过一段时间的培养和观察，发现部分小鼠出现了一些异常生理现象。问题：（1）脂质体介导基因转染的原理是什么？（2）如何检测导入的外源基因是否成功表达？（3）针对小鼠出现的异常生理现象，可能的原因有哪些？（15分）阅读以下材料，回答问题材料：某生物制药公司利用生物技术生产一种新型疫苗。在疫苗生产过程中，采用了细胞培养技术，通过培养特定的细胞系来表达疫苗抗原。为了提高疫苗的产量和质量，公司对培养条件进行了优化，包括培养基的成分、温度、pH值等。问题：（1）细胞培养技术在疫苗生产中有哪些优势？（2）简述优化培养条件对提高疫苗产量和质量的作用机制。（3）如何确保生产出的疫苗符合质量标准？答案：1.B2.B3.A4.B5.B6.D7.B8.C9.A10.B11.PCR技术的基本原理是在体外模拟DNA体内复制过程，通过高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤的循环，使特定DNA片段得到大量扩增。反应过程：首先将模板DNA加热至95℃左右使其变性解链；然后降温至55℃左右，引物与模板DNA单链互补结合（退火）；最后在72℃左右，TaqDNA聚合酶以dNTP为原料，从引物的3′端开始合成与模板互补的DNA链（延伸）。经过多次循环，目标DNA片段呈指数增长。12.蛋白质分离纯化的主要方法及原理：凝胶过滤层析根据蛋白质分子大小不同进行分离，大分子先流出，小分子后流出；离子交换层析利用蛋白质所带电荷差异，在离子交换树脂上进行吸附和解吸分离；亲和层析基于蛋白质与特定配体的特异性亲和力，如抗原与抗体、酶与底物等，将蛋白质分离；疏水层析依据蛋白质表面疏水性差异，在疏水介质上进行分离，高盐浓度下疏水性强的蛋白质保留，低盐浓度下洗脱。13.基因工程基本操作步骤及关键技术：获取目的基因，可通过PCR扩增、从基因组文库或cDNA文库中获取等方法；构建基因表达载体，用限制性内切酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子，这是关键步骤之一；将重组DNA分子导入受体细胞，常用方法有转化、转染、显微注射等；目的基因的检测与鉴定，检测是否导入成功可用DNA分子杂交技术，检测是否转录用Northernblot，检测是否翻译用Westernblot等。14.（1）脂质体是一种人工膜泡，它可以与细胞膜融合，将包裹在其中的外源基因导入细胞。脂质体的磷脂双分子层结构与细胞膜相似，能够在细胞膜表面吸附并与之融合，从而使外源基因进入细胞内部。（2）检测外源基因是否成功表达可采用Westernblot技术，通过检测细胞内特定蛋白质的表达情况来判断；也可用RT-PCR检测目的基因转录形成的mRNA水平。（3）小鼠出现异常生理现象，可能是外源基因插入到小鼠基因组的不当位置，影响了其他基因的表达；也可能是外源基因过量表达，产生的蛋白质对小鼠生理功能产生不良影响；还可能是细胞培养过程中受到污染等其他因素导致。15.（1）细胞培养技术在疫苗生产中的优势：可大量培养特定细胞系，保证疫苗抗原的稳定供应；能精确控制培养条件，提高疫苗产量和质量的可控性；可实现规模化生产，满足市场需求。（2）优化培养条件对提高疫苗产量和质量的作用机制：合适的培养基成分提供细胞生长和表达抗原所需的营养物质，促进细胞增殖和抗原表达；适宜的温度和pH值能维持细