2026年生物制药技术员中级专业知识测试

2026年生物制药技术员中级专业知识测试一、单项选择题（共20题，每题1分，共20分）1.在生物制药生产中，用于细胞培养的培养基通常需要添加哪种成分以支持细胞生长？A.胰岛素B.葡萄糖C.胰蛋白酶D.丝裂霉素答案：B解析：葡萄糖是细胞培养中最常用的碳源，为细胞提供能量。胰岛素主要用于调节血糖，胰蛋白酶用于细胞消化，丝裂霉素是抗肿瘤药物。2.在生物制药纯化过程中，哪种层析技术常用于分离蛋白质？A.离子交换层析B.凝胶过滤层析C.气相色谱法D.超临界流体萃取答案：A解析：离子交换层析利用蛋白质表面电荷差异进行分离，广泛应用于蛋白质纯化。凝胶过滤层析用于分离分子量，气相色谱法用于小分子，超临界流体萃取用于提取。3.生物制药中，哪种酶制剂常用于DNA/RNA提取？A.蛋白酶KB.RNA酶C.腺苷脱氨酶D.超氧化物歧化酶答案：A解析：蛋白酶K用于降解蛋白质，避免RNA/DNA降解。RNA酶会降解RNA，腺苷脱氨酶作用于核苷酸，超氧化物歧化酶是抗氧化酶。4.在生物制药生产中，哪种灭菌方法适用于热敏性物料？A.巴氏灭菌法B.灭菌锅灭菌C.低温冷冻灭菌D.辐射灭菌答案：A解析：巴氏灭菌法（72℃15秒或60℃30分钟）适用于热敏性物料。灭菌锅灭菌（121℃15分钟）不适用，低温冷冻灭菌和辐射灭菌适用于无菌包装。5.生物制药中，哪种缓冲液常用于维持pH稳定？A.Tris-HClB.乙酸钠C.磷酸缓冲液D.HEPES答案：C解析：磷酸缓冲液（pH6.0-8.0）应用广泛，Tris-HCl（pH7.5-8.3）常用于细胞培养，乙酸钠（pH4.5-6.0）用于酸化，HEPES（pH7.0-8.0）耐酶解。6.在生物制药过程中，哪种设备用于监测无菌操作？A.超净工作台B.生物安全柜C.烛状过滤器D.湿热灭菌锅答案：B解析：生物安全柜提供局部空气净化，防止污染。超净工作台仅提供洁净环境，烛状过滤器用于除菌，湿热灭菌锅用于灭菌。7.生物制药中，哪种培养基用于筛选酵母菌？A.麦康凯培养基B.血浆凝固酶培养基C.酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培养基D.营养肉汤培养基答案：C解析：YPD培养基富含酵母生长因子，常用于酵母筛选。麦康凯用于细菌，血浆凝固酶用于金黄色葡萄球菌，营养肉汤用于通用培养。8.在生物制药中，哪种方法用于检测蛋白质纯度？A.紫外分光光度法B.SDS电泳C.薄层色谱法D.酶联免疫吸附试验（ELISA）答案：B解析：SDS通过分子量分离检测纯度。紫外分光光度法检测浓度，薄层色谱法用于小分子，ELISA用于定量。9.生物制药中，哪种设备用于细胞计数？A.显微镜B.血细胞计数板C.流式细胞仪D.荧光显微镜答案：B解析：血细胞计数板（Neubauer计数板）经典且经济。显微镜用于观察形态，流式细胞仪定量分析，荧光显微镜用于标记观察。10.在生物制药中，哪种溶剂用于细胞裂解？A.甲醇B.Tris缓冲液C.蛋白酶K溶液D.高渗盐溶液答案：D解析：高渗盐溶液（如0.1MNaCl）通过渗透压裂解细胞。甲醇用于有机提取，Tris缓冲液用于pH调节，蛋白酶K用于消化。11.生物制药中，哪种技术用于基因编辑？A.PCRB.CRISPR-Cas9C.基因测序D.基因芯片答案：B解析：CRISPR-Cas9通过RNA引导切割DNA，实现精准编辑。PCR用于扩增，基因测序用于检测，基因芯片用于表达分析。12.在生物制药中，哪种方法用于去除多糖杂质？A.超滤B.亲和层析C.酶解D.离子交换层析答案：C解析：酶解（如使用葡萄糖酶）特异性降解多糖。超滤用于分离分子量，亲和层析用于结合蛋白，离子交换层析用于电荷分离。13.生物制药中，哪种设备用于监控发酵罐pH？A.pH电极B.温度计C.气体流量计D.搅拌器转速计答案：A解析：pH电极实时监测酸碱度。温度计监控温度，气体流量计监控通气，搅拌器转速计监控混合。14.在生物制药中，哪种培养基用于培养细菌？A.酵母提取物蛋白胨大豆（YPD）培养基B.琼脂平板培养基C.沙门氏菌选择性培养基D.肉汤培养基答案：B解析：琼脂平板用于分离培养。YPD用于酵母，沙门氏菌选择性培养基用于特定菌株，肉汤用于液体培养。15.生物制药中，哪种方法用于检测病毒活性？A.ELISAB.病毒滴定法（TCID50）C.病毒基因组测序D.荧光定量PCR答案：B解析：病毒滴定法通过细胞病变测定病毒效价。ELISA检测抗体/抗原，基因组测序检测序列，荧光定量PCR检测RNA量。16.在生物制药中，哪种设备用于监测无菌灌装？A.霍夫曼灌装机B.灌装机器人C.无菌监测罩D.洁净室压力计答案：C解析：无菌监测罩（RABS）防止污染。霍夫曼灌装机是设备类型，灌装机器人是自动化工具，压力计监控洁净度。17.生物制药中，哪种技术用于蛋白质结构预测？A.X射线晶体学B.核磁共振波谱法C.跨膜预测（TMHMM）D.质谱分析答案：C解析：TMHMM预测跨膜区域。X射线晶体学和核磁共振波谱法用于高分辨率结构，质谱分析用于肽段鉴定。18.在生物制药中，哪种方法用于去除内毒素？答案：C解析：超滤（如0.22μm膜）可去除内毒素。离子交换层析用于蛋白纯化，酶解和凝胶过滤不直接去除内毒素。19.生物制药中，哪种培养基用于培养放线菌？A.马丁氏琼脂培养基B.营养琼脂培养基C.酵母提取物麦芽提取物（YEM）培养基D.碳酸钙培养基答案：C解析：YEM培养基富含放线菌生长因子。马丁氏琼脂用于分枝杆菌，营养琼脂通用，碳酸钙用于检测抑菌圈。20.在生物制药中，哪种设备用于监测温度？A.温度探头B.热风循环烘箱C.冷冻干燥机D.真空泵答案：A解析：温度探头直接测量温度。烘箱和冷冻干燥机是设备，真空泵用于减压。二、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）21.生物制药中，哪些因素影响细胞培养效率？A.培养基成分B.温度控制C.气体组成D.转染效率E.机械搅拌答案：A、B、C、E解析：培养基、温度、CO2浓度、搅拌促进生长。转染效率属于基因操作，非常规培养。22.在生物制药纯化过程中，哪些方法可用于蛋白质分离？A.离子交换层析B.凝胶过滤层析C.亲和层析D.超滤E.薄层色谱法答案：A、B、C、D解析：四种均为主流纯化技术。薄层色谱法用于小分子检测。23.生物制药中，哪些设备用于无菌检测？A.霍夫曼灌装机B.生物安全柜C.湿热灭菌锅D.沉降菌计数器E.超净工作台答案：B、C、D、E解析：生物安全柜、灭菌锅、沉降菌计数器、超净工作台均用于无菌控制。霍夫曼灌装机是设备类型。24.在生物制药中，哪些培养基用于微生物筛选？A.麦康凯培养基B.血浆凝固酶培养基C.酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培养基D.营养肉汤培养基E.沙门氏菌选择性培养基答案：A、B、E解析：麦康凯（肠杆菌科）、血浆凝固酶（葡萄球菌）、沙门氏菌选择性培养基用于特定菌种。YPD用于酵母，营养肉汤通用。25.生物制药中，哪些方法用于检测蛋白质表达？A.SDS电泳B.WesternblotC.ELISAD.蛋白质印迹E.荧光定量PCR答案：A、B、C、D解析：四种均为蛋白质检测技术。荧光定量PCR检测RNA。26.在生物制药中，哪些设备用于细胞培养？A.生物反应器B.超净工作台C.离心机D.培养箱E.涡旋混合器答案：A、B、D、E解析：生物反应器、超净工作台、培养箱、涡旋混合器用于培养。离心机用于分离。27.生物制药中，哪些技术用于基因编辑？A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.基因测序E.基因合成答案：A、B、C解析：三种基因编辑技术。测序和合成是辅助工具。28.在生物制药中，哪些方法用于去除杂质？A.超滤B.亲和层析C.酶解D.离子交换层析E.凝胶过滤层析答案：A、B、C、D、E解析：五种均为主流去除杂质技术。29.生物制药中，哪些设备用于灭菌？A.灭菌锅B.辐射灭菌设备C.低温冷冻灭菌D.热风循环烘箱E.超声波清洗机答案：A、B、C解析：三种灭菌方法。烘箱和超声波清洗机非灭菌。30.在生物制药中，哪些因素影响发酵效率？A.搅拌速度B.pH控制C.营养物供应D.温度波动E.气体流量答案：A、B、C、E解析：搅拌、pH、营养、通气影响发酵。温度波动会降低效率。三、判断题（共10题，每题1分，共10分）31.生物制药中，SDS电泳通过蛋白质的分子量进行分离。（√）32.超滤可用于分离蛋白质和小分子杂质。（√）33.病毒滴定法（TCID50）通过细胞病变数量测定病毒效价。（√）34.酵母提取物蛋白胨大豆（YPD）培养基适用于细菌培养。（×）35.CRISPR-Cas9技术通过RNA引导切割DNA。（√）36.离子交换层析利用蛋白质表面电荷差异进行分离。（√）37.蛋白酶K可用于DNA/RNA提取过程中的蛋白质降解。（√）38.热风循环烘箱适用于热敏性物料的灭菌。（×）39.超净工作台和生物安全柜均提供局部空气净化。（×）40.生物制药中，葡萄糖是细胞培养中最常用的碳源。（√）四、简答题（共5题，每题4分，共20分）41.简述生物制药中纯化蛋白质的步骤及其原理。答案：1.粗提：细胞裂解后，通过离心或过滤去除细胞碎片，得到粗提液。2.澄清：使用超滤或离心去除大分子杂质（如盐、脂类）。3.初步纯化：通过离子交换层析或凝胶过滤层析去除小分子杂质和未结合蛋白。4.精细纯化：使用亲和层析（如抗体偶联）或离子交换层析进一步提高纯度。5.浓缩与缓冲液置换：通过超滤浓缩，并置换至储存缓冲液。原理：利用蛋白质与杂质的理化性质差异（如电荷、分子量、特异性结合）进行分离。42.简述生物制药中细胞培养的优化要点。答案：1.培养基优化：添加生长因子、激素和碳源（如葡萄糖）。2.温度和pH控制：维持37℃和7.2-7.4的pH。3.气体组成：95%空气+5%CO2提供氧气和酸碱平衡。4.搅拌和通气：防止代谢产物积累，促进氧气传递。5.接种密度：避免过度或不足接种。原理：提供最佳生长环境，最大化细胞活力和产物产量。43.简述生物制药中灭菌的方法及其适用范围。答案：1.湿热灭菌：121℃15分钟，适用于热敏性物料（如培养基）。2.干热灭菌：160℃2小时，适用于玻璃器皿。3.辐射灭菌：伽马射线或电子束，适用于无菌包装。4.过滤除菌：0.22μm膜，适用于热敏性液体（如疫苗）。适用范围：根据物料特性选择。44.简述生物制药中ELISA检测的原理及其步骤。答案：原理：利用抗体-抗原特异性结合，通过酶标抗体显色定量。步骤：1.包被：将抗原/抗体固定于微孔板。2.结合：加入待测样本，与酶标抗体结合。3.洗涤：去除未结合成分。4.显色：加入底物，酶催化显色。5.定量：通过酶标仪读取吸光度。45.简述生物制药中基因编辑的流程及其应用。答案：流程：1.设计gRNA靶向序列。2.构建CRISPR-Cas9载体。3.转染细胞，使Cas9/gRNA进入细胞。4.DNA修复（NHEJ或HDR）产生突变。应用：疾病模型构建、药物筛选、基因治疗。五、论述题（共2题，每题10分，共20分）46.论述生物制药中纯化蛋白质的挑战及解决方案。答案：挑战：1.杂质复杂：包含盐、小分子、多糖、宿主细胞蛋白等。2.目标蛋白不稳定：易降解或变构。3.纯化效率低：分步纯化可能导致损失。解决方案：1.多步纯化结合：结合离子交换、凝胶过滤和亲和层析，逐步去除杂质。2.优化条件：降