无菌过滤检测仪校准规范 征求意见稿

中华人民共和国国家计量技术规范

JJFxxxx－202x

无菌过滤检测仪校准规范

CalibrationSpecificationforAsepticFilterDetectors

（征求意见稿）

202x－xx－xx发布202x－xx－xx实施

国家市场监督管理总局发布

JJFxxxx—202x

目录

引言.............................................................................................................................（II）

1范围................................................................................................................................（1）

2引用文件........................................................................................................................（1）

3术语................................................................................................................................（1）

3.1菌落形成单位.............................................................................................................（1）

3.2培养器联数.................................................................................................................（1）

4概述................................................................................................................................（1）

5计量特性........................................................................................................................（2）

6校准条件........................................................................................................................（2）

6.1环境条件.....................................................................................................................（2）

6.2测量标准及其他设备.................................................................................................（2）

7校准项目和校准方法....................................................................................................（3）

7.1外观及功能检查.........................................................................................................（3）

7.2转速示值误差.............................................................................................................（3）

7.3转速重复性.................................................................................................................（4）

7.4转速稳定性.................................................................................................................（4）

7.5液体流量重复性.........................................................................................................（4）

7.6液体分配均匀性.........................................................................................................（5）

7.7微生物截留效率.........................................................................................................（6）

8校准结果表达................................................................................................................（7）

8.1校准结果处理...........................................................................................................（7）

8.2校准结果的测量不确定度.......................................................................................（7）

9复校时间间隔................................................................................................................（7）

附录A纯水密度表..........................................................................................................（8）

附录B校准原始记录格式..............................................................................................（9）

附录C校准证书（内页）格式....................................................................................（12）

附录D转速示值误差测量结果的不确定度评定示例................................................（13）

附录E参考文献.............................................................................................................（15）

I

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无菌过滤检测仪校准规范

1范围

本规范适用于移动式无菌过滤检测仪的校准，包含单联、二联和三联过滤器的无菌

过滤检测仪。

2引用文件

本规范引用了下列文件：

JB/T20195—2020集菌仪

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范，凡是不注日期的引用文件，

其最新版本（包括所有的修订单）适用于本规范。

3术语

3.1菌落形成单位colonyformingunit；CFU

指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖

所形成的集落，称为菌落形成单位，以表征活菌的数量。

3.2培养器联数incubatorparalleling

培养器并联的杯体数量。

4概述

无菌过滤检测仪（以下简称“检测仪”）主要由集菌泵和配套的一次性全封闭集菌

培养器组成。通过调节集菌泵的转速，集菌泵将供试品以不同的流速通过进样管道，连

续且均等得注入二联或者三联的培养器中。基于薄膜过滤法原理，利用集菌培养器内形

成的正压，供试品通过培养器中孔径不大于0.45μm（通常孔径为0.45μm或者0.22μm）

的滤膜过滤，其中可能存在的微生物被截留收集在滤膜上，然后把相应的培养基通过进

样管道直接注入培养器中。将全封闭集菌培养器放置于培养箱中，在规定的温度下培养

规定的时间。根据集菌培养器内液体的浑浊程度，判断供试品内是否含菌。

1

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一次性全封闭

集菌培养器

集菌泵

图1无菌过滤检测仪示意图

5计量特性

检测仪各项计量特性指标见表1。

表1检测仪的主要计量特性指标

计量特性计量特性指标

转速示值误差≤±8.0%

转速重复性≤±8.0%

转速稳定性≤±10.0%

液体流量重复性≤±5.0%

二联培养器≤±10.0%

液体分配均匀性

三联培养器≤±15.0%

微生物截留效率≥99%

注：以上技术指标不用于合格判别，仅供参考。

6校准条件

6.1环境条件

6.1.1环境温度：（15～35）℃；

6.1.2相对湿度：≤85%。

注：上述条件与制造商的产品规定不一致时，以产品说明书规定的环境条件为准。

6.2测量标准及其他设备

6.2.1转速表

测量范围（10～400）r/min，0.1级。

2

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6.2.2电子天平

测量范围≥200g，分度值不大于1mg，○I级。

6.2.3秒表

分辨力0.01s，最大允许误差±0.5s/d。

6.2.4微生物定量标准物质

粘质沙雷氏菌（针对标称孔径0.45μm级别的滤膜）或者缺陷短波单胞菌（针对标

称孔径0.22μm级别的滤膜）计数标准物质，国家有证标准物质，菌落数量值（108～

109）CFU。相对扩展不确定度不大于30%。

注：需在一定生物安全防护条件下操作。

6.2.5其他设备

a）移液器（10～100）μL，（100～1000）μL各1支，经检定合格；

b）离心管：50mL，无菌。

7校准项目和校准方法

7.1外观及功能检查

检测仪应结构完整、各部件齐全并能可靠连接，无影响仪器正常工作的缺陷。

检测仪应有名称、型号、制造厂名称、制造日期等标识。

检测仪接通电源后，各按键、开关旋钮应调节灵活、正确，数字显示的仪器应显示

清晰，不缺少笔画。

7.2转速示值误差

打开检测仪的电源，放置配套的培养器，设置仪器的参数。启动检测仪，运行稳定

后，在检测仪上面放置转速校准装置，测试被校检测仪的转速，测量3次。按照公式（1）、

公式（2），分别计算在最大量程转速和半量程转速下，待测检测仪的转速示值误差。

（1）△�

�1+�2+�3

�

�=3（2）

�−��

式中：△�=��×100%

RS——被校检测仪转速标准值，rpm；

R1、R2、R3——被校检测仪转速3次测量值，rpm；

R——被校检测仪转速设定值，rpm；

3

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△R——被校检测仪转速示值误差，%。

7.3转速重复性

按照7.2的方法，测量10次，重复性以单次测量的相对实验标准偏差表示。按照

公式（3），分别计算在最大量程转速和半量程转速下，待测检测仪的转速重复性。

�

（）�

�23

1�=1(��−�)

��=�×�−1×100%

式中：

——被校检测仪转速示值误差，%；

�R�i——被校检测仪转速每次的测量值，rpm；

——被校检测仪转速10次测量值的平均值，rpm；

�n——测量次数。

7.4转速稳定性

打开检测仪的电源，放置配套的培养器，设置仪器的流量参数。启动检测仪，运行

稳定后，用转速校准装置测试被校检测仪的转速，并开始计时，每隔1min记录一次流

量数值，共记录5min。取6个读数中的最大值和最小值，按公式（4），分别计算在最

大量程转速和半量程转速下，待测检测仪的转速稳定性。

（4）

�max−�min

式中：�=�0×100%

R0——被校检测仪转速初始测量值，rpm；

Rmax——被校检测仪转速最大测量值，rpm；

Rmin——被校检测仪转速最小测量值，rpm。

7.5液体流量重复性

打开检测仪的电源，放置配套的培养器，设置仪器的流量参数。准备一个装有约

300mL蒸馏水的瓶子，密封后将瓶子倒置，将培养器导管针头插入瓶中，启动检测仪，

将蒸馏水充满培养器前段的管道后，启动秒表，采集抽取蒸馏水30s。待抽取完毕后，

用天平称量过滤水的重量，记为Mi。重复测量6次，按照公式（5）、（6）、（7），分别

计算在最大量程转速和半量程转速下，待测检测仪的液体流量重复性SQ，重复性以6

4

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次测量的相对实验标准偏差表示。

Vi（5）

M�

ρ

Qi=（6）

��

=�（）

�27

1�=1(��−�)

式中：��=�×�−1×100%

Vi——第i次测量，仪器过滤水的体积，mL；

Mi——第i次测量，仪器过滤水的重量，g；

ρ——试验温度下水的密度，g/mL；

Qi——第i次测量，仪器液体流量的测量值，mL/min；

t——测量时间，0.5min；

——被校仪器液体流量6次测量值的平均值，mL/min；

S�Q——被校仪器液体流量重复性，%。

n——被校仪器的测量次数。

7.6液体分配均匀性

打开检测仪的电源，放置配套的培养器，设置仪器的流量参数，二联培养器采集

200mL体积的蒸馏水，三联培养器采集300mL体积的蒸馏水。采集抽取后，分别过滤

收集每个培养器内的液体，采用重量法，使用天平称取每个培养器杯体滤出液体的重量。

按照公式（8）计算二联培养器单次测量的分配差异系数CN，重复测量三次，按照公式

（9）取三次分配差异系数的平均值作为待校仪器的分配差异系数。

CN=|1-（8）

��

�|×100%

C=（9）

�1+�2+�3

式中：3

CN——单次测量的分配差异系数，%；

mn——单个培养器内的液体重量，g；

——二联培养器内的液体重量的平均值，g；

�5

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C——3次测量的分配差异系数的平均值，%；

C1、C2、C3——第1、2、3次测量的分配差异系数，%；

按照公式（10）和（11）计算三联培养器单次测量的分配差异系数，重复测量

三次，按照公式（12）取三次分配差异系数的平均值作为待校仪器的分配�差N异系数。

CNn=|1-（10）

�N�

�N|×100%

=（11）

�N1+�N2+�N3

�N3

C=（12）

�1+�2+�3

式中：3

CNn——第N次测量的第n个培养器的分配差异系数，%；

——第N次测量第n个培养器内的液体重量，g；

�N�——第N次测量三联培养器内的液体重量平均值，g；

�N——第N次测量三联培养器的分配差异系数的平均值，%；

�N、、——第N次测量的第1、2、3个培养器分配差异系数，%；

�CN—1—�3N次2测�量N3的三联培养器分配差异系数的平均值，%；

、、——第1、2、3次测量的分配差异系数，%；

�1�2�3

7.7微生物截留效率

在生物安全柜中，打开检测仪的电源，放置配套的培养器，取100mL（菌量为

108CFU~109CFU）的粘质沙雷氏菌（针对标称孔径0.45μm级别的滤膜）或者缺陷短波

单胞菌悬液（针对标称孔径0.22μm级别的滤膜）。启动检测仪5s后，菌液通过进样管

道连续注入培养器中，通过培养器中的滤膜进行过滤，将所有的滤液收集到无菌离心管

中。使用抽滤设备将所有滤液过滤到新的滤膜上，用已灭菌的镊子将滤膜放到胰酪大豆

胨琼脂培养基上进行培养，粘质沙雷氏菌放置于（30±2）℃条件下培养48h，缺陷短波

单胞菌放置于（30±2）℃条件下培养72h。重复测量三次。培养结束后，对3个平行组

滤膜上的菌落进行计数，计算平均值R2。利用公式（13）计算微生物截留效率。当R2=0

时，计为R>lgR1；当R2>0时，计算R值。

6

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R=lgR1-lgR2（13）

式中：

R——滤膜对微生物的截留效率；

R1——标准物质菌液的标称值菌落数，CFU；

R2——3个平行组透过滤膜的菌落数平均值，CFU。

8校准结果表达

8.1校准结果处理

经校准后的无菌过滤检测仪应核发校准证书，校准证书应符合JJF1071—2010中

5.12的要求，并给出各校准项目名称和测量结果以及扩展不确定度。校准原始记录格式

（推荐性表格）见附录B，校准证书内页格式（推荐性表格）见附录C。

8.2校准结果的测量不确定度

检测仪校准结果的测量不确定度按JJF1059.1—2012的要求评定，校准结果测量不

确定度评定示例见附录D。

9复校时间间隔

由于复校时间间隔的长短是由检测仪的使用情况、使用者、检测仪本身质量等诸因

素所决定的，因此送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔，复校时间间隔

建议不超过1年。

7

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附录A

纯水密度表

(×10-3g/mL)

t90(℃)0.00.10.20.30.40.50.60.70.80.9

0999.843999.850999.856999.862999.869999.874999.880999.886999.891999.897

1999.902999.907999.911999.916999.920999.924999.928999.932999.936999.940

2999.943999.946999.949999.952999.955999.957999.959999.962999.964999.965

3999.967999.969999.970999.971999.972999.973999.974999.974999.975999.975

4999.975999.975999.975999.974999.974999.973999.972999.971999.970999.968

5999.967999.965999.963999.961999.959999.957999.954999.952999.949999.946

6999.943999.940999.937999.933999.929999.926999.922999.918999.913999.909

7999.904999.900999.895999.890999.885999.880999.874999.869999.863999.857

8999.851999.845999.839999.833999.826999.819999.813999.806999.798999.791

9999.784999.776999.769999.761999.753999.745999.737999.728999.720999.711

10999.703999.694999.685999.676999.666999.657999.648999.638999.628999.618

11999.608999.598999.588999.577999.567999.556999.545999.534999.523999.512

12999.500999.489999.477999.466999.454999.442999.430999.418999.405999.393

13999.380999.367999.355999.342999.329999.315999.302999.289999.275999.261

14999.247999.233999.219999.205999.191999.176999.162999.147999.132999.118

15999.103999.087999.072999.057999.041999.026999.010998.994998.978998.962

16998.946998.930998.913998.897998.880998.863998.846998.829998.812998.795

17998.778998.760998.743998.725998.707998.689998.671998.653998.635998.617

18998.598998.580998.561998.542998.523998.505998.485998.466998.447998.427

19998.408998.388998.369998.349998.329998.309998.288998.268998.248998.227

20998.207998.186998.165998.144998.123998.102998.081998.060998.038998.017

21997.995997.973997.951997.929997.907997.885997.863997.841997.818997.796

22997.773997.750997.727997.704997.681997.658997.635997.612997.588997.564

23997.541997.517997.493997.469997.445997.421997.397997.372997.348997.323

24997.299997.274997.249997.224997.199997.174997.149997.124997.098997.073

25997.047997.021996.996996.970996.944996.918996.891996.865996.839996.812

26996.786996.759996.732996.706996.679996.652996.624996.597996.570996.543

27996.515996.488996.460996.432996.404996.376996.348996.320996.292996.264

28996.235996.207996.178996.150996.121996.092996.063996.034996.005996.976

29995.946995.917995.888995.858995.828995.799995.769995.739995.709995.679

30995.649995.619995.588995.558995.527995.497995.466995.435995.404995.373

31995.342995.311995.280995.249995.217995.186995.154995.123995.091995.059

32995.027994.996994.963994.931994.899994.867994.834994.802994.769994.737

33994.704994.671994.638994.605994.572994.539994.506994.473994.439994.406

34994.372994.339994.305994.271994.237994.204994.170994.135994.101994.067

35994.033993.998993.964993.929993.894993.860993.825993.790993.755993.720

36993.685993.650993.614993.579993.543993.508993.472993.437993.401993.365

37993.329993.293993.257993.221993.184993.148993.112993.075993.039993.002

38992.965992.929992.892992.855992.818992.781992.744992.706992.669992.632

39992.594992.557992.519992.481992.443992.406992.368992.330992.292992.253

40992.215──────────────────

注：1t90为1990年国际温标（ITS-90）。

2水密度值采用JJG42—2011工作玻璃浮计附录A。

8

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附录B

校准原始记录格式

（推荐性表格）

检测仪名称型号规格

制造厂商出厂编号

委托单位地址

温度湿度

记录编号校准日期

校准员核验员

一、外观及功能检查

表B.1外观及功能检查表

检查项目检查结果

外观□符合要求□不符合要求

功能□符合要求□不符合要求

二、转速示值误差

表B.2转速示值误差（n=3）

转速设定值测量值（rpm）平均值相对示值相对扩展不确定

（rpm）123（rpm）误差（%）度Urel（%），k=2

三、转速重复性

表B.3转速重复性（n=10）

转速设测量值（rpm）转速

定值重复

12345678910

（rpm）性（%）

9

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四、转速稳定性

表B.4转速稳定性（5min）

测量值（rpm）转速稳定

转速设定值（）

rpm性（）

0min1min2min3min4min5min%

五、液体流量重复性

表B.5液体流量重复性（n=6）

转速设定值液体重量液体流量液体流量重复

组别MiQ

（rpm）（g）（mL/min）性sr（%）

1

2

3

4

5

6

1

2

3

4

5

6

六、液体分配均匀性

表B.6液体分配均匀性（n=3）

培养器联数

转速设定值

（rpm）

分配系数

组别称量培养器1培养器2培养器3

C

空瓶重量（g）

1

空瓶+液体重量（g）

10

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液体重量（g）

分配系数C1

空瓶重量（g）

空瓶+液体重量（g）

2

液体重量（g）

分配系数C2

空瓶重量（g）

空瓶+液体重量（g）

3

液体重量（g）

分配系数C3

七、微生物截留效率

表B.7微生物截留效率

菌株

滤膜孔径

阴性对照(CFU)

组别平行1平行2平行3平均值

菌悬液初始菌落数(CFU)

滤膜上的菌落数(CFU)

截留效率

校准员：核验员：

11

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附录C

校准证书（内页）格式

（推荐性表格）

序号校准项目测量值

1外观及功能检查

2转速示值误差

3转速重复性

4转速稳定性

5液体流量重复性

6液体分配均匀性

7微生物截留效率

校准员：核验员：

12

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附录D

转速示值误差测量结果的不确定度评定示例

D.1概述

按规范要求，用转速校准装置测量被校检测仪的转速，重复测量3次，计算转速示

值误差。

D.2测量模型

（D.1）

�−��

式中：△�=��×100%

RS——被校检测仪转速标准值，rpm；

R1、R2、R3——被校检测仪转速3次测量值，rpm；

R——被校检测仪转速设定值，rpm；

△R——被校检测仪转速示值误差，%。

D.3方差和灵敏系数

由公式（D.1）得：R为采样器流量设定值，是一常数，因此不确定度来源仅为检

测仪转速标准值RS引入。则标准不确定度计算公式：