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文档简介
14影本一班张琛201452623血液实验影响血液凝固的因素实验目的:了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的一些因素实验原理:
血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过程称为血液凝固。本质是可溶性纤维蛋白原转换为不可溶性纤维蛋白多聚体。纤维蛋白交织成网,从而形成血凝块。血液凝固过程:凝血酶原酶复合物形成
凝血酶原凝血酶
纤维蛋白质纤维蛋白凝血酶原酶复合物的形成中有两个途径,内源性和外源性。内源性是指参与凝血的全部物质均在血液中。外源性是指在凝血的过程中有其他组织的凝血物质。Ca2+在血液凝固中的作用:FII、FVII、FIX、FX这四个因子的生化特征是分子上都有Ca2+结合的部位,通过与Ca2+结合发生变构,暴露出与磷脂结合的部位来参与凝血。因此Ca2+在血凝过程中具有很重要的作用。血小板在凝血过程中的作用:(1)激活的血小板为凝血因子提供磷脂表面,参与内外源性凝血途径因子X和凝血酶原的激活;(2)血小板质膜表面结合有许多凝血因子,如纤维蛋白原、FV、FXI、FXIII,这些因子的相继激活可加速凝血过程;(3)血小板激活后,释放颗粒的内容物,如:α-颗粒内纤维蛋白原的释放,可增加纤维蛋白的形成,加固凝块。肝素在凝血过程中的作用;肝素在体内和体外都有抗凝作用,主要通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用,使血液不凝。温度对血液凝固的影响:适宜酶发挥效能的温度(37℃左右)环境中,血凝速度加快。接触面光滑程度对血液凝固的影响:接触面越粗糙血液凝固速度越快实验材料动物:
家兔,2~3kg,雌雄均可药品:20%乌拉坦溶液、肝素、草酸钾、0.025mol/L氯化钙溶液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、石蜡油器材:小烧杯、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、清洁小试管9支、水浴装置一套、冰块、棉花、移液器(1ml、0.2ml)实验方法1.观察内源性与外源性凝血的过程取干净小试管3支,编号后按表7-2加入各种成分摇匀后静置,在加入0.025mol/LCaCl2溶液的同时开始计时,每15″倾斜一次,观察是否开始凝血,并分别记录3支试管的血凝时间,比较3个管的血液凝固时间。比较血液凝固的时间(1与2比,2与3比),分析产生差别原因2.观察影响血液凝固的理化因素取小试管7支,编号并按表7-4准备后,取家兔颈动脉血,每管2ml立即计时,每15″倾斜试管一次,以观察血液是否凝固,至血液呈凝胶状不再流动时记录血凝时间。3.观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用取血10ml,注入两个小烧杯中,一杯静置,另一杯用试管刷轻轻搅拌,几分钟后试管刷上结成红色血团,用水冲洗,观察纤维蛋白的形状,比较两杯的血凝情况。注意事项1.每试管口径大小及取血量应基本一致,判断试管倾斜角度(45º)、间隔时间(30s/次)、标准(血液不见流动)都应一致。2.采血有先有后,计时不应统一要求,各组和个人应分别单独计时。3.棉花不要压试管太紧,要松软。4.用石蜡油将试管表面全部润滑后,将石蜡油倒入水池中。5.取血前先准备好冰块,取完血后立即把第3号试管放入水浴锅,4号试管放入装有冰块的烧杯中。出血时间和凝血时间的测定实验目的:学习出血时间和凝血时间测定的方法实验原理:
出血时间是指从针刺使毛细血管破损,血液自行流出到自行停止的时间。当毛细血管受损时,受伤血管可立即引起收缩反应,从而局部血流减慢,有利于血小板粘着并聚集于血管的破损处,形成松软止血栓。接着部分血小板破裂,释放出血小板因子,在局部迅速出现血凝块,使出血停止。出血时间的测定可以反映毛细血管及血小板功能正常与否。凝血时间是指血液流出体外至凝固所需要的时间。它反应的是血液本身的凝血过程是否正常。凝血时间的延长常见于一些凝血因子缺乏或异常的疾病。实验材料对象:人药品
:75%酒精棉球器材:采血针、载玻片、滤纸条、秒表实验方法:1.出血时间的测定(1)以75%酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧,待酒精自然挥发后,用消毒采血针刺入上述部位2~3mm深,让血液自然流出,切勿挤压,从血流流出算起计算时间。(2)每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次,直到吸不到血液为止。(3)记录开始出血到止血的时间,或以滤纸上的血点数×0.5分钟来计算,其结果即为出血时间(分)。2.凝血时间的测定(1)以75%的酒精棉球消毒,待酒精自然挥发后用消毒采血针刺入上述部位2~3mm深,让血液自然流出,用棉球轻轻拭去第一滴血液,待血液重新自然流出即开始计时。(2)将第二滴血置于玻片上,每隔半分钟用大头针挑血一次,直到挑起细纤维状的血丝,即表示开始凝血.从开始流出到挑起细纤维状的血丝所需要的时间即为凝血时间。注意事项1.各种用具严格消毒。2.针刺手指或耳垂不宜过浅,深度2~3mm使血可自然流出为宜。如针刺部位深度不够,流血量太少不能用力挤压局部,应重新针刺。3.用滤纸吸血时,注意不要用滤纸触及皮肤伤口,以免影响结果的准确性。4.测定凝血时,应严格每隔半分钟用大头针挑血一次,不可太频繁,同时每次挑动血液要按一定方向和顺序进行,以免破坏纤维蛋白的网状结构而造成不凝的假象。ABO血型的鉴定实验目的:学习ABO血型鉴定的实验方法,加深对ABO血型划分的理解实验原理:是指红细胞膜上特异性抗原的类型。根据红细胞膜上是否有A或B抗原可分为四种血型:A型、B型、AB型和O型。当凝集原遇到与其相对抗的凝集素会发生凝集。根据抗原抗体反应原理,利用已知的血清凝集素(抗A凝集素、抗B凝集素)来确定未知的红细胞膜上的凝集原(A凝集原和B凝集原)的种类,从而鉴定ABO血型。+含B抗原的红细胞抗B抗体红细胞凝集反应抗B血型的抗原和抗体分布情况实验材料对象:人药品:抗A抗体和抗B抗体,生理盐水器材:采血针、凹玻片、75%酒精棉球、显微镜实验方法1.取双凹片一块,用蜡笔在两端分别写上A、B字样,在两侧凹内分别滴一滴抗A抗体和抗B抗体。2.用镊子夹取75%酒精棉球,消毒指端或耳垂及
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