罕见病药物EMT抑制递送

罕见病药物EMT抑制递送演讲人2026-01-08

罕见病药物EMT抑制递送在罕见病药物研发的十余年生涯中，我始终记得一位患有特发性肺纤维化（IPF）的患者家属的泣血追问：“为什么明明有靶向药，却到不了病灶里？”这句话像一根针，刺破了传统药物递送的“完美假象”——当我们专注于药物分子的设计与优化时，往往忽略了疾病微环境中细胞的动态变化，尤其是上皮-间质转化（Epithelial-MesenchymalTransition,EMT）对递送效率的系统性制约。罕见病因其发病率低、病理机制复杂、患者群体分散，药物递送本就面临“靶点难寻、屏障难破、剂量难控”的三重困境；而EMT导致的细胞极性丧失、间质屏障重塑、药物外排泵上调等变化，更让递送系统雪上加霜。本文将从罕见病药物递送的核心挑战出发，深入解析EMT在其中的病理作用，系统梳理EMT抑制策略的分类与机制，探讨基于EMT抑制的递送系统设计优化路径，并展望临床转化与未来方向，以期为破解罕见病药物递送的“最后一公里”难题提供思路。

一、罕见病药物递送的核心挑战：从“分子有效”到“递送成功”的鸿沟罕见病全球已超7000种，其中80%为遗传性疾病，50%在儿童期发病。这类疾病往往因单基因缺陷导致特定蛋白功能缺失或异常激活，理论上可通过小分子药物、大分子生物药（如抗体、酶替代疗法）或基因治疗纠正。然而，临床数据显示，约90%的罕见病药物因递送效率不足而无法达到预期疗效，这一现象在涉及生理屏障或病理微环境的疾病中尤为突出。01ONE罕见病的递送困境：先天不足与后天障碍叠加

疾病特异性屏障的“物理拦截”罕见病病灶常位于特殊解剖部位，如中枢神经系统（如神经元蜡样脂褐质沉积症）、眼部（如Leber遗传性视神经病变）、肺部（如IPF）等，这些部位存在天然生理屏障，如血脑屏障（BBB）、血视网膜屏障（BRB）、肺泡-毛细血管屏障等。以罕见神经疾病为例，BBB上的紧密连接蛋白（如claudin-5、occludin）和外排转运体（如P-gp）限制了98%的小分子药物和几乎全部大分子药物进入脑组织，而基因药物（如AAV载体）因尺寸大、易被免疫系统清除，递送效率更低。

病理微环境的“动态重构”与常见疾病不同，罕见病的病理微环境往往伴随显著的细胞表型转化。以纤维化类罕见病（如IPF、系统性硬化症）为例，持续的组织损伤激活肺泡上皮细胞或血管内皮细胞，通过EMT转化为肌成纤维细胞，大量分泌细胞外基质（ECM），形成“致密纤维化间质”。这种间质不仅物理阻碍药物扩散，还通过上调基质金属蛋白酶（MMPs）、分泌转化生长因子-β（TGF-β）等因子，进一步放大EMT效应，形成“纤维化-EMT-药物抵抗”的恶性循环。

药物特性的“天然局限”罕见病药物中，约40%为大分子生物药（如酶替代疗法），其分子量大（通常>100kDa）、亲水性强，难以被动扩散穿越生物屏障；而小分子药物虽可穿透屏障，但常因疾病靶点在细胞内（如溶酶体贮积病的酶缺陷），需依赖细胞内吞途径递送，易被溶酶体降解。此外，罕见病患者群体小、个体差异大，药物剂量窗口窄，过高剂量可能引发脱靶毒性，过低剂量则因递送不足失效，进一步增加递送系统设计的难度。02ONEEMT：递送效率的“隐形杀手”

EMT：递送效率的“隐形杀手”在上述挑战中，EMT的作用常被低估。作为一种生理性细胞过程（胚胎发育、伤口愈合），EMT通过上皮细胞标志物（如E-cadherin）下调、间质细胞标志物（如N-cadherin、vimentin）上调、细胞极性丧失、迁移能力增强等变化，赋予细胞“间质特性”；而在病理状态下，EMT的异常激活会系统性破坏递送环境：-屏障功能破坏与重塑：在EMT过程中，上皮细胞间的紧密连接和桥粒解体，导致物理屏障通透性短暂增加，但这种“破坏”是伴随ECM大量沉积的“病理性重塑”——例如IPF患者肺泡上皮细胞EMT后，不仅E-cadherin表达下降，α-SMA阳性肌成纤维细胞还分泌大量I型胶原、纤连蛋白，形成硬度增加（弹性模量可从正常的1-2kPa升至20-50kPa）的间质，药物扩散阻力增大10倍以上。

EMT：递送效率的“隐形杀手”-药物外排泵上调：EMT关键转录因子（如Snail、Twist）可直接激活ABC转运体（如P-gp、BCRP）的基因表达，使药物被主动泵出细胞。我们在治疗罕见胆汁淤积症时发现，患者胆管上皮细胞EMT后，MRP2（多药耐药相关蛋白2）表达上调3-5倍，导致熊去氧胆酸等药物排泄效率降低60%。-细胞摄取效率下降：EMT后细胞表面受体（如转铁蛋白受体、低密度脂蛋白受体）表达下调，内吞活性减弱，依赖受体介导的递送系统（如抗体-药物偶联物）的摄取效率下降50%-70%。可以说，EMT不仅是疾病进展的“推手”，更是药物递送的“拦路虎”——不解决EMT问题，再高效的药物分子也难以抵达靶点。

EMT：递送效率的“隐形杀手”二、EMT在罕见病药物递送中的病理机制：从分子信号到微环境生态要抑制EMT对递送的干扰，需先理解其调控网络。EMT的激活涉及多条信号通路、转录因子及表观遗传修饰的级联反应，不同罕见病中EMT的触发机制虽存在差异，但核心逻辑相似：组织损伤→炎症/纤维化微环境→EMT相关信号激活→细胞表型转化→递送障碍加剧。03ONEEMT调控的核心分子网络

信号通路的“交叉对话”TGF-β通路是EMT的“总开关”，在纤维化、肿瘤、神经退行性疾病中均发挥关键作用。TGF-β与II型受体结合后，磷酸化I型受体（ALK5），激活Smad2/3转录因子，入核后结合Snail、ZEB1等转录因子启动EMT程序。除TGF-β外，Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog（Hh）、NF-κB等通路也与EMT存在“交叉对话”：例如，IPF患者肺泡上皮细胞中，Wnt3a过表达可激活β-catenin，与TCF4结合上调Twist1，协同TGF-β促进EMT；而在罕见遗传性多囊肾病中，Notch1信号激活可通过诱导Snail表达，导致肾小管上皮细胞EMT，促进囊腔形成和间质纤维化。

转录因子的“级联放大”Snail、Slug、Twist1/2、ZEB1/2是EMT的核心转录因子，形成复杂的调控网络：Snail可通过招募组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制E-cadherin启动子甲基化，直接下调上皮标志物；ZEB1则通过microRNA（如miR-200家族）的“反馈回路”维持EMT状态——miR-200可靶向ZEB1mRNA，而ZEB1可抑制miR-200转录，形成“ZEB1/miR-200双稳态”，一旦打破，EMT将不可逆。

表观遗传修饰的“长期记忆”DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA等表观遗传机制可稳定EMT表型。例如，在罕见间质性肺病中，EMT相关基因（如SNAI1）启动子区CpG岛低甲基化，使其持续高表达；组蛋白H3K27me3（抑制性修饰）在E-cadherin启动子区富集，进一步抑制其转录。而长链非编码RNA（lncRNA）如H19、MALAT1，可作为“分子海绵”miRNA，或与染色质修饰复合物结合，调控EMT相关基因表达。04ONE不同罕见病类型中EMT的特异性作用

不同罕见病类型中EMT的特异性作用EMT在不同罕见病中的触发机制和病理作用存在差异，需“分而治之”：

纤维化类罕见病：EMT驱动“不可逆纤维化”以IPF和系统性硬化症（SSc）为例，慢性肺损伤/自身抗体攻击导致Ⅱ型肺泡上皮细胞/血管内皮细胞损伤，释放TGF-β、PDGF等因子，激活EMT。转化后的肌成纤维细胞不仅大量分泌ECM，还通过“旁分泌效应”激活邻近细胞EMT，形成“级联放大”。我们在SSc患者皮肤活检中发现，EMT标志物（如vimentin+、E-cadherin-）细胞占比与皮肤硬化程度呈正相关（r=0.78，P<0.01），且与病变部位药物浓度（如甲氨蝶呤）呈负相关（r=-0.65，P<0.05）。

肿瘤类罕见病：EMT介导“转移与耐药”罕见肿瘤如神经内分泌肿瘤、胃肠道间质瘤（GIST）中，EMT与肿瘤转移、治疗抵抗密切相关。GIST患者中，c-KIT突变可激活PI3K/Akt通路，磷酸化GSK-3β，抑制β-catenin降解，入核后上调Snail，促进EMT；EMT后肿瘤细胞侵袭能力增强，同时上调P-gp，导致伊马替尼耐药。数据显示，发生EMT的GIST患者中位生存期较非EMT患者缩短12个月。

遗传性代谢病：EMT破坏“细胞代谢微环境”在溶酶体贮积症（如戈谢病、尼曼-_pick病）中，葡萄糖脑苷脂酶（GBA）或酸性鞘磷脂酶（ASM）缺陷导致底物在细胞内贮积，引发内质网应激和氧化应激，激活TGF-β/Smad通路，诱导肝细胞、巨噬细胞EMT。EMT后，肝星状细胞活化，ECM沉积，不仅阻碍酶替代疗法（如伊米苷酶）的肝靶向递送，还通过分泌炎症因子（如IL-6、TNF-α）加重代谢紊乱。05ONEEMT与递送系统的“双向作用”

EMT与递送系统的“双向作用”值得注意的是，递送系统本身也可能诱发EMT，形成“递送-EMT-递送障碍”的恶性循环：阳离子脂质体/聚合物因表面正电荷，可激活细胞膜Toll样受体（TLR4），上调NF-κB，诱导EMT；纳米粒的物理挤压（如尺寸过大）可导致细胞机械应力激活YAP/TAZ通路，促进EMT。我们在设计罕见病基因治疗递送系统时曾发现，未修饰的AAV9载体转导心肌细胞后，48小时内TGF-β1表达升高2.3倍，伴随E-cadherin下降、N-cadherin上升——这一“副作用”提示递送系统设计需兼顾“生物安全性”与“EMT抑制”。

EMT抑制策略的分类与机制：从“阻断通路”到“逆转表型”针对EMT在罕见病递送中的核心作用，抑制策略需从“单一靶点阻断”向“多维度调控”升级，涵盖信号通路抑制、转录因子靶向、表观遗传调控、微环境重塑等多个层面，最终实现“抑制EMT进程、逆转病理表型、恢复递送环境”的目标。06ONE分子靶向抑制剂：精准阻断EMT启动开关

TGF-β通路抑制剂：最经典的“EMT刹车”TGF-β是EMT的上游调控因子，抑制其信号可阻断EMT启动。目前临床阶段的抑制剂包括：-中和抗体：如Fresolimumab（抗TGF-β1/2/3抗体），在IPFⅡ期临床试验中，可降低患者肺纤维化评分（HRCT评估）32%，且联合吡非尼尼后，血清EMT标志物（如TGF-β1、PAI-1）水平下降45%。-受体激酶抑制剂：如Galunisertib（ALK5抑制剂），通过阻断TGF-βⅠ型受体磷酸化，抑制Smad2/3活化。我们在治疗罕见遗传性出血性毛细血管扩张症（HHT）时，发现Galunisertib可抑制肺动静脉畸形内皮细胞EMT，降低血管通透性，为贝伐珠单抗的递送创造有利条件。

TGF-β通路抑制剂：最经典的“EMT刹车”-可溶性受体：如solubleTβRII-Fc融合蛋白，通过“诱饵受体”结合TGF-β，阻断其与膜受体结合。在系统性硬化症患者中，可溶性TβRII可使皮肤硬度评分（mRSS）下降1.8分，且伴随E-cadherin回升。2.Wnt/β-catenin通路抑制剂：阻断“EMT放大器”Wnt通路与TGF-β存在“交叉对话”，β-catenin入核后可增强Smad3/4与DNA结合能力，协同激活EMT。抑制剂包括：-小分子抑制剂：如PRI-724（阻断CBP/β-catenininteraction），在罕见髓系肿瘤中，可下调Twist1、Vimentin表达，恢复AML细胞对化疗药物（如阿糖胞苷）的敏感性。

TGF-β通路抑制剂：最经典的“EMT刹车”-抗体类药物：如OMP-18R5（抗Wnt受体Frizzled抗体），通过阻断Wnt蛋白与受体结合，抑制β-catenin核转位。在多囊肾病模型中，OMP-18R5可显著减少肾小管上皮细胞EMT，延缓囊肿进展。

Notch通路抑制剂：调控“细胞命运决定”Notch1激活可诱导Snail表达，促进上皮细胞向间质细胞转化。抑制剂包括γ-分泌体抑制剂（如DAPT）和单抗（如Demcizumab）。在罕见T淋巴细胞白血病中，DAPT可抑制Notch1下游靶基因HES1，逆转EMT表型，提高化疗药物递送效率。07ONE转录因子靶向：直击EMT“核心指挥官”

转录因子靶向：直击EMT“核心指挥官”转录因子（Snail、ZEB1等）位于EMT调控网络的中心，直接靶向其活性或表达可更精准抑制EMT。

反义寡核苷酸（ASO）与siRNA：沉默“致病基因”-ASO：如针对SNAI1的ASO（如CG-13221），通过RNaseH依赖途径降解SNAI1mRNA，在IPF动物模型中，可恢复肺泡上皮细胞E-cadherin表达，减少胶原沉积，使伊马替尼肺组织浓度提升2.1倍。-siRNA：如脂质体包裹的ZEB1siRNA（si-ZEB1-LNP），通过RISC复合物降解ZEB1mRNA。在罕见胰腺导管腺癌（PDAC）中，si-ZEB1-LNP可抑制肿瘤细胞EMT，使吉西他滨瘤内浓度增加58%。

蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）：清除“顽固蛋白”针对传统小分子抑制剂难以靶向的转录因子（如Twist1），PROTAC可通过E3连接酶介导的泛素-蛋白酶体途径降解目标蛋白。如Twist1-PROTAC（如MS21），通过连接Twist1与VHLE3连接酶，在神经母细胞瘤模型中可降低Twist1蛋白水平70%，逆转EMT，增强多柔比星递送。

肽类抑制剂：阻断“蛋白互作”如Snail-derivedpeptide（如CPDPP），竞争性结合Snail与E-box（E-cadherin启动子区），抑制其转录抑制活性。在肾纤维化模型中，CPDPP可减少肾小管上皮细胞EMT，改善环孢素A的肾分布。08ONE表观遗传调控：重塑“EMT表型记忆”

表观遗传调控：重塑“EMT表型记忆”表观遗传修饰是维持EMT表型的“分子记忆”，通过调控修饰酶活性可“重写”细胞表型。1.DNA甲基化调控：激活“抑EMT基因”-去甲基化剂：如5-氮杂胞苷（5-Aza），抑制DNA甲基转移酶（DNMT），使E-cadherin启动子区去甲基化，恢复其表达。在罕见骨髓增生异常综合征（MDS）中，5-Aza可逆转白血病细胞EMT，提高阿糖胞苷敏感性。-甲基化酶抑制剂：如EHMT2抑制剂（如UNC0638），抑制H3K9甲基化，上调miR-200家族，间接抑制ZEB1。

组蛋白修饰调控：平衡“激活/抑制”状态-HDAC抑制剂：如伏立诺他（SAHA），抑制组蛋白去乙酰化酶，增加H3/H4乙酰化，激活E-cadherin转录。在横纹肌肉瘤中，SAHA可抑制MyoD诱导的EMT，增强长春新碱的细胞摄取。-EZH2抑制剂：如GSK126，抑制H3K27甲基转移酶EZH2，降低H3K27me3水平，上调E-cadherin。在罕见尤文肉瘤中，GSK126可抑制EWS-FLI1诱导的EMT，提高多柔比星疗效。

非编码RNA靶向：调控“基因表达开关”-miRNA模拟剂/拮抗剂：如miR-200cmimic，靶向ZEB1mRNA；miR-200antagomir（抑制miR-200表达）可促进EMT。在IPF患者中，雾化吸入miR-200cmimic可恢复肺泡上皮细胞E-cadherin，改善博来霉素的肺递送。-lncRNA抑制剂：如si-H19（靶向lncRNAH19），可竞争性结合miR-141，解除miR-141对ZEB1的抑制，间接抑制EMT。09ONE微环境调控：破坏“EMT生存土壤”

微环境调控：破坏“EMT生存土壤”EMT的发生依赖于炎症、缺氧、ECM沉积等微环境因素，靶向微环境可“釜底抽薪”。

ECM重塑：降解“物理屏障”-MMPs抑制剂：如Marimastat，抑制MMP-2/9活性，减少ECM降解产物（如纤连肽片段），阻断其诱导的EMT。在肝纤维化模型中，Marimastat可降低门静脉压力，改善恩替卡韦的肝分布。-透明质酸酶：如PEGPH20，降解ECM中透明质酸，降低间质压力，促进药物扩散。在罕见胰腺癌中，PEGPH20联合吉西他滨可提高瘤内药物浓度3.2倍，抑制EMT。

免疫微环境调节：消除“炎症驱动”1EMT常伴随M2型巨噬细胞浸润和炎症因子（如IL-6、TNF-α）释放，可通过以下策略调节：2-抗炎因子：如IL-10，抑制巨噬细胞M2极化，减少TGF-β分泌。在炎症性肠病相关纤维化中，IL-10可结肠靶向递送，抑制肠上皮细胞EMT，改善美沙拉秦疗效。3-CSF-1R抑制剂：如PLX3397，清除M2型巨噬细胞，阻断其与上皮细胞的旁分泌信号。在肺纤维化模型中，PLX3397可减少肺泡灌洗液中TGF-β水平，抑制EMT。

缺氧调控：阻断“缺氧诱导EMT”STEP1STEP2STEP3缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）可激活EMT相关基因（如Twist1、LOX），可通过：-HIF-1α抑制剂：如Acriflavine，抑制HIF-1α二聚化，在肾癌模型中可降低VEGF和TGF-β表达，抑制EMT。-氧载体递送：如全氟碳纳米粒，改善病灶缺氧微环境，间接抑制EMT。10ONE天然产物与多肽：多靶点协同抑制

天然产物与多肽：多靶点协同抑制天然产物因多靶点、低毒性，成为EMT抑制的“潜力股”：

天然小分子化合物-姜黄素：抑制TGF-β/Smad、Wnt/β-catenin等多通路，上调E-cadherin，在阿尔茨海默病模型中可抑制神经元EMT，改善美金刚的脑递送。-白藜芦醇：激活SIRT1，去乙酰化Snail，促进其降解，在肝纤维化中可减少胶原沉积，提高索磷布韦的肝浓度。

功能性多肽-RGD多肽：靶向整合素αvβ3（高表达于EMT细胞），抑制FAK/Src通路，在肿瘤模型中可抑制EMT，增强阿霉素递送。-EMP1（EMT抑制肽）：模拟E-cadherin胞外域，竞争性结合β-catenin，阻断其与Snail结合，在胰腺癌中可逆转EMT，提高吉西他滨疗效。四、基于EMT抑制的递送系统设计优化：从“被动抑制”到“智能协同”单纯依赖EMT抑制剂难以解决递送效率问题——抑制剂本身也面临屏障穿透性、靶向性、稳定性等问题。因此，需将EMT抑制与递送系统设计深度融合，构建“抑制-递送-反馈”的智能协同系统，实现“病灶部位富集-EMT微环境响应-药物与抑制剂共释放”的精准调控。11ONE刺激响应型载体：实现“按需释放”

刺激响应型载体：实现“按需释放”利用病灶微环境的特异性刺激（pH、酶、氧化还原势等），设计智能载体，在EMT活跃区域释放药物与抑制剂，提高局部浓度，降低全身毒性。

pH响应型载体病理微环境常呈酸性（如肿瘤、炎症部位pH6.5-6.8，溶酶体pH4.5-5.0），可通过酸敏感键（如腙键、缩酮键）构建pH响应载体：-腙键连接脂质体：如DOX/Galunisertib共载脂质体（通过腙键连接Galunisertib），在酸性肿瘤微环境中释放Galunisertib抑制EMT，同时释放DOX杀伤肿瘤。在罕见神经内分泌肿瘤模型中，该系统可使瘤内Galunisertib浓度提高4.1倍，DOX浓度提高2.7倍，抑瘤效率提升60%。-缩酮修饰聚合物胶束：如PEI-b-PCL胶束（缩酮修饰），在溶酶体酸性环境下解体，释放si-ZEB1和溶酶体贮积症治疗酶（如GBA），在溶酶体贮积症模型中可恢复酶活性，抑制巨噬细胞EMT。

酶响应型载体EMT活跃区域高表达MMPs、组织蛋白酶（如CathepsinB）等，可设计酶底物连接的载体：-MMP-2/9敏感型纳米粒：如PEG-PLGA纳米粒（表面接MMP-2/9多肽底物），在纤维化病灶处被MMP-2/9降解，暴露靶向肽（如RGD）和药物（如吡非尼尼+Galunisertib）。在IPF模型中，该系统可提高肺靶向效率3.5倍，抑制EMT，减少胶原沉积45%。-CathepsinB敏感型前药：如Galunisertib-Phe-Lys-PABC-DOX前药，在CathepsinB作用下裂解，释放Galunisertib和DOX，在肝癌模型中可协同抑制EMT和肿瘤生长。

氧化还原响应型载体胞浆和病灶区域高谷胱甘肽（GSH）浓度（10mMvs血浆2-20μM），可通过二硫键构建氧化还原响应载体：-二硫键交联阳离子聚合物：如SS-PEI/PDNA复合物，在胞浆高GSH环境下解聚，释放PDNA（如编码sTβRII的基因），在遗传性代谢病中可长期抑制EMT，改善基因治疗效果。12ONE靶向修饰载体：实现“精准打击”

靶向修饰载体：实现“精准打击”通过表面修饰配体，靶向EMT高表达细胞（如肌成纤维细胞、EMT肿瘤细胞），提高递送系统对病灶的亲和力。

抗体靶向-抗α-SMA抗体修饰：α-SMA是肌成纤维细胞的标志物，在纤维化疾病中高表达。将抗α-SMA抗体修饰脂质体（载DOX+Galunisertib），在SSc模型中可提高皮肤病变部位药物浓度5.2倍，显著抑制EMT和纤维化。-抗EpCAM抗体修饰：EpCAM在上皮细胞高表达，EMT后下调，可反向用于靶向非EMT细胞（如正常肺泡上皮），保护正常细胞免受药物损伤。在IPF模型中，抗EpCAM修饰的吸入式纳米粒可减少肺泡上皮细胞凋亡，抑制继发性EMT。

肽类靶向-NGR多肽：靶向CD13（高表达于血管内皮细胞和EMT细胞），修饰PEG-PLGA纳米粒，在肿瘤模型中可提高瘤内药物浓度3.8倍，抑制EMT。-iRGD多肽：通过激活neuropilin-1，增强组织穿透性，修饰脂质体后可提高药物对纤维化间质的渗透能力，在肝纤维化模型中可使药物扩散深度从50μm提升至200μm。

核酸适配体靶向如AS1411（靶向核仁素，高表达于EMT肿瘤细胞），修饰金纳米粒，载DOX+si-ZEB1，在罕见小细胞肺癌中可抑制肿瘤EMT，提高化疗敏感性。13ONE协同治疗系统：实现“1+1>2”效应

协同治疗系统：实现“1+1>2”效应将EMT抑制剂与药物通过“物理共载”“化学偶联”或“基因共表达”等方式整合，实现协同治疗。

物理共载系统-脂质体共载：如DOX+Galunisertib脂质体，通过pH敏感膜实现“先抑制剂后药物”sequential释放：在弱酸性肿瘤微环境释放Galunisertib抑制EMT，在溶酶体释放DOX杀伤细胞，在GIST模型中抑瘤效率较单药提升75%。-聚合物胶束共载：如mPEG-PCL胶束载伊马替尼+si-TGF-β1，通过胶束核载伊马替尼、壳载si-TGF-β1，在肿瘤部位先释放si-TGF-β1抑制EMT，后释放伊马替尼，耐药逆转效率提升80%。

化学偶联系统-抗体-药物-抑制剂三偶联物：如抗c-KIT抗体-伊马替尼-GalunisertibADC，通过可裂解linker连接，在GIST模型中可同时靶向c-KIT、抑制EMT、杀伤肿瘤，血液半衰期延长至72小时（较游离药物提升5倍）。-前药偶联：如Galunisertib-伊马替尼前药（通过酯键连接），在EMT高表达酯酶环境下释放两种活性成分，在IPF模型中可协同抑制纤维化，降低药物全身毒性。

基因共表达系统-双基因AAV载体：如AAV9-sTβRII-siZEB1，通过双启动子共表达可溶性TβRII和ZEB1siRNA，在遗传性代谢病模型中可长期抑制EMT，改善酶替代疗效。-mRNA-LNP共递送：如mRNA（编码sTβRII）+siRNA（靶向Snail）共载LNP，在罕见肝病中可实现“快速抑制EMT+长期基因调控”，疗效持续4周以上。14ONE仿生递送系统：实现“生物兼容性”

仿生递送系统：实现“生物兼容性”利用细胞膜或外泌体等天然载体，提高递送系统的生物相容性和靶向性。

细胞膜包被纳米粒-红细胞膜包被：如红细胞膜包被的DOX/Galunisertib脂质体，通过CD47“别吃我”信号延长体内循环时间（半衰期48小时），在IPF模型中可提高肺药物浓度2.3倍。-血小板膜包被：如血小板膜包被的RGD纳米粒，靶向血管损伤部位，在HHT模型中可抑制内皮细胞EMT，改善血管畸形。

外泌体递送-工程化外泌体：如间充质干细胞来源外泌体（负载miR-200c），通过表面修饰NGR肽靶向肿瘤，在罕见神经母细胞瘤中可逆转EMT，提高化疗敏感性，且外泌体具有低免疫原性，适合长期治疗。

外泌体递送临床转化与未来展望：从“实验室”到“病床旁”的跨越尽管EMT抑制递送策略在临床前研究中展现出巨大潜力，但临床转化仍面临诸多挑战：安全性、规模化生产、个体化治疗等。未来需从多学科交叉、技术创新和临床需求对接中寻找突破。15ONE临床转化中的核心挑战

安全性问题：EMT抑制的“双刃剑”EMT在胚胎发育（如神经嵴细胞迁移）、伤口愈合（如组织修复）、免疫调节（如巨噬细胞极化）中发挥生理作用，系统性抑制可能引发副作用。例如，TGF-β抑制剂可导致心肌纤维化、免疫紊乱；HDAC抑制剂可引发骨髓抑制。因此，需开发“病灶特异性EMT抑制”策略，如局部递送（吸入、瘤内注射）、短暂抑制（脉冲式给药），或靶向EMT病理通路（而非完全阻断生理EMT）。

递送系统的规模化与质量控制复杂递送系统（如靶向纳米粒、基因载体）的规模化生产面临工艺复杂、成本高、批次差异大等问题。例如，siRNA-LNP的生产需控制粒径（PDI<0.2）、包封率（>90%）、载药量（>5%），且对储存条件（-80℃）要求苛刻。未来需建立标准化生产流程和质控体系，推动“从实验室到GMP”的转化。

个体化治疗：基于EMT表型的精准分型不同患者、不同疾病阶段的EMT表型存在