生物反应器无菌灭菌技师（初级）考试试卷及答案

生物反应器无菌灭菌技师（初级）考试试卷及答案生物反应器无菌灭菌技师（初级）考试试卷一、填空题（每题1分，共10分）1.生物反应器灭菌最常用的湿热灭菌方法是______。2.超净工作台使用前，紫外灯照射时间一般不少于______分钟。3.培养基高压蒸汽灭菌的典型参数是121℃、______分钟。4.生物反应器接种前必须进行______检测，确认无杂菌。5.干热灭菌常用温度为______℃左右（玻璃器皿）。6.无菌水制备通常采用______灭菌法。7.生物反应器搅拌轴灭菌时，需确保______密封完好。8.培养基灭菌后需冷却至______℃左右（细菌接种）。9.无菌检测常用的固体培养基是______培养基。10.生物反应器灭菌后需保压至______，防止外界空气倒吸。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.下列属于湿热灭菌的是（）A.高压蒸汽灭菌B.干热灭菌C.灼烧灭菌D.过滤灭菌2.高压蒸汽灭菌时，排气阀的核心作用是（）A.排出冷空气B.增加压力C.快速降温D.搅拌液体3.超净工作台操作前，应先开（）再开风机A.紫外灯B.照明灯C.消毒剂D.过滤器4.培养基灭菌后浑浊，最可能原因是（）A.灭菌不彻底B.冷却过快C.接种量少D.pH过高5.生物反应器常规无菌检测周期为（）A.每天B.每周C.每月D.每季度6.不能用于培养基灭菌的方法是（）A.高压蒸汽B.过滤C.干热D.环氧乙烷7.手部无菌消毒常用（）A.75%酒精B.95%酒精C.碘伏D.双氧水8.生物反应器轴封泄漏会直接导致（）A.杂菌污染B.压力骤降C.温度升高D.搅拌停止9.干热灭菌的最短时间为（）A.30分钟B.1小时C.2小时D.3小时10.培养基pH调节应在灭菌（）进行A.前B.后C.过程中D.任意时间三、多项选择题（每题2分，共20分）1.生物反应器灭菌的关键控制点包括（）A.灭菌温度B.压力稳定C.保温时间D.冷却速度2.无菌操作的基本要求有（）A.环境无菌B.工具无菌C.操作人员无菌D.培养基无菌3.湿热灭菌的优点是（）A.穿透力强B.灭菌彻底C.温度低D.耗时短4.生物反应器常用灭菌方法有（）A.高压蒸汽B.过滤C.干热D.环氧乙烷5.无菌检测的方法包括（）A.平板涂布法B.液体培养法C.显微镜观察D.pH检测6.影响灭菌效果的因素有（）A.微生物数量B.物品装载量C.灭菌时间D.冷空气残留7.生物反应器接种的注意事项（）A.无菌操作B.接种量适宜C.温度匹配D.时间控制8.超净工作台的维护要点（）A.定期换过滤器B.紫外灯定期校准C.风机检查D.台面消毒9.培养基灭菌的注意事项（）A.避免过度灭菌B.防止水分蒸发C.排气彻底D.快速冷却10.灭菌后保压的目的（）A.防止倒吸B.维持无菌C.快速降温D.增加压力四、判断题（每题2分，共20分）1.高压蒸汽灭菌时，冷空气不影响灭菌效果。（）2.超净工作台紫外灯可直接照射人体。（）3.培养基灭菌后需立即接种。（）4.干热灭菌适用于玻璃器皿和金属工具。（）5.生物反应器搅拌系统无需灭菌。（）6.无菌水可用煮沸法制备。（）7.无菌检测平板需倒置培养。（）8.生物反应器排气口需装过滤器。（）9.95%酒精消毒效果比75%好。（）10.灭菌后生物反应器可直接使用。（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述高压蒸汽灭菌的原理及核心操作要点。2.生物反应器无菌操作的注意事项有哪些？3.培养基灭菌后浑浊的原因及解决方法？4.简述生物反应器无菌检测的基本步骤。六、讨论题（每题5分，共10分）1.如何判断生物反应器灭菌是否彻底？结合实际操作说明。2.生物反应器灭菌过程中常见异常（如温度不达标、轴封泄漏）及处理措施？---参考答案一、填空题1.高压蒸汽灭菌2.303.20（15-30均可）4.无菌5.160-1706.高压蒸汽7.轴封8.35（30-37均可）9.营养琼脂10.冷却完成二、单项选择题1.A2.A3.A4.A5.A6.D7.A8.A9.C10.A三、多项选择题1.ABC2.ABCD3.ABD4.ABC5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABC10.AB四、判断题1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.×10.×五、简答题1.原理：利用高温高压饱和蒸汽的穿透力和潜热，使微生物蛋白质变性凝固，彻底杀灭芽孢。要点：①物品装载≤80%容积，避免堆积；②排气彻底（冷空气残留会降低实际温度）；③参数121℃/0.1MPa，保温15-30分钟；④灭菌后缓慢降压，防止物品破裂；⑤冷却后密封保存。2.①环境：超净台提前30分钟开紫外，操作前开风机；②工具：接种针灼烧灭菌，器皿干热灭菌；③人员：穿无菌服、戴口罩手套，手部75%酒精消毒；④操作：动作轻柔，靠近火焰区，避免交叉污染；⑤检测：操作前后做无菌检测；⑥废弃物：污染物品灭菌后丢弃。3.原因：①灭菌不彻底（参数不足、冷空气未排）；②冷却污染（环境无菌差）；③原料带菌。解决：①重新验证灭菌参数（121℃/20分钟以上）；②冷却在超净台内进行；③更换合格原料，灭菌前做原料检测；④浑浊严重则废弃，重新制备。4.①准备：无菌营养琼脂、培养皿、超净台；②取样：取反应器内培养基（或空气沉降）；③涂布/培养：平板涂布，37℃倒置培养24-48h；④观察：统计菌落数，≤1CFU/皿为合格；⑤记录：填写检测记录，不合格需复检。六、讨论题1.①无菌检测：灭菌后取培养基涂布平板，无杂菌生长为合格；②指示剂验证：用灭菌指示带（变色）或生物指示剂（嗜热脂肪芽孢杆菌），灭菌后指示剂达标；③运行观察：接种后培养基无浑浊、pH无异常波动。实际操作中，每次灭菌后做平板检测，每周用生物指示剂验证；若出现菌落，排查参数、密封、冷却污染后重新灭菌复检。2.常见异常及处理：-温