生物制药纯化树脂研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药纯化树脂研发工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.生物制药中单抗捕获常用含______配基的树脂。2.离子交换树脂交换容量分为静态和______交换容量。3.凝胶过滤分离依据是目标分子的______。4.疏水作用树脂的配基通常为______。5.树脂孔径常用______单位表示。6.强阳离子交换树脂功能基团是______。7.树脂再生常用碱性再生剂是______。8.病毒去除树脂需______孔径。9.反映树脂结合能力的参数是______。10.符合cGMP的树脂需具备______。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.单抗捕获首选（）A.蛋白A树脂B.离子交换树脂C.疏水树脂D.凝胶过滤树脂2.凝胶过滤中小分子蛋白洗脱体积（）A.大于Void体积B.等于Void体积C.小于Void体积D.不确定3.带负电蛋白应选（）A.强阳离子树脂B.弱阳离子树脂C.强阴离子树脂D.弱阴离子树脂4.蛋白A树脂再生常用（）A.1MNaClB.0.1MHClC.20%乙醇D.5M尿素5.动态结合容量（DBC）单位是（）A.mg蛋白/mL树脂B.μmol配基/mL树脂C.mL蛋白/g树脂D.mg配基/g树脂6.疏水层析高盐浓度作用是（）A.增强蛋白疏水性B.降低疏水性C.破坏结构D.调节pH7.弱阴离子交换树脂是（）A.QSepharoseB.DEAESepharoseC.SPSepharoseD.CMSepharose8.树脂灭菌不包括（）A.湿热灭菌B.环氧乙烷C.干热灭菌D.180℃干烤9.疫苗纯化树脂需（）A.高交换容量B.病毒清除C.低非特异性结合D.以上都是10.离子交换穿透早的原因（）A.上样不足B.流速慢C.结合容量低D.洗脱浓度高三、多项选择题（每题2分，共20分）1.选树脂需考虑（）A.目标蛋白pIB.配基特异性C.pH稳定性D.生产规模E.成本2.离子交换树脂表征参数（）A.交换容量B.孔径分布C.配基密度D.回收率E.流速3.亲和层析树脂包括（）A.蛋白G树脂B.His-tag镍柱C.谷胱甘肽树脂D.羟基磷灰石E.凝胶过滤树脂4.树脂再生注意事项（）A.避免干燥B.控制再生剂浓度C.平衡至应用pHD.检测再生效果E.无限重复使用5.影响疏水层析回收率的因素（）A.盐浓度B.温度C.pHD.配基密度E.上样量6.生物制药常用层析树脂（）A.蛋白A树脂B.Q树脂C.苯基树脂D.SephadexE.混合模式树脂7.树脂孔径与目标分子关系（）A.需大于目标分子Stokes半径B.小孔径阻碍进入C.大孔径不影响分离D.病毒去除需小孔径E.凝胶过滤依赖孔径分布8.树脂清洁试剂（）A.NaOHB.盐酸胍C.乙醇D.蛋白酶E.去垢剂9.法规要求树脂特性（）A.无毒性B.可灭菌C.批次一致D.可追溯E.高回收率10.混合模式树脂优势（）A.特异性高B.耐受高盐C.减少步骤D.提高纯度E.降低成本四、判断题（每题2分，共20分）1.所有树脂均可湿热灭菌（×）2.蛋白A仅结合人源单抗（×）3.凝胶过滤无需上样缓冲液（×）4.交换容量越高纯化效果越好（×）5.疏水层析通过降低盐浓度洗脱（√）6.DBC高于静态结合容量（×）7.弱离子交换树脂解离受pH影响大（√）8.病毒过滤树脂孔径＜20nm（√）9.再生后树脂无需检测直接用（×）10.混合模式树脂利用离子+疏水作用（√）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述离子交换树脂纯化蛋白的原理及关键参数答案：原理：树脂带电基团与目标蛋白相反电荷发生静电结合。关键参数：①pH（远离蛋白pI，稳定电荷）；②离子强度（低盐结合，高盐洗脱）；③流速（控制树脂允许范围）；④上样量（不超DBC）；⑤洗脱梯度（线性/阶梯式盐浓度变化）。2.亲和层析与疏水层析树脂适用场景差异答案：亲和层析依赖特异性配基（如蛋白A），适用于粗提液中低丰度目标物（如单抗）的高纯度捕获；疏水层析依赖疏水相互作用，适用于去除杂蛋白、浓缩蛋白，常用于亲和后的精纯步骤，耐受高盐。3.树脂再生流程及注意事项答案：流程：①去离子水冲洗残留缓冲液；②再生剂（NaOH/盐酸）冲洗污染物；③去离子水冲至中性；④平衡缓冲液平衡。注意：①避免干燥；②控制再生剂浓度/时间；③定期检测结合容量；④不同树脂选对应再生剂。4.生物制药常用树脂类型及核心应用答案：①蛋白A树脂：单抗捕获；②His-tag镍柱：重组蛋白纯化；③Q/SP树脂：蛋白精纯；④苯基树脂：浓缩/去杂；⑤凝胶过滤树脂：脱盐/分子量测定；⑥混合模式树脂：多步合并提高纯度。六、讨论题（每题5分，共10分）1.疏水层析回收率低的原因及优化答案：原因：①盐浓度不足；②盐类型不合适；③pH偏离最适；④配基密度不匹配；⑤洗脱梯度过急。优化：①增加盐浓度（如(NH4)2SO4替代NaCl）；②调整pH至远离pI；③换更强疏水树脂（辛基替代苯基）；④线性洗脱梯度；⑤增加树脂体积。2.如何根据单抗特性选蛋白A树脂答案：需考虑：①单抗种属（如蛋白A对人IgG结合强）；②纯度要求（选低非特异性结合的重组配基树脂）；③生产规模（高DBC树脂）；④洗脱条件（温和酸性避免变性）；⑤再生性能（耐NaOH树脂）；⑥法规要求（cGMP可追溯）。答案汇总一、1.蛋白A2.动态3.分子量大小4.烷基/芳基5.埃（Å）/纳米（nm）6.磺酸基（-SO3H）7.NaOH溶液8.小9.动态结合容量（DBC）10.可追溯性二、1.A2.A3.C4.B5.A6.A